Name: mammary transplantation of stromal cells and carcinoma cells in c57bl/6j mice
Uploaded: 2011-08-12T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mammary Transplantation of Stromal Cells and Carcinoma Cells in C57BL/6J Mice at JoVE.com

وقد تم تمويل هذا المشروع من خلال منحة من قبل عدد المعاهد الوطنية للصحة / NCI R00 CA127357 ومركز جامعة كانساس الهبات السرطان.

1. العزلة واستخراج الكولاجين المانحة من الفئران C57BL/6J <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التضحية العادية الإناث الناضجة C57BL/6J الفئران باستخدام طرق IACUC المعتمدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حصاد ذيول ونقع في الإيثانول 70 ٪ لمدة 45 دقائق لتعقيم الأنسجة. ذيول ...

<ol>
	<li>Hayward, S., Haughney, P. C., Rosen, M. A., Greulich, K. M., Weier, H. U., Dahiya, R., Cunha, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+between+adult+human+prostatic+epithelium+and+rat+urogenital+sinus+mesenchyme+in+a+tissue+recombination+model.">Interactions between adult human prostatic epithelium and rat urogenital sinus mesenchyme in a tissue recombination model.</a> Differentiation. 63, 131-131 (1998).</li><li>Cunha, G., Hom, Y. K., Young, P., Brody, J., Asch, B. B., Ip, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods in Mammary Gland Biology. , (2000).</li><li>Ethier, S. P., Ammerman, C. A., Dziubinski, M. L., Asch, B. B., Ip, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods in Mammary Gland Biology. , (2000).</li><li>Medina, D., Kittrell, F., Asch, B. B., Ip, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods in Mammary Gland Biology. , (2000).</li><li>Kalluri, R., Zeisberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblasts+in+cancer.">Fibroblasts in cancer.</a> Nat Rev Cancer. 6, 392-401 (2006).</li><li>DeNardo, D. G., Johansson, M., Coussens, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+cells+as+mediators+of+solid+tumor+metastasis.">Immune cells as mediators of solid tumor metastasis.</a> Cancer Metastasis. 27, 11-18 (2008).</li><li>Naito, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage+differentiation+and+function+in+health+and+disease.">Macrophage differentiation and function in health and disease.</a> Pathol Int. 58, 143-155 (2008).</li><li>Firestein, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+T+cell+cometh:+interplay+between+adaptive+immunity+and+cytokine+networks+in+rheumatoid+arthritis.">The T cell cometh: interplay between adaptive immunity and cytokine networks in rheumatoid arthritis.</a> J Clin Invest. 114, 471-474 (2004).</li><li>Cheng, N., Chytil, A., Shyr, Y., Joly, A., Moses, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+Hepatocyte+Growth+Factor+Signaling+by+Type+II+Transforming+Growth+Factor-{beta}+Receptor+Knockout+Fibroblasts+Promotes+Mammary+Tumorigenesis.">Enhanced Hepatocyte Growth Factor Signaling by Type II Transforming Growth Factor-{beta} Receptor Knockout Fibroblasts Promotes Mammary Tumorigenesis.</a> Cancer Res. 67, 4869-4877 (2007).</li><li>Qiu, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+expression+profiling+identifies+signatures+of+tumor+virulence+in+MMTV-PyMT-transgenic+mice:+correlation+to+human+disease.">Global expression profiling identifies signatures of tumor virulence in MMTV-PyMT-transgenic mice: correlation to human disease.</a> Cancer Res. 64, 5973-5981 (2004).</li><li>Schaffhausen, B. S., Roberts, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lessons+from+polyoma+middle+T+antigen+on+signaling+and+transformation:+A+DNA+tumor+virus+contribution+to+the+war+on+cancer.">Lessons from polyoma middle T antigen on signaling and transformation: A DNA tumor virus contribution to the war on cancer.</a> Virology. 384, 304-316 (2009).</li><li>Cepko, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+of+neural+cells+via+retrovirus-mediated+oncogene+transduction.">Immortalization of neural cells via retrovirus-mediated oncogene transduction.</a> Annu Rev Neurosci. 12, 47-65 (1989).</li><li>O'Hare, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+immortalization+of+freshly+isolated+human+mammary+fibroblasts+and+endothelial+cells.">Conditional immortalization of freshly isolated human mammary fibroblasts and endothelial cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 98, 646-651 (2001).</li><li>Shay, J. W., Wright, W. E., Werbin, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+the+molecular+mechanisms+of+human+cell+immortalization.">Defining the molecular mechanisms of human cell immortalization.</a> Biochim Biophys Acta. 1072, 1-7 (1991).</li><li>Gudjonsson, T., Villadsen, R., Ronnov-Jessen, L., Petersen, O. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+protocols+used+in+cell+culture+models+of+human+breast+morphogenesis.">Immortalization protocols used in cell culture models of human breast morphogenesis.</a> Cell Mol Life Sci. 61, 2523-2534 (2004).</li><li>Raschke, W. C., Baird, S., Ralph, P., Nakoinz, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+macrophage+cell+lines+transformed+by+Abelson+leukemia+virus.">Functional macrophage cell lines transformed by Abelson leukemia virus.</a> Cell. 15, 261-267 (1978).</li><li>Shen, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+of+endothelial+cells+differentiated+from+mouse+embryonic+stem+cells.">Immortalization of endothelial cells differentiated from mouse embryonic stem cells.</a> Shi Yan Sheng Wu Xue Bao. 35, 218-228 (2002).</li><li>Wang, S. J., Greer, P., Auerbach, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+propagation+of+yolk-sac-derived+endothelial+cells+from+a+hypervascular+transgenic+mouse+expressing+a+gain-of-function+fps/fes+proto-oncogene.">Isolation and propagation of yolk-sac-derived endothelial cells from a hypervascular transgenic mouse expressing a gain-of-function fps/fes proto-oncogene.</a> In Vitro Cell Dev Biol Anim. 32, 292-299 (1996).</li><li>Tiede, B. J., Owens, L. A., Li, F., DeCoste, C., Kang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mouse+model+for+non-invasive+single+marker+tracking+of+mammary+stem+cells+in+vivo+reveals+stem+cell+dynamics+throughout+pregnancy.">A novel mouse model for non-invasive single marker tracking of mammary stem cells in vivo reveals stem cell dynamics throughout pregnancy.</a> PLoS One. 4, e8035-e8035 (2009).</li><li>Guzman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracarotid+injection+of+fluorescence+activated+cell-sorted+CD49d-positive+neural+stem+cells+improves+targeted+cell+delivery+and+behavior+after+stroke+in+a+mouse+stroke+model.">Intracarotid injection of fluorescence activated cell-sorted CD49d-positive neural stem cells improves targeted cell delivery and behavior after stroke in a mouse stroke model.</a> Stroke. 39, 1300-1306 (2008).</li><li>Duda, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+transplantability+of+tumor-associated+stromal+cells.">Differential transplantability of tumor-associated stromal cells.</a> Cancer Res. 64, 5920-5924 (2004).</li></ol>

وقد تجلى مساهمة الفنية الليفية في تطور الورم من خلال نماذج لزراعة الأعضاء ، والذي يرتبط سرطان الخلايا الليفية شارك في زرع الثدي حميدة مع النتائج الخلايا الظهارية في زيادة نمو الورم والغازية 5. وقد شملت زرع النهج التقليدي استخدام الفئران SCID عارية أو أن تشارك في ?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> اسم كاشف </th><th> شركة </th><th> فهرس العدد </th><th> تعليقات (اختياري) </th></tr><tr><td> الفئران C57BL/6N </td><td> هارلان </td><td> N / A </td><td></td></tr><tr><td> MMTV - PyVmT الفئران المعدلة وراثيا </td><td> جاكسون المختبرات </td><td> 002374 </td><td></td></tr><tr><td> المصل البقري الجنين </td><td> الصياد </td><td> SH3039603PR </td><td></td></tr><tr><td> DMEM </td><td> VWR </td><td> 10000113873 </td><td></td></tr><tr><td> البنسلين / الستربتوميسين </td><td> الصياد </td><td> MT - 30-001 </td><td></td></tr><tr><td> أمفوتيريسين </td><td> الصياد </td><td> BP2645 - 20 </td><td></td></tr><tr><td> Amicon الترشيح الأعمدة ultracel 50K </td><td> ميليبور </td><td> UFC905008 </td><td></td></tr><tr><td> أنابيب لبيكمان TI الدوار </td><td> بيكمان </td><td> 355618 </td><td></td></tr><tr><td> ذيل فأر الكولاجين </td><td> الصياد </td><td> CB 40236 </td><td></td></tr><tr><td> 10X EBSS </td><td> سيغما الدريتش </td><td> E7510 - 100ML </td><td></td></tr><tr><td> التربسين 1X ، 0.25 ٪ في الكالسيوم ث / س HBSS والمغنيسيوم </td><td> الصياد </td><td> MT - 25 - 050 - CI </td><td></td></tr><tr><td> الجليدية حمض الخليك </td><td> الصياد </td><td> A491 - 212 </td><td></td></tr><tr><td> Coomasie الزرقاء </td><td> الصياد </td><td> BP101 25 </td><td></td></tr><tr><td> التربسين </td><td> سيغما الدريتش </td><td> T3924 - 100ML </td><td></td></tr><tr><td> كولاجيناز A </td><td> سيغما AldrichC0130 - 50 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> hyalronidase </td><td> سيغما الدريتش </td><td> H3884 </td><td></td></tr><tr><td> الدناز </td><td> سيغما الدريتش </td><td> D5025 </td><td></td></tr><tr><td> مشكال البروتين القياسية </td><td> Biorad </td><td> 1610375 </td><td></td></tr><tr><td> الشرائح الزجاجية </td><td> الصياد </td><td> 12545-78 </td><td></td></tr><tr><td> الزجاج coverslips </td><td> VWR </td><td> 101400-042 </td><td></td></tr><tr><td> Vimentin الضد S - 20 </td><td> سانتا كروز التكنولوجيا الحيوية </td><td> SC - 7558 </td><td></td></tr><tr><td> α - السلس الضد عضلة أكتين </td><td> Abcam </td><td> ab5694 </td><td></td></tr><tr><td> CK14 الأضداد </td><td> سانتا كروز التكنولوجيا الحيوية </td><td> SC - 53253 </td><td></td></tr><tr><td> CK18 الأضداد </td><td> Abcam </td><td> ab668 </td><td></td></tr><tr><td> دابي </td><td> سيغما الدريتش </td><td> D9542 </td><td></td></tr><tr><td> مكافحة فأر biotinylated </td><td> ناقلات المختبرات </td><td> BA9200 </td><td> توزع من خلال فيشر </td></tr><tr><td> مكافحة الفأر اليكسا - 568 </td><td> Invitrogen </td><td> A10037 </td><td></td></tr><tr><td> مكافحة الفأر اليكسا - 488 </td><td> Invitrogen </td><td> A11001 </td><td></td></tr><tr><td> Streptavidin اليكسا - 488 - </td><td> Invitrogen </td><td> S11226 </td><td></td></tr><tr><td> دابي </td><td> Invitrogen </td><td> D21490 </td><td></td></tr><tr><td> إطالة antifade </td><td> Invitrogen </td><td> P - 36930 </td><td></td></tr><tr><td> مقص جراحي </td><td> أدوات العلوم غرامة </td><td> 91400-12 </td><td></td></tr><tr><td> مقص الربيع الجميلة </td><td> أدوات العلوم غرامة </td><td> 15000-02 </td><td></td></tr><tr><td> كليلة ملقط </td><td> أدوات العلوم غرامة </td><td> 11002-12 </td><td></td></tr><tr><td> # 5 ملقط غرامة </td><td> أدوات العلوم غرامة </td><td> 11251-10 </td><td></td></tr><tr><td> خياطة الوتر الكروميك </td><td> الصياد </td><td> NC9326254 </td><td></td></tr><tr><td> الزجاج باستور الماصة </td><td> الصياد </td><td> 22-042-815 </td><td></td></tr><tr><td> الإيثانول </td><td> الصياد </td><td> A406P 4 </td><td></td></tr><tr><td> betadine </td><td> الصياد </td><td> NC9386574 </td><td></td></tr><tr><td> مقاطع الجرح </td><td> الصياد </td><td> 12032-07 </td><td></td></tr><tr><td> الجرح التيلة </td><td> الصياد </td><td> 12031-07 </td><td></td></tr></tbody></table>

mammary transplantation of stromal cells and carcinoma cells in c57bl/6j mice

وقد كان تأثير الخلايا اللحمية ، بما في ذلك الخلايا الليفية على تطور ورم الثدي موثقة بشكل جيد من خلال استخدام نماذج الماوس ، لا سيما من خلال زرع خلايا انسجة والخلايا الظهارية في الغدة الثديية من الفئران. زرع النماذج الحالية غالبا ما تنطوي على استخدام الفئران المناعة بسبب خلفيات وراثية مختلفة من خلايا انسجة والخلايا الظهارية. وغالبا ما تستخدم مصفوفات خارج الخلية لتضمين نوعين خلية مختلفة عن التفاعلات خلية خلية ثابتة ، ولكنها تنطوي على استخدام Matrigel أو ذيل فأر الكولاجين ، والتي هي ركائز المناعية. عدم وجود خلايا تي من الفئران وظيفية المناعة يمنع تقييم دقيق للانسجة الخلايا الثديية على تطور الورم في الجسم الحي ، مع انعكاسات هامة على تطوير الأدوية ونجاعتها. وعلاوة على ذلك ، والفئران المناعة مكلفة ، من الصعب ان تولد وتتطلب شروط رعاية خاصة. للتغلب على هذه العقبات ، وقد طورنا نهجا لزرع خلايا انسجة orthotopically والخلايا الظهارية في الفئران من الخلفية الجينية نفسها للحث على تشكيل ثابت الورم. هذا النظام ينطوي على حصاد طبيعي ، وسرطان الخلايا الليفية المرتبطة بها ، خلايا سرطان الثدي PyVmT والكولاجين من الفئران C57BL/6J المانحة. ثم يتم تضمين الخلايا في الكولاجين وزرع في غدد الثدي الأربية من الفئران C57BL/6J الإناث. زرع خلايا أورام PyVmT وحده شكل واضح آخر أيام 30-40 الزرع. تحليل نقطة النهاية في 60 يوما يشير إلى أن التعاون مع زرع الخلايا الليفية الثدي يعزز نمو الورم مقارنة مع الخلايا المزروعة PyVmT وحدها. بينما تم استخدام خلايا من الفئران ومصفوفة C57BL/6J في هذه الدراسات ، يمكن تطبيق عزل الخلايا ونهج المصفوفة وزرع نحو الفئران من خلفيات وراثية مختلفة يتظاهرون براعة. باختصار ، يمكن استخدام هذا النظام لتحقيق التفاعلات الجزيئية بين خلايا انسجة والخلايا الظهارية ، ويتغلب على القيود الحرجة في نماذج الماوس المناعة.

Watch this Scientific Journal Video about Mammary Transplantation of Stromal Cells and Carcinoma Cells in C57BL/6J Mice at JoVE.com

Mammary Transplantation of Stromal Cells and Carcinoma Cells in C57BL/6J Mice

في هذا التقرير ، إلا أننا يبرهن على وجود نظام لعزل الخلايا المانحة والثقافة من الغدة الثديية الماوس ، وزرع هذه الخلايا في orthotopically الفئران المتلقي لتحليل انسجة : التفاعلات الظهارية أثناء تطوير ورم الثدي.

الثدي زرع الخلايا اللحمية وسرطان الخلايا في الفئران C57BL/6J

The influence of stromal cells, including fibroblasts on mammary tumor progression has been well documented through the use of mouse models, in particular ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts (CAFs) from Human Mammary Fibroblasts

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts CAFs from Human Mammary Fibroblasts

الجيل التجريبية للسرطان ، المرتبطين بها الخلايا الليفية (مقاهي) من الخلايا الليفية الثديية البشرية

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of ...

Human Internal Mammary Artery (IMA) Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

Human Internal Mammary Artery IMA Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

الداخلية الثديية البشرية الشريان (IMA) وزرع الدعامات: نموذج الإنسان لدراسة تطوير داخل الدعامة عودة التضيق

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

العزلة، وتوصيف المقارن التمييز بين الخلايا الجذعية البشرية الأسنان اللب المستمدة من الأسنان الدائمة باستخدام طريقتين مختلفتين

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Generation of Subcutaneous and Intrahepatic Human Hepatocellular Carcinoma Xenografts in Immunodeficient Mice

جيل من تحت الجلد والخلايا الكبدية داخل الكبد سرطان Xenografts الإنسان في الفئران العوز المناعي

In  vivo experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate  the human disease provide a valuable platform for research into disease  ...

Coculture System with an Organotypic Brain Slice and 3D Spheroid of Carcinoma Cells

نظام Coculture مع عضوي النمط شريحة الدماغ و 3D كروي من خلايا سرطان

Patients with cerebral metastasis of carcinomas have a poor prognosis. However, the process at the metastatic site has barely been investigated, in ...

Modeling Spontaneous Metastatic Renal Cell Carcinoma (mRCC) in Mice Following Nephrectomy

Modeling Spontaneous Metastatic Renal Cell Carcinoma mRCC in Mice Following Nephrectomy

النمذجة العفوي النقيلي سرطان الخلايا الكلوية (مركز تنسيق الانقاذ البحري) في الفئران بعد استئصال الكلية

One of the key challenges to improved testing of new experimental therapeutics in renal cell carcinoma (RCC) is the development of models that faithfully ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mammary Fat Pad of Mice to Study Tumor Growth.

حقن مثلي من خلايا سرطان الثدي في الثديية الدهون وسادة من الفئران لدراسة نمو الأورام.

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the ...

Evaluation of Stem Cell Properties in Human Ovarian Carcinoma Cells Using Multi and Single Cell-based Spheres Assays

تقييم خصائص الخلايا الجذعية في الإنسان خلايا سرطان المبيض عن طريق متعدد واحدة على أساس خلية المجالات فحوصات

Years of research indicates that ovarian cancers harbor a heterogeneous mixture of cells including a subpopulation of so-called &#8220;cancer stem ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

دراسة سرطان البنكرياس الجذعية خصائص الخلايا لتطوير استراتيجيات علاجية جديدة

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

منتبذ عنق الرحم القلب زرع في الفئران

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...