Name: mammary transplantation of stromal cells and carcinoma cells in c57bl/6j mice
Uploaded: 2011-08-12T12:00:00
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इस परियोजना के माध्यम से NIH / NCI अनुदान R00 संख्या CA127357 और कान्सास कैंसर सेंटर बंदोबस्ती के विश्वविद्यालय द्वारा वित्त पोषित किया गया था.

1. अलगाव और C57BL/6J चूहों से दाता कोलेजन की निकासी <ol><li> परिपक्व सामान्य महिला C57BL/6J अनुमोदित IACUC तरीकों का उपयोग कर चूहों बलिदान. </li><li> हार्वेस्ट पूंछ और 45 से ऊतकों बाँझ मिनट के लिए 70% इथेनॉल में लेना. टिशू पेपर के सा...

<ol>
	<li>Hayward, S., Haughney, P. C., Rosen, M. A., Greulich, K. M., Weier, H. U., Dahiya, R., Cunha, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+between+adult+human+prostatic+epithelium+and+rat+urogenital+sinus+mesenchyme+in+a+tissue+recombination+model.">Interactions between adult human prostatic epithelium and rat urogenital sinus mesenchyme in a tissue recombination model.</a> Differentiation. 63, 131-131 (1998).</li><li>Cunha, G., Hom, Y. K., Young, P., Brody, J., Asch, B. B., Ip, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods in Mammary Gland Biology. , (2000).</li><li>Ethier, S. P., Ammerman, C. A., Dziubinski, M. L., Asch, B. B., Ip, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods in Mammary Gland Biology. , (2000).</li><li>Medina, D., Kittrell, F., Asch, B. B., Ip, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods in Mammary Gland Biology. , (2000).</li><li>Kalluri, R., Zeisberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblasts+in+cancer.">Fibroblasts in cancer.</a> Nat Rev Cancer. 6, 392-401 (2006).</li><li>DeNardo, D. G., Johansson, M., Coussens, L. 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S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+T+cell+cometh:+interplay+between+adaptive+immunity+and+cytokine+networks+in+rheumatoid+arthritis.">The T cell cometh: interplay between adaptive immunity and cytokine networks in rheumatoid arthritis.</a> J Clin Invest. 114, 471-474 (2004).</li><li>Cheng, N., Chytil, A., Shyr, Y., Joly, A., Moses, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+Hepatocyte+Growth+Factor+Signaling+by+Type+II+Transforming+Growth+Factor-{beta}+Receptor+Knockout+Fibroblasts+Promotes+Mammary+Tumorigenesis.">Enhanced Hepatocyte Growth Factor Signaling by Type II Transforming Growth Factor-{beta} Receptor Knockout Fibroblasts Promotes Mammary Tumorigenesis.</a> Cancer Res. 67, 4869-4877 (2007).</li><li>Qiu, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+expression+profiling+identifies+signatures+of+tumor+virulence+in+MMTV-PyMT-transgenic+mice:+correlation+to+human+disease.">Global expression profiling identifies signatures of tumor virulence in MMTV-PyMT-transgenic mice: correlation to human disease.</a> Cancer Res. 64, 5973-5981 (2004).</li><li>Schaffhausen, B. S., Roberts, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lessons+from+polyoma+middle+T+antigen+on+signaling+and+transformation:+A+DNA+tumor+virus+contribution+to+the+war+on+cancer.">Lessons from polyoma middle T antigen on signaling and transformation: A DNA tumor virus contribution to the war on cancer.</a> Virology. 384, 304-316 (2009).</li><li>Cepko, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+of+neural+cells+via+retrovirus-mediated+oncogene+transduction.">Immortalization of neural cells via retrovirus-mediated oncogene transduction.</a> Annu Rev Neurosci. 12, 47-65 (1989).</li><li>O'Hare, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+immortalization+of+freshly+isolated+human+mammary+fibroblasts+and+endothelial+cells.">Conditional immortalization of freshly isolated human mammary fibroblasts and endothelial cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 98, 646-651 (2001).</li><li>Shay, J. W., Wright, W. E., Werbin, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+the+molecular+mechanisms+of+human+cell+immortalization.">Defining the molecular mechanisms of human cell immortalization.</a> Biochim Biophys Acta. 1072, 1-7 (1991).</li><li>Gudjonsson, T., Villadsen, R., Ronnov-Jessen, L., Petersen, O. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+protocols+used+in+cell+culture+models+of+human+breast+morphogenesis.">Immortalization protocols used in cell culture models of human breast morphogenesis.</a> Cell Mol Life Sci. 61, 2523-2534 (2004).</li><li>Raschke, W. C., Baird, S., Ralph, P., Nakoinz, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+macrophage+cell+lines+transformed+by+Abelson+leukemia+virus.">Functional macrophage cell lines transformed by Abelson leukemia virus.</a> Cell. 15, 261-267 (1978).</li><li>Shen, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+of+endothelial+cells+differentiated+from+mouse+embryonic+stem+cells.">Immortalization of endothelial cells differentiated from mouse embryonic stem cells.</a> Shi Yan Sheng Wu Xue Bao. 35, 218-228 (2002).</li><li>Wang, S. J., Greer, P., Auerbach, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+propagation+of+yolk-sac-derived+endothelial+cells+from+a+hypervascular+transgenic+mouse+expressing+a+gain-of-function+fps/fes+proto-oncogene.">Isolation and propagation of yolk-sac-derived endothelial cells from a hypervascular transgenic mouse expressing a gain-of-function fps/fes proto-oncogene.</a> In Vitro Cell Dev Biol Anim. 32, 292-299 (1996).</li><li>Tiede, B. J., Owens, L. A., Li, F., DeCoste, C., Kang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mouse+model+for+non-invasive+single+marker+tracking+of+mammary+stem+cells+in+vivo+reveals+stem+cell+dynamics+throughout+pregnancy.">A novel mouse model for non-invasive single marker tracking of mammary stem cells in vivo reveals stem cell dynamics throughout pregnancy.</a> PLoS One. 4, e8035-e8035 (2009).</li><li>Guzman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracarotid+injection+of+fluorescence+activated+cell-sorted+CD49d-positive+neural+stem+cells+improves+targeted+cell+delivery+and+behavior+after+stroke+in+a+mouse+stroke+model.">Intracarotid injection of fluorescence activated cell-sorted CD49d-positive neural stem cells improves targeted cell delivery and behavior after stroke in a mouse stroke model.</a> Stroke. 39, 1300-1306 (2008).</li><li>Duda, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+transplantability+of+tumor-associated+stromal+cells.">Differential transplantability of tumor-associated stromal cells.</a> Cancer Res. 64, 5920-5924 (2004).</li></ol>

ट्यूमर प्रगति में fibroblasts के कार्यात्मक योगदान प्रत्यारोपण मॉडल के माध्यम से प्रदर्शित किया गया है, जिसमें कार्सिनोमा जुड़े fibroblasts सौम्य स्तन वृद्धि ट्यूमर के विकास और 5 invasiveness में उपकला कोशिकाओं परिणा?...

<table border="1"><tbody><tr><th> अभिकर्मक के नाम </th><th> कंपनी </th><th> सूचीपत्र संख्या </th><th> टिप्पणियां (वैकल्पिक) </th></tr><tr><td> C57BL/6N चूहों </td><td> Harlan </td><td> N / A </td><td></td></tr><tr><td> MMTV - PyVmT ट्रांसजेनिक चूहों </td><td> जैक्सन प्रयोगशालाओं </td><td> 002374 </td><td></td></tr><tr><td> भ्रूण गोजातीय सीरम </td><td> मछुआ </td><td> SH3039603PR </td><td></td></tr><tr><td> DMEM </td><td> VWR </td><td> 10000113873 </td><td></td></tr><tr><td> पेनिसिलीन / स्ट्रेप्टोमाइसिन </td><td> मछुआ </td><td> मीट्रिक टन-30-001 </td><td></td></tr><tr><td> amphotericin </td><td> मछुआ </td><td> BP2645 - 20 </td><td></td></tr><tr><td> Amicon निस्पंदन स्तंभों ultracel 50k </td><td> Millipore </td><td> UFC905008 </td><td></td></tr><tr><td> Beckman तिवारी रोटर के लिए ट्यूबें </td><td> Beckman </td><td> 355618 </td><td></td></tr><tr><td> चूहा पूंछ कोलेजन </td><td> मछुआ </td><td> 40236 सीबी </td><td></td></tr><tr><td> 10x EBSS </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> E7510-100ml </td><td></td></tr><tr><td> Trypsin 1X, HBSS w / ओ कैल्शियम और मैग्नीशियम में 0.25% </td><td> मछुआ </td><td> मीट्रिक टन-25-050-CI </td><td></td></tr><tr><td> हिमनदों एसिटिक एसिड </td><td> मछुआ </td><td> A491-212 </td><td></td></tr><tr><td> Coomasie नीले </td><td> मछुआ </td><td> BP101 25 </td><td></td></tr><tr><td> Trypsin </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> T3924-100ml </td><td></td></tr><tr><td> Collagenase एक </td><td> सिग्मा AldrichC0130 - 50 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> hyalronidase </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> H3884 </td><td></td></tr><tr><td> DNase </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> D5025 </td><td></td></tr><tr><td> बहुरूपदर्शक प्रोटीन मानक </td><td> Biorad </td><td> 1610375 </td><td></td></tr><tr><td> ग्लास स्लाइड्स </td><td> मछुआ </td><td> 12545-78 </td><td></td></tr><tr><td> ग्लास coverslips </td><td> VWR </td><td> 101400-042 </td><td></td></tr><tr><td> Vimentin एंटीबॉडी एस 20- </td><td> सांता क्रूज़ जैव प्रौद्योगिकी </td><td> SC-7558 </td><td></td></tr><tr><td> α चिकनी पेशी actin एंटीबॉडी </td><td> Abcam </td><td> ab5694 </td><td></td></tr><tr><td> CK14 एंटीबॉडी </td><td> सांता क्रूज़ जैव प्रौद्योगिकी </td><td> SC - 53,253 </td><td></td></tr><tr><td> CK18 एंटीबॉडी </td><td> Abcam </td><td> ab668 </td><td></td></tr><tr><td> DAPI </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> D9542 </td><td></td></tr><tr><td> विरोधी माउस biotinylated </td><td> वेक्टर प्रयोगशालाओं </td><td> BA9200 </td><td> फिशर के माध्यम से वितरित </td></tr><tr><td> विरोधी माउस alexa - 568 </td><td> Invitrogen </td><td> A10037 </td><td></td></tr><tr><td> विरोधी माउस alexa - 488 </td><td> Invitrogen </td><td> A11001 </td><td></td></tr><tr><td> Streptavidin-alexa - 488 </td><td> Invitrogen </td><td> S11226 </td><td></td></tr><tr><td> DAPI </td><td> Invitrogen </td><td> D21490 </td><td></td></tr><tr><td> Antifade लम्बा </td><td> Invitrogen </td><td> पी - 36,930 </td><td></td></tr><tr><td> सर्जिकल कैंची </td><td> ललित विज्ञान उपकरण </td><td> 91400-12 </td><td></td></tr><tr><td> ठीक वसंत कैंची </td><td> ललित विज्ञान उपकरण </td><td> 15000-02 </td><td></td></tr><tr><td> ब्लंट संदंश </td><td> ललित विज्ञान उपकरण </td><td> 11002-12 </td><td></td></tr><tr><td> # ठीक संदंश 5 </td><td> ललित विज्ञान उपकरण </td><td> 11251-10 </td><td></td></tr><tr><td> आंत क्रोमिक सिवनी </td><td> मछुआ </td><td> NC9326254 </td><td></td></tr><tr><td> ग्लास और पाश्चर pipet </td><td> मछुआ </td><td> 22-042-815 </td><td></td></tr><tr><td> इथेनॉल </td><td> मछुआ </td><td> 4 A406P </td><td></td></tr><tr><td> betadine </td><td> मछुआ </td><td> NC9386574 </td><td></td></tr><tr><td> घाव क्लिप </td><td> मछुआ </td><td> 12032-07 </td><td></td></tr><tr><td> घाव प्रधान </td><td> मछुआ </td><td> 12031-07 </td><td></td></tr></tbody></table>

mammary transplantation of stromal cells and carcinoma cells in c57bl/6j mice

माउस मॉडल के उपयोग के माध्यम से स्तन ट्यूमर प्रगति पर fibroblasts सहित stromal कोशिकाओं के प्रभाव को अच्छी तरह से किया गया है stromal कोशिकाओं और चूहों की स्तन ग्रंथि में उपकला कोशिकाओं के प्रत्यारोपण के माध्यम से विशेष रूप से, प्रलेखित. वर्तमान प्रत्यारोपण मॉडल अक्सर immunocompromised stromal कोशिकाओं और उपकला कोशिकाओं के अलग आनुवंशिक पृष्ठभूमि के कारण चूहों के उपयोग शामिल है. कोशिकी matrices अक्सर संगत सेल सेल बातचीत के लिए दो अलग अलग सेल प्रकार एम्बेड करते हैं, लेकिन Matrigel या चूहे की पूंछ कोलेजन, जो immunogenic substrates के इस्तेमाल को शामिल किया जाता है. immunocompromised चूहों से कार्यात्मक टी कोशिकाओं की कमी दवा के विकास और प्रभावकारिता पर महत्वपूर्ण प्रभाव के साथ vivo में स्तन ट्यूमर प्रगति पर stromal कोशिकाओं के सटीक आकलन, रोकता है . इसके अलावा, immunocompromised चूहों महंगा, नस्ल और विशेष देखभाल की स्थिति की आवश्यकता मुश्किल हैं. इन बाधाओं पर काबू पाने के लिए, हम एक दृष्टिकोण के लिए orthotopically चूहों में एक ही आनुवंशिक पृष्ठभूमि से stromal सेल और उपकला कोशिकाओं को लगातार ट्यूमर गठन को प्रेरित प्रत्यारोपण विकसित किया है. इस प्रणाली दाता C57BL/6J चूहों से सामान्य, कार्सिनोमा जुड़े fibroblasts, PyVmT स्तन कार्सिनोमा कोशिकाओं और कोलेजन कटाई शामिल है. कोशिकाओं तो कोलेजन में एम्बेडेड रहे हैं और वंक्षण महिला C57BL/6J चूहों की स्तन ग्रंथियों में प्रतिरोपित. अकेले PyVmT कोशिकाओं के प्रत्यारोपण स्पर्शनीय ट्यूमर 30-40 दिनों के बाद प्रत्यारोपण के रूप में. 60 दिनों में समापन बिंदु विश्लेषण दर्शाता है कि fibroblasts के साथ सह - प्रत्यारोपण PyVmT अकेले प्रतिरोपित कोशिकाओं की तुलना में स्तन ट्यूमर के विकास को बढ़ाता है. जबकि C57BL/6J चूहों से कोशिकाओं और मैट्रिक्स इन अध्ययनों में इस्तेमाल किया गया, कोशिकाओं और मैट्रिक्स और प्रत्यारोपण दृष्टिकोण के अलगाव अलग आनुवंशिक बहुमुखी प्रतिभा का प्रदर्शन पृष्ठभूमि से चूहों की दिशा में लागू किया जा सकता है. संक्षेप में, इस प्रणाली stromal कोशिकाओं और उपकला कोशिकाओं के बीच आणविक मुलाकातों की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, और immunocompromised माउस मॉडल में महत्वपूर्ण सीमाओं पर काबू.

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Mammary Transplantation of Stromal Cells and Carcinoma Cells in C57BL/6J Mice

इस रिपोर्ट में, हम एक अलग करने के लिए प्रणाली और संस्कृति माउस स्तन ग्रंथि से दाता कोशिकाओं का प्रदर्शन, और orthotopically stromal विश्लेषण: स्तन ट्यूमर के विकास के दौरान उपकला बातचीत प्राप्तकर्ता चूहों में इन कोशिकाओं का प्रत्यारोपण.

C57BL/6J चूहे में stromal कोशिकाओं और कार्सिनोमा कोशिकाओं के स्तन प्रत्यारोपण

The influence of stromal cells, including fibroblasts on mammary tumor progression has been well documented through the use of mouse models, in particular ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts (CAFs) from Human Mammary Fibroblasts

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कार्सिनोमा - एसोसिएटेड Fibroblasts के प्रायोगिक मानव स्तन Fibroblasts से जनरेशन (CAFs)

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of ...

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मानव आंतरिक स्तन धमनी (आईएमए) प्रत्यारोपण और stenting: में स्टेंट restenosis के विकास का अध्ययन करने के लिए एक मानव मॉडल

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

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Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Generation of Subcutaneous and Intrahepatic Human Hepatocellular Carcinoma Xenografts in Immunodeficient Mice

Immunodeficient चूहों में चमड़े के नीचे और Intrahepatic मानव hepatocellular कार्सिनोमा Xenografts की पीढ़ी

In  vivo experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate  the human disease provide a valuable platform for research into disease  ...

Coculture System with an Organotypic Brain Slice and 3D Spheroid of Carcinoma Cells

एक Organotypic मस्तिष्क टुकड़ा और कार्सिनोमा कोशिकाओं के 3 डी उपगोल साथ coculture प्रणाली

Patients with cerebral metastasis of carcinomas have a poor prognosis. However, the process at the metastatic site has barely been investigated, in ...

Modeling Spontaneous Metastatic Renal Cell Carcinoma (mRCC) in Mice Following Nephrectomy

Modeling Spontaneous Metastatic Renal Cell Carcinoma mRCC in Mice Following Nephrectomy

चूहे में सहज metastatic वृक्क कोशिका कार्सिनोमा (mRCC) मॉडलिंग के बाद nephrectomy

One of the key challenges to improved testing of new experimental therapeutics in renal cell carcinoma (RCC) is the development of models that faithfully ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mammary Fat Pad of Mice to Study Tumor Growth.

चूहे के स्तन वसा पैड में स्तन कैंसर की कोशिकाओं की orthotopic इंजेक्शन ट्यूमर के विकास का अध्ययन करने के लिए।

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the ...

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Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

अग्नाशय के कैंसर नई उपचार रणनीतियों के विकास के लिए सेल के लक्षण स्टेम का अध्ययन

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Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

चूहे में Heterotopic सरवाइकल हृदय प्रत्यारोपण

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