Name: mammary transplantation of stromal cells and carcinoma cells in c57bl/6j mice
Uploaded: 2011-08-12T12:00:00
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このプロジェクトは、NIH / NCIの助成金番号R00 CA127357とカンザスがんセンター基金の大学を通じて資金を供給された。

1。 C57BL/6Jマウスから分離し、ドナーのコラーゲンの抽出<ol><li>承認さIACUCの方法を使用して成熟した正常な雌C57BL/6Jマウスを生け贄に捧げる。 </li><li>尾を回収し、組織を滅菌するために45分間70％エタノールに浸漬。ティッシュペーパー、アルミホイルでラップと尾を乾かします。必要になるまで-20℃で尾を保管してください。 </li><li>そのような層流フードのような無菌環境で尾を置きます...

<ol>
	<li>Hayward, S., Haughney, P. C., Rosen, M. A., Greulich, K. M., Weier, H. U., Dahiya, R., Cunha, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+between+adult+human+prostatic+epithelium+and+rat+urogenital+sinus+mesenchyme+in+a+tissue+recombination+model.">Interactions between adult human prostatic epithelium and rat urogenital sinus mesenchyme in a tissue recombination model.</a> Differentiation. 63, 131-131 (1998).</li><li>Cunha, G., Hom, Y. K., Young, P., Brody, J., Asch, B. B., Ip, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods in Mammary Gland Biology. , (2000).</li><li>Ethier, S. P., Ammerman, C. A., Dziubinski, M. L., Asch, B. B., Ip, M. 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S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+T+cell+cometh:+interplay+between+adaptive+immunity+and+cytokine+networks+in+rheumatoid+arthritis.">The T cell cometh: interplay between adaptive immunity and cytokine networks in rheumatoid arthritis.</a> J Clin Invest. 114, 471-474 (2004).</li><li>Cheng, N., Chytil, A., Shyr, Y., Joly, A., Moses, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+Hepatocyte+Growth+Factor+Signaling+by+Type+II+Transforming+Growth+Factor-{beta}+Receptor+Knockout+Fibroblasts+Promotes+Mammary+Tumorigenesis.">Enhanced Hepatocyte Growth Factor Signaling by Type II Transforming Growth Factor-{beta} Receptor Knockout Fibroblasts Promotes Mammary Tumorigenesis.</a> Cancer Res. 67, 4869-4877 (2007).</li><li>Qiu, T. 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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+of+neural+cells+via+retrovirus-mediated+oncogene+transduction.">Immortalization of neural cells via retrovirus-mediated oncogene transduction.</a> Annu Rev Neurosci. 12, 47-65 (1989).</li><li>O'Hare, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+immortalization+of+freshly+isolated+human+mammary+fibroblasts+and+endothelial+cells.">Conditional immortalization of freshly isolated human mammary fibroblasts and endothelial cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 98, 646-651 (2001).</li><li>Shay, J. W., Wright, W. 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C., Baird, S., Ralph, P., Nakoinz, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+macrophage+cell+lines+transformed+by+Abelson+leukemia+virus.">Functional macrophage cell lines transformed by Abelson leukemia virus.</a> Cell. 15, 261-267 (1978).</li><li>Shen, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+of+endothelial+cells+differentiated+from+mouse+embryonic+stem+cells.">Immortalization of endothelial cells differentiated from mouse embryonic stem cells.</a> Shi Yan Sheng Wu Xue Bao. 35, 218-228 (2002).</li><li>Wang, S. J., Greer, P., Auerbach, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+propagation+of+yolk-sac-derived+endothelial+cells+from+a+hypervascular+transgenic+mouse+expressing+a+gain-of-function+fps/fes+proto-oncogene.">Isolation and propagation of yolk-sac-derived endothelial cells from a hypervascular transgenic mouse expressing a gain-of-function fps/fes proto-oncogene.</a> In Vitro Cell Dev Biol Anim. 32, 292-299 (1996).</li><li>Tiede, B. J., Owens, L. 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G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+transplantability+of+tumor-associated+stromal+cells.">Differential transplantability of tumor-associated stromal cells.</a> Cancer Res. 64, 5920-5924 (2004).</li></ol>

腫瘍の進行における線維芽細胞の機能的な貢献は、癌関連した線維芽細胞が増加した腫瘍の増殖と浸潤5の良性乳腺上皮細胞の結果と同じ場所に移植した、移植モデルによって実証されている。従来の移植のアプローチは、異なる遺伝的マウスの背景や異なる種からの共移植間質および上皮細胞のSCIDまたはヌードマウスの使用が関与している。免疫不全マウスでは腫瘍特異的抗原と腫...

<table border="1"><tbody><tr><th>試薬の名前</th><th>会社</th><th>カタログ番号</th><th>コメント（省略可能） </th></tr><tr><td> C57BL/6Nマウス</td><td>ハーラン</td><td> N / </td><td></td></tr><tr><td> MMTV - PyVmTトランスジェニックマウス</td><td>ジャクソン研究所</td><td> 002374 </td><td></td></tr><tr><td>ウシ胎仔血清</td><td>フィッシャー</td><td> SH3039603PR </td><td></td></tr><tr><td> DMEM </td><td> VWR </td><td> 10000113873 </td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン/ストレプトマイシン</td><td>フィッシャー</td><td> MT - 30から001 </td><td></td></tr><tr><td>アンフォテリシン</td><td>漁師</td><td> BP2645 - 20 </td><td></td></tr><tr><td>アミコンろ過カラムultracel 50K </td><td>ミリポア</td><td> UFC905008 </td><td></td></tr><tr><td>ベックマンTIローター用チューブ</td><td>ベックマン</td><td> 355618 </td><td></td></tr><tr><td>ラットの尾のコラーゲン</td><td>フィッシャー</td><td> CB 40236 </td><td></td></tr><tr><td> 10倍EBSS </td><td>シグマアルドリッチ</td><td> E7510 - 100ML </td><td></td></tr><tr><td>トリプシン1X、HBSS W / Oカルシウムとマグネシウム0.25％ </td><td>フィッシャー</td><td> MT - 25 - 050 - CI </td><td></td></tr><tr><td>氷酢酸</td><td>フィッシャー</td><td> A491 - 212 </td><td></td></tr><tr><td> Coomasie青</td><td>フィッシャー</td><td> BP101 25 </td><td></td></tr><tr><td>トリプシン</td><td>シグマアルドリッチ</td><td> T3924 - 100ミリリットル</td><td></td></tr><tr><td>コラゲナーゼ</td><td>シグマAldrichC0130 - 50 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> hyalronidase </td><td>シグマアルドリッチ</td><td> H3884 </td><td></td></tr><tr><td> DNase処理</td><td>シグマアルドリッチ</td><td> D5025 </td><td></td></tr><tr><td>万華鏡のタンパク質標準</td><td>バイオラッド</td><td> 1610375 </td><td></td></tr><tr><td>スライドガラス</td><td>フィッシャー</td><td> 12545〜78 </td><td></td></tr><tr><td>ガラス製カバースリップ</td><td> VWR </td><td> 101400-042 </td><td></td></tr><tr><td>ビメンチン抗体S - 20 </td><td>サンタクルスバイオテクノロジー</td><td> SC - 7558 </td><td></td></tr><tr><td> α-平滑筋アクチン抗体</td><td>アブカム</td><td> ab5694 </td><td></td></tr><tr><td> CK14抗体</td><td>サンタクルスバイオテクノロジー</td><td> SC - 53253 </td><td></td></tr><tr><td> CK18抗体</td><td>アブカム</td><td> ab668 </td><td></td></tr><tr><td> DAPI </td><td>シグマアルドリッチ</td><td> D9542 </td><td></td></tr><tr><td>抗マウスビオチン化</td><td>ベクターラボラトリーズ</td><td> BA9200 </td><td>フィッシャーを通じて配布</td></tr><tr><td>抗マウス-アレクサ- 568 </td><td>インビトロジェン</td><td> A10037 </td><td></td></tr><tr><td>抗マウス-アレクサ- 488 </td><td>インビトロジェン</td><td> A11001 </td><td></td></tr><tr><td>ストレプトアビジン-アレクサ- 488 </td><td>インビトロジェン</td><td> S11226 </td><td></td></tr><tr><td> DAPI </td><td>インビトロジェン</td><td> D21490 </td><td></td></tr><tr><td>退色を長引かせる</td><td>インビトロジェン</td><td> P - 36930 </td><td></td></tr><tr><td>外科はさみ</td><td>ファイン科学ツール</td><td> 91400〜12 </td><td></td></tr><tr><td>春のはさみ</td><td>ファイン科学ツール</td><td> 15000〜02 </td><td></td></tr><tr><td>ブラント鉗子</td><td>ファイン科学ツール</td><td> 11002〜12 </td><td></td></tr><tr><td> ＃5微細な鉗子</td><td>ファイン科学ツール</td><td> 11251〜10 </td><td></td></tr><tr><td>腸クロム縫合</td><td>フィッシャー</td><td> NC9326254 </td><td></td></tr><tr><td>ガラスパスツールピペット</td><td>フィッシャー</td><td> 22-042-815 </td><td></td></tr><tr><td>エタノール</td><td>フィッシャー</td><td> A406P 4 </td><td></td></tr><tr><td> betadine </td><td>漁師</td><td> NC9386574 </td><td></td></tr><tr><td>創傷クリップ</td><td>フィッシャー</td><td> 12032〜07 </td><td></td></tr><tr><td>創傷主食</td><td>フィッシャー</td><td> 12031〜07 </td><td></td></tr></tbody></table>

mammary transplantation of stromal cells and carcinoma cells in c57bl/6j mice

乳腺腫瘍の進行に対する線維芽細胞を含む間質細胞の影響はよくマウスの乳腺の間質細胞と上皮細胞の移植による、特に、マウスモデルを使用して文書化されています。現在の移植モデルは、しばしば間質細胞と上皮細胞の異なる遺伝的背景に起因する免疫不全マウスの使用を必要とする。細胞外マトリックスは、しばしば一貫性のある細胞間相互作用の2つの異なった種類の細胞を埋め込むために使用されるが、免疫原性基質であるマトリゲルまたはラット尾のコラーゲンの使用を必要としている。免疫不全マウスから機能的なT細胞の欠如は、医薬品開発と有効性に関する重要な意味を持つ、 生体内での乳腺腫瘍の進行に間質細胞の正確な評価を防ぎます。また、免疫不全マウスでは、特別なケアの条件を繁殖し、必要とするのは難しい、コストがかかります。これらの障害を克服するために、我々は、同所一貫性のある腫瘍の形成を誘導するために、同じ遺伝的背景からマウスに間質細胞と上皮細胞を移植する手法を開発しました。このシステムは、ドナーC57BL/6Jマウスから通常、癌関連線維芽細胞、PyVmT乳癌細胞とコラーゲンを収穫伴います。次に、細胞をコラーゲンに埋め込まれ、雌のC57BL/6Jマウスの鼠径部乳腺に移植されています。単独でPyVmT細胞の移植は、明白な腫瘍の30〜40日後に移植を形成する。 60日でのエンドポイント解析は、その線維芽細胞との共移植が単独で移植PyVmT細胞と比較して乳腺腫瘍の成長を促進することを示します。 C57BL/6Jマウス由来の細胞とマトリックスはこれらの研究で用いていたが、細胞とマトリックスと移植のアプローチの分離は、汎用性を実証するさまざまな遺伝的背景からマウスの方に適用されることがあります。要約すると、このシステムは、間質細胞と上皮細胞間の分子間相互作用を調査するために使用すること、および免疫不全マウスモデルでの重要な限界を克服しています。

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Mammary Transplantation of Stromal Cells and Carcinoma Cells in C57BL/6J Mice

このレポートでは、我々はマウス乳腺から分離し、培養ドナー細胞にシステムのデモンストレーションを、と同所間質分析するためにレシピエントマウスにこれらの細胞を移植：乳腺腫瘍の開発中に上皮との相互作用を。

C57BL/6Jマウスにおける間質細胞と癌細胞の乳腺移植

The influence of stromal cells, including fibroblasts on mammary tumor progression has been well documented through the use of mouse models, in particular ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts (CAFs) from Human Mammary Fibroblasts

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts CAFs from Human Mammary Fibroblasts

ヒト乳腺線維芽細胞からの癌関連線維芽細胞の実験的生成（CAFS）

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of ...

Human Internal Mammary Artery (IMA) Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

Human Internal Mammary Artery IMA Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

人間の内胸動脈（IMA）移植およびステント留置術：ステント内再狭窄の開発を研究するための人体モデル

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

単離、特徴付けと二つの異なる方法を使用して永久歯に由来するヒト歯髄幹細胞の分化の比較

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Generation of Subcutaneous and Intrahepatic Human Hepatocellular Carcinoma Xenografts in Immunodeficient Mice

免疫不全マウスの皮下および肝内ヒト肝細胞癌異種移植片の生成

In  vivo experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate  the human disease provide a valuable platform for research into disease  ...

Coculture System with an Organotypic Brain Slice and 3D Spheroid of Carcinoma Cells

器官型脳スライスと癌細胞の3Dスフェロイドとの共培養システム

Patients with cerebral metastasis of carcinomas have a poor prognosis. However, the process at the metastatic site has barely been investigated, in ...

Modeling Spontaneous Metastatic Renal Cell Carcinoma (mRCC) in Mice Following Nephrectomy

Modeling Spontaneous Metastatic Renal Cell Carcinoma mRCC in Mice Following Nephrectomy

腎摘出後のマウスにおける自発転移性腎細胞癌（MRCC）をモデル化する

One of the key challenges to improved testing of new experimental therapeutics in renal cell carcinoma (RCC) is the development of models that faithfully ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mammary Fat Pad of Mice to Study Tumor Growth.

腫瘍増殖を研究するためにマウスの乳房脂肪パッド中に乳癌細胞の同所注入。

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the ...

Evaluation of Stem Cell Properties in Human Ovarian Carcinoma Cells Using Multi and Single Cell-based Spheres Assays

マルチとシングルセルベース球アッセイを用いてヒト卵巣癌細胞における幹細胞特性の評価

Years of research indicates that ovarian cancers harbor a heterogeneous mixture of cells including a subpopulation of so-called &#8220;cancer stem ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

新しい治療戦略を開発するための膵臓癌幹細胞特性を研究

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

マウスにおける異子宮頸心臓移植

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...