Name: mammary transplantation of stromal cells and carcinoma cells in c57bl/6j mice
Uploaded: 2011-08-12T12:00:00
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이 프로젝트는 NIH / NCI 부여 번호 R00 CA127357와 캔자스 암 센터 엔다우먼트 대학으로 통해 후원했다.

1. C57BL/6J 마우스의 분리 및 기증 콜라겐의 추출 <ol><li> 승인 IACUC 방법을 사용하여 성숙한 정상 여성 C57BL/6J 마우스를 희생. </li><li> 꼬리를 수확하고 조직을 소독하기 위해 45 분 동안 70 %의 에탄올에 만끽해보세요. 조직 종이로 꼬리를 건조, 알루미늄 호일에 포장. 필요한 때까지 -20 ° C에 꼬리를 저장합니다. </li><li> 이러한 층류 후드로 멸균 환경에서 꼬리를 놓습니다. 가위를 사용하여 꼬리 루트?...

<ol>
	<li>Hayward, S., Haughney, P. C., Rosen, M. A., Greulich, K. M., Weier, H. U., Dahiya, R., Cunha, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+between+adult+human+prostatic+epithelium+and+rat+urogenital+sinus+mesenchyme+in+a+tissue+recombination+model.">Interactions between adult human prostatic epithelium and rat urogenital sinus mesenchyme in a tissue recombination model.</a> Differentiation. 63, 131-131 (1998).</li><li>Cunha, G., Hom, Y. K., Young, P., Brody, J., Asch, B. B., Ip, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods in Mammary Gland Biology. , (2000).</li><li>Ethier, S. P., Ammerman, C. A., Dziubinski, M. L., Asch, B. B., Ip, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods in Mammary Gland Biology. , (2000).</li><li>Medina, D., Kittrell, F., Asch, B. B., Ip, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods in Mammary Gland Biology. , (2000).</li><li>Kalluri, R., Zeisberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblasts+in+cancer.">Fibroblasts in cancer.</a> Nat Rev Cancer. 6, 392-401 (2006).</li><li>DeNardo, D. G., Johansson, M., Coussens, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+cells+as+mediators+of+solid+tumor+metastasis.">Immune cells as mediators of solid tumor metastasis.</a> Cancer Metastasis. 27, 11-18 (2008).</li><li>Naito, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage+differentiation+and+function+in+health+and+disease.">Macrophage differentiation and function in health and disease.</a> Pathol Int. 58, 143-155 (2008).</li><li>Firestein, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+T+cell+cometh:+interplay+between+adaptive+immunity+and+cytokine+networks+in+rheumatoid+arthritis.">The T cell cometh: interplay between adaptive immunity and cytokine networks in rheumatoid arthritis.</a> J Clin Invest. 114, 471-474 (2004).</li><li>Cheng, N., Chytil, A., Shyr, Y., Joly, A., Moses, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+Hepatocyte+Growth+Factor+Signaling+by+Type+II+Transforming+Growth+Factor-{beta}+Receptor+Knockout+Fibroblasts+Promotes+Mammary+Tumorigenesis.">Enhanced Hepatocyte Growth Factor Signaling by Type II Transforming Growth Factor-{beta} Receptor Knockout Fibroblasts Promotes Mammary Tumorigenesis.</a> Cancer Res. 67, 4869-4877 (2007).</li><li>Qiu, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+expression+profiling+identifies+signatures+of+tumor+virulence+in+MMTV-PyMT-transgenic+mice:+correlation+to+human+disease.">Global expression profiling identifies signatures of tumor virulence in MMTV-PyMT-transgenic mice: correlation to human disease.</a> Cancer Res. 64, 5973-5981 (2004).</li><li>Schaffhausen, B. S., Roberts, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lessons+from+polyoma+middle+T+antigen+on+signaling+and+transformation:+A+DNA+tumor+virus+contribution+to+the+war+on+cancer.">Lessons from polyoma middle T antigen on signaling and transformation: A DNA tumor virus contribution to the war on cancer.</a> Virology. 384, 304-316 (2009).</li><li>Cepko, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+of+neural+cells+via+retrovirus-mediated+oncogene+transduction.">Immortalization of neural cells via retrovirus-mediated oncogene transduction.</a> Annu Rev Neurosci. 12, 47-65 (1989).</li><li>O'Hare, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+immortalization+of+freshly+isolated+human+mammary+fibroblasts+and+endothelial+cells.">Conditional immortalization of freshly isolated human mammary fibroblasts and endothelial cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 98, 646-651 (2001).</li><li>Shay, J. W., Wright, W. E., Werbin, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+the+molecular+mechanisms+of+human+cell+immortalization.">Defining the molecular mechanisms of human cell immortalization.</a> Biochim Biophys Acta. 1072, 1-7 (1991).</li><li>Gudjonsson, T., Villadsen, R., Ronnov-Jessen, L., Petersen, O. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+protocols+used+in+cell+culture+models+of+human+breast+morphogenesis.">Immortalization protocols used in cell culture models of human breast morphogenesis.</a> Cell Mol Life Sci. 61, 2523-2534 (2004).</li><li>Raschke, W. C., Baird, S., Ralph, P., Nakoinz, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+macrophage+cell+lines+transformed+by+Abelson+leukemia+virus.">Functional macrophage cell lines transformed by Abelson leukemia virus.</a> Cell. 15, 261-267 (1978).</li><li>Shen, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+of+endothelial+cells+differentiated+from+mouse+embryonic+stem+cells.">Immortalization of endothelial cells differentiated from mouse embryonic stem cells.</a> Shi Yan Sheng Wu Xue Bao. 35, 218-228 (2002).</li><li>Wang, S. J., Greer, P., Auerbach, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+propagation+of+yolk-sac-derived+endothelial+cells+from+a+hypervascular+transgenic+mouse+expressing+a+gain-of-function+fps/fes+proto-oncogene.">Isolation and propagation of yolk-sac-derived endothelial cells from a hypervascular transgenic mouse expressing a gain-of-function fps/fes proto-oncogene.</a> In Vitro Cell Dev Biol Anim. 32, 292-299 (1996).</li><li>Tiede, B. J., Owens, L. 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G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+transplantability+of+tumor-associated+stromal+cells.">Differential transplantability of tumor-associated stromal cells.</a> Cancer Res. 64, 5920-5924 (2004).</li></ol>

종양 진행에 섬유아 세포의 기능적 기여는 암종 관련 섬유아 세포가 증가 종양 성장과 invasiveness 5 양성 상피 세포 내유 결과와 함께 공동으로 이식하는, 이식 모델을 통해 증명되었습니다. 기존의 이식 방법은 다른 유전적 배경 마우스 또는 다른 종 공동 이식 stromal와 상피 세포 SCID이나 누드 마우스의 사용을 참여합니다. Immunocompromised 마우스는 종양 특정 항원과 종양 세포의 타겟팅 이후,...

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 댓글 (옵션) </th></tr><tr><td> C57BL/6N 마우스 </td><td> 할런 </td><td> N / A </td><td></td></tr><tr><td> MMTV - PyVmT 형질 전환 마우스 </td><td> 잭슨 실험실 </td><td> 002374 </td><td></td></tr><tr><td> 태아 소 혈청 </td><td> 어부 </td><td> SH3039603PR </td><td></td></tr><tr><td> DMEM </td><td> VWR </td><td> 10000113873 </td><td></td></tr><tr><td> 페니실린 / 스트렙토 마이신 </td><td> 어부 </td><td> MT - 30-001 </td><td></td></tr><tr><td> amphotericin </td><td> 어부 </td><td> BP2645 - 20 </td><td></td></tr><tr><td> Amicon 여과 열 ultracel 50K </td><td> Millipore </td><td> UFC905008 </td><td></td></tr><tr><td> 베크맨 TI 로터를위한 튜브 </td><td> 베크맨 </td><td> 355618 </td><td></td></tr><tr><td> 쥐 꼬리 콜라겐 </td><td> 어부 </td><td> CB 40,236 </td><td></td></tr><tr><td> 10X EBSS </td><td> 시그마 알드리치 </td><td> E7510 - 100ML </td><td></td></tr><tr><td> 트립신 1X, HBSS W / O 칼슘과 마그네슘의 0.25 % </td><td> 어부 </td><td> MT - 25-050 ​​- CI </td><td></td></tr><tr><td> 빙초산 </td><td> 어부 </td><td> A491 - 212 </td><td></td></tr><tr><td> Coomasie 블루 </td><td> 어부 </td><td> BP101 25 </td><td></td></tr><tr><td> 트립신 </td><td> 시그마 알드리치 </td><td> T3924 - 100ml </td><td></td></tr><tr><td> Collagenase </td><td> 시그마 AldrichC0130 - 50 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> hyalronidase </td><td> 시그마 알드리치 </td><td> H3884 </td><td></td></tr><tr><td> DNase </td><td> 시그마 알드리치 </td><td> D5025 </td><td></td></tr><tr><td> 만화경 단백질 표준 </td><td> Biorad </td><td> 1,610,375 </td><td></td></tr><tr><td> 유리 슬라이드 </td><td> 어부 </td><td> 12545-78 </td><td></td></tr><tr><td> 유리 coverslips </td><td> VWR </td><td> 101400-042 </td><td></td></tr><tr><td> Vimentin 항체 S - 20 </td><td> 산타크루즈 생명 공학 </td><td> SC - 7558 </td><td></td></tr><tr><td> α - 평활근의 굴지 항체 </td><td> Abcam </td><td> ab5694 </td><td></td></tr><tr><td> CK14 항체 </td><td> 산타크루즈 생명 공학 </td><td> SC - 53253 </td><td></td></tr><tr><td> CK18 항체 </td><td> Abcam </td><td> ab668 </td><td></td></tr><tr><td> DAPI </td><td> 시그마 알드리치 </td><td> D9542 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 마우스 biotinylated </td><td> 벡터 실험실 </td><td> BA9200 </td><td> 피셔 통해 배포 </td></tr><tr><td> 안티 마우스 알렉사 - 568 </td><td> Invitrogen </td><td> A10037 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 마우스 알렉사 - 488 </td><td> Invitrogen </td><td> A11001 </td><td></td></tr><tr><td> Streptavidin - 알렉사 - 488 </td><td> Invitrogen </td><td> S11226 </td><td></td></tr><tr><td> DAPI </td><td> Invitrogen </td><td> D21490 </td><td></td></tr><tr><td> antifade을 연장 </td><td> Invitrogen </td><td> P - 36930 </td><td></td></tr><tr><td> 외과 가위 </td><td> 파인 과학 도구 </td><td> 91400-12 </td><td></td></tr><tr><td> 봄날의 가위 </td><td> 파인 과학 도구 </td><td> 15000-02 </td><td></td></tr><tr><td> 블런트 포셉 </td><td> 파인 과학 도구 </td><td> 11002-12 </td><td></td></tr><tr><td> # 5 멋진 포셉 </td><td> 파인 과학 도구 </td><td> 11251-10 </td><td></td></tr><tr><td> 굿 삼가의 크롬을 함유하는 제품 봉합 </td><td> 어부 </td><td> NC9326254 </td><td></td></tr><tr><td> 유리 파스퇴르 pipet </td><td> 어부 </td><td> 22-042-815 </td><td></td></tr><tr><td> 에탄올 </td><td> 어부 </td><td> A406P 4 </td><td></td></tr><tr><td> betadine </td><td> 어부 </td><td> NC9386574 </td><td></td></tr><tr><td> 상처 클립 </td><td> 어부 </td><td> 12032-07 </td><td></td></tr><tr><td> 상처 스테이플 </td><td> 어부 </td><td> 12031-07 </td><td></td></tr></tbody></table>

mammary transplantation of stromal cells and carcinoma cells in c57bl/6j mice

내유 종양의 진행에 섬유아 세포를 포함한 세포 stromal의 영향은 잘 생쥐의 유선에 stromal 세포와 상피 세포의 이식을 통해 특히, 마우스 모델의 사용을 통해 문서화되었습니다. 현재 이식 모델은 종종 stromal 세포와 상피 세포의 다양한 유전 배경에 의한 immunocompromised 생쥐의 사용을 포함하고 있습니다. 세포외 매트릭스는 종종 일관성있는 세포 세포 상호 작용에 대한 두 가지 세포 유형을 포함하지만, Matrigel 또는 immunogenic 기판 아르 쥐 꼬리 콜라겐의 사용을 포함하는 데 사용됩니다. immunocompromised 생쥐에서 T 세포 기능의 부족 약물 개발 및 효능에 대한 중요한 의미와 함께, 생체내에 내유 종양 진행에 stromal 세포의 정확한 평가를 방지할 수 있습니다. 또한, immunocompromised 마우스는 특별한주의 조건을 번식하고 요구, 비용이 많이 드는 어려운 있습니다. 이러한 장애물을 극복하기 위해, 우리는 orthotopically 일관성 종양 형성을 유도하는 동일한 유전적 배경에서 마우스로 stromal 세포와 상피 세포를 이식하는 방법을 개발했습니다. 이 시스템은 기증자 C57BL/6J 마우스의 정상, 암종 관련 섬유아 세포, PyVmT 내유 암종 세포와 콜라겐을 수확 포함됩니다. 세포가 콜라겐에 포함된 다음과 여성 C57BL/6J 마우스의 사타구니 내유 분비에 이식하고 있습니다. 혼자 PyVmT 세포의 이식은 만져서 알 수있는 종양 30-40일 게시물 이식을 형성합니다. 60일에서 종점 분석은 섬유아 세포와 공동 이식 혼자 이식 PyVmT 세포에 비해 내유 종양의 성장을 향상 나타냅니다. C57BL/6J 마우스의 세포와 매트릭스는 이러한 연구에 사용했지만, 세포 매트릭스 및 이식 방식의 고립은 다용도을 보여주는 서로 다른 유전 배경을 마우스 방향으로 적용될 수 있습니다. 요약이 시스템은 stromal 세포와 상피 세포 사이의 분자 상호 작용을 조사하는 데 사용될 수 있으며, immunocompromised 마우스 모델에서 중요한 한계를 극복.

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Mammary Transplantation of Stromal Cells and Carcinoma Cells in C57BL/6J Mice

이 보고서에서, 우리는 분리 시스템 및 마우스 유선에서 문화 기증자 세포를 증명하고, orthotopically stromal 분석받는 마우스에서 이러한 세포를 이식 : 내유 종양 개발하는 동안 상피 상호 작용합니다.

C57BL/6J 마우스의 Stromal 셀 및 암종 세포 이식 내유

The influence of stromal cells, including fibroblasts on mammary tumor progression has been well documented through the use of mouse models, in particular ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts (CAFs) from Human Mammary Fibroblasts

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인간 Mammary 섬유아 세포에서 암종 - 관련 섬유아 세포의 실험 세대 (CAFs)

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of ...

연구

의학

Human Internal Mammary Artery (IMA) Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

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인간 내유 동맥 (IMA) 이식과 Stenting : 인 Restenosis 스텐 트의 개발을 공부하는 인간 모델

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

인간 치과 펄프의 줄기 세포의 분리, 특성화 및 비교 차별화 두 가지 방법을 사용하여 영구 치아에서 파생

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면역 결핍 마우스의 피하 및 간내 인간의 간세포 암 이종 이식의 생성

In  vivo experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate  the human disease provide a valuable platform for research into disease  ...

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