Name: ex vivo culture of primary human fallopian tube epithelial cells
Uploaded: 2011-05-09T13:00:00
Duration: 11 min 46 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells at JoVE.com

Мы благодарим факультет, ребята, жители, и врач помощников Бригам и женской больницы, отделении патологии для изготовления ткани для этих исследований. Эта работа была поддержана исследовательских грантов от NIH / Национальный институт рака (P50 CA105009, K08 CA108748, U01 CA152990), рак яичников Исследования фонда, Фонда мая Кей, Novartis Pharmaceuticals, Роберт и Дебора Первый фонд, Рэнди и Джоэл Катлер рака яичников Исследования Фонда, Марша Ривкин Foundation - научного премии Scholar, AACR - Джордж и Патрисия Sehl стипендий для Рака генетики исследований и стипендий Американского врача по медицине в Израиле - Клэр и Эммануэль Г. Розенблатт Фонда Грант.

<ol>
	<li>Jemal, A., Siegel, R., Xu, J., Ward, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics.">Cancer statistics.</a> CA Cancer J. Clin. 60, 277-300 (2010).</li><li>Markman, M., Walker, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraperitoneal+chemotherapy+of+ovarian+cancer:+a+review,+with+a+focus+on+practical+aspects+of+treatment.">Intraperitoneal chemotherapy of ovarian cancer: a review, with a focus on practical aspects of treatment.</a> J. Clin. Oncol. 24, 988-994 (2006).</li><li>Liu, J., Matulonis, U. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+advances+in+ovarian+cancer.">New advances in ovarian cancer.</a> Oncology (Williston Park). 24, 721-728 (2010).</li><li>Cannistra, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+of+the+ovary.">Cancer of the ovary.</a> N. Engl. J. Med. 351, 2519-2529 (2004).</li><li>Kurman, R. J., Shih, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+origin+and+pathogenesis+of+epithelial+ovarian+cancer:+a+proposed+unifying+theory.">The origin and pathogenesis of epithelial ovarian cancer: a proposed unifying theory.</a> Am. J. Surg. Pathol. 34, 433-443 (2010).</li><li>Fong, M. Y., Kakar, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+cancer+mouse+models:+a+summary+of+current+models+and+their+limitations.">Ovarian cancer mouse models: a summary of current models and their limitations.</a> J Ovarian Res. 2, 12-12 (2009).</li><li>Shan, W., Liu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epithelial+ovarian+cancer:+focus+on+genetics+and+animal+models.">Epithelial ovarian cancer: focus on genetics and animal models.</a> Cell Cycle. 8, 731-735 (2009).</li><li>Levanon, K., Crum, C. P., Drapkin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+insights+into+the+pathogenesis+of+serous+ovarian+cancer+and+its+clinical+impact.">New insights into the pathogenesis of serous ovarian cancer and its clinical impact.</a> J. Clin. Oncol. 26, 5284-5293 (2008).</li><li>Karst, A. M., Drapkin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+cancer+pathogenesis:+a+model+in+evolution.">Ovarian cancer pathogenesis: a model in evolution.</a> J Oncol. 2010, 932371-932371 (2010).</li><li>Levanon, K., Ng, V., Piao, H. Y., Zhang, Y., Chang, M. C., Roh, M. H., Kindelberger, D. W., Hirsch, M. S., Crum, C. P., Marto, J. A., Drapkin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+ex+vivo+cultures+of+human+fallopian+tube+epithelium+as+a+model+for+serous+ovarian+carcinogenesis.">Primary ex vivo cultures of human fallopian tube epithelium as a model for serous ovarian carcinogenesis.</a> Oncogene. 25, 1103-1113 (2010).</li><li>Landen, C. N., Birrer, M. J., Sood, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+events+in+the+pathogenesis+of+epithelial+ovarian+cancer.">Early events in the pathogenesis of epithelial ovarian cancer.</a> J. Clin. Oncol. 26, 995-1005 (2008).</li><li>Vermeer, P. D., Einwalter, L. A., Moninger, T. O., Rokhlina, T., Kern, J. A., Zabner, J., Welsh, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segregation+of+receptor+and+ligand+regulates+activation+of+epithelial+growth+factor+receptor.">Segregation of receptor and ligand regulates activation of epithelial growth factor receptor.</a> Nature. 422, 322-326 (2003).</li></ol>

Доктор Драпкин является консультантом Novartis Pharmaceuticals. Никакие другие авторы заявляют любого потенциального конфликта интересов.

Идентификация FT в качестве кандидата сайта происхождения SOC предоставляет возможность для основной и трансляционные исследования, направленные на расшифровку механизмы, связывающие известные факторы риска и фактических серозного канцерогенный процесс. Критические для этого является развитие послушный модельные системы, которая позволит нам приступить к тестированию гипотезы, что FTSEC является клетка-оф-происхождения тазовых серозных опухолях. Бывшие модели культуры естественных условиях, описанных здесь является новая система, которая позволяет изоляции и со-культуре первичных секреторной FT и ресничные клетки таким образом, что сохраняет морфологию и биологию родной эпителия FT. Используя эту систему, мы в последнее время характеризуется secretome этого эпителия и как эпителий реагирует на механические и генотоксического травмы 10. Овуляция, одним из основных факторов риска, связанных с яичников опухолей, характеризуется сочетанием повреждения тканей, воспалительные медиаторы, факторы роста, гормоны и 11. Эта система может быть использована для изучения влияния среды на овуляторных реагирования и жизнеспособность секреторную и ресничных клеток. Кроме того, влияние других типов клеток (т.е. клеток воспаления) могут быть изучены, чтобы лучше понять события, диск камерного типа дифференциации и факторов, которые способствуют опухолевой трансформации этих клеток. Подобные модели были описаны в других тканях, где поляризованных эпителия присутствует. Например, в поляризованном первичных культур дыхательных путей эпителия, эффект heregulin на рост клеток и ответ на повреждение клеток оценивали 12. Эти типы моделей системы предоставляют новые и полезный способ исследования инициирования и патогенеза опухолей, которые возникают из эпителиальных тканей, и это имеет решающее значение в тканях, таких как FT, где нет линий клеток в настоящее время существуют, и где есть большой необходимость определения основных путей и разработка новых стратегий лечения.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Collagen from human placenta (Bornstein and Traub Type IV)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>C7521</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DMEM:F12 media</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cellgro</td>
<td>15-090-CV</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ultroser G</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Crescent Chemical Company</td>
<td>67042</td>
<td>Add 20 ml of DMEM:F12 to stock bottle and use 10mls per 500 ml of media (2% final concentration)</td>
</tr>
<tr>
<td>Pen Strep</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15140-122</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BD Primaria culture plates</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Bioscience</td>
<td>353802</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>24 well Transwell Permeable supports</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Corning (Costar)</td>
<td>3470</td>
<td> Clear, 6.5 mm insert, 0.4 &mu;m pore size, treated polyester </td>
</tr>
<tr>
<td>MEM (Minimal Essential Media)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cellgro</td>
<td>10-010-CV</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pronase</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roche</td>
<td>11459643001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DNAse</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>DN25</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sall2 antibody</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dr T. Benjamin, Harvard</td>
<td>Gift</td>
<td>1:20 dilution</td>
</tr>
<tr>
<td>Pax8 antibody</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Proteintech</td>
<td>10336-1-AP</td>
<td>1: 1000 dilution</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

ex vivo culture of primary human fallopian tube epithelial cells

Эпителиального рака яичников является одной из главных причин женской смертности от рака в Соединенных Штатах. В отличие от других женщин-специфические виды рака, как и рака молочной железы и матки рак, где показатели смертности снизились в последние годы, яичников ставки лечения рака остаются относительно неизменными в течение последних двух десятилетий 1. Во многом это связано с отсутствием соответствующих инструментов скрининга для выявления ранних стадия заболевания, когда хирургическое вмешательство и химиотерапия являются наиболее эффективными 2, 3. В результате, большинство пациентов имеет продвинутые стадии заболевания и диффузного брюшной участия. Это осложняется еще и тем, что рак яичников является гетерогенным заболеванием с несколькими гистологических подтипов 4, 5. Серозный рак яичников (ШОС) является наиболее распространенным и агрессивный подтип и вид чаще всего связан с мутациями в генах BRCA. Современные экспериментальные модели в этой области связаны с использованием клеточных линий рака и мышах, чтобы лучше понять генетические события начала и патогенеза заболевания 6, 7. В последнее время маточной трубе появился как роман сайт для возникновения ШОС, с маточной трубе (FT) секреторная эпителиальные клетки (FTSEC) в качестве предлагаемой ячейки 8 происхождения, 9. Есть в настоящее время нет клеточных линий или культура систем, доступных для изучения эпителия FT или FTSEC. Здесь мы опишем естественных роман бывшего культуры система, где первичные человеческие FT эпителиальные клетки культивируют в манере, которая сохраняет свою архитектуру, полярность, иммунофенотип, и ответ на физиологические и генотоксического стресса. Это бывшие модели естественных условиях представляет собой полезный инструмент для изучения ШОС, что позволит лучше понять, как опухоли могут возникнуть из этой ткани, а также механизмы, участвующие в опухоли инициации и прогрессии.

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells at JoVE.com

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

Фаллопиевых труб (FT) появляется в качестве альтернативного места происхождения для серозного рака яичников (SOC). Этот протокол описывает новый метод для изоляции и<em&gt; Исключая виво</em&gt; Культура маточной трубе эпителиальных клеток. Эта система повторяет<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Эпителия и позволяет изучение патогенеза SOC.

Экс Vivo культуры первичных человеческих маточных труб эпителиальных клеток

Epithelial ovarian cancer is a leading cause of female cancer mortality in the United States. In contrast to other women-specific cancers, like breast and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

Метод культуры раннего куриных эмбрионов исключая виво (Новая Культура)

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Primary Human Bronchial Epithelial Cells Grown from Explants

Первичные человеческие бронхиальные эпителиальные клетки, выращенных из эксплантов

Human bronchial epithelial cells are needed for cell models of disease and to investigate the effect of excipients and pharmacologic agents on the ...

Isolation and Culture of Adult Epithelial Stem Cells from Human Skin

Выделение и культуры взрослых Эпителиальные стволовые клетки из человеческой кожи

The homeostasis of all self-renewing tissues is dependent on adult stem cells. As undifferentiated stem cells undergo asymmetric divisions, they generate ...

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Лентивирусов-опосредованной Нокдаун В Ex Vivo Эритропоэз прав гемопоэтических стволовых клеток

Erythropoiesis is a commonly used model system to study cell differentiation. During erythropoiesis, pluripotent adult human hematopoietic stem cells ...

Ex vivo Culture of Mouse Embryonic Skin and Live-imaging of Melanoblast Migration

Ex vivo Culture of Mouse Embryonic Skin and Live-imaging of Melanoblast Migration

Экс естественных Культура мышиных эмбриональных Внешний Live-визуализации меланобластов миграции

Melanoblasts are the neural crest derived precursors of melanocytes; the cells responsible for producing the pigment in skin and hair. Melanoblasts ...

Optimal Lentivirus Production and Cell Culture Conditions Necessary to Successfully Transduce Primary Human Bronchial Epithelial Cells

Оптимальное Лентивирус производства и клеточной культуры условия, необходимые для успешного трансдукции Первичные человеческие бронхиальные эпителиальные клетки

In vitro culture of primary human bronchial epithelial (HBE) cells using air-liquid interface conditions provides a useful model to study the processes of ...

Multicellular Human Alveolar Model Composed of Epithelial Cells and Primary Immune Cells for Hazard Assessment

Многоклеточная альвеолярная модель человека, состоящая из эпителиальных клеток и первичных иммунных клеток для оценки опасности

A human alveolar cell coculture model is described here for simulation of the alveolar epithelial tissue barrier composed of alveolar epithelial type II ...

Isolation and Enrichment of Human Lung Epithelial Progenitor Cells for Organoid Culture

Выделение и обогащение эпителиальных клеток-предшественников легких человека для органоидной культуры

Epithelial organoid models serve as valuable tools to study the basic biology of an organ system and for disease modeling. When grown as organoids, ...

Isolation, Culture, and Genetic Engineering of Mammalian Primary Pigment Epithelial Cells for Non-Viral Gene Therapy

Выделение, культивация и генная инженерия первичных пигментных эпителиальных клеток млекопитающих для невирусной генной терапии

Age-related macular degeneration (AMD) is the most frequent cause of blindness in patients &#62;60 years, affecting ~30 million people worldwide. AMD is a ...

Efficient Dissection and Culture of Primary Mouse Retinal Pigment Epithelial Cells

Эффективное рассечение и культура первичной мыши сетчатки Пигмент эпителиальных клеток

Eye disorders affect millions of people worldwide, but the limited availability of human tissues hinders their study. Mouse models are powerful tools to ...