Name: 'bioluminescent' reporter phage for the detection of category a bacterial pathogens
Uploaded: 2011-07-08T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about 'Bioluminescent' Reporter Phage for the Detection of Category A Bacterial Pathogens at JoVE.com

وأيد هذا البحث من قبل برنامج بحوث الأعمال الصغيرة الابتكار من المعاهد الوطنية للصحة (NIAID ، 1R43AI082698 - 01) وزارة الزراعة معهد الوطني للأغذية والزراعة (NIFA ، 2009-33610-20028).

1. Y. طاعون وحة التلقيح <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خط Y. طاعون A1122 (BeiResources # NR15) الثقافات الأسهم على لوريا ، Bertani (LB) آغار (ميلر). استخدام تقنية معقمة ، وتأدية جميع Y. طاعون التلاعب في نوع من الدرجة الثانية ومجلس الوزراء. السلامة الأحيائية...

<ol>
	<li>Darling, R. G., Catlett, C. L., Huebner, K. D., Jarrett, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Threats+in+bioterrorism.+I:+CDC+category+A+agents.">Threats in bioterrorism. I: CDC category A agents.</a> Emerg Med Clin North Am. 20, 273-309 (2002).</li><li>Chu, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Laboratory manual of plague diagnostic tests.. , (2000).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> , (1999).</li><li>Inglesby, T. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anthrax+as+a+biological+weapon,+2002:+updated+recommendations+for+management.">Anthrax as a biological weapon, 2002: updated recommendations for management.</a> JAMA. 287, 2236-2252 (2002).</li><li>Schuch, R., Fischetti, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detailed+genomic+analysis+of+the+Wbeta+and+gamma+phages+infecting+Bacillus+anthracis:+implications+for+evolution+of+environmental+fitness+and+antibiotic+resistance.">Detailed genomic analysis of the Wbeta and gamma phages infecting Bacillus anthracis: implications for evolution of environmental fitness and antibiotic resistance.</a> J Bacteriol. 188, 3037-3051 (2006).</li><li>Garcia, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+genome+sequence+of+Yersinia+pestis+bacteriophage+phiA1122+reveals+an+intimate+history+with+the+coliphage+T3+and+T7+genomes.">The genome sequence of Yersinia pestis bacteriophage phiA1122 reveals an intimate history with the coliphage T3 and T7 genomes.</a> J Bacteriol. 185, 5248-5262 (2003).</li><li>Schofield, D. A., Molineux, I. J., Westwater, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+bioluminescent+phage+for+detection+of+Yersinia+pestis.">Diagnostic bioluminescent phage for detection of Yersinia pestis.</a> Journal of Clinical Microbiology. 47, 3887-3894 (2009).</li><li>Schofield, D. A., Westwater, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phage-mediated+bioluminescent+detection+of+Bacillus+anthracis.">Phage-mediated bioluminescent detection of Bacillus anthracis.</a> Journal of Applied Microbiology. 107, 468-478 (2009).</li><li>Chu, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> CDC: Basic laboratory protocols for the presumptive identification of Yersinia pestis. , 1-19 (2001).</li><li>Gunnison, J. B., Larson, A., Lazarus, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+differentiation+between+Pasteurella+pestis+and+Pasteurella+pseudotuberculosis+by+action+of+bacteriophage.">Rapid differentiation between Pasteurella pestis and Pasteurella pseudotuberculosis by action of bacteriophage.</a> J Infect Dis. 88, 254-255 (1951).</li><li>Lazarus, A. S., Gunnison, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Action+of+Pasteurella+pestis+Bacteriophage+on+Strains+of+Pasteurella,+Salmonella,+and+Shigella.">The Action of Pasteurella pestis Bacteriophage on Strains of Pasteurella, Salmonella, and Shigella.</a> J Bacteriol. 53, 705-714 (1947).</li><li>Sergueev, K. V., He, Y., Borschel, R. H., Nikolich, M. P., Filippov, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+and+sensitive+detection+of+Yersinia+pestis+using+amplification+of+plague+diagnostic+bacteriophages+monitored+by+real-time+PCR.">Rapid and sensitive detection of Yersinia pestis using amplification of plague diagnostic bacteriophages monitored by real-time PCR.</a> PLoS One. 5, e11337-e11337 (2010).</li></ol>

هذا الأسلوب يدل على قدرة بالعاثية مراسل لكشف بسرعة Y. يمكن أن الطاعون منذ بالعاثية مراسل تنبيغ استجابة لإشارة bioluminescent Y. مثقف طاعون داخل الخلايا 20 دقيقة بعد إضافة فج. وبالعاثية مراسل هي أيضا قادرة على الكشف عن مباشرة Y. طاعون في مصفوفات السريرية...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> اسم كاشف </th><th> شركة </th><th> فهرس العدد </th></tr><tr><td> Difco آغار LB ، ميلر </td><td> VWR </td><td> 90003-346 </td></tr><tr><td> Difco LB مرق ، ميلر </td><td> VWR </td><td> 90003-350 </td></tr><tr><td> 17 × 100 ملم أنابيب الثقافة </td><td> الولايات المتحدة الأمريكية والعلم </td><td> 1485-0810 </td></tr><tr><td> ن Decanal </td><td> سيغما </td><td> D7384 </td></tr><tr><td> VERITAS microplate luminometer </td><td> تيرنر النظم البيولوجية </td><td> 9100-001 </td></tr><tr><td> Microlite microtiter 96 - جيدا لوحة </td><td> VWR </td><td> 62402-984 </td></tr></tbody></table>

'bioluminescent' reporter phage for the detection of category a bacterial pathogens

يرسينيا بيستيس وعصيات الجمرة الخبيثة هي الفئة أ مسببات الأمراض البكتيرية التي هي العوامل المسببة للمرض الجمرة الخبيثة والطاعون ، على التوالي 1. على الرغم من الطبيعي حدوث الأمراض على حد سواء &quot;هو الآن نادرة نسبيا ، وإمكانية استخدام هذه الجماعات الإرهابية باعتبارها الاسلحة البيولوجية مسببات حقيقية. بسبب سراية المرض المتأصل ، وبطبيعة الحال السريرية السريع ، وارتفاع معدل وفيات الأطفال ، فمن الأهمية بمكان أن يتم الكشف عن تفشي بسرعة. ولذلك المنهجيات التي توفر الكشف السريع والتشخيص ضرورية لضمان التنفيذ الفوري للتدابير الصحة العامة وتفعيل إدارة الأزمات. قد المؤتلف بالعاثية مراسل توفير نهج محدد وسريع للكشف عن Y. الطاعون وباء. الجمرة الخبيثة ، ومراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها في الوقت الحاضر استخدام تحلل بالعاثية الكلاسيكية فحوصات لتحديد أكدت هذه مسببات الأمراض البكتيرية 2-4. هذه المقايسات الاستفادة من طبيعيا بالعاثية التي هي محددة وlytic لمضيفيهم البكتيرية. بين عشية وضحاها بعد نمو للبكتيريا المزروعة في وجود فج محددة ، وتشكيل لويحات (تحلل الجرثومي) يوفر تحديد هوية الهدف البكتيرية. على الرغم من أن هذه القياسات ليست قوية ، فإنها تعاني من ثلاثة عيوب : 1) أنها تقوم المختبرات ؛ 2) أنها تتطلب العزلة البكتيرية وزراعة عينة من المشتبه بهم ، و 3) أنها تأخذ 24-36 ساعة لإكمال. لمعالجة هذه القضايا ، والمؤتلف وراثيا &quot;للضوء الموسومة&quot; فج المراسل من خلال دمج جينات harveyi الضمة luxAB في جينوم Y. الطاعون وباء. الجمرة الخبيثة بالعاثية محددة 5-8. وكان مراسل luxAB الناتجة بالعاثية قادرة على الكشف عن هدفهم محددة بسرعة (في غضون دقائق) ، ومنح بحساسية النمط الظاهري bioluminescent إلى الخلايا المتلقية. الأهم من ذلك ، تم الحصول عليها إما مع الكشف عن خلايا المزروعة المستلم أو وهمية مع المصابين العينات السريرية 7. لأغراض العرض التوضيحي ، ونحن هنا تصف طريقة للكشف بالعاثية بوساطة من المعروف Y. طاعون عزل باستخدام بالعاثية مراسل luxAB شيدت من فج CDC التشخيص الطاعون ΦA1122 6،7 (الشكل 1). ويمكن استخدام طريقة مماثلة ، مع تعديلات طفيفة (مثل التغير في درجة الحرارة ونمو وسائل الإعلام) ، للكشف عن B. الجمرة الخبيثة العزلات باستخدام B. الجمرة الخبيثة Wβ بالعاثية المراسل : luxAB 8. الأسلوب يصف تنبيغ بالعاثية بوساطة من النمط الظاهري biolumescent المزروعة إلى Y. طاعون الخلايا التي يتم قياسها في وقت لاحق باستخدام luminometer microplate. وتشمل المزايا الرئيسية لهذه الطريقة على المقايسات بالعاثية تحلل التقليدية هو سهولة الاستخدام ، ونتائج سريعة ، والقدرة على اختبار عينات متعددة في وقت واحد في شكل لوحة microtiter 96 - جيدا. <img src="/files/ftp_upload/2740/2740fig1.jpg" alt="الشكل 1"/> الشكل 1. الكشف التخطيطي ، وبالعاثية تختلط مع العينة ، وتنميط يصيب الخلية ، وأعرب عن luxAB ، وbioluminesces الخلية. تجهيز العينات ليست ضرورية ، وتنميط وخلايا مختلطة وقياسها في وقت لاحق للضوء.

Watch this Scientific Journal Video about 'Bioluminescent' Reporter Phage for the Detection of Category A Bacterial Pathogens at JoVE.com

'Bioluminescent' Reporter Phage for the Detection of Category A Bacterial Pathogens

وهناك طريقة بسيطة لتحديد مسببات الأمراض البكتيرية الأولوية لاستخدام وراثيا مراسل فج. هذه بالعاثية المراسل ، والتي هي محددة لأنواع معينة المضيفة ، قادرة على الاستجابة بسرعة transducing bioluminescent إشارة إلى الخلايا المضيفة. هنا ، نحن تصف استخدام فج مراسل للكشف عن<em&gt; يرسينيا بيستيس</em&gt;.

&#39;Bioluminescent&#39; بالعاثية مراسل للكشف عن مسببات الأمراض البكتيرية الفئة أ

Yersinia pestis and Bacillus anthracis are Category A bacterial pathogens that are the causative agents of the plague and anthrax, respectively 1. ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

باستخدام التصوير Bioluminescent بالتحقيق في التآزر بين العقدية الرئوية والأنفلونزا من الفيروسات في الفئران الرضع

During the 1918 influenza virus pandemic, which killed approximately 50 million people worldwide, the majority of fatalities were not the result of ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

إدخال إجهاد القص في دراسة الالتصاق الجرثومي

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

Infection of Zebrafish Embryos with Intracellular Bacterial Pathogens

إصابة الأجنة الزرد مع مسببات الأمراض البكتيرية بين الخلايا

Zebrafish (Danio rerio) embryos are increasingly used as a model for studying the function of the vertebrate innate immune system in host-pathogen ...

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

البكتيرية التصوير Bioluminescent<em&gt; في الجسم الحي</em

This video describes the use of whole body bioluminesce imaging (BLI) for the study of bacterial trafficking in live mice, with an emphasis on the use of ...

Biolistic Transformation of a Fluorescent Tagged Gene into the Opportunistic Fungal Pathogen Cryptococcus neoformans

Biolistic Transformation of a Fluorescent Tagged Gene into the Opportunistic Fungal Pathogen Cryptococcus neoformans

التحول Biolistic من نيون معلم جين إلى القناص الفطرية مسببات الأمراض<em&gt; المستخفية المورمة</em

The basidiomycete Cryptococcus neoformans, an invasive opportunistic pathogen of the central nervous system, is the most frequent cause of fungal ...

Identification of Rare Bacterial Pathogens by 16S rRNA Gene Sequencing and MALDI-TOF MS

تحديد مسببات الأمراض البكتيرية النادرة التي 16S الريباسي جين تسلسل وMALDI-TOF MS

There are a number of rare and, therefore, insufficiently described bacterial pathogens which are reported to cause severe infections especially in ...

Qualitative and Quantitative Assays for Detection and Characterization of Protein Antimicrobials

فحوصات النوعية والكمية للكشف وتوصيف مضادات الميكروبات البروتين

Initial evaluations of large microbial libraries for potential producers of novel antimicrobial proteins require both qualitative and quantitative methods ...

High-throughput Detection of Respiratory Pathogens in Animal Specimens by Nanoscale PCR

كشف الإنتاجية العالية للجهاز التنفسي مسببات الأمراض في العينات الحيوانية التي كتبها النانو PCR

Nanoliter scale real-time PCR uses spatial multiplexing to allow multiple assays to be run in parallel on a single plate without the typical drawbacks of ...

Development of a Hepatitis B Virus Reporter System to Monitor the Early Stages of the Replication Cycle

تطوير نظام الفيروسات مراسل التهاب الكبد B لرصد المراحل المبكرة من دورة النسخ المتماثل

Currently, it is possible to construct recombinant forms of various viruses, such as human immunodeficiency virus 1 (HIV-1) and hepatitis C virus (HCV), ...

A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.

A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.

منصة الفائق لفحص السالمونيلا spp./دوسنتاريا spp.

Fecal-oral transmission of acute gastroenteritis occurs from time to time, especially when people who handled food and water are infected by Salmonella ...