Name: aseptic laboratory techniques: volume transfers with serological pipettes and micropipettors
Uploaded: 2012-05-31T12:00:00
Duration: 11 min 43 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors at JoVE.com

الشكر الخاص لساندرز كوري في تصاميم يروك لإعداد الرسوم التوضيحية وكريس Reddi في جامعة كاليفورنيا لإقامة الثقافات عينة للشخصيات. تم توفير التمويل لهذا المشروع من قبل HHMI (HHMI منحة رقم 52006944).

<ol>
	<li>Barker, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> At the Bench: A Laboratory Navigator. , (1998).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biosafety in Microbiological And Biomedical Laboratories (BMBL). , (2009).</li><li>Bykowski, T., Stevenson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+Technique.">Aseptic Technique.</a> Current Protocols in Microbiology. Appendix 4, Appendix 4D (2008).</li><li>Cot&#233;, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+Technique+for+Cell+Culture.">Aseptic Technique for Cell Culture.</a> Current Protocols in Cell Biology. Chapter 1, Unit 1.3 (2001).</li><li>Grimes, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+basic+laboratory+manual+for+the+small-scale+production+and+testing+of+I-2+Newcastle+disease+vaccine.">A basic laboratory manual for the small-scale production and testing of I-2 Newcastle disease vaccine.</a> RAP Publication. AC802/E, 12-13 (2002).</li><li>Guzman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pipetting:+A+Practical+Guide.">Pipetting: A Practical Guide.</a> The American Biology Teacher. 63 (2), 128-131 (2001).</li><li>Jordan, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> RESEARCH: National Genomics Research Initiative Phage Resource Laboratory Manual. , (2008).</li><li>Sambrook, J., Russell, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular Cloning - A Laboratory Manual. , 978-087969576 (2001).</li><li>Seidman, L. A., Moore, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Basic Laboratory Methods for Biotechnology: Textbook and Laboratory Reference. , (2000).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> PIPETMAN P User's Guide. , (2012).</li></ol>

ليس لدي ما يكشف.

تقنية العقيم ويشير إلى مجموعة من الإجراءات الروتينية القيام به لمنع الحلول العقيمة والثقافات من أن تصبح ملوثة غير مرغوب فيه من قبل الكائنات الحية الدقيقة في المختبر. هذه التقنيات ضرورية لإجراء التجارب التي تتطلب الخلايا المتنامية. على الرغم من عدم إعداد العمل الذي هو عقيم تماما أن يتحقق، والإجراءات مثل تعقيم السطوح مختبر، وخلق مجال معقم باستخدام موقد بنسن، والحد من التعرض للثقافات لم يسبق لهم اللعب ووسائل الإعلام في الهواء، وتعقيم المواد مثل الأنابيب والزجاجات والماصات الزجاجية، وتجنب الاتصال مع الأدوات المعقمة غير معقمة أسطح يقلل من احتمال تلوث الحلول والثقافات في تجربة. والهدف من ذلك هو لهذه الإجراءات الاحترازية لتصبح طبيعة ثانية، وهذا يأتي مع التدريب والممارسة بينما كان يعمل في المختبر. نقل وحدة التخزين مع حلول عقيمة والثقافات باستخدام أدوات مثل الماصات المصلية وهيئة التصنيع العسكريropipettors هي واحدة من العديد من أنواع تقنيات روتين عمله في أحد المختبرات. التطبيقات التجريبية المختلفة استدعاء لأدوات قادر على نقل متميزة، وأحجام دقيقة بعد دقيقة و،. وتستخدم ماصات المصلية في مختبرات علم الأحياء الدقيقة لإعداد مزارع الخلايا التي تتطلب استعدادات وسائل الإعلام التي تشمل وحدات التخزين ملليلتر، بينما micropipettors ضرورية لتجارب البيولوجيا الجزيئية التي تحتاج إلى كميات ميكروليتر فقط من الحلول. عندما يمارس أسلوب العقيم مع هذه الصكوك، والتقليل من التلوث أثناء عمليات النقل بغض النظر عن حجم كمية من السائل أو النوع من التجارب. على الرغم من عدم مناقشتها في هذا البروتوكول، واحد وسيلة أخرى تستخدم عادة لمنع التلوث هو العمل داخل غطاء محرك السيارة تدفق رقائقي (الشكل 10). هذه المعدات هو أمر حاسم لزراعة الأنسجة وللتجارب أجريت مع الكائنات الحية الدقيقة المصنفة BLS-2 أو أعلى. غطاء تدفق رقائقي يحتوي على (HEPA ذات الكفاءة العاليةالهواء جسيمات) مرشح أن يزيل الملوثات المحمولة جوا من الجو التي تصب في غطاء محرك السيارة في حين منع الهواء فلتر من غرفة من تتخلل مساحة العمل. من المذكرة، لا يمكن أن تستخدم موقد بنسن داخل الصفحي غطاء محرك السيارة، لأن تدفق الحرارة من لهب يعطل تدفق الهواء أساسي إلى وظيفة غطاء محرك السيارة. غالبا ما يكون من المفيد للتحقق من جودة الأسلوب الخاص بك العقيم عند تنفيذ التجارب العملية. للتأكد من الحلول وليس وسائل الإعلام ثقافة للتلوث خلال التلاعب التجريبية، وإعداد عنصر تحكم دائما سلبية. على سبيل المثال، إذا كان إعداد أنابيب من مرق لنمو الثقافات البكتيرية، لا تطعيم أنبوب واحد ترك وسائل الاعلام فقط العقيمة. احتضان والمتوسطة إلى جانب أنابيب تلقيح ثم تفقد السيطرة أنبوب uninoculated بحثا عن علامات على تلوث مثل تعكر من نمو الخلايا غير المرغوب فيها وعرض عن غير قصد في أنبوب. إذا كانت ملوثة أنبوب السيطرة، وأنبوب التجريبيةمن المرجح تكون ملوثة أيضا، وهذه التجربة لا بد من تكرارها. وينبغي القيام بهذه التدابير الاحترازية مع كل تجربة.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> LB حساء </td><td> Difco </td><td> 244620 </td><td> تتوفر أيضا وصفة في إشارة 6 </td></tr><tr><td colspan="4"> TE العازلة: </td></tr><tr><td> EDTA ثنائي الصوديوم ملح ثنائي الهيدرات </td><td> سيغما </td><td> E5134 </td><td></td></tr><tr><td> Trizma-حمض الهيدروكلوريك </td><td> سيغما </td><td> T-3253 </td><td></td></tr><tr><td> CiDecon </td><td> التطهير المختبرات، وشركة </td><td> 8504 </td><td> مطهر </td></tr><tr><td> الإيثانول </td><td> فيشر العلمية </td><td> A406 </td><td> لاستخدامها كعامل مطهر، وإعداد 70٪ (V / V) مع الماء المقطر </td></tr></tbody></table>

aseptic laboratory techniques: volume transfers with serological pipettes and micropipettors

الكائنات الحية الدقيقة في كل مكان - في الهواء والتربة، وجسم الإنسان وكذلك على الأسطح غير حية مثل المقاعد ومختبر لوحة مفاتيح الحاسوب. في كل مكان من الميكروبات يخلق امدادات وفيرة من الملوثات المحتملة في المختبر. لضمان نجاح التجربة، يجب أن يكون الحد الأدنى لعدد من الملوثات على الأسطح والمعدات والعمل. المشترك بين العديد من التجارب في علم الأحياء المجهرية من التقنيات التي تنطوي على قياس ونقل الثقافات التي تحتوي على الخلايا البكتيرية أو الجسيمات الفيروسية. للقيام بذلك من دون الاتصال غير معقمة أو الأسطح الملوثة وسائل الاعلام عقيمة يتطلب (1) إعداد مساحة عمل عقيم، (2) تحدد بدقة وقراءة بدقة الأدوات اللازمة لنقل العقيم من السوائل، و (3) معالجة بشكل صحيح من الصكوك والثقافات قوارير وزجاجات و أنابيب داخل حقل معقمة. تعلم هذه الإجراءات تدعو إلى تدريب وممارسة. في البداية، وينبغي اتخاذ إجراءات قد تكون بطيئة، مدروسة، والتي تسيطر عليها مع هدف يجري لتي العقيمechnique لتصبح طبيعة ثانية عند العمل على مقاعد البدلاء. هنا نقدم خطوات لقياس حجم استخدام ماصات المصلية وmicropipettors داخل حقل العقيمة التي أنشأتها ناسخ بنسن. أحجام تتراوح ما بين microliters (ميكرولتر) إلى ملليلتر (مل) اعتمادا على الأداة المستخدمة. نقل السوائل عادة تشمل حساء عقيم أو المحاليل الكيميائية، وكذلك الثقافات البكتيرية وأسهم فج. باتباع هذه الإجراءات، يجب أن يكون الطلاب قادرين على: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> العمل في مجال العقيمة التي أنشأتها لهب الموقد بنسن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام ماصات المصلية دون المساس عقم الصك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نضح السوائل مع ماصات المصلية، والقراءة على وجه التحديد كميات معايرة عن طريق محاذاة الغضروف المفصلي التي شكلها السائل إلى علامات التخرج على ماصة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الزجاجات والثقافة، وقوارير وأنابيب وقبعات كل منهما معقم خلال نقل السائل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التعرف على التطبيقات المختلفة لبيب المصلية البلاستيك مقابل زجاجettes. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قيود دقة الدولة للmicropipettors. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> على وجه التحديد وبدقة وضع وحدات التخزين على micropipettors. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> معرفة كيفية استخدام صحيح المحطة الأولى والثانية على micropipettor إلى نضح ونقل وحدات التخزين الصحيح. </li></ul>

Watch this Scientific Journal Video about Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors at JoVE.com

Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors

عند العمل في المختبر، لا بد من الحد من مصادر التلوث. تقنية العقيم يشير إلى الإجراءات التي تسمح لنقل الثقافات والكواشف مع تجنب الاتصال مع المنظمات غير معقمة السطوح. وتستخدم ماصات المصلية وmicropipettors لقياس كميات الدقيق دون المساس عقم الحلول المستخدمة في التجارب.

مختبر تقنيات العقيم: التحويلات الحجم مع الماصات المصلية وMicropipettors

Microorganisms are everywhere - in the air, soil, and human body as well as on inanimate surfaces like laboratory benches and computer keyboards. The ...

Research

JoVE Journal

Biology

Microbial Communities in Nature and Laboratory - Interview

المجتمعات الميكروبية في الطبيعة ومختبر -- مقابلة

Making Patch-pipettes and Sharp Electrodes with a Programmable Puller

جعل التصحيح ، وماصات أقطاب شارب مع بولير برمجة

Glass microelectrodes (also called pipettes) have been a workhorse of electrophysiology for decades.  Today, such pipettes are made from glass capillaries ...

Pressure-polishing Pipettes for Improved Patch-clamp Recording

الضغط تلميع الماصات لتسجيل باتش تحسين المشبك

Pressure-polishing is a method for shaping glass pipettes for patch-clamp recording.  We first developed this method for fabricating pipettes suitable for ...

Modeling Biological Membranes with Circuit Boards and Measuring Electrical Signals in Axons: Student Laboratory Exercises

النمذجة الأغشية البيولوجية مع لوحات الدوائر الكهربائية وقياس الاشارات في محاور عصبية : تمارين مختبر طالبة

This is a demonstration of how electrical models can be used to characterize biological membranes. This exercise also introduces biophysical terminology ...

Aseptic Laboratory Techniques: Plating Methods

مختبر تقنيات العقيم: طرق تصفيح

Microorganisms are present on all inanimate surfaces creating ubiquitous sources of possible contamination in the laboratory. Experimental success relies ...

Reconstruction of 3-Dimensional Histology Volume and its Application to Study Mouse Mammary Glands

إعادة بناء 3 الأبعاد حجم الأنسجة وتطبيقاتها لدراسة ماوس الغدد الثديية

Histology volume reconstruction facilitates the study of 3D shape and volume change of an organ at the level of macrostructures made up of cells. It can ...

Techniques for the Analysis of Extracellular Vesicles Using Flow Cytometry

تقنيات لتحليل خارج الخلية الحويصلات عن طريق التدفق الخلوي

Extracellular Vesicles (EVs) are small, membrane-derived vesicles found in bodily fluids that are highly involved in cell-cell communication and help ...

Measuring Pressure Volume Loops in the Mouse

قياس حجم حلقات الضغط في الماوس

Understanding the causes and progression of heart disease presents a significant challenge to the biomedical community. The genetic flexibility of the ...

Techniques to Induce and Quantify Cellular Senescence

تقنيات للحث وتحديد الخلوي الشيخوخة

In response to cellular stress or damage, proliferating cells can induce a specific program that initiates a state of long-term cell-cycle arrest, termed ...

Volume Segmentation and Analysis of Biological Materials Using SuRVoS (Super-region Volume Segmentation) Workbench

Volume Segmentation and Analysis of Biological Materials Using SuRVoS Super-region Volume Segmentation Workbench

حجم تجزئة وتحليل المواد البيولوجية باستخدام منضدة سورفوس (منطقة عظمى تجزئة وحدة التخزين)

Segmentation is the process of isolating specific regions or objects within an imaged volume, so that further study can be undertaken on these areas of ...