Name: aseptic laboratory techniques: volume transfers with serological pipettes and micropipettors
Uploaded: 2012-05-31T12:00:00
Duration: 11 min 43 s
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数字のサンプルの培養を設定するためのイラストを準備し、カリフォルニア大学ロサンゼルス校（UCLA）クリスReddiするためにはIROCデザインでコリ·サンダース氏に感謝します。このプロジェクトの資金は、HHMI（ハワードグラント番号52006944）によって提供されていました。

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私は、開示することは何もありません。

無菌実験室での不要な微生物によって汚染されたなってから滅菌溶液と文化を防止するために行わルーチンプロシージャのセットを指します。このような技術は成長した細胞を必要とする実験のために不可欠です。完全に無菌である職場環境を実現することはできませんが、このように、研究室の表面を消毒ブンゼンバーナーを使用して滅菌フィールドを作成して、空気に上限なしの文化やメディアの露出を制限するなど、ボトル、チューブ、ガラスピペットなどの材料を殺菌するなどの手続き、と非滅菌表面と滅菌の楽器との接触を避けることが実験でソリューションや文化を汚染の可能性を減らすことができます。目標は、第二の天性になるため、これらの予防措置のためのものです。実験室での作業中に、これはトレーニングや練習が付属しています。 このような血清ピペットやマイクなどの楽器を使用して滅菌溶液と文化を持つボリュームの転送ropipettorsは、実験室で行わルーチンのテクニックの多くの種類の一つです。異なる実験アプリケーションは別個の、まだ正確で精度の高いボリュームを転送できる機器用に呼び出します。 micropipettorsは、ソリューションの唯一のマイクロリットル量を必要とする分子生物学的な実験に不可欠である一方血清ピペットは、ミリリットルボリュームを含むメディアの準備を必要とする細胞培養を準備する微生物学研究室で使用されています。無菌技術はこ​​れらの機器を用いて実施される場合は、汚染が液体または実験の種類の量にかかわらず、ボリューム転送中に最小化されます。 このプロトコルで説明されていませんが、一般的に汚染を防止するために使用されるもう一つの手段は、層流フード（ 図10）内で動作するようです。この装置は、組織培養用とBLS-2以上に分類される微生物で行った実験のために重要です。層流フードでは、HEPA（高効率が含まれていますワークスペースに浸透してから部屋からフィルタリングされていない空気を防止しながら、フードに流れる空気から空気中の汚染物質を除去する微粒子空気）フィルター。火炎からの熱は、フードの機能に不可欠な空気の流れを中断させるため注目すべきは、ブンゼンバーナーは、層流フード内では使用できません。 それは、実験を実行するときは、無菌の品質をチェックすると便利です。ソリューションと培地は実験操作中に汚染されないことを確認するには、常にネガティブコントロールを用意します 。たとえば、細菌培養の成長のための培養液のチューブを準備する場合は、1つのチューブだけで滅菌メディアを残して接種していません。そのような意図せずにチューブに導入し、不要な細胞の増殖から濁りなどの汚染の兆候が未接種の対照チューブを点検して接種したチューブと一緒に培地をインキュベートします。制御管が汚染されている場合、実験的な管の可能性が高いだけでなく、汚染され、実験が繰り返されなければなりません。これらの予防措置は、すべての実験を行う必要があります。

<table border="1"><tbody><tr><td> 試薬の名前 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td><td> コメント </td></tr><tr><td> LBブロス</td><td>ディフコ</td><td> 244620 </td><td>基準6でまた利用できるレシピ</td></tr><tr><td colspan="4"> TEバッファー： </td></tr><tr><td> EDTA二ナトリウム塩二水和物</td><td>シグマ</td><td> E5134 </td><td></td></tr><tr><td> Trizma-HClを</td><td>シグマ</td><td> T-3253 </td><td></td></tr><tr><td> CiDecon </td><td>ディーコン·ラボラトリーズ社</td><td> 8504 </td><td>消毒剤</td></tr><tr><td>エタノール</td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> A406 </td><td>消毒剤として使用するために、蒸留水で70％（v / v）を準備する</td></tr></tbody></table>

aseptic laboratory techniques: volume transfers with serological pipettes and micropipettors

微生物があふれている - 空気、土壌、人間の体内で同様に実験室でのベンチやコンピュータのキーボードのような無生物表面上に。微生物の普遍性は、実験室における潜在的な汚染物質の大量の供給を作成します。実験的な成功を確保するために、機器や作業表面上の汚染物質の数は最小限に抑える必要があります。微生物学の多くの実験の間で一般的な細菌細胞またはウイルス粒子を含む培養物の測定と移転技術である。 （1）非滅菌表面に接触または無菌のメディアが必要を汚染することなくこれを行うには無菌スペース、（2）正確に設定し、正確に液体の無菌転送のためのインストゥルメントを読み込み、（3）適切に操作する楽器、文化フラスコ、ボトルと準備滅菌フィールド内チューブ。これらの手順を学ぶことは訓練と実践を求めている。最初に、アクションは、低速意図的、および無菌tに対してれることを目標に制御する必要がありますベンチで作業するとき第二の天性になってechnique。ここでは、ブンゼンバーナーで作成された無菌のフィールド内の血清ピペットとmicropipettorsを使用してボリュームを測定するための手順を紹介します。ボリュームは、マイクロリットル（μL）から使用する機器に応じて、ミリリットル（ml）の範囲です。一般的に転送され、液体は、無菌培養液または薬液など細菌培養とファージ株が含まれています。これらの手順を実行することで、学生のことができるようになります。 <ul><li>ブンゼンバーナーの炎によって作成された無菌のフィールド内で動作します。 </li><li>機器の無菌性を損なうことなく、血清学的ピペットを使用しています。 </li><li>正確にピペットで卒業マークに液体によって形成されるメニスカスを合わせて校正されたボリュームを読んで、血清ピペットで液体を吸引除去する。 </li><li>液体の転送中に培養瓶、フラスコ、試験管、それぞれのキャップは無菌に保つ。 </li><li>プラスチック製の対ガラス血清PIPの異なるアプリケーションを識別ettes。 </li><li> micropipettorsの状態の精度には限界が。 </li><li>正確にかつ正確にmicropipettors上のボリュームを設定します。 </li><li>適切に正しいボリュームを吸引し、転送するピペットに1番目と2番目のストップを使用する方法を知っています。 </li></ul>

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Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors

実験室で作業している場合は、汚染の発生源を最小限に抑えることが不可欠です。無菌非無菌の表面との接触を避けながら、文化や試薬の転送を許可する手順を指します。血清ピペットとmicropipettorsは、実験に使用される溶液の無菌性を損なうことなく、正確なボリュームを測定するために使用されます。

無菌室のテクニック：血清ピペットMicropipettorsのボリュームを転送

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Research

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Biology

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