Name: aseptic laboratory techniques: volume transfers with serological pipettes and micropipettors
Uploaded: 2012-05-31T12:00:00
Duration: 11 min 43 s
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인물에 대한 샘플 문화를 설정하는 그림을 준비하고 UCLA의 크리스 Reddi에 대한 Iroc 설계에서 Cori 샌더스에 대한 특별 감사합니다. 이 프로젝트에 대한 자금 지원은 HHMI (HHMI 그랜트 번호 52006944)에 의해 제공되었다.

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나는 공개 할게 없다.

무균 기술은 실험실에서 원치 않는 미생물에 의해 오염되는 것을 멸균 솔루션과 문화를 막을 일상적인 절차의 집합을 말합니다. 이러한 기술은 성장 세포를 필요로 실험을위한 필수적입니다. 완전 멸균은 작업 설정이 달성될 수는 없지만, 같은 실험실 표면을 소독 분젠 버너를 사용하여 멸균 필드를 만들고, 공기에 uncapped 문화와 미디어의 노출을 제한, 그러한 병, 튜브 및 유리 pipettes과 같은 물질을 살균 등의 절차, 및 비 멸균 표면 살균 계기의 접촉을 피하는 것이 실험에서 솔루션과 문화를 오염 가능성을 줄여줍니다. 목표는 제 2의 천성이 될하려면 다음 예방 절차를 위해이다; 연구실에 근무하는 동안 이것은 훈련과 연습이 제공됩니다. 이러한 serological pipettes와 마이크 등의 악기를 사용하여 멸균 솔루션과 문화가있는 볼륨 전송ropipettors는 실험실에서 수행 루틴 기법의 여러 유형 중 하나입니다. 다른 실험적인 응용 프로그램은 별개의, 아직 정밀하고 정확한 볼륨을 전송할 수있는기구 부릅니다. micropipettors 솔루션만을 microliter 양의 필요한 분자 생물학 실험에 필수적인 반면 Serological pipettes은 밀리리터 볼륨을 포함한 미디어의 준비를 필요로하는 세포 문화를 준비하는 미생물학 실험실에 사용됩니다. 무균 기술은 이러한 악기와 함께 연습을하면 오염은 액체 또는 실험 형태의 금액에 관계없이 볼륨 전송하는 동안 최소화된다. 이 프로토콜에서 설명하지 않지만, 일반적으로 오염을 방지하기 위해 사용하는 다른 한 방법은 층류 후드 (그림 10) 내에서 작동하는 것입니다. 이 장비는 조직 문화와 BLS-2 이상으로 분류된 미생물과 함께 수행한 실험에 중요합니다. 층류 후드는 HEPA (고효율이 포함되어 있습니다작업 영역을 permeating에서 회의실에서 필터없는 공기를 방지하면서 후드에 흐르는 공기에서 공기로 운반되는 오염 물질을 제거 미립자 공기) 필터. 화염의 열기가 후드의 기능에 필수적인 공기 흐름을 방해하기 때문에 참고, 분젠 버너는 층류 후드 안에서 사용할 수 없습니다. 그것은 실험을 수행할 때 무균 기법의 품질을 확인하는 것이 도움이 될 것입니다. 솔루션을 확인하려면 문화 미디어 실험 조작 중에 오염된받을 수 없어 항상 부정적인 컨트롤을 준비합니다. 예를 들어, 세균성 문화의 성장 국물의 튜브를 준비한다면, 한 튜브만을 무균 미디어를두고 접종하지 않습니다. 같은 실수 튜브에 소개 원치 않는 세포의 성장에서 탁도 등 오염의 징후에 대해 다음 검사 uninoculated 제어 튜브 주사 튜브와 함께 매체를 품어. 제어 튜브가 오염되면 실험 튜브들 가능성뿐만 아니라 오염되며, 실험을 반복해야한다. 이러한 예방책은 모든 실험을 다해야합니다.

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> LB의 국물 </td><td> Difco </td><td> 244,620 </td><td> 참조 6도 사용할 레시피 </td></tr><tr><td colspan="4"> TE 버퍼 : </td></tr><tr><td> EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) 나트륨 소금의 이수화물 </td><td> 시그마 </td><td> E5134 </td><td></td></tr><tr><td> Trizma-HCL </td><td> 시그마 </td><td> T-3253 </td><td></td></tr><tr><td> CiDecon </td><td> 방사능 오염을 제거 연구소 주식 회사 </td><td> 8504 </td><td> 소독제 </td></tr><tr><td> 에탄올 </td><td> 피셔 과학 </td><td> A406 </td><td> 살균제로 사용 들면, 증류수 70 % (V / V)를 준비 </td></tr></tbody></table>

aseptic laboratory techniques: volume transfers with serological pipettes and micropipettors

미생물은 어디 에나있다 - 공기, 토양, 그리고 인체뿐 아니라 실험실 벤치 및 컴퓨터 키보드와 같은 생명이없는 표면. 미생물의 편재는 실험실의 잠재적인 오염 물질의 풍부한 공급을 만듭니다. 실험의 성공을 보장하기 위해, 장비, 작업 표면에 오염 물질의 수를 최소화해야합니다. 미생물학의 많은 실험 중에서 공통는 세균 세포 또는 바이러스 입자를 포함하는 문화의 측정 및 전송과 관련된 기술입니다. 멸균 작업 공간을 준비 멸균 매체가 필요합니다 (1), (2) 정확하게 설정하고 정확하게 액체의 무균 전송을 위해 악기를 읽고, 그리고 (3) 적절하게, 문화의 flasks, 병 악기를 조작을하지 않는 무균 표면에 연락하거나 훼손없이 이렇게하고하려면 멸균 입력란 내의 튜브. 이 절차를 배우는 것은 훈련과 연습을 요구하고있다. 처음에는 동작이 느리고 신중한 및 무균 t 당분간 목표로 제어되어야벤치에서 작업할 때 제 2의 천성이 될 echnique. 여기 분젠 버너에 의해 만들어 멸균 분야 내에서 serological pipettes 및 micropipettors를 사용하여 볼륨을 측정하는 단계를 소개합니다. 볼륨은 microliters (μl)에서 사용하는 악기에 따라 밀리리터 (ML)로 다양합니다. 일반적으로 양도 액체는 멸균 국물이나 화학 솔루션뿐만 아니라 세균성 문화와 파지 주식을 포함합니다. 이 절차를 수행하여, 학생에게 수 있어야한다 : <ul><li> 분젠 버너 불꽃에서 만든 멸균 분야 내에서 작동합니다. </li><li> 악기 불임을 손상시키지 않고 serological pipettes를 사용하십시오. </li><li> serological pipettes로 액체를 대기음, 정확하게 피펫에 졸업 자국으로 액체에 의해 형성된 초승달 모양을 정렬하여 보정 볼륨을 읽고. </li><li> 문화 병, flasks, 튜브 및 액체 전송 중에 멸균 각각의 모자 보관하십시오. </li><li> 플라스틱 대 유리 serological의 핍에 대해 서로 다른 애플 리케이션을 식별ettes. </li><li> micropipettors에 대한 국가의 정확성 제한. </li><li> 정확하고 정확하게 micropipettors에 볼륨을 설정합니다. </li><li> 제대로 올바른 볼륨을 대기음하고 전송하는 micropipettor에서 첫 번째와 두 번째 정거장을 사용하는 방법을 알아요. </li></ul>

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Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors

연구실에 근무하면 오염의 소스를 최소화하기 위해 필수적입니다. 무균 기법이 아닌 멸균 표면과 접촉을 피하면서 문화와 시약의 양도를 허용 절차를 말합니다. Serological pipettes 및 micropipettors는 실험에 사용되는 솔루션의 불임을 손상시키지 않고 정확한 볼륨을 측정하는 데 사용됩니다.

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