Name: aseptic laboratory techniques: volume transfers with serological pipettes and micropipettors
Uploaded: 2012-05-31T12:00:00
Duration: 11 min 43 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors at JoVE.com

Rakamlar için örnek kültürleri kurmak için resimler hazırlamak ve UCLA Kris Reddi için IROC Tasarımları Cori Sanders özel teşekkürler. Bu proje için finansman HHMI (HHMI Hibe No 52.006.944) tarafından sağlandı.

<ol>
	<li>Barker, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> At the Bench: A Laboratory Navigator. , (1998).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biosafety in Microbiological And Biomedical Laboratories (BMBL). , (2009).</li><li>Bykowski, T., Stevenson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+Technique.">Aseptic Technique.</a> Current Protocols in Microbiology. Appendix 4, Appendix 4D (2008).</li><li>Cot&#233;, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+Technique+for+Cell+Culture.">Aseptic Technique for Cell Culture.</a> Current Protocols in Cell Biology. Chapter 1, Unit 1.3 (2001).</li><li>Grimes, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+basic+laboratory+manual+for+the+small-scale+production+and+testing+of+I-2+Newcastle+disease+vaccine.">A basic laboratory manual for the small-scale production and testing of I-2 Newcastle disease vaccine.</a> RAP Publication. AC802/E, 12-13 (2002).</li><li>Guzman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pipetting:+A+Practical+Guide.">Pipetting: A Practical Guide.</a> The American Biology Teacher. 63 (2), 128-131 (2001).</li><li>Jordan, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> RESEARCH: National Genomics Research Initiative Phage Resource Laboratory Manual. , (2008).</li><li>Sambrook, J., Russell, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular Cloning - A Laboratory Manual. , 978-087969576 (2001).</li><li>Seidman, L. A., Moore, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Basic Laboratory Methods for Biotechnology: Textbook and Laboratory Reference. , (2000).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> PIPETMAN P User's Guide. , (2012).</li></ol>

Ben ifşa hiçbir şey yok.

Aseptik teknikle laboratuvar istenmeyen mikroorganizmalar tarafından kontamine olmasını steril çözümleri ve kültürleri önlemek için yapılan rutin bir dizi ifade eder. Bu tür teknikler büyüyen hücreleri gerektiren deneyler için çok önemlidir. Tamamen steril bir iş ortamında elde edilemez olsa da, bu, laboratuvar yüzeylerin dezenfekte Bir Bunsen beki kullanarak steril bir alan yaratarak, hava kapağını açıp kültür ve medya maruz sınırlandırılması, bu şişeler, tüpler ve cam pipetler gibi malzemelerin sterilizasyon gibi prosedürleri, ve steril olmayan yüzeyleri steril aletlerin temastan kaçınarak bir deneyde çözümleri ve kültür kirlenmesi olasılığı azaltır. Amaç ikinci doğa haline aşağıdaki önlem prosedürleri için; bir laboratuarda çalışırken, bu eğitim ve uygulama ile birlikte geliyor. Gibi serolojik pipet ve mikrofon gibi aletler kullanılarak steril çözümleri ve kültürler ile Cilt transferleriropipettors bir laboratuvarda yapılan rutin teknikler birçok türleri vardır. Farklı deneysel uygulamalar farklı, henüz kesin ve doğru cilt aktarabilen araçlar için arayın. Micropipettors çözümleri sadece mikrolitre miktarda ihtiyaç moleküler biyoloji deneyleri için gerekli olan süre Serolojik pipet, mililitre birimleri kapsayan medya hazırlıklar gerektiren hücre kültürleri hazırlamak için mikrobiyoloji laboratuvarlarında kullanılmaktadır. Aseptik teknik bu aletle uygulanan zaman, kirlenme sıvı veya deneme türü ve miktarı ne olursa olsun ses aktarımı sırasında en aza indirilmiştir. Bu protokol ele olmasa da, sık kirlenmeyi önlemek için kullanılan bir başka yollarla bir laminar akım kapağı (Şekil 10) içinde çalışmaktır. Bu cihaz, doku kültürü ve BLS-2 veya daha yüksek olarak sınıflandırılan mikroorganizmalar ile yapılan deneyler için önemlidir. A laminar akım kaput bir HEPA (yüksek verimlilik içerençalışma permeating gelen odasından filtresiz hava önlerken kaputun içine akan hava hava kirleticileri kaldırır partikül hava) filtresi. Alevden ısı kaput işlevselliği için gerekli hava akımını bozar, çünkü not, bir Bunsen beki laminar flow kaput içinde kullanılamaz. Bu deneyler sırasında aseptik teknik kalitesini kontrol etmek için genellikle yararlıdır. Çözümler teyit etmek ve kültür ortamı, deneysel manipülasyonlar sırasında kontamine alamadım, her zaman negatif kontrol hazırlamak. Örneğin, bakteriyel kültür büyümesi için çorbasının tüpler hazırlanması durumunda, tek tüp, sadece steril ortam terk aşılamak değildir. Böyle istemeden tüp içine istenmeyen hücrelerin büyüme bulanıklık gibi kirlilik belirtileri daha sonra kontrol aşılanmamış kontrol tüpü inoküle tüpü boyunca orta inkübe edin. Kontrol tüpü kirli ise, deney tüpübüyük olasılıkla da kontamine ve deneyi tekrarladı gerekecektir. Bu önlemler her deneyde ile yapılmalıdır.

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> LB Broth </td><td> Difco </td><td> 244620 </td><td> Referans 6 da mevcut reçete </td></tr><tr><td colspan="4"> TE Tamponu: </td></tr><tr><td> EDTA disodyum tuzu dihidrat </td><td> Sigma </td><td> E5134 </td><td></td></tr><tr><td> Trizma-HCl </td><td> Sigma </td><td> T-3253 </td><td></td></tr><tr><td> CiDecon </td><td> Temizlenme Laboratories, Inc </td><td> 8504 </td><td> Dezenfektan </td></tr><tr><td> Etanol </td><td> Fisher Scientific </td><td> A406 </td><td> Dezenfektan olarak kullanımı için, damıtılmış su ile% 70 (v / v) hazırlanması </td></tr></tbody></table>

aseptic laboratory techniques: volume transfers with serological pipettes and micropipettors

Mikroorganizmalar her yerde vardır - hava, toprak ve insan vücudunda yanı sıra laboratuar tezgahları ve bilgisayar klavyeleri gibi cansız yüzeyler üzerinde. Mikrop ubiquity bir laboratuvar potansiyel kirletici maddelerin bir bol kaynağı oluşturur. Deneysel başarı sağlamak için, ekipman ve iş yüzeyler bulaşanların sayısı en aza indirilmelidir. Mikrobiyoloji birçok deneyler arasında yaygın bakteri hücreleri veya viral partikülleri içeren kültürlerin ölçüm ve transferi ile ilgili teknikleri vardır. Steril bir çalışma alanı hazırlarken steril ortam gerektirir (1), (2) hassas ayar ve doğru sıvıların aseptik transferi için araçlar okuma, ve (3) düzgün, kültür şişeleri, şişe aletleri manipüle steril olmayan yüzeylere temas veya kontamine olmadan bunu yapmak ve steril bir alan içinde tüpler. Bu işlemler Öğrenme eğitim ve uygulama gerektirir. İlk başta, eylemler, yavaş, bilinçli ve aseptik t olma hedefi ile kontrol edilmelidirtezgah üzerinde çalışırken ikinci doğa haline Tekniğine Dayalı Görüşme. Burada bir Bunsen beki tarafından oluşturulan steril bir alan içinde serolojik pipet ve micropipettors kullanarak hacimleri ölçmek için adımları sunuyoruz. Hacimler mikrolitre (ul) ile kullanılan alet bağlı mililitre (ml) arasında değişir. Sık transfer Sıvılar steril suyu veya kimyasal çözümler yanı sıra bakteri kültürleri ve faj stokları bulunmaktadır. Bu işlemleri takiben, öğrenciler gerekir: <ul><li> Bunsen beki alevi tarafından oluşturulan steril alan içinde çalışır. </li><li> Enstrüman sterilite ödün vermeden serolojik pipet kullanın. </li><li> Serolojik pipet ile sıvı aspire, tam pipet üzerinde mezuniyet işaretleri sıvı oluşan menisküs hizalayarak kalibre hacimleri okuma. </li><li> Kültür şişeler, mataralar, tüpler ve sıvı aktarımı sırasında steril kendi kapakları tutun. </li><li> Plastik karşı cam serolojik pip için farklı uygulamalar tespitmak. </li><li> Micropipettors Devlet doğruluğu sınırlamalar. </li><li> Hassas ve doğru micropipettors birimler ayarlayın. </li><li> Doğru düzgün hacimleri aspire ve aktarmak için bir micropipettor üzerindeki birinci ve ikinci durağı nasıl kullanacağımı biliyorum. </li></ul>

Watch this Scientific Journal Video about Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors at JoVE.com

Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors

Bir laboratuarda çalışırken, bulaşma kaynakları en aza indirmek için şarttır. Aseptik teknik Steril olmayan yüzeyler ile temas kaçınarak kültürler ve reaktifler transferi izin prosedürleri ifade eder. Serolojik pipet ile micropipettors Deneylerde kullanılan çözeltilerin sterilite bozmadan hassas cilt ölçmek için kullanılır.

Aseptik Laboratuvar Teknikleri: Serolojik Pipetler ve Micropipettors ile Cilt Transferler

Microorganisms are everywhere - in the air, soil, and human body as well as on inanimate surfaces like laboratory benches and computer keyboards. The ...

Research

JoVE Journal

Biology

Microbial Communities in Nature and Laboratory - Interview

Doğa ve Laboratuvar Mikrobiyal Toplulukları - Röportaj

Making Patch-pipettes and Sharp Electrodes with a Programmable Puller

Programlanabilir Çektirme Patch-pipetler ve Sharp Elektrotlar

Glass microelectrodes (also called pipettes) have been a workhorse of electrophysiology for decades.  Today, such pipettes are made from glass capillaries ...

Pressure-polishing Pipettes for Improved Patch-clamp Recording

Geliştirilmiş Patch-kelepçe kayıt için Basınç-parlatma Pipetler

Pressure-polishing is a method for shaping glass pipettes for patch-clamp recording.  We first developed this method for fabricating pipettes suitable for ...

Modeling Biological Membranes with Circuit Boards and Measuring Electrical Signals in Axons: Student Laboratory Exercises

Devre Biyolojik Membranlar Modelleme ve Aksonlar Elektrik Sinyalleri Ölçme: Öğrenci Laboratuvar Egzersizler

This is a demonstration of how electrical models can be used to characterize biological membranes. This exercise also introduces biophysical terminology ...

Aseptic Laboratory Techniques: Plating Methods

Aseptik Laboratuvar Teknikleri: Kaplama Yöntemleri

Microorganisms are present on all inanimate surfaces creating ubiquitous sources of possible contamination in the laboratory. Experimental success relies ...

Reconstruction of 3-Dimensional Histology Volume and its Application to Study Mouse Mammary Glands

3-Boyutlu Histoloji hacmi ve Fare meme bezlerinin Eğitim için onun Uygulama İmar

Histology volume reconstruction facilitates the study of 3D shape and volume change of an organ at the level of macrostructures made up of cells. It can ...

Techniques for the Analysis of Extracellular Vesicles Using Flow Cytometry

Akım Sitometri Kullanımı Ekstrasellüler Veziküller Analizi Teknikleri

Extracellular Vesicles (EVs) are small, membrane-derived vesicles found in bodily fluids that are highly involved in cell-cell communication and help ...

Measuring Pressure Volume Loops in the Mouse

Fare Basınç Hacim Döngüler Ölçme

Understanding the causes and progression of heart disease presents a significant challenge to the biomedical community. The genetic flexibility of the ...

Techniques to Induce and Quantify Cellular Senescence

Teknikler İndüklemek ve Ölçmek Hücresel Yaşlılık etmek

In response to cellular stress or damage, proliferating cells can induce a specific program that initiates a state of long-term cell-cycle arrest, termed ...

Volume Segmentation and Analysis of Biological Materials Using SuRVoS (Super-region Volume Segmentation) Workbench

Volume Segmentation and Analysis of Biological Materials Using SuRVoS Super-region Volume Segmentation Workbench

Birim segmentasyon ve SuRVoS (süper bölge birim segmentasyon) tezgah kullanarak biyolojik malzemelerin analizi

Segmentation is the process of isolating specific regions or objects within an imaged volume, so that further study can be undertaken on these areas of ...