Name: a protocol for collecting and staining hemocytes from the yellow fever mosquito aedes aegypti
Uploaded: 2011-05-16T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Protocol for Collecting and Staining Hemocytes from the Yellow Fever Mosquito Aedes aegypti at JoVE.com

والكتاب أود أن أشكر جون بيترسون وفري بن لتربية البعوض. ونحن نشكر أيضا كريستين ديفيس وراديس غاري للمساعدة في micrographs كرية دموية. وقد تم تمويل هذا البحث من جامعة ريتشموند في الآداب والعلوم زمالة الصيف لAA القيوم وأعضاء هيئة التدريس ألف منحة لTelang.

1. التحضير مسبقا لجمع كرية دموية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يعد حل مخفف الدملمف التي تتكون من متوسطة شنايدر 60 ٪ ، 10 ٪ مصل بقري جنيني (FBS) ، و 30 ٪ العازلة سيترات (تخثر ؛ 98 مم هيدروكسيد الصوديوم ، 186 مم كلوريد الصوديوم ، و 1.7 ملي EDTA ، 41 حمض ملي الليمون ، و...

<ol>
	<li>Enayati, A., Hemingway, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malaria+management:+past,+present,+and+future.">Malaria management: past, present, and future.</a> Annu. Rev. Entomol. 55, 569-569 (2010).</li><li>Medlock, J., Luz, P. M., Struchiner, C. J., Galvani, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+transgenic+mosquitoes+on+dengue+virulence+to+humans+and+mosquitoes.">The impact of transgenic mosquitoes on dengue virulence to humans and mosquitoes.</a> The American Naturalist. 174, 565-565 (2009).</li><li>Baton, L. A., Garver, L., Xi, Z., Dimopoulos, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+genomics+studies+on+the+innate+immunity+of+disease+vectors.">Functional genomics studies on the innate immunity of disease vectors.</a> Insect Sci. 15, 15-15 (2008).</li><li>Thomas, R. E., Wu, W. K., Verleye, D., Rai, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Midgut+basal+lamina+thickness+and+dengue-1+virus+dissemination+rates+in+laboratory+strains+of+Aedes+albopictus+(Diptera:+Culicidae).">Midgut basal lamina thickness and dengue-1 virus dissemination rates in laboratory strains of Aedes albopictus (Diptera: Culicidae).</a> J. Med. Entomol. 30, 326-326 (1993).</li><li>Bartholomay, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Profiling+infection+responses+in+the+haemocytes+of+the+mosquito,+Aedes+aegypti.">Profiling infection responses in the haemocytes of the mosquito, Aedes aegypti.</a> Insect Mol. Biol. 16, 761-761 (2007).</li><li>Strand, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+insect+cellular+immune+response.">The insect cellular immune response.</a> Insect Sci. 15, 1-1 (2008).</li><li>Hillyer, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-associated+mortality+in+immune+challenged+mosquitoes+(Aedes+aegypti)+correlates+with+a+decrease+in+haemocyte+numbers.">Age-associated mortality in immune challenged mosquitoes (Aedes aegypti) correlates with a decrease in haemocyte numbers.</a> Cell. Microbiol. 7, 39-39 (2005).</li><li>Chen, C. C., Laurence, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+study+on+humoral+encapsulation+of+microfilariae:+establishment+of+technique+and+description+of+reaction.">In vitro study on humoral encapsulation of microfilariae: establishment of technique and description of reaction.</a> International Journal for Parasitology. 17, 781-781 (1987).</li><li>Beerntsen, B. T., Christensen, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dirofilaria+immitis:+effects+on+hemolymph+polypeptide+synthesis+in+Aedes+aegypti+during+melanotic+encapsulation+reactions+against+Microfilariae.">Dirofilaria immitis: effects on hemolymph polypeptide synthesis in Aedes aegypti during melanotic encapsulation reactions against Microfilariae.</a> Exp. Parasitol. 71, 406-406 (1990).</li><li>Hillyer, J. F., Schmidt, S. L., Christensen, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+antibacterial+innate+immune+response+by+the+mosquito+Aedes+aegypti+is+mediated+by+hemocytes+and+independent+of+Gram+type+and+pathogenicity.">The antibacterial innate immune response by the mosquito Aedes aegypti is mediated by hemocytes and independent of Gram type and pathogenicity.</a> Microb. Infect. 6, 448-448 (2004).</li><li>Castillo, J. C., Robertson, A. E., Strand, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+hemocytes+from+the+mosquitoes+Anopheles+gambiae+and+Aedes+aegypti.">Characterization of hemocytes from the mosquitoes Anopheles gambiae and Aedes aegypti.</a> Insect Biochem. Mol. Biol. 36, 891-891 (2006).</li></ol>

وصف طريقة جمع كرية دموية هنا هو معدلة من أساليب المنشورة سابقا ويسمح احد لعزل الاستعدادات نظيف hemocytes من البعوض الزاعجة مع عدد أقل من الخطوات. في حين تكمن مصلحتنا ولا سيما في وصف السكان كرية دموية في البعوض الزاعجة ، ونحن نعتقد أنه يمكن تطبيق هذه التقنية لمجم?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> اسم كاشف </th><th> شركة </th><th> فهرس العدد </th><th> تعليقات (اختياري) </th></tr><tr><td> شنايدر متوسطة </td><td> سيغما الدريخ </td><td> S0146 </td><td></td></tr><tr><td> مصل بقري جنيني </td><td> سيغما الدريخ </td><td> F0643 </td><td></td></tr><tr><td> Hema3 عدة وصمة عار </td><td> الصياد </td><td> 123-869 </td><td></td></tr><tr><td> الزجاج الإبر (البورسليكات مع خيوط) </td><td> سوتر الصك </td><td> BF100 - 78-10 </td><td> 1.0mm 0.78mm OD ومعرف </td></tr><tr><td> إبرة مجتذب </td><td> سوتر الآلات </td><td> نموذج P - 87 </td><td></td></tr><tr><td> MicroInjector </td><td> Tritech بحوث </td><td> MINJ - PD </td><td></td></tr><tr><td> حامل إبرة </td><td> Tritech بحوث </td><td> MINJ - 4 </td><td></td></tr></tbody></table>

a protocol for collecting and staining hemocytes from the yellow fever mosquito aedes aegypti

البعوض الناقل لعدد من العوامل الممرضة المسببة للأمراض مثل فيروس الحمى الصفراء والملاريا الطفيليات والديدان الفيلاريا. مختبرات يحققون مكافحة الممرض مكونات الجهاز المناعي في الأنواع الفطرية ناقلات الأمراض على أمل توليد البعوض المعدلة وراثيا التي يتم صهر لمسببات الأمراض مثل 1 و 2. نظام المناعة الفطري للبعوض وتتألف من عدة خطوط للدفاع 3. مسببات الأمراض التي تدير هربا من الحاجز الذي فرضته البعوض ظهارة مبطنة المعي المتوسط ​​4 أدخل الدملمف واللقاء hemocytes المتداولة ، والمكونات الخلوية الهامة التي تغلف ومسببات الأمراض بابتلاع 5 ، 6. الباحثين لم يجدوا دليلا على الأنسجة المكونة للدم في البعوض والأدلة الحالية تشير إلى أن يتم إصلاح عدد من hemocytes في ظهور الكبار والأرقام قد تراجع فعلا مثل البعوض الأعمار 7. القدرة على جمع بشكل صحيح وتحديد hemocytes من الحشرات الهامة طبيا هو خطوة أساسية للدراسات في المناعة الخلوية. ومع ذلك ، فإن صغر حجم البعوض ومحدودية حجم الدملمف تشكل تحديا لجمع الخلايا المناعية. طريقتين التي أنشئت لجمع hemocytes تشمل طرد البعوض الدملمف من 8 قطع خرطوم ، والتشريد وحدة التخزين (التروية) ، حيث يتم حقن المياه المالحة في المنطقة necklike الغشائي بين الرأس والصدر (أي وعنق الرحم) ، ويتم جمع الدملمف perfused من فتح في منطقة مزقتها القاصية من البطن 9 و 10. هذه التقنيات ، مع ذلك ، هي محدودة بسبب انخفاض الانتعاش hemocytes وتلوث محتمل من قبل خلايا الجسم من الدهون ، 11 على التوالي. في الآونة الأخيرة أشارت إلى أنه أسلوب الحقن الانتعاش / استرداد عالية تحسين immunocytes باستخدام مخازن للتخثر في حين خفض مستويات تلوث الجداول والأنسجة الداخلية 11. في حين أن هذا الأسلوب يسمح للطريقة محسنة لجمع وصيانة hemocytes الأساسي للثقافة ، فإنه ينطوي على عدد من الحقن وجمع الخطوات التي ليست ضرورية إذا كان الهدف هو جمع المصب ، وإصلاح وصمة عار hemocytes للتشخيص. هنا ، علينا أن نظهر لدينا وسيلة لجمع الدملمف البعوض الذي يجمع بين البساطة في الارواء ، وذلك باستخدام مخازن للتخثر في مكان من المحلول الملحي ، مع دقة عالية لتقنيات الحقن عزل الاستعدادات نظيف hemocytes الزاعجة في البعوض.

Watch this Scientific Journal Video about A Protocol for Collecting and Staining Hemocytes from the Yellow Fever Mosquito Aedes aegypti at JoVE.com

A Protocol for Collecting and Staining Hemocytes from the Yellow Fever Mosquito Aedes aegypti

وبعد دقيقة طريقة مبسطة لجمع وصمة عار hemocytes البعوض هو موضح. لدينا وسيلة تجمع بين بساطة نضح مع دقة عالية لتقنيات الحقن عزل الاستعدادات نظيف hemocytes الزاعجة في البعوض. هذه الطريقة تسهل الدراسات تتطلب معرفة أنواع hemocytes والوفرة.

بروتوكول لجمع ويلطخ Hemocytes من الحمى الصفراء البعوض الزاعجة المصرية</em

 Mosquitoes are vectors for a number  of disease-causing pathogens such as the yellow fever virus, malaria parasites  and filarial worms. Laboratories are ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Protocol for Collecting and Staining Hemocytes from the Yellow Fever Mosquito Aedes aegypti

Protocol for Production of a Genetic Cross of the Rodent Malaria Parasites

بروتوكول للانتاج من الصليب الوراثية للطفيليات الملاريا القوارض

Variation in response to antimalarial drugs and in pathogenicity of malaria parasites is of biologic and medical importance. Linkage mapping has led to ...

A Calcium Bioluminescence Assay for Functional Analysis of Mosquito (Aedes aegypti) and Tick (Rhipicephalus microplus) G Protein-coupled Receptors

A Calcium Bioluminescence Assay for Functional Analysis of Mosquito Aedes aegypti and Tick Rhipicephalus microplus G Protein-coupled Receptors

والفحص ضوء بارد الكالسيوم عن التحليل الوظيفي من البعوض ( الزاعجة المصرية) والقراد ( مروحية الرأس المتثني) G - يقترن بروتين المستقبلات

Arthropod hormone receptors are potential targets for novel pesticides as they regulate many essential physiological and behavioral processes.  The ...

A Simple Chelex Protocol for DNA Extraction from Anopheles spp.

A Simple Chelex Protocol for DNA Extraction from Anopheles spp.

A Chelex بروتوكول بسيط لاستخراج الحمض النووي من<em&gt; الأنوفيلة</em&gt; النيابة.

Endemic countries are increasingly adopting molecular tools for  efficient typing, identification and surveillance against malaria parasites and  vector ...

Utilization of Capsules for Negative Staining of Viral Samples within Biocontainment

استخدام كبسولات لالتلطيخ السلبي من العينات الفيروسية ضمن بيوكنتينمنت

Transmission electron microscopy (TEM) is used to observe the ultrastructure of viruses and other microbial pathogens with nanometer resolution. Most ...

Extraction of Hemocytes from Drosophila melanogaster Larvae for Microbial Infection and Analysis

Extraction of Hemocytes from Drosophila melanogaster Larvae for Microbial Infection and Analysis

استخراج هيموسيتيس من اليرقات melanogaster المورفولوجية للعدوى الميكروبية والتحليل

During the pathogenic infection of Drosophila melanogaster, hemocytes play an important role in the immune response throughout the infection. Thus, the ...

Co-staining Blood Vessels and Nerve Fibers in Adipose Tissue

شارك تلطيخ الأوعية الدموية والألياف العصبية في الأنسجة الدهنية

Recent studies have highlighted the critical role of angiogenesis and sympathetic innervation in adipose tissue remodeling during the development of ...

In Vitro ELISA Test to Evaluate Rabies Vaccine Potency

في اختبار فيترو ELISA لتقييم قوة لقاح داء الكلب

The growing global concern for the animal welfare is encouraging manufacturers and the National Control Laboratories (OMCLs) to follow the 3Rs strategy ...

Vector Competence Analyses on Aedes aegypti Mosquitoes using Zika Virus

Vector Competence Analyses on Aedes aegypti Mosquitoes using Zika Virus

تحليلات كفاءة النواقل على بعوض Aedes aegypti باستخدام فيروس زيكا

The procedures presented describe a generalized methodology to infect Aedes aegypti mosquitoes with Zika virus under laboratory conditions to determine ...

Propagation of the Microsporidian Parasite Edhazardia aedis in Aedes aegypti Mosquitoes

Propagation of the Microsporidian Parasite Edhazardia aedis in Aedes aegypti Mosquitoes

انتشار الطفيلي Microsporidian Edhazardia aedis في Aedes aegypti البعوض

Edhazardia aedis is a microsporidian parasite of Aedes aegypti mosquitoes, a disease vector that transmits multiple arboviruses which cause millions of ...

Feeding and Quantifying Animal-Derived Blood and Artificial Meals in Aedes aegypti Mosquitoes

Feeding and Quantifying Animal-Derived Blood and Artificial Meals in Aedes aegypti Mosquitoes

تغذية وقياس الدم المشتق من الحيوانات والوجبات الاصطناعية في البعوض Aedes aegypti

Females of certain mosquito species can spread diseases while biting vertebrate hosts to obtain protein-rich blood meals required for egg development. In ...