Name: in vitro assay of bacterial adhesion onto mammalian epithelial cells
Uploaded: 2011-05-16T14:00:00
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लेखकों की प्रयोगशालाओं में कार्य प्राकृतिक विज्ञान और इंजीनियरिंग अनुसंधान परिषद, कनाडा के कनाडा के स्वास्थ्य अनुसंधान संस्थान, और कनाडा अनुसंधान अध्यक्षों कार्यक्रम से अनुदान द्वारा समर्थित है. जीएल Fonds डे Recherche SANTE डु क्यूबेक एन से धन के माध्यम से ग्रुप डी तसवीर का ख़ाका डेस Protéines Membranaires (GEPROM) से एक फैलोशिप द्वारा समर्थित है.

1. प्रारंभिक: जीवाणु उपभेदों और उपकला कोशिकाओं. कोशिकाओं और जीवाणुओं की जोड़तोड़ aseptically एक लामिना का प्रवाह हुड के तहत, प्रदर्शन कर रहे हैं. <ol><li> हौसले ई. अलग कोलाई 2787 उपभेदों, 2787Δ AIDA C600 ग्ल?...

<ol>
	<li>Kline, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+adhesins+in+host-microbe+interactions.">Bacterial adhesins in host-microbe interactions.</a> Cell Host Microbe. 5, 580-580 (2009).</li><li>Cossart, P., Boquet, P., Normark, S., Rappuoli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+microbiology+emerging.">Cellular microbiology emerging.</a> Science. 271, 315-315 (1996).</li><li>Elsinghorst, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+invasion+by+gentamicin+resistance.">Measurement of invasion by gentamicin resistance.</a> Methods Enzymol. 236, 405-405 (1994).</li><li>Pizarro-Cerda, J., Lecuit, M., Cossart, P., Sansonetti, P., Zychlinsky, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular Cellular Microbiology. , 161-161 (2002).</li><li>Srivastava, A., Isberg, R. R., Sansonetti, P., Zychlinsky, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular Cellular Microbiology. , 179-179 (2002).</li><li>Benz, I., Schmidt, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cloning+and+expression+of+an+adhesin+(AIDA-I)+involved+in+diffuse+adherence+of+enteropathogenic+Escherichia+coli.">Cloning and expression of an adhesin (AIDA-I) involved in diffuse adherence of enteropathogenic Escherichia coli.</a> Infect Immun. 57, 1506-1506 (1989).</li><li>Charbonneau, M. E., Berthiaume, F., Mourez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteolytic+processing+is+not+essential+for+multiple+functions+of+the+Escherichia+coli+autotransporter+adhesin+involved+in+diffuse+adherence+(AIDA-I).">Proteolytic processing is not essential for multiple functions of the Escherichia coli autotransporter adhesin involved in diffuse adherence (AIDA-I).</a> J Bacteriol. 188, 8504-8504 (2006).</li><li>Jacques, M., Paradis, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adhesin-receptor+interactions+in+Pasteurellaceae.">Adhesin-receptor interactions in Pasteurellaceae.</a> FEMS Microbiol Rev. 22, 45-45 (1998).</li><li>Auger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host-pathogen+interactions+of+Actinobacillus+pleuropneumoniae+with+porcine+lung+and+tracheal+epithelial+cells.">Host-pathogen interactions of Actinobacillus pleuropneumoniae with porcine lung and tracheal epithelial cells.</a> Infect Immun. 77, 1426-1426 (2009).</li><li>Jacques, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+lipo-oligosaccharides+and+lipopolysaccharides+in+bacterial+adherence.">Role of lipo-oligosaccharides and lipopolysaccharides in bacterial adherence.</a> Trends Microbiol. 4, 408-408 (1996).</li><li>Nataro, J. P., Kaper, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diarrheagenic+Escherichia+coli.">Diarrheagenic Escherichia coli.</a> Clin Microbiol Rev. 11, 142-142 (1998).</li><li>Jallat, C., Darfeuille-Michaud, A., Rich, C., Joly, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survey+of+clinical+isolates+of+diarrhoeogenic+Escherichia+coli:+diffusely+adhering+E.+coli+strains+with+multiple+adhesive+factors.">Survey of clinical isolates of diarrhoeogenic Escherichia coli: diffusely adhering E. coli strains with multiple adhesive factors.</a> Res Microbiol. 145, 621-621 (1994).</li></ol>

यह एक मानक है कि आक्रमण अध्ययन (gentamicin संरक्षण परख 3 का उपयोग उदाहरण के लिए) करने के लिए संशोधित किया जा सकता जीवाणु पालन परख प्रोटोकॉल का वर्णन करता है. कॉलोनी बनाने इकाइयों की गिनती मात्रा का ठहराव एक ?...

<table border="1"><tbody><tr><th> अभिकर्मक </th><th> कंपनी </th><th> सूचीपत्र संख्या </th></tr><tr><td> उच्च ग्लूकोज DMEM </td><td> GIBCO - Invitrogen </td><td> 12430-054 </td></tr><tr><td> DDPBS </td><td> GIBCO - Invitrogen </td><td> 14190-144 </td></tr><tr><td> गोजातीय वृद्धि सीरम </td><td> Hyclone </td><td> SH3054 </td></tr><tr><td> पेनिसिलीन / स्ट्रेप्टोमाइसिन </td><td> GIBCO - Invitrogen </td><td> 15140-148 </td></tr><tr><td> 24 अच्छी तरह प्लेटें </td><td> Corning </td><td> 3337 </td></tr><tr><td> Triton एक्स - 100 </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> BP151 - 100 </td></tr></tbody></table>

in vitro assay of bacterial adhesion onto mammalian epithelial cells

संक्रमण पैदा करने के लिए, बैक्टीरिया अपने मेजबान उपनिवेश स्थापित करना चाहिए. बैक्टीरियल रोगज़नक़ों विभिन्न अणुओं या लगाव को बढ़ावा देने के लिए मेजबान 1 कोशिकाओं में सक्षम संरचनाओं व्यक्त करते हैं . इन adhesins मेजबान कोशिका की सतह रिसेप्टर्स या घुलनशील प्रोटीन बैक्टीरिया और मेजबान के बीच एक पुल के रूप में अभिनय के साथ बातचीत पर भरोसा करते हैं. आसंजन एक महत्वपूर्ण पहला आक्रमण और / या विषाक्त पदार्थों के स्राव के लिए पहले कदम है, इस प्रकार यह एक महत्वपूर्ण घटना है बैक्टीरियल रोगजनन में अध्ययन किया जा है. इसके अलावा, पालन बैक्टीरिया अक्सर exquisitely ठीक tuned सेलुलर प्रतिक्रियाओं, अध्ययन जिसमें से सेलुलर सूक्ष्म जीव विज्ञान &#39;2 के क्षेत्र को जन्म दिया है प्रेरित . बैक्टीरियल आसंजन और मेजबान कोशिकाओं पर उनके आक्रमण के लिए मजबूत assays इसलिए बैक्टीरियल रोगजनन अध्ययनों में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं और लंबे समय से कई अग्रणी 3,4 प्रयोगशालाओं में इस्तेमाल किया गया है. ये assays अब सबसे बैक्टीरियल रोगजनन पर काम प्रयोगशालाओं द्वारा अभ्यास कर रहे हैं. यहाँ, हम एक मानक पालन एक विशिष्ट adhesin के योगदान illustrating परख का वर्णन करता है. हम Escherichia कोलाई तनाव 5 +२,७८७, एक मानव रोगजनक autotransporter विसरित पालन (AIDA) में शामिल Adhesin व्यक्त तनाव का उपयोग करें. किसी नियंत्रण के रूप में, हम एक उत्परिवर्ती तनाव का उपयोग AIDA जीन, 2787Δ Aida (एफ Berthiaume और एम. Mourez, अप्रकाशित) और ई. के एक वाणिज्यिक प्रयोगशाला तनाव की कमी कोलाई, C600 (न्यू इंग्लैंड Biolabs). बैक्टीरिया आमतौर पर इस्तेमाल किया Hep दो मानव उपकला कोशिका लाइन से कोशिकाओं का पालन करने के लिए छोड़ दिया जाता है. इस परख कम बड़े पैमाने पर 6 से पहले वर्णित किया गया है.

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In Vitro Assay of Bacterial Adhesion onto Mammalian Epithelial Cells

यह एक सरल बैक्टीरियल आसंजन बैक्टीरियल कॉलोनी कि संवर्धित कोशिकाओं पर पालन कर रहे हैं इकाइयों के गठन की संख्या की गिनती में शामिल परख प्रोटोकॉल है. परख मजबूत है, adhesin के स्वतंत्र अध्ययन, और कई बदलाव ज्यादातर प्रयोगशालाओं में उपयोग किया जाता है बैक्टीरियल रोगजनन पर काम कर रहे है.

बैक्टीरियल आसंजन के स्तनधारी उपकला कोशिकाओं पर इन विट्रो परख

To cause infections, bacteria must colonize their host. Bacterial pathogens express various molecules or structures able to promote attachment to host ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In Vitro Assay of Bacterial Adhesion onto Mammalian Epithelial Cells

Application of a Mouse Ligated Peyer&#x2019;s Patch Intestinal Loop Assay to Evaluate Bacterial Uptake by M cells

Application of a Mouse Ligated PeyerÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â€žÂ¢s Patch Intestinal Loop Assay to Evaluate Bacterial Uptake by M cells

एक माउस के आवेदन Peyer पैच आंतों लूप परख ligated एम कोशिकाओं द्वारा बैक्टीरियल तेज मूल्यांकन

The inside of our gut is inhabited with enormous number of commensal bacteria. The mucosal surface of the gastrointestinal tract is continuously exposed ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

बैक्टीरियल आसंजन के अध्ययन में कतरें तनाव का परिचय

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

मात्रात्मक<em&gt; इन विट्रो में</emस्टेटिक शर्तों के तहत सक्रिय प्राथमिक मानव microvascular endothelial कोशिकाओं को न्युट्रोफिल आसंजन उपाय&gt; परख

The vascular  endothelium plays an integral part in the inflammatory response. During the  acute phase of inflammation, endothelial cells (ECs) are ...

Enteric Bacterial Invasion Of Intestinal Epithelial Cells In Vitro Is Dramatically Enhanced Using a Vertical Diffusion Chamber Model

Enteric Bacterial Invasion Of Intestinal Epithelial Cells In Vitro Is Dramatically Enhanced Using a Vertical Diffusion Chamber Model

आंतों उपकला कोशिकाओं की आंतों बैक्टीरियल आक्रमण<em&gt; इन विट्रो में</em&gt; नाटकीय रूप से एक कार्यक्षेत्र प्रसार चैंबर मॉडल का उपयोग बढ़ाया है

The interactions of bacterial pathogens with host cells have been investigated extensively using in vitro cell culture methods. However as such cell ...

In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

इन विट्रो रोगजनक प्रेरित न्यूट्रोफिल ट्रांस-एपिथेलियल माइग्रेशन का आकलन करने के लिए कोकल्चर परख

Mucosal surfaces serve as protective barriers against pathogenic organisms.&#160;Innate immune responses are activated upon sensing pathogen leading to ...

Human Neutrophil Flow Chamber Adhesion Assay

मानव न्युट्रोफिल फ्लो चैंबर आसंजन परख

Neutrophil firm adhesion to endothelial cells plays a critical role in inflammation in both health and disease. The process of neutrophil firm adhesion ...

Static Adhesion Assay for the Study of Integrin Activation in T Lymphocytes

टी lymphocytes में Integrin से सक्रियण के अध्ययन के लिए स्टेटिक आसंजन परख

T lymphocyte adhesion is required for multiple T cell functions, including migration to sites of inflammation and formation of immunological synapses with ...

Electroporation of Functional Bacterial Effectors into Mammalian Cells

स्तनधारी कोशिकाओं में कार्यात्मक बैक्टीरियल effectors के electroporation

The study of protein interactions in the context of living cells can generate critical information about localization, dynamics, and interacting partners. ...

In Vitro and In Vivo Model to Study Bacterial Adhesion to the Vessel Wall Under Flow Conditions

In Vitro and In Vivo Model to Study Bacterial Adhesion to the Vessel Wall Under Flow Conditions

इन विट्रो में और vivo मॉडल में पोत दीवार के नीचे प्रवाह की स्थिति के लिए बैक्टीरियल आसंजन अध्ययन करने के लिए

In order to cause endovascular infections and infective endocarditis, bacteria need to be able to adhere to the vessel wall while being exposed to the ...

Assay of Adhesion Under Shear Stress for the Study of T Lymphocyte-Adhesion Molecule Interactions

टी लिम्फोसाइट-आसंजन अणु बातचीत का अध्ययन के लिए आसंजन के तहत कतरनी तनाव की परख

Overall, T cell adhesion is a critical component of function, contributing to the distinct processes of cellular recruitment to sites of inflammation and ...