Name: identification and analysis of mouse erythroid progenitors using the cd71/ter119 flow-cytometric assay
Uploaded: 2011-08-05T13:00:00
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우리는 매사 추세츠 유동세포계측법 코어 감사 : 리차드 Konz, 테드 Giehl, 바바라 고셀린, Yuehua 번지와 태미 Krupoch 있습니다. 이 작품은 NIH / NHLBI RO1 HL084168 (MS)와 NIH CA T32 - 130807 (JRS)에 의해 재정 지원되었다. 당뇨병 내분비학 연구 센터 부여 DK32520 지원의 핵심 자원도 사용되었습니다.

1. 조직의 수확 <ol><li> 2-5 ML 차가운 얼룩 버퍼를 (와 호수 (PBS)가 0.2 % BSA와 5mM 포도당을 추가 인산염 버퍼)이있는 튜브를 준비합니다. 이전 조직 수확 얼음 튜브 보관하십시오. </li><li> 쿨 마우스 적절한 승인 프로토콜에 따라 (예 : CO 2 흡입 자궁 전위 다음). </li><li> 나중에 분석, 혈소판의 예, reticulocyte 백작 CBC 분석을위한 EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) 또는 헤파린 혈액 수집 튜브에 ?...

<ol>
	<li>Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+Fas-FasL+coexpression+by+erythropoietin+mediates+erythroblast+expansion+during+the+erythropoietic+stress+response+in.">Suppression of Fas-FasL coexpression by erythropoietin mediates erythroblast expansion during the erythropoietic stress response in.</a> 108, 123-133 (2006).</li><li>Socolovsky, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negative+Autoregulation+by+FAS+Mediates+Robust+Fetal+Erythropoiesis.">Negative Autoregulation by FAS Mediates Robust Fetal Erythropoiesis.</a> PLoS Biol. 5, e252-e252 (2007).</li><li>Krutzik, P. O., Hale, M. B., Nolan, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+murine+immunological+signaling+network+with+phosphospecific+flow+cytometry.">Characterization of the murine immunological signaling network with phosphospecific flow cytometry.</a> J Immunol. 175, 2366-2373 (2005).</li><li>Socolovsky, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ineffective+erythropoiesis+in+Stat5a(-/-)5b(-/-)+mice+due+to+decreased+survival+of+early+erythroblasts.">Ineffective erythropoiesis in Stat5a(-/-)5b(-/-) mice due to decreased survival of early erythroblasts.</a> Blood. 98, 3261-3273 (2001).</li><li>Guihard, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+MAPK+ERK1+is+a+negative+regulator+of+the+adult+steady-state+splenic+erythropoiesis.">The MAPK ERK1 is a negative regulator of the adult steady-state splenic erythropoiesis.</a> Blood. 115, 3686-3694 (2010).</li><li>Yu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+erythroid+chaperone+that+facilitates+folding+of+alpha-globin+subunits+for+hemoglobin+synthesis.">An erythroid chaperone that facilitates folding of alpha-globin subunits for hemoglobin synthesis.</a> J Clin Invest. 117, 1856-1865 (2007).</li><li>Chen, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Erythroid+dysplasia,+megaloblastic+anemia,+and+impaired+lymphopoiesis+arising+from+mitochondrial+dysfunction.">Erythroid dysplasia, megaloblastic anemia, and impaired lymphopoiesis arising from mitochondrial dysfunction.</a> Blood. 114, 4045-4053 (2009).</li><li>Chen, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resolving+the+distinct+stages+in+erythroid+differentiation+based+on+dynamic+changes+in+membrane+protein+expression+during+erythropoiesis.">Resolving the distinct stages in erythroid differentiation based on dynamic changes in membrane protein expression during erythropoiesis.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106, 17413-17418 (2009).</li><li>McGrath, K. E., Bushnell, T. P., Palis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multispectral+imaging+of+hematopoietic+cells:+where+flow+meets+morphology.">Multispectral imaging of hematopoietic cells: where flow meets morphology.</a> J Immunol Methods. 336, 91-97 (2008).</li><li>Pop, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+key+commitment+step+in+erythropoiesis+is+synchronized+with+the+cell+cycle+clock+through+mutual+inhibition+between+PU.1+and+S-phase+progression.">A key commitment step in erythropoiesis is synchronized with the cell cycle clock through mutual inhibition between PU.1 and S-phase progression.</a> PLoS Biol. 8, (2010).</li><li>Borsook, H., Lingrel, J. B., Scaro, J. L., Millette, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+haemoglobin+in+relation+to+the+maturation+of+erythroid+cells.">Synthesis of haemoglobin in relation to the maturation of erythroid cells.</a> Nature. 196, 347-350 (1962).</li></ol>

흐름 cytometric 방법은 세포 표면 마커, 단백질 발현, 세포 생존, phospho 특정 항체 3 세포주기 상태를 사용하여 세포 신호를 포함하여 형광 - 복합 특정 항체 혹은 리간드와 검색 수있는 세포 기능의 동시 조사 수 있습니다. 이러한 성능은 신선하게 고립 erythropoietic 조직의 맥락에서, 분화 단계 특정 하위 집합의 개수 각 만들 수 있습니다. 이 방법은 따라서 erythropoietic 자극의 다양한 반응이나 ...

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th></tr><tr><td> 파 - 비오틴 </td><td> BD Pharmingen </td><td> 554256 </td></tr><tr><td> Streptavidin - APC </td><td> 분자 프로브 </td><td> S868 </td></tr><tr><td> 40 μm의 무균 셀 스트레이너 </td><td> Fisherbrand </td><td> 22363547 </td></tr><tr><td> 외과의 얼룩을위한 폴리스티렌 왕복 하단 튜브 </td><td> BD 팰컨 </td><td> 352008 </td></tr><tr><td> U - 96 바닥 잘 플레이트 </td><td> BD 팰컨 </td><td> 353910 </td></tr><tr><td> ChromePure 래빗 IgG </td><td> 잭슨 ImmunoResearch </td><td> 015-000-003 </td></tr><tr><td> CD71 - FITC (재고 0.5mg/ml) </td><td> BD - Biosciences </td><td> 553266 </td></tr><tr><td> Ter119 - PE (재고 0.2mg/ml) </td><td> BD - Biosciences </td><td> 553673 </td></tr><tr><td> 7AAD </td><td> BD - Biosciences </td><td> 559925 </td></tr><tr><td> DAPI 분말 </td><td> 로체 </td><td> 236276 </td></tr><tr><td> FITC 랫 안티 - 마우스 CD41 MWReg30 </td><td> BD Pharmingen </td><td> 553848 </td></tr><tr><td> FITC 랫 안티 - 마우스 CD45R/B220 RA3 - 6B2 </td><td> BD Pharmingen </td><td> 553087 </td></tr><tr><td> FITC 랫 안티 - 마우스 CD411b/Mac-1 M1/70 </td><td> BD Pharmingen </td><td> 557396 </td></tr><tr><td> FITC 랫 안티 - 마우스 LY - 6G 및 LY - 6C (GR - 1) RB6 - 8C5 </td><td> BD Pharmingen </td><td> 553126 </td></tr><tr><td> FITC 햄스터 방지 마우스 CD3e 145 - 2C11 </td><td> BD Pharmingen </td><td> 553061 </td></tr><tr><td> APC BrdU 흐름 키트 </td><td> BD Pharmingen </td><td> 557892 </td></tr><tr><td> Annexin V - 비오틴 </td><td> BD Pharmingen </td><td> 556418 </td></tr></tbody></table>

identification and analysis of mouse erythroid progenitors using the cd71/ter119 flow-cytometric assay

적혈구 조혈의 연구는 이전 조혈 및 erythroid progenitors에서 형성하는 방법 빨간색 세포 이해하는 것을 목표로하고있다. 특히, 빨간색 셀 형성 율이 그의 합성 조직 hypoxia에 의해 트리거되는 호르몬 erythropoietin (EPO)에 의해 규제됩니다. EPO의 급속한 증가에 적절한 조직 산소 결과, erythropoietic 속도 증가를 주도하는 위협 erythropoietic 스트레스 반응으로 알려진 과정. 붉은 세포를 순환의 숫자의 증가는 결과 조직 산소 전달을 향상시킵니다. 효율적인 erythropoietic 스트레스 반응 따라서 생존과 같은 높은 고도, 빈혈, 출혈, 화학 요법 또는 줄기 세포 이식과 같은 생리 학적 및 병리 학적 조건에서 회복하는 것이 중요합니다. 마우스 적혈구 조혈 및 스트레스 반응의 연구에 중요한 모델입니다. 마우스 최종 (성인 타입) 적혈구 조혈은 신생아 비장에서 성인 비장 및 골수에서 배아 일 12.5과 15.5 사이의 태아 간에서 이루어진다. 조직에 erythroid progenitors를 식별하는 방법의 클래식 EPO 함유 반 고체 미디어 도금 때 붉은 세포 식민지을 일으키다 이러한 세포의 능력에 의존하고 있습니다. 그들 erythroid 전구체의 자손은 형태학의 기준에 따라 구분됩니다. 나도 이러한 고전적인 방법을 분자 연구를위한 차별화 단계 특정 erythroid 세포의 큰 숫자에 액세스할 수 없습니다. 우리가 직접 갓 절연 마우스 조직의 맥락에서 분화 단계 특정 erythroid progenitors의과 엽 성의 전구 물질을 식별하고 공부의 흐름 cytometric 방법을 제시한다. 분석은 세포 표면 마커 CD71, Ter119에 의존하고, 흐름 cytometric &#39;전달 - 분산형&#39;매개 변수에, 이것은 세포의 크기의 함수입니다. CD71/Ter119 분석은 생체내에 erythropoietic 스트레스를 자신의 응답을하는 동안 erythroid progenitors을 연구하는 데 사용할 수있는 예를 들어, 빈혈 마우스 또는 마우스로 낮은 산소 조건에서 지내게. 또한 적혈구 조혈에 수정된 분자 경로의 구체적인 역할을 평가하기 위해 직접 유전자 변형 성인 마우스 또는 태아의 조직에 erythroid progenitors의 연구를하는 데 사용할 수 있습니다.

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Identification and Analysis of Mouse Erythroid Progenitors using the CD71/TER119 Flow-cytometric Assay

직접 갓 수확 마우스 골수, 비장이나 태아의 간장에서 분화 단계 특정 murine erythroid progenitors의과 엽 성의 전구 물질의 식별 및 분자 분석을 위해 흐름 cytometric 방식입니다. 분석은 세포 표면 마커 CD71, Ter119 및 셀 크기에 의존합니다.

CD71/TER119 흐름 cytometric 어세를 사용하여 마우스 Erythroid Progenitors의 제품 식별 및 분석

The study of erythropoiesis aims to understand how red cells are formed from earlier hematopoietic and erythroid progenitors. Specifically, the rate of ...

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Identification, Isolation, and Characterization of Fibro-Adipogenic Progenitors FAPs and Myogenic Progenitors MPs in Skeletal Muscle in the Rat

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