Name: evaluation of mammary gland development and function in mouse models
Uploaded: 2011-07-21T12:00:00
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Diese Studien wurden von CIHR und CBCRA gewährt DWL finanziert. IP wurde durch Stipendien aus CIHR-STP, FRSQ und CIHR finanziert. MKGS wurde von OGS und CIHR-STP Stipendien finanziert. Die Autoren danken Kevin Barr für seine Unterstützung bei der Maus Zucht.

1. Brustdrüse Dissektion <ol><li> Euthanize der Maus unter Verwendung von CO 2-Inhalation. Vermeiden Sie Genickbruch, wenn möglich, da es große Blutgefäße im Hals und führen zu einer Akkumulation von Blut durch Brustdrüsen beschädigt werden kann, wodurch die Dissektion erschweren. Wenn jedoch andere Kriterien in die gleiche Maus, wie die Blutspiegel von Oxytocin ausgewertet werden sollen, können alternative Methoden Euthanasie notwendig sein, obwohl dies von Ihrem IACUC ausgewertet werden müssen. ...

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	<li>Geddes, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inside+the+lactating+breast:+the+latest+anatomy+research.">Inside the lactating breast: the latest anatomy research.</a> J Midwifery Womens Health. 52, 556-556 (2007).</li><li>Sternlicht, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Key+stages+in+mammary+gland+development:+the+cues+that+regulate+ductal+branching+morphogenesis.">Key stages in mammary gland development: the cues that regulate ductal branching morphogenesis.</a> Breast Cancer Res. 8, 201-201 (2006).</li><li>Silberstein, G. B., Flanders, K. C., Roberts, A. B., Daniel, C. 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Brustdrüse Entwicklung und Funktion sind eng orchestriert. Mutant Mäuse können Hafen-Gen-Mutationen, die Brustdrüse Entwicklung und Funktion Hervorhebung der Notwendigkeit, Drüse Architektur 13,12 bewerten beeinträchtigen können. Whole Montage kann wie in diesem Artikel auf allen Stufen der Brustdrüse Entwicklung beschrieben werden. Typischerweise wird die Entwicklung des Epithels zu Beginn der Pubertät (~ 4 Wochen alt) beurteilt, in der Mitte der Pubertät (~ 6 Wochen alt) und nach der Pubertät (~ ...

<table border="1"><tbody><tr><th> Reagens </th><th> Firma </th><th> Katalog-Nummer </th></tr><tr><td> Karminrot </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> C1022 </td></tr><tr><td> Aluminiumkaliumsulfat </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> A6435 </td></tr><tr><td> Thymol </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> T0501 </td></tr><tr><td> Methylsalicylat </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> M6752 </td></tr><tr><td> Oxytocin </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> O3251 </td></tr></tbody></table>

evaluation of mammary gland development and function in mouse models

Der menschliche Brustdrüse von 15-20 Lappen zusammengesetzt, die Sekretion von Milch in eine Verzweigung Kanalsystem Öffnung an der Brustwarze. Die Lappen selbst sind eine Reihe von Terminal Kanal lobulären Einheiten der sekretorischen Alveolen und konvergierenden Kanäle 1 zusammengesetzt. Bei Mäusen ist eine ähnliche Architektur an der Schwangerschaft in die Gänge und Alveolen in das bindegewebige Stroma eingestreut werden eingehalten. Die Maus Brustdrüse Epithel ist ein Baum wie Gangsystem aus zwei Schichten von Zellen, eine innere Schicht aus luminalen Zellen, die durch eine äußere Schicht aus Myoepithelzellen durch die Grenzen eines Basalmembran 2 bezeichnet umgeben ist. Bei der Geburt ist nur eine rudimentäre duktale Baum vorhanden ist, besteht aus einem primären Kanal und 15-20 Filialen. Niederlassung Dehnung und Verstärkung beginnen am Anfang der Pubertät, ca. 4 Wochen alt, unter dem Einfluss von Hormonen 3,4,5. Bei 10 Wochen, wird der Großteil des Stroma durch ein komplexes System von Kanälen, die Zyklen der Verzweigung und Regression in jeder Läufigkeit bis Schwangerschaft 2 wird zu unterziehen eingedrungen. Zu Beginn der Schwangerschaft, beginnt eine zweite Phase der Entwicklung, mit der Proliferation und Differenzierung des Epithels auf Trauben-förmige Milch sekretorischen Strukturen, so genannte Alveolen 6,7 bilden. Nach der Geburt und während der Stillzeit wird die Milch durch luminale sekretorische Zellen produziert und gelagert im Lumen der Alveolen. Oxytocin, ein neuronales Reflex Säugen der Welpen induzierte stimulierte, induziert synchronisiert Kontraktionen der Myoepithelzellen um die Alveolen und entlang der Kanäle, so dass Milch durch die Milchgänge zur Brustwarze, wo es verfügbar wird, um die Welpen 8 transportiert werden. Brustdrüse Entwicklung, Differenzierung und Funktion sind eng orchestriert und erfordern nicht nur Interaktionen zwischen Stroma und Epithel, sondern auch zwischen myoepithelialen und luminalen Zellen innerhalb des Epithels 9,10,11. Dabei können Mutationen in vielen Genen in diesen Interaktionen verwickelt beeinträchtigen entweder duktalen Dehnung während der Pubertät oder Alveolen Bildung in der frühen Schwangerschaft, Differenzierung während der späten Schwangerschaft und sekretorischen Aktivierung führt zu Laktation 12,13. In diesem Artikel beschreiben wir, wie man mit der Maus Milchdrüsen sezieren und beurteilen ihre Entwicklung mit ganzen mounts. Wir zeigen auch, wie man myoepithelialen Kontraktionen und Milchspendereflex mit einem ex-vivo Oxytocin-basierten funktionellen Assays zu bewerten. Der Effekt einer Genmutation auf Brustdrüse Entwicklung und Funktion kann also in situ, indem diese beiden Techniken in der Mutante und Wildtyp-Mäusen der Kontrollgruppe festgestellt werden.

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Evaluation of Mammary Gland Development and Function in Mouse Models

Diese Methode beschreibt, wie zu sezieren und zu bewerten Brustdrüse Entwicklung und Funktion von Mäusen. Abgeschnittene Milchdrüsen sind für den Grad der Entwicklung mit whole mount beurteilt, während Milchspendereflex wird ausgewertet, wobei Oxytocin-basierte myoepithelialen Zelle Kontraktion Assay.

Evaluation der Brustdrüse Entwicklung und Funktion in Mausmodellen

The human mammary gland is composed of 15-20 lobes that secrete milk into a branching duct system opening at the nipple. Those lobes are themselves ...

Research

JoVE Journal

Biology

In vivo Bioluminescent Imaging of Mammary Tumors Using IVIS Spectrum

In vivo Bioluminescent Imaging of Mammary Tumors Using IVIS Spectrum

In vivo Biolumineszenz Imaging von Brusttumoren mit IVIS Spectrum

4T1 mouse mammary tumor cells can be implanted sub-cutaneously in nu/nu mice to form palpable tumors in 15 to 20 days. This xenograft tumor model system ...

Forschung

Biologie

Mouse Mammary Epithelial Cells form Mammospheres During Lactogenic Differentiation

Maus Brustepithelzellen Form Mammospheres Während lactogenic Differenzierung

A phenotypic measure commonly used to determine the degree of lactogenic differentiation in mouse mammary epithelial cell cultures is the formation of ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In-vivo-Imaging und therapeutische Behandlungen in einem orthotopen Mausmodell des Eierstockkrebs

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Changes in Mammary Gland Morphology and Breast Cancer Risk in Rats

Änderungen der Brustdrüsen Morphologie und Breast Cancer Risk in Ratten

Studies in rodent models of breast cancer show that exposures to dietary/hormonal factors during the in utero and pubertal periods, when the mammary gland ...

Isolation of Mouse Salivary Gland Stem Cells

Isolierung von Maus Speicheldrüsen Stem Cells

Mature salivary glands of both human and mouse origin comprise a minimum of five cell types, each of which facilitates the production and excretion of ...

Mouse Sperm Cryopreservation and Recovery using the I&middot;Cryo Kit

Mouse Sperm Cryopreservation and Recovery using the IÃƒâ€šÃ‚Â·Cryo Kit

Maus Sperma Kryokonservierung und Recovery mit der I · Cryo-Kit

Thousands of new genetically modified (GM) strains of mice have been created since the advent of transgenesis and knockout technologies.  Many of these ...

Intraductal Injection for Localized Drug Delivery to the Mouse Mammary Gland

Intraduktale Injection für Lokalisierte Drug Delivery auf die Maus Milchdrüse

Herein we describe a protocol to deliver various reagents to the mouse mammary gland via intraductal injections. Localized drug delivery and knock-down of ...

Functional Reconstitution and Channel Activity Measurements of Purified Wildtype and Mutant CFTR Protein

Funktionelle Rekonstitution und Kanalaktivitätsmessungen von gereinigtem Wildtyp und mutierten CFTR-Protein

The Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) is a unique channel-forming member of the ATP Binding Cassette (ABC) superfamily of ...

Evaluation of Zebrafish Kidney Function Using a Fluorescent Clearance Assay

Bewertung der Zebrafisch Nierenfunktion unter Verwendung einer fluoreszierenden Räumungs Assay

The zebrafish embryo offers a tractable model to study organogenesis and model human genetic disease. Despite its relative simplicity, the zebrafish ...

Indirect Immunofluorescence on Frozen Sections of Mouse Mammary Gland

Die indirekte Immunfluoreszenz auf Gefrierschnitte von Mäusemilchdrüse

Indirect immunofluorescence is used to detect and locate proteins of interest in a tissue. The protocol presented here describes a complete and simple ...