Name: detection of infectious virus from field-collected mosquitoes by vero cell culture assay
Uploaded: 2011-06-09T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Detection of Infectious Virus from Field-collected Mosquitoes by Vero Cell Culture Assay at JoVE.com

نحن نعترف بامتنان بالمساهمات الهامة من الدكاترة. جون أندرسون ، واندرو شيرلي Tirrell الرئيسية لهذه الدراسة. وأيد هذا العمل في جزء من المنح المقدمة من مراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها (U50/CCU116806-01-1) وزارة الزراعة الأمريكية (58-6615-1-218 ، CONH00768 وCONH00773).

1. الفرز وتحديد البعوض <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تنفيذ الإجراءات التالية على مقاعد البدلاء في مختبر مفتوح مخصص للسلامة الأحيائية من المستوى 2 المختبرات (BSL - 2) من قبل الموظفين الذين تم تدريبهم للعمل مع البعوض تعيش. ويحتفظ &quot;سلسلة التبريد&quot...

<ol>
	<li>Chosewood, L. C., Wilson, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. , (2007).</li><li>Anderson, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+West+Nile+virus+from+mosquitoes,+crows,+and+a+Cooper's+hawk+in+Connecticut.">Isolation of West Nile virus from mosquitoes, crows, and a Cooper's hawk in Connecticut.</a> Science. 286, 2331-2333 (1999).</li><li>Armstrong, P. M., Andreadis, T. G., Anderson, J. F., Main, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolations+of+Potosi+virus+from+mosquitoes+(Diptera:+Culicidae)+collected+in+Connecticut.">Isolations of Potosi virus from mosquitoes (Diptera: Culicidae) collected in Connecticut.</a> J Med Entomol. 42, 875-881 (2005).</li><li>Armstrong, P. M., Andreadis, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+genetic+variant+of+La+Crosse+virus+(Bunyaviridae)+isolated+from+New+England.">A new genetic variant of La Crosse virus (Bunyaviridae) isolated from New England.</a> Am J Trop Med Hyg. 75, 491-496 (2006).</li><li>Andreadis, T. G., Anderson, J. F., Vossbrinck, C. R., Main, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+West+Nile+virus+in+Connecticut,+USA:+a+five+year+analysis+of+mosquito+data+1999-2003.">Epidemiology of West Nile virus in Connecticut, USA: a five year analysis of mosquito data 1999-2003.</a> Vector Borne Zoonotic Dis. 4, 360-378 (2004).</li><li>Andreadis, T. G., Anderson, J. F., Tirrell-Peck, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+isolations+of+eastern+equine+encephalitis+and+highlands+J+viruses+from+mosquitoes+(Diptera:+Culicidae)+during+a+1996+epizootic+in+southeastern+Connecticut.">Multiple isolations of eastern equine encephalitis and highlands J viruses from mosquitoes (Diptera: Culicidae) during a 1996 epizootic in southeastern Connecticut.</a> J Med Entomol. 35, 296-302 (1998).</li><li>Armstrong, P. M., Andreadis, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eastern+equine+encephalitis+virus+in+mosquitoes+and+their+role+as+bridge+vectors.">Eastern equine encephalitis virus in mosquitoes and their role as bridge vectors.</a> Emerg Infect Dis. 16, 1869-1874 (2010).</li><li>Andreadis, T. G., Anderson, J. F., Armstrong, P. M., Main, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolations+of+Jamestown+Canyon+virus+(Bunyaviridae:+Orthobunyavirus)+from+field-collected+mosquitoes+(Diptera:+Culicidae)+in+Connecticut,+USA:+a+ten-year+analysis,+1997-2006.">Isolations of Jamestown Canyon virus (Bunyaviridae: Orthobunyavirus) from field-collected mosquitoes (Diptera: Culicidae) in Connecticut, USA: a ten-year analysis, 1997-2006.</a> Vector Borne Zoonotic Dis. 8, 175-188 (2008).</li><li>Beaty, B. J., Calisher, C. H., Shope, R., Lennette, E. H., Lennette, D. A., Lennette, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+11.">Chapter 11.</a> Diagnostic Procedures for Viral, Rickettsial, and Chlamydial Infections. , 189-212 (1995).</li><li>Karabatsos, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> International Catalogue of Arboviruses Including Certain Other Viruses of Vertebrates. , (1985).</li><li>Lanciotti, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+detection+of+west+nile+virus+from+human+clinical+specimens,+field-collected+mosquitoes,+and+avian+samples+by+a+TaqMan+reverse+transcriptase-PCR+assay.">Rapid detection of west nile virus from human clinical specimens, field-collected mosquitoes, and avian samples by a TaqMan reverse transcriptase-PCR assay.</a> J Clin Microbiol. 38, 4066-4071 (2000).</li><li>Lambert, A. J., Martin, D. A., Lanciotti, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+North+American+eastern+and+western+equine+encephalitis+viruses+by+nucleic+acid+amplification+assays.">Detection of North American eastern and western equine encephalitis viruses by nucleic acid amplification assays.</a> J Clin Microbiol. 41, 379-385 (2003).</li></ol>

فيرو مقايسة خلية ثقافة بمثابة وسيلة فعالة للبعوض الشاشة الميدانية التي تم جمعها لمجموعة متنوعة من الفيروسات. هذا يتناقض مع الأساليب الجزيئية التي تستهدف على وجه التحديد واحد أو عدد قليل من الفيروسات الفائدة. علاوة على ذلك ، وجدنا أن فيرو مقايسة ثقافة الخلية بنفس الق...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> اسم كاشف / المعدات </th><th> شركة </th><th> رقم كتالوج </th></tr><tr><td> مصل بقري جنيني </td><td> Gibco -- Invitrogen </td><td> 16140 </td></tr><tr><td> Anti-biotic/mycotic </td><td> Gibco -- Invitrogen </td><td> 15240 </td></tr><tr><td> بيكربونات الصوديوم NaHCO 3 ، Soln 7.5 ٪. </td><td> Gibco -- Invitrogen </td><td> 25080 </td></tr><tr><td> الجلوتامين L - 200MM 100X </td><td> Gibco - Invitrogen </td><td> 25030 </td></tr><tr><td> مسحوق الوسيلة الأساسية الدنيا (MEM) </td><td> Gibco -- Invitrogen </td><td> 11700 </td></tr><tr><td> 10X Dulbecco في برنامج تلفزيوني </td><td> Gibco -- Invitrogen </td><td> 14080 </td></tr><tr><td> التربسين - EDTA </td><td> Gibco -- Invitrogen </td><td> 15400 </td></tr><tr><td> مصل الأرنب </td><td> Gibco -- Invitrogen </td><td> 16120 </td></tr><tr><td> خلايا فيرو (استنساخ E6) </td><td> ATCC </td><td> CRL - 1586 </td></tr><tr><td> قوارير صغيرة زراعة الأنسجة ، والقبعات تنفيس ، 25 سم 2 </td><td> الصقر -- بيكتون ديكنسون </td><td> 353112 </td></tr><tr><td> القوارير الكبيرة زراعة الأنسجة ، والقبعات تنفيس ، 175 سم 2 </td><td> الصقر -- بيكتون ديكنسون </td><td> 353108 </td></tr><tr><td> النحاس المطلي BB لل، 4.5 ملم </td><td> Crosman </td><td> 0767 </td></tr><tr><td> الخلاط مطحنة </td><td> Retsch </td><td> MM300 </td></tr><tr><td> رفوف الثلاجة Isopack </td><td> إيبندورف </td><td> 022510240 </td></tr></tbody></table>

detection of infectious virus from field-collected mosquitoes by vero cell culture assay

أنواع البعوض أن تنقل عددا من الفيروسات متميزة بما في ذلك مسببات الأمراض البشرية الهامة مثل فيروس غرب النيل ، وفيروس حمى الضنك ، وفيروس chickungunya. وقد كثفت العديد من هذه الفيروسات في نطاقاتها المتوطنة وتوسيعها لمناطق جديدة ، مما يستدعي المراقبة والسيطرة الفعالة برامج للرد على هذه التهديدات. استراتيجية واحدة لمراقبة نشاط فيروس ينطوي على جمع أعداد كبيرة من البعوض من المواقع الموبوءة واختبارها للعدوى الفيروسية. في هذه المقالة ، ونحن تصف كيفية التعامل معها ، والعملية ، والشاشة التي تم جمعها ميدانيا البعوض عن الفيروسات المعدية التي فيرو الخلية مقايسة الثقافة. يتم فرز حسب الموقع البعوض وأنواع الشرك ، وتجميعها في أحواض تحتوي على ≤ 50 فردا. والمتجانس العينات المجمعة مخزنة في المياه المالحة باستخدام خلاط ، مطحنة ، وتحصين المرحلة المائية متكدسة على الثقافات الخلية فيرو (استنساخ E6). ويتم رصد مزارع الخلايا لتأثير الاعتلال الخلوي من الأيام المحددة 3-7 بعد التلقيح وأي فيروسات نمت في الثقافة الخلية المقايسات التشخيصية المناسبة. باستخدام هذا النهج ، ونحن عزل 9 فيروسات مختلفة من البعوض التي تم جمعها في ولاية كونيتيكت ، الولايات المتحدة الأمريكية ، وبين هؤلاء ، ومن المعروف أن تسبب المرض 5 الإنسان. ثلاثة من هذه الفيروسات (فيروس غرب النيل ، وفيروس بوتوسي ، ولوس انجليس لفيروس كروس) تمثل سجلات جديدة لأمريكا الشمالية أو منطقة نيو إنجلاند منذ عام 1999. القدرة على الكشف عن تنوع واسع من الفيروسات أمر بالغ الأهمية لرصد كل من أنشأ والفيروسات الناشئة حديثا في أسراب البعوض.

Watch this Scientific Journal Video about Detection of Infectious Virus from Field-collected Mosquitoes by Vero Cell Culture Assay at JoVE.com

Detection of Infectious Virus from Field-collected Mosquitoes by Vero Cell Culture Assay

نحن تصف طريقة لعملية وشاشة الميدانية التي تم جمعها. البعوض لمجموعة متنوعة من الفيروسات من خلال فحص خلايا فيرو الثقافة من خلال استخدام هذه التقنية ، وقد اكتشفنا 9 فيروسات مختلفة من الأسر التصنيفية 4 في البعوض التي تم جمعها في ولاية كونيتيكت.

الكشف عن الفيروسات المعدية التي جمعت من الحقل عن طريق البعوض فيرو خلية الفحص الثقافة

Mosquitoes transmit a number of distinct viruses including important human pathogens such as West Nile virus, dengue virus, and chickungunya virus. Many ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Live Cell Imaging of Alphaherpes Virus Anterograde Transport and Spread

تصوير الخلايا الحية من الهربسي الألفائي الفيروسات النقل تقدمي وانتشارها

Advances in live cell fluorescence microscopy  techniques, as well as the construction of recombinant viral strains that  express fluorescent fusion ...

Organoids as Model for Infectious Diseases: Culture of Human and Murine Stomach Organoids and Microinjection of Helicobacter Pylori

Organoids كنموذج للأمراض المعدية: ثقافة الإنسان وOrganoids المعدة الفئران وهيليكوباكتر بيلوري Microinjection من

Recently infection biologists have employed stem cell derived cultures to answer the need for new and better models to study host-pathogen interactions. ...

Zika Virus Infectious Cell Culture System and the In Vitro Prophylactic Effect of Interferons

Zika Virus Infectious Cell Culture System and the In Vitro Prophylactic Effect of Interferons

زيكا الفيروسات نظام المعدية خلية الثقافة و<em&gt; في المختبر</em&gt; وقائية تأثير الانترفيرونات

Zika Virus (ZIKV) is an emerging pathogen that is linked to fetal developmental abnormalities such as microcephaly, eye defects, and impaired growth. ZIKV ...

Rescue and Characterization of Recombinant Virus from a New World Zika Virus Infectious Clone

إنقاذ وتوصيف الفيروسات المؤتلف من عالم جديد زيكا الفيروسات استنساخ العدوى

Infectious cDNA clones allow for genetic manipulation of a virus, thus facilitating work on vaccines, pathogenesis, replication, transmission and viral ...

Rapid, Safe, and Simple Manual Bedside Nucleic Acid Extraction for the Detection of Virus in Whole Blood Samples

استخراج سريعة وآمنة وبسيطة دليل السرير الحمض النووي للكشف عن الفيروس في عينات الدم كله

The rapid diagnosis of an infection is essential for the outbreak management, risk containment, and patient care. We have previously shown a method for ...

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

نموذج السابقين فيفو الابتدائي بورسال خلية ثقافة دجاج لدراسة الأمراض المعدية بورسال الفيروسات المرضية

Infectious bursal disease virus (IBDV) is a birnavirus of economic importance to the poultry industry. The virus infects B cells, causing morbidity, ...

Identification of Mouse and Human Antibody Repertoires by Next-Generation Sequencing

تحديد الماوس وجسم الإنسان مبدع بتسلسل الجيل المقبل

The immense adaptability of antigen recognition by antibodies is the basis of the acquired immune system. Despite our understanding of the molecular ...

Human Serum Anti-aquaporin-4 Immunoglobulin G Detection by Cell-based Assay

مصل الدم البشري المضادة-أقوابورين-4 غلوبيولين مناعي G الكشف بتحليل يستند إلى الخلية

Anti-aquaporin-4 (AQP4) immunoglobulin G (IgG) is the core diagnostic biomarker for neuromyelitis optica spectrum disorders (NMOSD). The cell-based assay ...

Purification of High Yield Extracellular Vesicle Preparations Away from Virus

تنقية عالية الغلة الاستعدادات الحويصلة خارج الخلية بعيدا عن الفيروس

One of the major hurdles in the field of extracellular vesicle (EV) research today is the ability to achieve purified EV preparations in a viral infection ...

Vector Competence Analyses on Aedes aegypti Mosquitoes using Zika Virus

Vector Competence Analyses on Aedes aegypti Mosquitoes using Zika Virus

تحليلات كفاءة النواقل على بعوض Aedes aegypti باستخدام فيروس زيكا

The procedures presented describe a generalized methodology to infect Aedes aegypti mosquitoes with Zika virus under laboratory conditions to determine ...