Name: detection of infectious virus from field-collected mosquitoes by vero cell culture assay
Uploaded: 2011-06-09T13:00:00
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हम कृतज्ञता डीआरएस के महत्वपूर्ण योगदान को स्वीकार करते हैं. जॉन एंडरसन, एंड्रयू मुख्य और शर्ली Tirrell इस अध्ययन करने के लिए. इस काम के हिस्से में रोग नियंत्रण और रोकथाम (U50/CCU116806-01-1) और अमेरिकी कृषि विभाग (58-6615-1-218, CONH00768, और CONH00773) के लिए केंद्र से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था.

1. मच्छर छँटाई और पहचान <ol><li> निम्नलिखित प्रक्रियाओं एक खुली प्रयोगशाला बेंच पर एक समर्पित जैव सुरक्षा स्तर 2 (BSL-2) कर्मचारियों के साथ जो रहते मच्छरों के साथ काम करने के लिए प्रशिक्षित किया जाता है द्वारा प...

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	<li>Chosewood, L. C., Wilson, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. , (2007).</li><li>Anderson, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+West+Nile+virus+from+mosquitoes,+crows,+and+a+Cooper's+hawk+in+Connecticut.">Isolation of West Nile virus from mosquitoes, crows, and a Cooper's hawk in Connecticut.</a> Science. 286, 2331-2333 (1999).</li><li>Armstrong, P. M., Andreadis, T. G., Anderson, J. F., Main, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolations+of+Potosi+virus+from+mosquitoes+(Diptera:+Culicidae)+collected+in+Connecticut.">Isolations of Potosi virus from mosquitoes (Diptera: Culicidae) collected in Connecticut.</a> J Med Entomol. 42, 875-881 (2005).</li><li>Armstrong, P. M., Andreadis, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+genetic+variant+of+La+Crosse+virus+(Bunyaviridae)+isolated+from+New+England.">A new genetic variant of La Crosse virus (Bunyaviridae) isolated from New England.</a> Am J Trop Med Hyg. 75, 491-496 (2006).</li><li>Andreadis, T. G., Anderson, J. F., Vossbrinck, C. R., Main, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+West+Nile+virus+in+Connecticut,+USA:+a+five+year+analysis+of+mosquito+data+1999-2003.">Epidemiology of West Nile virus in Connecticut, USA: a five year analysis of mosquito data 1999-2003.</a> Vector Borne Zoonotic Dis. 4, 360-378 (2004).</li><li>Andreadis, T. G., Anderson, J. F., Tirrell-Peck, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+isolations+of+eastern+equine+encephalitis+and+highlands+J+viruses+from+mosquitoes+(Diptera:+Culicidae)+during+a+1996+epizootic+in+southeastern+Connecticut.">Multiple isolations of eastern equine encephalitis and highlands J viruses from mosquitoes (Diptera: Culicidae) during a 1996 epizootic in southeastern Connecticut.</a> J Med Entomol. 35, 296-302 (1998).</li><li>Armstrong, P. M., Andreadis, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eastern+equine+encephalitis+virus+in+mosquitoes+and+their+role+as+bridge+vectors.">Eastern equine encephalitis virus in mosquitoes and their role as bridge vectors.</a> Emerg Infect Dis. 16, 1869-1874 (2010).</li><li>Andreadis, T. G., Anderson, J. F., Armstrong, P. M., Main, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolations+of+Jamestown+Canyon+virus+(Bunyaviridae:+Orthobunyavirus)+from+field-collected+mosquitoes+(Diptera:+Culicidae)+in+Connecticut,+USA:+a+ten-year+analysis,+1997-2006.">Isolations of Jamestown Canyon virus (Bunyaviridae: Orthobunyavirus) from field-collected mosquitoes (Diptera: Culicidae) in Connecticut, USA: a ten-year analysis, 1997-2006.</a> Vector Borne Zoonotic Dis. 8, 175-188 (2008).</li><li>Beaty, B. J., Calisher, C. H., Shope, R., Lennette, E. H., Lennette, D. A., Lennette, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+11.">Chapter 11.</a> Diagnostic Procedures for Viral, Rickettsial, and Chlamydial Infections. , 189-212 (1995).</li><li>Karabatsos, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> International Catalogue of Arboviruses Including Certain Other Viruses of Vertebrates. , (1985).</li><li>Lanciotti, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+detection+of+west+nile+virus+from+human+clinical+specimens,+field-collected+mosquitoes,+and+avian+samples+by+a+TaqMan+reverse+transcriptase-PCR+assay.">Rapid detection of west nile virus from human clinical specimens, field-collected mosquitoes, and avian samples by a TaqMan reverse transcriptase-PCR assay.</a> J Clin Microbiol. 38, 4066-4071 (2000).</li><li>Lambert, A. J., Martin, D. A., Lanciotti, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+North+American+eastern+and+western+equine+encephalitis+viruses+by+nucleic+acid+amplification+assays.">Detection of North American eastern and western equine encephalitis viruses by nucleic acid amplification assays.</a> J Clin Microbiol. 41, 379-385 (2003).</li></ol>

वेरो सेल संस्कृति परख वायरस का एक विविधता के लिए स्क्रीन क्षेत्र एकत्र मच्छरों के लिए एक प्रभावी तरीका के रूप में कार्य करता है. यह आणविक विधियों है कि विशेष रूप से एक लक्ष्य या ब्याज की कुछ वायरस को विर...

<table border="1"><tbody><tr><th> अभिकर्मक / उपकरणों के नाम </th><th> कंपनी </th><th> सूचि संख्या </th></tr><tr><td> भ्रूण गोजातीय सीरम </td><td> Gibco - Invitrogen </td><td> 16140 </td></tr><tr><td> Anti-biotic/mycotic </td><td> Gibco - Invitrogen </td><td> 15240 </td></tr><tr><td> सोडियम बिकारबोनिट 3 NaHCO, 7.5% सोल्यूशन. </td><td> Gibco - Invitrogen </td><td> 25080 </td></tr><tr><td> एल Glutamine 100x 200mm </td><td> Gibco - Invitrogen </td><td> 25030 </td></tr><tr><td> पाउडर न्यूनतम आवश्यक मध्यम (सदस्य) </td><td> Gibco - Invitrogen </td><td> 11700 </td></tr><tr><td> 10X Dulbecco है पीबीएस </td><td> Gibco - Invitrogen </td><td> 14080 </td></tr><tr><td> Trypsin - EDTA </td><td> Gibco - Invitrogen </td><td> 15400 </td></tr><tr><td> खरगोश सीरम </td><td> Gibco - Invitrogen </td><td> 16120 </td></tr><tr><td> वेरो कोशिकाओं (E6 क्लोन) </td><td> ATCC </td><td> CRL - 1586 </td></tr><tr><td> लघु टिशू कल्चर बोतल, निकाल टोपियां, 25 2 सेमी </td><td> फाल्कन - Becton Dickinson </td><td> 353112 </td></tr><tr><td> बड़े टिशू कल्चर बोतल, निकाल टोपियां, 175 2 सेमी </td><td> फाल्कन - Becton Dickinson </td><td> 353108 </td></tr><tr><td> कॉपर लेपित बी.बी., 4.5 मिमी </td><td> Crosman </td><td> 0767 </td></tr><tr><td> मिक्सर मिल </td><td> Retsch </td><td> MM300 </td></tr><tr><td> Isopack फ्रीजर रैक </td><td> Eppendorf </td><td> 022510240 </td></tr></tbody></table>

detection of infectious virus from field-collected mosquitoes by vero cell culture assay

मच्छरों पश्चिम नील नदी वायरस, डेंगू वायरस, और chickungunya वायरस जैसे महत्वपूर्ण मानव रोगज़नक़ों सहित अलग वायरस के एक संख्या संचारित. उनके स्थानिकमारी वाले श्रेणियों में इन वायरस से कई तेज है और नए क्षेत्रों के लिए विस्तारित, इन धमकियों का जवाब प्रभावी निगरानी और नियंत्रण कार्यक्रम की जरूरत महसूस. एक वायरस गतिविधि पर नजर रखने की रणनीति के स्थानिकमारी वाले साइटों से मच्छरों की बड़ी संख्या का संग्रह शामिल है और उन्हें वायरल संक्रमण के लिए परीक्षण. इस अनुच्छेद में, हम वर्णन कैसे संभाल करने के लिए, प्रक्रिया, और स्क्रीन वेरो सेल संस्कृति परख द्वारा संक्रामक वायरस के लिए मच्छरों क्षेत्र एकत्र. मच्छरों जाल स्थान और प्रजातियों के द्वारा हल कर रहे हैं, और ≤ 50 व्यक्तियों युक्त पूल में बांटा है. जमा नमूनों बफर मिल एक मिक्सर और जलीय चरण मिला हुआ वेरो सेल संस्कृतियों (E6 क्लोन) पर inoculated है का उपयोग खारा में homogenized हैं. सेल संस्कृतियों दिनों 3-7 के बाद टीका और किसी भी वायरस सेल संस्कृति में हो उपयुक्त निदान assays के द्वारा पहचाने जाते हैं cytopathic प्रभाव के लिए निगरानी कर रहे हैं. इस दृष्टिकोण का उपयोग करके, हम कनेक्टिकट, संयुक्त राज्य अमेरिका में एकत्र मच्छरों से 9 विभिन्न वायरस अलग है, और इनमें से 5 के लिए मानव रोग का कारण जाना जाता है. इन वायरस के तीन (पश्चिम नील नदी वायरस, पोटोसी वायरस, और La Crosse वायरस) उत्तर अमेरिका या 1999 के बाद से नई इंग्लैंड क्षेत्र के लिए नए रिकॉर्ड का प्रतिनिधित्व करते हैं. वायरस की एक विस्तृत विविधता का पता लगाने की क्षमता की निगरानी दोनों स्थापित और मच्छर आबादी में नए उभरते वायरस के लिए महत्वपूर्ण है.

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Detection of Infectious Virus from Field-collected Mosquitoes by Vero Cell Culture Assay

हम प्रक्रिया के लिए एक विधि का वर्णन है और स्क्रीन क्षेत्र एकत्र वायरस का एक विविधता के लिए वेरो सेल संस्कृति परख द्वारा मच्छरों. इस तकनीक काम करके, हम कनेक्टिकट में एकत्र मच्छरों में 4 वर्गीकरण परिवारों से 9 विभिन्न वायरस का पता लगाया है.

संक्रामक वायरस के फील्ड एकत्र मच्छरों से वेरो सेल संस्कृति परख द्वारा जांच

Mosquitoes transmit a number of distinct viruses including important human pathogens such as West Nile virus, dengue virus, and chickungunya virus. Many ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Live Cell Imaging of Alphaherpes Virus Anterograde Transport and Spread

Alphaherpes वायरस अग्रगामी परिवहन और बिखरा का लाइव सेल इमेजिंग

Advances in live cell fluorescence microscopy  techniques, as well as the construction of recombinant viral strains that  express fluorescent fusion ...

Organoids as Model for Infectious Diseases: Culture of Human and Murine Stomach Organoids and Microinjection of Helicobacter Pylori

संक्रामक रोगों के लिए मॉडल के रूप में Organoids: हेलिकोबेक्टर के मानव की संस्कृति और murine पेट Organoids और microinjection

Recently infection biologists have employed stem cell derived cultures to answer the need for new and better models to study host-pathogen interactions. ...

Zika Virus Infectious Cell Culture System and the In Vitro Prophylactic Effect of Interferons

Zika Virus Infectious Cell Culture System and the In Vitro Prophylactic Effect of Interferons

Zika वायरस संक्रामक सेल संस्कृति प्रणाली और<em&gt; इन विट्रो</em&gt; इंटरफेरॉन की रोगनिरोधी प्रभाव

Zika Virus (ZIKV) is an emerging pathogen that is linked to fetal developmental abnormalities such as microcephaly, eye defects, and impaired growth. ZIKV ...

Rescue and Characterization of Recombinant Virus from a New World Zika Virus Infectious Clone

एक नई दुनिया Zika वायरस संक्रमित क्लोन से पुनः संयोजक वायरस के बचाव और विशेषता

Infectious cDNA clones allow for genetic manipulation of a virus, thus facilitating work on vaccines, pathogenesis, replication, transmission and viral ...

Rapid, Safe, and Simple Manual Bedside Nucleic Acid Extraction for the Detection of Virus in Whole Blood Samples

तेजी से, सुरक्षित, और सरल मैनुअल बेडसाइड न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण पूरे रक्त के नमूनों में वायरस का पता लगाने के लिए

The rapid diagnosis of an infection is essential for the outbreak management, risk containment, and patient care. We have previously shown a method for ...

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

संक्रामक Bursal रोग वायरस का अध्ययन करने के लिए एक पूर्व Vivo चिकन प्राथमिक Bursal-सेल संस्कृति मॉडल रोगजनन

Infectious bursal disease virus (IBDV) is a birnavirus of economic importance to the poultry industry. The virus infects B cells, causing morbidity, ...

Identification of Mouse and Human Antibody Repertoires by Next-Generation Sequencing

अगली पीढ़ी के अनुक्रमण द्वारा माउस और मानव एंटीबॉडी रिपरटोअर्स की पहचान

The immense adaptability of antigen recognition by antibodies is the basis of the acquired immune system. Despite our understanding of the molecular ...

Human Serum Anti-aquaporin-4 Immunoglobulin G Detection by Cell-based Assay

मानव सीरम विरोधी aquaporin-सेल द्वारा 4 Immunoglobulin जी पता लगाने आधारित परख

Anti-aquaporin-4 (AQP4) immunoglobulin G (IgG) is the core diagnostic biomarker for neuromyelitis optica spectrum disorders (NMOSD). The cell-based assay ...

Purification of High Yield Extracellular Vesicle Preparations Away from Virus

वायरस से दूर उच्च उपज extracellular Vesicle तैयारी की शुद्धि

One of the major hurdles in the field of extracellular vesicle (EV) research today is the ability to achieve purified EV preparations in a viral infection ...

Vector Competence Analyses on Aedes aegypti Mosquitoes using Zika Virus

Vector Competence Analyses on Aedes aegypti Mosquitoes using Zika Virus

वेक्टर क्षमता जीका वायरस का उपयोग कर एडीज एजिप्टी मच्छरों पर विश्लेषण

The procedures presented describe a generalized methodology to infect Aedes aegypti mosquitoes with Zika virus under laboratory conditions to determine ...