Name: modeling neural immune signaling of episodic and chronic migraine using spreading depression in vitro
Uploaded: 2011-06-13T13:00:00
Duration: 16 min 13 s
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Este trabalho foi financiado por doações do Instituto Nacional de Distúrbios Neurológicos e Derrame (NS-19108), o Instituto Nacional de Saúde Infantil e de Doenças (PO1-HD09402), a Fundação de Pesquisa da enxaqueca e da Fundação White. Ms. Marcia P. Kraig assistida na preparação e manutenção de sistemas de cultura.

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	<li>Kunkler, P. E., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+waves+precede+electrophysiological+changes+of+spreading+depression+in+hippocampal+organ+cultures.">Calcium waves precede electrophysiological changes of spreading depression in hippocampal organ cultures.</a> J Neurosci. 18 (9), 3416-3425 (1998).</li><li>Kunkler, P. E., Hulse, R. E., Schmitt, M. W., Nicholson, C., Kraig, R. 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A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+MIQE+guidelines:+minimum+information+for+publication+of+quantitative+real-time+PCR+experiments.">The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-time PCR experiments.</a> Clin Chem. 55 (4), 611-622 (2009).</li><li>Pusic, A. D., Kraig, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+gene+micro+array+profiling+demonstrates+"T-cell-like"+activation+after+recurrent+spreading+depression+-+implications+for+migraine+pathogenesis.">Inflammatory gene micro array profiling demonstrates "T-cell-like" activation after recurrent spreading depression - implications for migraine pathogenesis.</a> Soc Neurosci abst. , (2010).</li><li>Quinn, B., Graybiel, A. 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Não há conflitos de interesse declarados.

SD é uma perturbação paroxística do cérebro cujas características são altamente conservada em todas as regiões do cérebro examinado espécies e até à data. SD é comumente estudada em neocórtex. No entanto, a complexidade do circuito neural desta estrutura (em comparação com o hipocampo), bem como a incapacidade de manter viva neocórtex in vitro com funções imunológicas de repouso por períodos prolongados, torná-lo menos útil como uma preparação em vitro para a definição das consequências a longo prazo de susceptibilidade SD. Em contraste, o hipocampo não é apenas a estrutura do cérebro que é mais sensível a SD, é também uma estrutura archicortical com uma estrutura mais simplificada do circuito neural e função, que é bem adequado para definir os meios pelos quais neuroimunes atividade neural pode modular a suscetibilidade SD .

modeling neural immune signaling of episodic and chronic migraine using spreading depression in vitro

Enxaqueca e sua transformação para enxaqueca crônica são encargos de saúde que precisam de opções de tratamento melhoraram. Procuramos definir como sinalização imune neural modula a suscetibilidade à enxaqueca, como modelo in vitro utilizando a depressão alastrante (SD), como um meio para desenvolver novos alvos terapêuticos para enxaqueca episódica e crônica. SD é a causa provável de aura de enxaqueca e dor da enxaqueca. É uma perda da função neuronal paroxística desencadeada por aumento da atividade neuronal, inicialmente, que lentamente se propaga dentro de regiões cerebrais suscetíveis. Função normal do cérebro é extremamente sensível a, e se baseia em, coincidente baixo nível de sinalização imune. Assim, a sinalização neural imunológico provavelmente afeta a atividade elétrica do SD, e, portanto, enxaqueca. Estudos percepção de dor em animais inteiros SD são repletas de dificuldades, mas os animais inteiros são adequados para examinar os aspectos biologia de sistemas de enxaqueca desde SD ativa trigeminal vias nociceptivas. No entanto, estudos com animais inteiros por si só não pode ser usado para decifrar os mecanismos celulares e circuitos neurais da SD. Em vez disso, em preparações in vitro, onde as condições ambientais podem ser controlados são necessários. Aqui, é importante reconhecer as limitações de fatias aguda e vantagens distintas das culturas fatia do hipocampo. Fatias de cérebro agudo não pode revelar mudanças sutis na sinalização imune desde a preparar as fatias sozinho dispara: pró-inflamatórias mudanças que nos últimos dias, o comportamento epileptiforme devido aos altos níveis de tensão de oxigênio necessário para vitalizar as fatias, e lesões celulares irreversíveis nos centros fatia anóxica. Em contraste, nós examinamos sinalização imunológico maduro em culturas fatia hipocampal desde a culturas intimamente paralelo, a sua contrapartida na vivo com a função trisynaptic madura; mostrar astrócitos quiescente, microglia e os níveis de citocinas, e SD é facilmente induzida em uma preparação não anestesiados. Além disso, as fatias são de longa duração e SD pode ser induzida em dias consecutivos sem lesão, fazendo esta preparação o único meio de data-capazes de modelar as conseqüências de doenças crônicas neuroimunes SD, e enxaqueca crônica, assim, talvez. Usamos técnicas eletrofisiológicas e não-invasivo para medir a imagem de células neuronais e as funções de circuito coincidente com SD. Neural variáveis ​​expressão imune gene são medidos com qPCR triagem, arrays qPCR, e, mais importante, o uso de pré-amplificação de cDNA para detecção de alvos ultra-baixo nível, como interferon-gama usando todo, regionais ou específicos de células avançado (via laser microscopia de dissecção) amostragem. Sinalização em cascata de citocinas é avaliada com metas fosfoproteína multiplexados relacionadas com a expressão de genes e alterações fosfoproteína confirmada através de células específicas de imunocoloração. Estratégias farmacológicas e siRNA são utilizados para imitar e modular de sinalização imune SD.

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Modeling Neural Immune Signaling of Episodic and Chronic Migraine Using Spreading Depression In Vitro

Enxaqueca e sua transformação para enxaqueca crônica são um fardo imenso de saúde que precisam de opções de tratamento melhoraram. Procuramos definir como sinalização imune neural modula a suscetibilidade à enxaqueca, modelada<em&gt; In vitro</em&gt; Usando a depressão alastrante em culturas fatia do hipocampo, como um meio para desenvolver novos alvos terapêuticos.

Modelagem Neural Sinalização Imune de migrânea episódica e crônica Usando a depressão alastrante In Vitro</em

Migraine and its transformation to chronic migraine are healthcare burdens in need of improved treatment options.  We seek to define how neural immune ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Modeling Neural Immune Signaling of Episodic and Chronic Migraine Using Spreading Depression In Vitro

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