אנו מודים מתקן המכון Wistar בעלי חיים, מתקן מיקרוסקופית, מתקן Histotechnology ואספקה ​​מרכז המחקר. המחקר מומן בחלקו על ידי מענקים מהמוסד הלאומי לבריאות ע&quot;א 076674, קליפורניה 098101, 025874 ו - CA CA 10815.

<ol>
	<li>Sun, T., Jackson, S., Haycock, J. W., MacNeil, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culture+of+skin+cells+in+3D+rather+than+2D+improves+their+ability+to+survive+exposure+to+cytotoxic+agents.">Culture of skin cells in 3D rather than 2D improves their ability to survive exposure to cytotoxic agents.</a> J Biotechnol. 122, 372-381 (2006).</li><li>Smalley, K. S., Lioni, M., Herlyn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+isn't+flat:+taking+cancer+biology+to+the+next+dimension.">Life isn't flat: taking cancer biology to the next dimension.</a> In Vitro Cell Dev Biol Anim. 42, 242-247 (2006).</li><li>Sun, T., Norton, D., McKean, R. J., Haycock, J. W., Ryan, A. J., MacNeil, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+3D+cell+culture+system+for+investigating+cell+interactions+with+electrospun+fibers.">Development of a 3D cell culture system for investigating cell interactions with electrospun fibers.</a> Biotechnol Bioeng. 97, 1318-1328 (2007).</li><li>Kremer, M., Lang, E., Berger, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organotypical+engineering+of+differentiated+composite-skin+equivalents+of+human+keratinocytes+in+a+collagen-GAG+matrix+(INTEGRA+Artificial+Skin)+in+a+perfusion+culture+system.">Organotypical engineering of differentiated composite-skin equivalents of human keratinocytes in a collagen-GAG matrix (INTEGRA Artificial Skin) in a perfusion culture system.</a> Langenbecks Arch Surg. 386, 357-363 (2001).</li><li>Esc&#225;mez, M. J., Garc&#237;, M., Larcher, F., Meana, A., Mu&#241;oz, E., Jorcano, J. L., Del R&#237;o, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+vivo+model+of+wound+healing+in+genetically+modified+skin-humanized+mice.">An in vivo model of wound healing in genetically modified skin-humanized mice.</a> J Invest Dermatol. 123, 1182-1191 (2004).</li><li>Li, L., Fukunaga-Kalabis, M., Yu, H., Xu, X., Kong, J., Lee, J. T., Herlyn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+dermal+stem+cells+differentiate+into+functional+epidermal+melanocytes.">Human dermal stem cells differentiate into functional epidermal melanocytes.</a> J Cell Sci. 123, 853-860 (2010).</li><li>Meier, F., Nesbit, M., Hsu, M. Y., Martin, B., Van Belle, P., Elder, D. E., Schaumburg-Lever, G., Garbe, C., Walz, T. M., Donatien, P., Crombleholme, T. M., Herlyn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+melanoma+progression+in+skin+reconstructs:+biological+significance+of+bFGF.">Human melanoma progression in skin reconstructs: biological significance of bFGF.</a> Am J Pathol. 156, 193-200 (2000).</li><li>Yu, H., McDaid, R., Lee, J., Li, L., Kumar, S. M., Elder, D. E., Van Belle, P., Gimotty, P., Guerra, M., Hammond, R., Nathanson, K. L., Dalla Palma, M., Herlyn, M., Xu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+BRAF+mutation+and+p53+inactivation+during+transformation+of+a+subpopulation+of+primary+human+melanocytes.">The role of BRAF mutation and p53 inactivation during transformation of a subpopulation of primary human melanocytes.</a> Am J Pathol. 174, 2367-2377 (2009).</li><li>Lee, J. T., Li, L., Brafford, P. A., van den Eijnden, M., Halloran, M. B., Sproesser, K., Haass, N. K., Smalley, K. S., Tsai, J., Bollag, G., Herlyn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PLX4032,+a+potent+inhibitor+of+the+B-Raf+V600E+oncogene,+selectively+inhibits+V600E-positive+melanomas.">PLX4032, a potent inhibitor of the B-Raf V600E oncogene, selectively inhibits V600E-positive melanomas.</a> Pigment Cell Melanoma Res. 23, 820-827 (2010).</li><li>Tsai, J., Lee, J. T., Wang, W., Zhang, J., Cho, H., Mamo, S., Bremer, R., Gillette, S., Kong, J., Haass, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery+of+a+selective+inhibitor+of+oncogenic+B-Raf+kinase+with+potent+antimelanoma+activity.">Discovery of a selective inhibitor of oncogenic B-Raf kinase with potent antimelanoma activity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105, 3041-3046 (2008).</li></ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

תיארנו יצירת עור 3D משחזר עם מלנוציטים אדם נורמלי, לתאי גזע עורי ותאי מלנומה. כאשר גדל בתרבות monolayer, תאים melanocytic להציג מורפולוגיה דומה (שטוח, כישור או יותר דנדריטים בצורת), ללא קשר למוצאם של השלב הקליני. לעומת זאת, עור 3D משחזר לשחזר הבמה מאפיינים ספציפיים של תאים מלנומה. מלנוציטים אדם רגיל מתגוררים בבית ממברנות במרתף בין שכבות האפידרמיס ואת עורי כמו תאים בודדים. תאים RGP מלנומה ראשונית לגדול בקבוצות קטנות לאורך הממברנה במרתף בעוד יותר אגרסיביים תאים VGP מלנומה לגדול ככל אשכולות גדולים שבירת דרך הממברנה אל תוך מרתף בדרמיס. בתאי מלנומה גרורתית לגדול לכל הכיוונים לפלוש עמוק לתוך הדרמיס כמו תאים או אשכולות יחיד. ניתוח כמותי יכול להתבצע על המודל הזה על ידי מדידת עומק הפלישה והיקף התפוצה. בנוסף ואפיון של תאים ממאירים melanocytic נורמלי, באמצעות מודל שאנחנו יכולים לגרום ישירות התמיינות בתאי גזע עורי לתוך מלנוציטים התבגר, אשר בבית אל שכבת הבסיס של האפידרמיס ליצור תקשורת בתום לב עם קרטינוציטים דרך upregulation של E-cadherin ( 6). באמצעות וקטורים ויראליים, אנו מסוגלים גם להפעיל או להשבית פונקציה גן הבנה טובה יותר של הדינמיקה ואת משמעות תפקודית של גנים לידי ביטוי כל סוג תא העור משחזר, אשר מבטיח להיות מודל יעיל ללמוד לא רק על מנגנוני טרנספורמציה של מלנוציטים , אלא גם התקדמות של מלנומה (8). לטווח ארוך של התבוננות פנוטיפים הסלולרי הפך אפשרי באמצעות השתלת עור משחזר לבעלי חיים immunodeficient. אדם כזה העור עכבר הכימרה היא כלי מחקר מעולה ללמוד melanomagenesis וגרורות מלנומה. העור משחזר יכול להיות גם פלטפורמה יעילה להערכת תרופות. תרופות רבות אשר לחסל תאים סרטניים בתנאי תרבות 2D לעיתים קרובות יש השפעה מועטה ביישומים הניסוי הקליני. כפי שניתן לראות בגידול vivo, בתאי מלנומה בתרבויות 3D הם לעתים קרובות עמידים לתרופות אשר התאים בתרביות 2D להגיב, מה שמראה כי microenvironment מודולציה מסלולי איתות מלנומה. לגילוי סמים מוצלח, העור לשחזר מודל 3D הוא כלי אידיאלי פרה לחזות את ההשפעות של תרכובות in vivo (9,10). לסיכום, העור לשחזר מודלים לגשר על הפער בין במבחנה במחקרים vivo. הם יובילו להבנה טובה יותר של אילו גנים מעורבים טרנספורמציה וכיצד בתאי גזע לתרום השינוי.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> שם מגיב </th><th> חברה </th><th> מספר קטלוגי </th></tr><tr><td> 10x EMEM </td><td> ביו וויטאקר </td><td> 12-684F </td></tr><tr><td> L-גלוטמין </td><td> Gibco </td><td> 25030-081 </td></tr><tr><td> סרום שור עוברית </td><td> Hyclone </td><td> SH-30,071.02 </td></tr><tr><td> גיד שור חומצה חולץ קולגן </td><td> Organogenesis </td><td> 200/50 </td></tr><tr><td> תרביות רקמה של 6 גם מגשים עם תוספות </td><td> Organogenesis </td><td> 9285 </td></tr><tr><td> Keratinocyte בינונית חינם סרום </td><td> Gibco </td><td> 17005042 </td></tr><tr><td> Dialyzed עגל עוברית סרום </td><td> Hyclone </td><td> SH-30,079.03 </td></tr><tr><td> רקומביננטי גזע אנושיים Cell Factor </td><td> פיצג&#39;רלד תעשיות </td><td> RDI-307-255X </td></tr><tr><td> יסוד FGF </td><td> פיצג&#39;רלד תעשיות </td><td> 30R-AF015 </td></tr><tr><td> אנדותלין-3, אדם </td><td> האמריקאי פפטיד ושות </td><td> 88-5-10 </td></tr><tr><td> סידן כלוריד </td><td> סיגמא </td><td> C-7902 </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> JRH מדעי החיים </td><td> 56430-10L </td></tr><tr><td> F12 (HAM של) </td><td> Gibco </td><td> 11765-54 </td></tr><tr><td> הידרוקורטיזון </td><td> סיגמא </td><td> H-0888 </td></tr><tr><td> אינסולין, transferrin, Ethanolamine, סלניום (ITES) </td><td> BioWhittaker </td><td> 17839Z </td></tr><tr><td> O-Phosphorylethanolamine </td><td> סיגמא </td><td> P0503 </td></tr><tr><td> אדנין </td><td> סיגמא </td><td> A9795 </td></tr><tr><td> הפרוגסטרון </td><td> סיגמא </td><td> P-8783 </td></tr><tr><td> Triiodothyronine </td><td> סיגמא </td><td> T-5516 </td></tr><tr><td> סרום סובך של יילוד </td><td> Hyclone </td><td> SH3011802 </td></tr><tr><td> חיץ 10% פורמלין </td><td> Surgipath </td><td> 00600 </td></tr><tr><td> טמפרטורה אופטימלית חיתוך קפוא התקשורת (אוקטובר) </td><td> סאקורה </td><td> 4583 </td></tr><tr><td> Multi קלטות </td><td> Surgipath </td><td> 02293-BX </td></tr><tr><td> TBS ביופסיה ניירות </td><td> משולש למדעי ביו </td><td> BP-B </td></tr><tr><td> TBS ביופסיה ניירות </td><td> משולש למדעי ביו </td><td> BP-B </td></tr><tr><td> מאגר תבניות חד פעמיות </td><td> דיג </td><td> 15-182-501C </td></tr><tr><td> הבנזואין מתחם תמיסת </td><td> Disposables Professional, Inc, </td><td> S42450 </td></tr><tr><td> מטליות אלכוהול Prep </td><td> בית המרקחת CVS </td><td></td></tr><tr><td> משי שחורה קלועה 5-0 </td><td> Ethicon </td><td> 682G </td></tr><tr><td> גזה ספוגים (סטרילי) </td><td> בית המרקחת CVS </td><td></td></tr><tr><td> מצבטים </td><td> Roboz </td><td> RS5070 </td></tr><tr><td> איריס מספריים </td><td> Roboz </td><td> RS5913 </td></tr><tr><td> כירורגי להבי </td><td> נוצה </td><td> 2976 </td></tr><tr><td> EZ הרדמה </td><td> Euthanex קורפ </td><td></td></tr><tr><td> SCID עכבר outbred שיער </td><td> צ&#39;ארלס הנהר </td><td></td></tr></tbody></table>

the three-dimensional human skin reconstruct model: a tool to study normal  skin and melanoma progression

רוב במבחנה בביולוגיה העור ניסיוני נעשו monocultures 2 ממדי (2D), תוך צבירת הראיות עולה כי התאים מתנהגים באופן שונה כאשר הם גדלו בתוך מטריצה ​​חוץ תאית 3D וגם אינטראקציה עם תאים אחרים (1-5) . מודלים עכבר כבר נוצלו בהרחבה ללמוד המורפוגנזה רקמה in vivo. עם זאת העכבר העור האנושי יש הבדלים משמעותיים בארכיטקטורה הסלולר פיזיולוגיה, אשר מקשה להסיק מחקרים העכבר לבני אדם. מאז מלנוציטים בעור עכבר מרוכזים בעיקר בזקיקי השיער, יש להם מאפיינים ביולוגיים שונים מאלה של בני אדם, אשר לאתר בעיקר בשכבת הבסיס של האפידרמיס. ההתפתחות האחרונה של העור האנושי לשחזר מודלים 3D אפשרה את השדה כדי לחקור תאים מטריקס תאים תאים אינטראקציות בין תאים מסוגים שונים. משחזר מורכב &quot;הדרמיס&quot; עם fibroblasts מוטבע קולגן אני מטריקס, &quot;האפידרמיס&quot;, אשר מורכבת, מרובדת קרטינוציטים מבודל קרום במרתף פונקציונלי, המפריד בין הדרמיס לאפידרמיס. קולגן מספק פיגומים, אספקת חומרי מזון, ואת הפוטנציאל לאינטראקציה התא אל התא. העור מודלים 3D המשלב תאים melanocytic לשחזר את המאפיינים הטבעיים של הומאוסטזיס מלנוציט והתקדמות מלנומה בעור האדם. כפי in vivo, מלנוציטים בעור משוחזר מרוכזים בבית קרום המרתף וביניהם קרטינוציטים שכבת הבסיס. בתאי מלנומה התערוכה אותם מאפיינים המשקף את שלב הגידול המקורי (RGP, VGP ותאי מלנומה גרורתית) in vivo. לאחרונה, בתאי גזע עורי זוהו בדרמיס אדם (6). אלה רב עוצמה בתאי גזע יכול לעבור האפידרמיס להבדיל כדי מלנוציטים.

Watch this Scientific Journal Video about The Three-Dimensional Human Skin Reconstruct Model: a Tool to Study Normal  Skin and Melanoma Progression at JoVE.com

The Three-Dimensional Human Skin Reconstruct Model: a Tool to Study Normal  Skin and Melanoma Progression

בדו&quot;ח זה, אנו מתארים את העור תלת ממדי לשחזר מודל אשר מחקה העור האנושי באדריכלות הרכב. הפיזיולוגיה מלנוציט, התקדמות מלנומה גורל בתאי גזע עורי נחקרו באמצעות העור לשחזר מודל. המודל שימושית גם ככלי קליני להערכת תרופות.

עור תלת ממדי האדם לשחזר דגם: ככלי מחקר עור רגיל התקדמות מלנומה

Most in vitro studies in experimental skin biology have been done in 2-dimensional (2D) monocultures, while accumulating evidence suggests that cells ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Planar and Three-Dimensional Printing of Conductive Inks

הדפסה מישוריים תלת ממדי של דיו מוליך

Printed electronics rely on low-cost, large-area fabrication routes to create flexible or multidimensional electronic, optoelectronic, and biomedical ...

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

עיצוב של bioreactor לחץ על מחזורי Ex Vivo מחקר של מסתמי הלב אבי העורקים

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic ...

Skin Tattooing As A Novel Approach For DNA Vaccine Delivery

עור קעקוע כגישה חדשה לאספקת חיסון ה-DNA

Nucleic acid-based vaccination is a topic of growing interest, especially plasmid DNA (pDNA) encoding immunologically important antigens. After the ...

An Improved Method for the Preparation of Type I Collagen From Skin

שיטה משופרת להכנת סוג I קולגן מעור

Soluble type 1 collagen (COL1) is used extensively as an adhesive substrate for cell cultures and as a cellular scaffold for regenerative applications. ...

Investigating the Three-dimensional Flow Separation Induced by a Model Vocal Fold Polyp

חקירת הפרדת הזרימה התלת מימדית הנגרמת על ידי מודל פוליפ קיפול ווקאלי

The fluid-structure energy exchange process for normal speech has been studied extensively, but it is not well understood for pathological conditions. ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

ייצור רקמת סחוס אנושי באמצעות שלושה ממדי הזרקת דיו טכנולוגיית הדפסה

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

עור מלא פגמים דגם להערכת כלי דם של Biomaterials<em&gt; בVivo</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

Generation of a Three-dimensional Full Thickness Skin Equivalent and Automated Wounding

דור של עור בעובי מלא תלת ממדי Equivalent ואוטומטי פציעה

In vitro models are a cost effective and ethical alternative to study cutaneous wound healing processes. Moreover, by using human cells, these models ...

Development of a Multicellular Three-dimensional Organotypic Model of the Human Intestinal Mucosa Grown Under Microgravity

פיתוח תאיים תלת ממד Organotypic דגם של אדם המעיים הריריים Grown במיקרוגרבטיציה

Because cells growing in a three-dimensional (3-D) environment have the potential to bridge many gaps of cell cultivation in 2-D environments (e.g., ...

DNA Nanotubes as a Versatile Tool to Study Semiflexible Polymers

ה-DNA צינוריות כמו כלי רב-תכליתי ללמוד פולימרים Semiflexible

Mechanical properties of complex, polymer-based soft matter, such as cells or biopolymer networks, can be understood in neither the classical frame of ...