Name: delivery of therapeutic agents through intracerebroventricular (icv) and intravenous (iv) injection in mice
Uploaded: 2011-10-03T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Delivery of Therapeutic Agents Through Intracerebroventricular ICV and Intravenous IV Injection in Mice at JoVE.com

Die Autoren bedanken sich bei John Marston für Experten der Tierhaltung und Dr. Marco A. Passini danken für die technische Unterstützung in der Anfangsphase dieses Projekts. Diese Arbeit wurde durch Zuschuss von der National Institutes of Health zur CLL (; R01HD054413 R01NS41584) finanziert.

1. Intrazerebroventrikuläre Injektion <ol><li> Der erste Schritt ist die Vorbereitung der Injektion Stammlösungen; diese Lösungen sind viralen Vektor, Plasmid-DNA, Drogen, und sollte unter sterilen Bedingungen injiziert werden. </li><li> Mix eine gewünschte Titer der viralen Vektor (5-7 ul insgesamt) mit 0,05% w / v Trypanblau in PBS zur Visualisierung der Injektionsstelle. </li><li> Plasmid-DNA-Lösung (5 l ul total) enthält D-(+)-Glucose 20% (w / v) (1 mL), Trypanblau (0,05%) PBS (1 mL), Plasmid (~ 5 ~ g / ~ L ...

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	<li>Blanchette, M., Fortin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood-brain+barrier+disruption+in+the+treatment+of+brain+tumors.">Blood-brain barrier disruption in the treatment of brain tumors.</a> Methods Mol. Biol. 686, 447-463 (2011).</li><li>Foust, K. D., Kaspar, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Over+the+barrier+and+through+the+blood:+to+CNS+delivery+we+go.">Over the barrier and through the blood: to CNS delivery we go.</a> Cell Cycle. 24, 4017-4018 (2009).</li><li>Snyder, E. Y., Taylor, R. M., Wolfe, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+progenitor+cell+engraftment+corrects+lysosomal+storage+throughout+the+MPS+VII+mouse+brain.">Neural progenitor cell engraftment corrects lysosomal storage throughout the MPS VII mouse brain.</a> Nature. 374, 367-370 (1995).</li><li>Passini, M. A., Wolfe, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Widespread+gene+delivery+and+structure-specific+patterns+of+expression+in+the+brain+after+intraventricular+injections+of+neonatal+mice+with+an+adeno-associated+virus+vector.">Widespread gene delivery and structure-specific patterns of expression in the brain after intraventricular injections of neonatal mice with an adeno-associated virus vector.</a> J. Virol. 24, 12382-12392 (2001).</li><li>Kienstra, K. A., Freysdottir, D., Gonzales, N. 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D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rescue+of+the+spinal+muscular+atrophy+phenotype+in+a+mouse+model+by+early+postnatal+delivery+of+SMN.">Rescue of the spinal muscular atrophy phenotype in a mouse model by early postnatal delivery of SMN.</a> Nat. Biotechnol. 28, 271-274 (2010).</li><li>Foust, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravascular+AAV9+preferentially+targets+neonatal+neurons+and+adult+astrocytes.">Intravascular AAV9 preferentially targets neonatal neurons and adult astrocytes.</a> Nat. Biotechnol. 27, 59-65 (2009).</li><li>Passini, M. A., Watson, D. J., Wolfe, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+delivery+to+the+mouse+brain+with+adeno-associated+virus.">Gene delivery to the mouse brain with adeno-associated virus.</a> Methods Mol. Biol. 246, 225-236 (2004).</li><li>Coady, T. H., Lorson, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trans-splicing-mediated+improvement+in+a+severe+mouse+model+of+spinal+muscular+atrophy.">Trans-splicing-mediated improvement in a severe mouse model of spinal muscular atrophy.</a> J. Neurosci. 30, 126-130 (2010).</li><li>Baughan, T. D., Dickson, A., Osman, E. Y., Lorson, C. 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A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negatively-Acting+Bifunctional+RNA+Increases+Survival+Motor+Neuron+in+vitro+and+in+vivo.">Negatively-Acting Bifunctional RNA Increases Survival Motor Neuron in vitro and in vivo.</a> Hum. Gene. Ther. 19, 1307-1315 .</li><li>Mattis, V. B., Ebert, A. D., Fosso, M. Y., Chang, C. W., Lorson, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delivery+of+a+read-through+inducing+compound,+TC007,+lessens+the+severity+of+a+spinal+muscular+atrophy+animal+model.">Delivery of a read-through inducing compound, TC007, lessens the severity of a spinal muscular atrophy animal model.</a> Hum. Mol. Genet. 18, 3906-3913 (2009).</li><li>Williams, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligonucleotide-mediated+survival+of+motor+neuron+protein+expression+in+CNS+improves+phenotype+in+a+mouse+model+of+spinal+muscular+atrophy.">Oligonucleotide-mediated survival of motor neuron protein expression in CNS improves phenotype in a mouse model of spinal muscular atrophy.</a> J. Neurosci. 29, 7633-7638 (2009).</li><li>Passini, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS-targeted+gene+therapy+improves+survival+and+motor+function+in+a+mouse+model+of+spinal+muscular+atrophy.">CNS-targeted gene therapy improves survival and motor function in a mouse model of spinal muscular atrophy.</a> J. Clin. Invest. 120, 1253-1264 (2010).</li><li>Shababi, M., Glascock, J., Lorson, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+of+SMN+Trans-Splicing+and+a+Neurotrophic+Factor+Increases+the+Life+Span+and+Body+Mass+in+a+Severe+Model+of+Spinal+Muscular+Atrophy.">Combination of SMN Trans-Splicing and a Neurotrophic Factor Increases the Life Span and Body Mass in a Severe Model of Spinal Muscular Atrophy.</a> Hum. Gene. Ther. 22, 1-10 (2010).</li></ol>

Forschung mit Maus-Modellen der Erkrankung erfordert oft die Verabreichung von Medikamenten oder anderen Substanzen bei Neugeborenen. In diesem Video zeigen wir den Schritt-für Schritt-Verfahren mit zwei Arten der Injektion Strategien, die verwendet werden, um das ZNS Ziel kann sein: 1) direkte Injektion in das ZNS Nutzung intracerebroventrikuläre (ICV) Injektion, oder 2) iv Injektion gezielt die zeitliche / Vena facialis. Das Timing dieser Injektionen ist von großer Bedeutung. Da die ICV-Injektionen Freihand sind, m...

<table border="1"><tbody><tr><th> Name des Reagenzes </th><th> Firma </th><th> Katalog-Nummer </th><th> Kommentare (optional) </th></tr><tr><td> Green Food Dye </td><td> McCormick </td><td> n / a </td><td> Muss gefiltert werden </td></tr><tr><td> Hamilton Glasspritze (100 ul) </td><td> Sigma Aldrick </td><td> 20702 </td><td></td></tr><tr><td> LuerMxF Thema Style White Nylon </td><td> Kleine Teile, Inc. </td><td> VPLF-LC78-1-25 </td><td></td></tr><tr><td> Feinmaschiges Injektionsnadeln </td><td> Popper </td><td> 7111 </td><td> Größe: 33 (SWG) x ¼ &quot;(6,35 mm) </td></tr><tr><td> Wee Sight Transilluminator </td><td> Respironics </td><td> 1017920 </td><td></td></tr><tr><td> 2.25X Kopfbandlupe </td><td> MagEyes </td><td> Modell Nr. 5 </td><td> Wählen Sie Vergrößerung auf individuelle Präferenzen passen </td></tr></tbody></table>

delivery of therapeutic agents through intracerebroventricular (icv) and intravenous (iv) injection in mice

Trotz der schützenden Rolle, die Blut-Hirn-Schranke spielt in Abschirmung des Gehirns, schränkt den Zugriff auf das zentrale Nervensystem (ZNS), die am häufigsten Ergebnisse in Ausfall potenzieller Therapeutika für neurodegenerative Erkrankungen 1,2 ausgelegt. Neurodegenerative Erkrankungen wie Spinale Muskelatrophie (SMA), in denen die unteren motorischen Neuronen betroffen sind, können großen Nutzen aus der Einführung der Therapeutika in das ZNS. Der Zweck dieses Videos ist es, zwei verschiedene Injektions-Paradigmen demonstrieren, um therapeutische Materialien in neugeborenen Mäusen bald nach der Geburt zu liefern. Eine dieser Methoden ist direktes Einspritzen in zerebralen Seitenventrikel (intracerebroventrikuläre), die im Lieferumfang von Materialien in das ZNS durch die Liquor 3,4 ergibt. Die zweite Methode ist eine zeitliche Vene Injektion (iv) dass verschiedene Therapeutika in das Kreislaufsystem einführen können, was zu einer systematischen Lieferung einschließlich des ZNS 5. Die weit verbreitete Transduktion des ZNS ist erreichbar, wenn eine entsprechende viralen Vektors und virale Serotyp genutzt wird. Visualisierung und Nutzung der V. temporalis zur Injektion ist möglich bis zu postnatalen Tag 6. Allerdings, wenn die gelieferte Material soll das ZNS zu erreichen, sollten diese Injektionen stattfinden, während die Blut-Hirn-Schranke durchlässiger ist wegen seiner unreifen Status, vorzugsweise vor der postnatalen Tag 2. Die ausgereifte Blut-Hirn-Schranke schränkt die Wirksamkeit der intravenösen Lieferung. Beide Delivery-Systeme sind einfach und wirksam, wenn die chirurgische Eignung erreicht wird. Sie benötigen keine umfangreiche chirurgische Geräte und kann von einer einzigen Person durchgeführt werden. Allerdings sind diese Techniken nicht ohne Herausforderungen. Die geringe Größe der postnatalen Tag 2 Welpen und der anschließenden kleinen Zielgebieten können die Injektionen schwierig durchzuführen und zunächst schwierig zu replizieren.

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Delivery of Therapeutic Agents Through Intracerebroventricular ICV and Intravenous IV Injection in Mice

Dieser Artikel zeigt zwei sehr unterschiedliche Methoden der Injektion: 1) in das Gehirn (intracerebroventrikuläre) und 2) systemischen (intravenösen), um die therapeutischen Wirkstoffe in das zentrale Nervensystem von neugeborenen Mäusen einzuführen.

Abgabe therapeutischer Wirkstoffe durch intracerebroventrikuläre (ICV) und intravenöse (IV) Injektion in Mäuse

Despite the protective role that blood brain barrier plays in shielding the brain, it limits the access to the central nervous system (CNS) which most ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Delivery of Therapeutic Agents Through Intracerebroventricular (ICV) and Intravenous (IV) Injection in Mice

Orthotopic Xenografting of Human Luciferase-Tagged Malignant Peripheral Nerve Sheath Tumor Cells for in vivo Testing of Candidate Therapeutic Agents

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Orthotopen Xenografting of Human Luciferase-Tagged malignen peripheren Nervenscheide Tumorzellen für In vivo Prüfung von Kandidaten Therapeutika

Although in vitro screens are essential for the initial identification of candidate therapeutic agents, a rigorous assessment of the drug's ability to ...

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Spontaneous intracerebral hemorrhage (ICH) defines a potentially life-threatening neurological malady that accounts for 10-15% of all stroke-related ...

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