Name: the application of permanent middle cerebral artery ligation in the mouse
Uploaded: 2011-07-25T13:00:00
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La tecnica chirurgica è stata originariamente acquisite nel laboratorio del Dr. William D. Hill presso il Medical College of Georgia. Gli autori desiderano inoltre ringraziare il dottor David A. Rempe e Landa Prifti per l&#39;utilizzo della fotocamera dissezione. Questa ricerca è stata sostenuta da NIH NS041744, NS051279, F31 NS064700 e AHA 30815697D.

Questo protocollo è stato approvato dalla Università di Rochester comitato dedicato l&#39;uso etico degli animali nella ricerca (UCAR). Tecniche asettiche da seguire durante il protocollo. L&#39;utilizzo di guanti sterili e una maschera è necessario. Tutte le attrezzature, materiali, prodotti chimici, e gli strumenti che vengono utilizzati durante il protocollo sono descritte nella tabella 1. 1. La preparazione pre-chirurgica <ol><li> Iniettare topi per via ...

<ol>
	<li>Britton, M., Rafols, J., Alousi, S., Dunbar, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+middle+cerebral+artery+occlusion+on+central+nervous+system+apoptotic+events+in+normal+and+diabetic+rats.">The effects of middle cerebral artery occlusion on central nervous system apoptotic events in normal and diabetic rats.</a> Int J Exp Diabesity Res. 4, 13-20 (2003).</li><li>Ciceri, P., Rabuffetti, M., Monopoli, A., Nicosia, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+leukotrienes+in+a+model+of+focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat.">Production of leukotrienes in a model of focal cerebral ischaemia in the rat.</a> Br J Pharmacol. 133, 1323-1329 (2001).</li><li>Jin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+transplantation+of+human+neural+precursor+cells+improves+outcome+from+focal+cerebral+ischemia+in+aged+rats.">Delayed transplantation of human neural precursor cells improves outcome from focal cerebral ischemia in aged rats.</a> Aging Cell. 9, 1076-1083 (2010).</li><li>McCaig, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+GADD34+expression+after+focal+cerebral+ischaemia.">Evolution of GADD34 expression after focal cerebral ischaemia.</a> Brain Res. 1034, 51-61 (2005).</li><li>Shirotani, T., Shima, K., Chigasaki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+studies+of+extracellular+metabolites+in+the+striatum+after+distal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+stroke-prone+spontaneously+hypertensive+rats.">In vivo studies of extracellular metabolites in the striatum after distal middle cerebral artery occlusion in stroke-prone spontaneously hypertensive rats.</a> Stroke. 26, 878-884 (1995).</li><li>Wu, Y. P., Tan, C. K., Ling, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+Fos-like+immunoreactivity+in+the+brain+and+spinal+cord+of+rats+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Expression of Fos-like immunoreactivity in the brain and spinal cord of rats following middle cerebral artery occlusion.</a> Exp Brain Res. 115, 129-136 (1997).</li><li>Tamura, A., Graham, D. I., McCulloch, J., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat:+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Focal cerebral ischaemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 1, 53-60 (1981).</li><li>Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+middle+cerebral+artery+occlusion:+evaluation+of+the+model+and+development+of+a+neurologic+examination.">Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination.</a> Stroke. 17, 472-476 (1986).</li><li>Carswell, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+and+gender+influences+on+sensitivity+to+focal+cerebral+ischemia+in+the+stroke-prone+spontaneously+hypertensive+rat.">Genetic and gender influences on sensitivity to focal cerebral ischemia in the stroke-prone spontaneously hypertensive rat.</a> Hypertension. 33, 681-685 (1999).</li><li>Mary, V., Wahl, F., Uzan, A., Stutzmann, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enoxaparin+in+experimental+stroke:+neuroprotection+and+therapeutic+window+of+opportunity.">Enoxaparin in experimental stroke: neuroprotection and therapeutic window of opportunity.</a> Stroke. 32, 993-999 (2001).</li><li>Menzies, S. A., Hoff, J. T., Betz, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats:+a+neurological+and+pathological+evaluation+of+a+reproducible+model.">Middle cerebral artery occlusion in rats: a neurological and pathological evaluation of a reproducible model.</a> Neurosurgery. 31, 100-107 (1992).</li><li>Iaci, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+growth+factor+2+promotes+functional+recovery+with+treatment+initiated+up+to+7+days+after+permanent+focal+ischemic+stroke.">Glial growth factor 2 promotes functional recovery with treatment initiated up to 7 days after permanent focal ischemic stroke.</a> Neuropharmacology. 59, 640-649 (2010).</li><li>Richard, M. J. P., Khan, B. V. C. B. J., Saleh, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+mechanisms+by+which+lipoic+acid+confers+protection+during+the+early+stages+of+cerebral+ischemia:+A+possible+role+for+calcium.">Cellular mechanisms by which lipoic acid confers protection during the early stages of cerebral ischemia: A possible role for calcium.</a> Neuroscience Research. , (2011).</li><li>Heiss, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+derangement+of+periinfarct+viable+tissue+in+ischemic+stroke.">Progressive derangement of periinfarct viable tissue in ischemic stroke.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 12, 193-203 (1992).</li><li>Nedergaard, M., Gjedde, A., Diemer, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+ischemia+of+the+rat+brain:+autoradiographic+determination+of+cerebral+glucose+utilization,+glucose+content,+and+blood+flow.">Focal ischemia of the rat brain: autoradiographic determination of cerebral glucose utilization, glucose content, and blood flow.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 6, 414-424 (1986).</li><li>Nowicki, J. P., Assumel-Lurdin, C., Duverger, D., MacKenzie, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+evolution+of+regional+energy+metabolism+following+focal+cerebral+ischemia+in+the+rat.">Temporal evolution of regional energy metabolism following focal cerebral ischemia in the rat.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 8, 462-473 (1988).</li><li>Butcher, S. P., Bullock, R., Graham, D. I., McCulloch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+between+amino+acid+release+and+neuropathologic+outcome+in+rat+brain+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Correlation between amino acid release and neuropathologic outcome in rat brain following middle cerebral artery occlusion.</a> Stroke. 21, 1727-1733 (1990).</li><li>Arlicot, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+and+quantification+of+remote+microglial+activation+in+rodent+models+of+focal+ischaemia+using+the+TSPO+radioligand+CLINDE.">Detection and quantification of remote microglial activation in rodent models of focal ischaemia using the TSPO radioligand CLINDE.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 37, 2371-2380 (2010).</li><li>Moyanova, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+for+type+4+metabotropic+glutamate+receptors+against+ischemic+brain+damage.">Protective role for type 4 metabotropic glutamate receptors against ischemic brain damage.</a> J Cereb Blood Flow Metab. , (2010).</li><li>Ortolano, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+imaging+of+new+targets+for+pharmacological+intervention+in+stroke:+real-time+tracking+of+T-cells+in+the+ischaemic+brain.">Advances in imaging of new targets for pharmacological intervention in stroke: real-time tracking of T-cells in the ischaemic brain.</a> Br J Pharmacol. 159, 808-811 (2010).</li><li>O'Neill, M. J., A, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+cerebral+ischemia.">Rodent models of focal cerebral ischemia.</a> Current Protocols in Neuroscience. , 9.6.1-9.6.32 (2000).</li><li>Lin, T. N., He, Y. Y., Wu, G., Khan, M., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+brain+edema+on+infarct+volume+in+a+focal+cerebral+ischemia+model+in+rats.">Effect of brain edema on infarct volume in a focal cerebral ischemia model in rats.</a> Stroke. 24, 117-121 (1993).</li><li>Filiano, A. J., Tucholski, J., Dolan, P. J., Colak, G., Johnson, G. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transglutaminase+2+protects+against+ischemic+stroke.">Transglutaminase 2 protects against ischemic stroke.</a> Neurobiol Dis. 39, 334-343 (2010).</li></ol>

Il metodo di legatura permanente MCA dà volumi infarto altamente riproducibili e un aumento post-operatorio tassi di sopravvivenza rispetto ad altri metodi disponibili. La facilità e la breve durata (~ 30 min) della procedura di renderlo ancora più pratico. Il metodo è ampiamente utilizzato sia in topi e ratti. Questa tecnica richiede un intervento chirurgico invasivo sotto uno stereomicroscopio. Pertanto, l&#39;esperienza nella gestione sotto un microscopio e perfezionare una craniotomi...

<table border="1"><tbody><tr><th> NOME </th><th> SOCIETA &#39;E NUMERO CATALOGO </th></tr><tr><td> Soluzioni e prodotti chimici A. </td><td></td></tr><tr><td> Povidone-iodio soluzione, lavaggio chirurgico </td><td> Aplicare, 82-209 </td></tr><tr><td> 70% di etanolo </td><td> Koptec, V1001 </td></tr><tr><td> 2,3,5 trifeniltetrazolio cloruro (TTC) </td><td> Sigma, T8877 </td></tr><tr><td> 4% paraformaldeide </td><td> Scienze della microscopia elettronica, 159SP </td></tr><tr><td> Tampone fosfato isotonico, pH: 7,4 </td><td> Realizzato e sterilizzati in laboratorio. </td></tr><tr><td> Olio minerale </td><td> PML Microbiologicals, R6570 </td></tr><tr><td> Isofluorane </td><td> La Società Butler, 029405 </td></tr><tr><td> Buprenorfina (0.3mg/ml) </td><td> Hospira, NDC 0409-2012-32 </td></tr><tr><td> Lacrime artificiali </td><td> La Società Butler, 007312 </td></tr><tr><td> Recupero Gel </td><td> Chiaro H 2 O, 72-01-5022 </td></tr><tr><td> B. Materiali e attrezzature chirurgiche </td><td></td></tr><tr><td> C57/BL6 del mouse, 10-12 settimane di età </td><td> La colonia è stato allevato nel vivaio universitario </td></tr><tr><td> 100% bombola di ossigeno </td><td> Airgas </td></tr><tr><td> Anestetico vaporizzatore e misuratore di portata </td><td> Surgivet, Modello 100 </td></tr><tr><td> Pad di riscaldamento con sonda rettale </td><td> Strumenti Scienza bene, TR200 </td></tr><tr><td> Microscopio da dissezione </td><td> Zeiss, Stemi 2000 </td></tr><tr><td> Riscaldamento a pannelli </td><td> Petco Services Ltd. 0307-013 </td></tr><tr><td> Piccola nave Set Cauterizer </td><td> Strumenti Scienza bene, 18000-00 </td></tr><tr><td> Mini pompa peristaltica </td><td> Harvard Apparatus, MPII </td></tr><tr><td> Siringa da 1 ml </td><td> BD, 329650 </td></tr><tr><td> 18G ago </td><td> Becton Dickinson, 305196 </td></tr><tr><td> Chirurgico di sutura in nylon 5,0 </td><td> Ethilon, 698H </td></tr><tr><td> Blocco di sezionamento </td><td> Kent scientifico, 1mm </td></tr><tr><td> Singolo bordo Razor Blades </td><td> Scienze della microscopia elettronica, 71962 </td></tr><tr><td> Etichetta del nastro </td><td> Scienceware, Bel-arte Prodotti F13463-2075 </td></tr><tr><td> Garza Spugne </td><td> Kendall rezza 2252, Johnson e Johnson 6415 </td></tr><tr><td> Suggerimento cotone Applicatori </td><td> Puritana 806-WCL </td></tr><tr><td> C. Strumenti di Chirurgia </td><td></td></tr><tr><td> Forbici chirurgiche Primavera </td><td> Strumenti Scienza multa 15003-08 </td></tr><tr><td> Forcipe Microdissecting angolato </td><td> Strumenti Scienza Belle 5 / 45 </td></tr><tr><td> Pinze Microdissecting curve </td><td> Belle Scienza Strumenti 5 Ti </td></tr><tr><td> Belle forbici dritto </td><td> Strumenti Scienza multa 14568-12 </td></tr><tr><td> Osso curvo pinza ossivora </td><td> Strumenti Scienza multa 16021-14 </td></tr><tr><td> Emostatica Hartman curvo </td><td> Strumenti Scienza multa 13003-10 </td></tr></tbody></table> Tabella 1. L&#39;elenco dei materiali, strumenti e sostanze chimiche usate per la procedura di legatura MCA. Soluzioni e prodotti chimici A., B. Materiali e attrezzature chirurgiche, C. Chirurgia Strumenti.

the application of permanent middle cerebral artery ligation in the mouse

Ischemia cerebrale focale è tra il tipo più comune di ictus osservato nei pazienti. A causa della rilevanza clinica c&#39;è stato un lungo lavoro per sviluppare modelli animali adatti a studiare gli eventi che si svolgono durante l&#39;insulto ischemico. Queste tecniche sono transitori o permanenti, i modelli di ischemia focale o globale usando molti diversi modelli animali, con i roditori più comuni sono. Il metodo di legatura permanente MCA, che viene anche definito come pMCAo in letteratura è ampiamente utilizzato come modello di ischemia focale nei roditori 1-6. Questo metodo è stato originariamente descritto per i ratti da Tamura et al. nel 1981 7. In questo protocollo una craniotomia è stato utilizzato per accedere alla MCA e le regioni prossimali sono state occluse da elettrocoagulazione. Il infarti coinvolgere soprattutto le regioni corticali e striatali volte a seconda della posizione della occlusione. Questa tecnica è ormai ben consolidata e utilizzata in molti laboratori 8-13. L&#39;uso precoce di questa tecnica ha portato alla definizione e descrizione del &quot;core infarto&quot; e &quot;penombra&quot; 14-16, ed è spesso utilizzata per valutare il potenziale neuroprotettivo composti 10, 12, 13, 17. Anche se gli studi iniziali sono stati condotti nel ratto, legatura permanente MCA è stato utilizzato con successo nei topi con lievi modifiche 18-20. Questo modello produce infarti riproducibile e un aumento post-tassi di sopravvivenza. Circa l&#39;80% degli ictus ischemico negli esseri umani avvengono in zona MCA 21 e quindi questo è un modello molto importante per gli studi di ictus. Attualmente, c&#39;è una scarsità di trattamenti efficaci a disposizione dei pazienti colpiti da ictus, e quindi c&#39;è bisogno di buoni modelli per testare potenziali composti farmacologici e valutare i risultati fisiologici. Questo metodo può essere utilizzato anche per studiare i meccanismi intracellulari di risposta all&#39;ipossia in vivo. Qui, vi presentiamo l&#39;intervento legatura MCA in un mouse C57/BL6. Descriviamo la preparazione pre-chirurgica, la chirurgia legatura MCA e 2,3,5 trifeniltetrazolio cloruro (TTC) colorazione per la quantificazione dei volumi di infarto.

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The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

Dell&#39;arteria cerebrale media (MCA) legatura è una tecnica per lo studio ischemia cerebrale focale in modelli animali. In questo metodo, l&#39;arteria cerebrale media è esposta da craniotomia e legato da cauterizzazione. Questo metodo dà volumi infarto altamente riproducibili e un aumento post-operatorio tassi di sopravvivenza rispetto ad altri metodi disponibili.

L&#39;applicazione di permanente legatura dell&#39;arteria cerebrale media nel mouse

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

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Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

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Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

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Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

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Utilizzando una finestra craniale per visualizzare l&#39;arteria cerebrale media Durante endotelina-1 indotta da occlusione dell&#39;arteria cerebrale media

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