Name: the application of permanent middle cerebral artery ligation in the mouse
Uploaded: 2011-07-25T13:00:00
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La técnica quirúrgica fue adquirido originalmente en el laboratorio del doctor William D. Hill, en el Colegio Médico de Georgia. Los autores también desean agradecer al Dr. David A. Rempe y Prifti Landa para el uso de la cámara de disección. Esta investigación fue financiada por el NIH NS041744, NS051279, NS064700 F31 y 30815697D AHA.

Este protocolo fue aprobado por la Universidad de Rochester comité dedicado a la ética del uso de animales en la investigación (UCAR). Técnicas de asepsia deben ser seguidas durante el protocolo. El uso de guantes estériles y mascarilla es necesario. Todos los equipos, materiales, productos químicos y herramientas que se utilizan en el protocolo se describen en la Tabla 1. 1. La preparación pre-quirúrgica <ol><li> Se inyecta por vía subcutánea ratones...

<ol>
	<li>Britton, M., Rafols, J., Alousi, S., Dunbar, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+middle+cerebral+artery+occlusion+on+central+nervous+system+apoptotic+events+in+normal+and+diabetic+rats.">The effects of middle cerebral artery occlusion on central nervous system apoptotic events in normal and diabetic rats.</a> Int J Exp Diabesity Res. 4, 13-20 (2003).</li><li>Ciceri, P., Rabuffetti, M., Monopoli, A., Nicosia, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+leukotrienes+in+a+model+of+focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat.">Production of leukotrienes in a model of focal cerebral ischaemia in the rat.</a> Br J Pharmacol. 133, 1323-1329 (2001).</li><li>Jin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+transplantation+of+human+neural+precursor+cells+improves+outcome+from+focal+cerebral+ischemia+in+aged+rats.">Delayed transplantation of human neural precursor cells improves outcome from focal cerebral ischemia in aged rats.</a> Aging Cell. 9, 1076-1083 (2010).</li><li>McCaig, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+GADD34+expression+after+focal+cerebral+ischaemia.">Evolution of GADD34 expression after focal cerebral ischaemia.</a> Brain Res. 1034, 51-61 (2005).</li><li>Shirotani, T., Shima, K., Chigasaki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+studies+of+extracellular+metabolites+in+the+striatum+after+distal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+stroke-prone+spontaneously+hypertensive+rats.">In vivo studies of extracellular metabolites in the striatum after distal middle cerebral artery occlusion in stroke-prone spontaneously hypertensive rats.</a> Stroke. 26, 878-884 (1995).</li><li>Wu, Y. P., Tan, C. K., Ling, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+Fos-like+immunoreactivity+in+the+brain+and+spinal+cord+of+rats+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Expression of Fos-like immunoreactivity in the brain and spinal cord of rats following middle cerebral artery occlusion.</a> Exp Brain Res. 115, 129-136 (1997).</li><li>Tamura, A., Graham, D. I., McCulloch, J., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat:+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Focal cerebral ischaemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 1, 53-60 (1981).</li><li>Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+middle+cerebral+artery+occlusion:+evaluation+of+the+model+and+development+of+a+neurologic+examination.">Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination.</a> Stroke. 17, 472-476 (1986).</li><li>Carswell, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+and+gender+influences+on+sensitivity+to+focal+cerebral+ischemia+in+the+stroke-prone+spontaneously+hypertensive+rat.">Genetic and gender influences on sensitivity to focal cerebral ischemia in the stroke-prone spontaneously hypertensive rat.</a> Hypertension. 33, 681-685 (1999).</li><li>Mary, V., Wahl, F., Uzan, A., Stutzmann, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enoxaparin+in+experimental+stroke:+neuroprotection+and+therapeutic+window+of+opportunity.">Enoxaparin in experimental stroke: neuroprotection and therapeutic window of opportunity.</a> Stroke. 32, 993-999 (2001).</li><li>Menzies, S. A., Hoff, J. T., Betz, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats:+a+neurological+and+pathological+evaluation+of+a+reproducible+model.">Middle cerebral artery occlusion in rats: a neurological and pathological evaluation of a reproducible model.</a> Neurosurgery. 31, 100-107 (1992).</li><li>Iaci, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+growth+factor+2+promotes+functional+recovery+with+treatment+initiated+up+to+7+days+after+permanent+focal+ischemic+stroke.">Glial growth factor 2 promotes functional recovery with treatment initiated up to 7 days after permanent focal ischemic stroke.</a> Neuropharmacology. 59, 640-649 (2010).</li><li>Richard, M. J. P., Khan, B. V. C. B. J., Saleh, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+mechanisms+by+which+lipoic+acid+confers+protection+during+the+early+stages+of+cerebral+ischemia:+A+possible+role+for+calcium.">Cellular mechanisms by which lipoic acid confers protection during the early stages of cerebral ischemia: A possible role for calcium.</a> Neuroscience Research. , (2011).</li><li>Heiss, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+derangement+of+periinfarct+viable+tissue+in+ischemic+stroke.">Progressive derangement of periinfarct viable tissue in ischemic stroke.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 12, 193-203 (1992).</li><li>Nedergaard, M., Gjedde, A., Diemer, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+ischemia+of+the+rat+brain:+autoradiographic+determination+of+cerebral+glucose+utilization,+glucose+content,+and+blood+flow.">Focal ischemia of the rat brain: autoradiographic determination of cerebral glucose utilization, glucose content, and blood flow.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 6, 414-424 (1986).</li><li>Nowicki, J. P., Assumel-Lurdin, C., Duverger, D., MacKenzie, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+evolution+of+regional+energy+metabolism+following+focal+cerebral+ischemia+in+the+rat.">Temporal evolution of regional energy metabolism following focal cerebral ischemia in the rat.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 8, 462-473 (1988).</li><li>Butcher, S. P., Bullock, R., Graham, D. I., McCulloch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+between+amino+acid+release+and+neuropathologic+outcome+in+rat+brain+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Correlation between amino acid release and neuropathologic outcome in rat brain following middle cerebral artery occlusion.</a> Stroke. 21, 1727-1733 (1990).</li><li>Arlicot, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+and+quantification+of+remote+microglial+activation+in+rodent+models+of+focal+ischaemia+using+the+TSPO+radioligand+CLINDE.">Detection and quantification of remote microglial activation in rodent models of focal ischaemia using the TSPO radioligand CLINDE.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 37, 2371-2380 (2010).</li><li>Moyanova, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+for+type+4+metabotropic+glutamate+receptors+against+ischemic+brain+damage.">Protective role for type 4 metabotropic glutamate receptors against ischemic brain damage.</a> J Cereb Blood Flow Metab. , (2010).</li><li>Ortolano, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+imaging+of+new+targets+for+pharmacological+intervention+in+stroke:+real-time+tracking+of+T-cells+in+the+ischaemic+brain.">Advances in imaging of new targets for pharmacological intervention in stroke: real-time tracking of T-cells in the ischaemic brain.</a> Br J Pharmacol. 159, 808-811 (2010).</li><li>O'Neill, M. J., A, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+cerebral+ischemia.">Rodent models of focal cerebral ischemia.</a> Current Protocols in Neuroscience. , 9.6.1-9.6.32 (2000).</li><li>Lin, T. N., He, Y. Y., Wu, G., Khan, M., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+brain+edema+on+infarct+volume+in+a+focal+cerebral+ischemia+model+in+rats.">Effect of brain edema on infarct volume in a focal cerebral ischemia model in rats.</a> Stroke. 24, 117-121 (1993).</li><li>Filiano, A. J., Tucholski, J., Dolan, P. J., Colak, G., Johnson, G. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transglutaminase+2+protects+against+ischemic+stroke.">Transglutaminase 2 protects against ischemic stroke.</a> Neurobiol Dis. 39, 334-343 (2010).</li></ol>

El método permanente MCA ligadura da volumen del infarto altamente reproducible y el aumento de post-operatorio las tasas de supervivencia en comparación con otros métodos disponibles. La facilidad y la corta duración (~ 30 min) del procedimiento que sea aún más práctico. El método es ampliamente utilizado tanto en ratones y ratas. Esta técnica requiere una cirugía invasiva bajo un microscopio estereoscópico. Por lo tanto, la experiencia en la operación bajo el microscopio y el p...

<table border="1"><tbody><tr><th> NOMBRE </th><th> Empresa y el número CATÁLOGO </th></tr><tr><td> A. Soluciones y Productos Químicos </td><td></td></tr><tr><td> Solución de povidona yodada, el lavado quirúrgico </td><td> Aplicare, 82-209 </td></tr><tr><td> 70% de etanol </td><td> Koptec, V1001 </td></tr><tr><td> 2,3,5 cloruro de trifenil tetrazolio (TTC) </td><td> Sigma, T8877 </td></tr><tr><td> Paraformaldehído al 4% </td><td> Microscopía electrónica de Ciencias, 159SP </td></tr><tr><td> Tampón fosfato pH Saline,: 7.4 </td><td> Hecho y se esterilizan en el laboratorio. </td></tr><tr><td> Aceite mineral </td><td> PML microbiológicos, R6570 </td></tr><tr><td> Isofluorano </td><td> La Compañía Butler, 029405 </td></tr><tr><td> La buprenorfina (0.3mg/ml) </td><td> Hospira, NDC 0409-2012-32 </td></tr><tr><td> Las lágrimas artificiales </td><td> La Compañía Butler, 007312 </td></tr><tr><td> Recuperación de Gel </td><td> Claro H 2 O, 72-01-5022 </td></tr><tr><td> B. Materiales y equipo quirúrgico </td><td></td></tr><tr><td> C57/BL6 ratón, 10-12 semanas de edad </td><td> La colonia fue criado en el vivero universitario </td></tr><tr><td> 100% tanque de oxígeno </td><td> Airgas </td></tr><tr><td> Vaporizador anestésico y un medidor de flujo </td><td> Surgivet, Modelo 100 </td></tr><tr><td> Almohadilla eléctrica con sonda rectal </td><td> Herramientas de Bellas Ciencia, TR200 </td></tr><tr><td> Microscopio de disección </td><td> Zeiss, Stemi 2000 </td></tr><tr><td> Calefacción de </td><td> Petco Services Ltd. 0307-013 </td></tr><tr><td> Embarcación pequeña Set cauterizador </td><td> Herramientas de Bellas Ciencia, 18000-00 </td></tr><tr><td> Mini bomba peristáltica </td><td> Harvard Apparatus, GP II </td></tr><tr><td> 1 ml jeringa </td><td> BD, 329650 </td></tr><tr><td> 18G aguja </td><td> Becton Dickinson, 305196 </td></tr><tr><td> Quirúrgico 5,0 sutura de nylon </td><td> Ethilon, 698H </td></tr><tr><td> Bloque de seccionamiento </td><td> Kent Científico, 1mm </td></tr><tr><td> Hojas de un solo filo de la navaja </td><td> Microscopía electrónica de Ciencias, 71962 </td></tr><tr><td> Etiqueta de la cinta </td><td> Scienceware, Bel-Art Productos F13463-2075 </td></tr><tr><td> Esponjas de gasa </td><td> Kendall Curity 2252, Johnson y Johnson 6415 </td></tr><tr><td> Aplicadores con punta de algodón </td><td> Puritana 806-CMT </td></tr><tr><td> C. Cirugía Herramientas </td><td></td></tr><tr><td> Tijeras quirúrgicas primavera </td><td> Herramientas de Bellas Ciencia 15003-08 </td></tr><tr><td> Pinza en ángulo Microdissecting </td><td> Herramientas de Bellas Ciencia 5 / 45 </td></tr><tr><td> Pinzas curvas Microdissecting </td><td> Bellas Ciencia Herramientas 5 Ti </td></tr><tr><td> Bellas tijeras rectas </td><td> Herramientas de Bellas Ciencia 14568-12 </td></tr><tr><td> Gubia hueso curvo </td><td> Herramientas de Bellas Ciencia 16021-14 </td></tr><tr><td> Pinzas hemostáticas curvas Hartman </td><td> Herramientas de Bellas Ciencia 13003-10 </td></tr></tbody></table> Tabla 1. La lista de materiales, herramientas y productos químicos utilizados para el procedimiento de ligadura de MCA. A. Las soluciones y productos químicos, materiales quirúrgicos y B. Equipos, Herramientas C. Cirugía.

the application of permanent middle cerebral artery ligation in the mouse

Isquemia cerebral focal se encuentra entre el tipo más común de accidente cerebrovascular en los pacientes. Debido a la importancia clínica no ha habido un esfuerzo prolongado para desarrollar modelos animales para estudiar los acontecimientos que se desarrollan durante la lesión isquémica. Estas técnicas incluyen transitoria o permanente, los modelos de isquemia focal o global con muchos diferentes modelos animales, con los roedores más comunes son. El método permanente MCA ligadura que también se conoce como pMCAo en la literatura se utiliza ampliamente como un modelo de isquemia focal en los roedores 1-6. Este método fue descrito originalmente para las ratas por Tamura et al. en 1981 7. En este protocolo se utilizó una craneotomía para acceder a la MCA y de las regiones proximal se ocluye por electrocoagulación. Los infartos a regiones corticales y sobre todo del estriado a veces dependiendo de la localización de la oclusión. Esta técnica está bien establecido y utilizado en muchos laboratorios de 8.13. El uso precoz de esta técnica condujo a la definición y descripción del &quot;núcleo del infarto&quot; y &quot;penumbra&quot;, 14-16, y es a menudo utilizado para evaluar el potencial de compuestos neuroprotectores 10, 12, 13, 17. Aunque los estudios iniciales se realizaron en ratas, la ligadura permanente MCA ha sido utilizado con éxito en ratones con ligeras modificaciones, 18-20. Este modelo produce infartos reproducible y el aumento de las tasas de supervivencia después. Aproximadamente el 80% de los accidentes cerebrovasculares isquémicos en los humanos ocurren en el área de MCA 21 y por lo tanto este es un modelo muy importante para los estudios de tiempos. En la actualidad, hay una escasez de tratamientos eficaces para los pacientes con ictus, y por lo tanto hay una necesidad de un buen modelo para evaluar el potencial compuestos farmacológicos y evaluar los resultados fisiológicos. Este método también puede ser utilizado para el estudio de los mecanismos de respuesta a la hipoxia intracelular in vivo. A continuación, presentamos la cirugía de ligadura de MCA en un ratón C57/BL6. Se describe la preparación pre-quirúrgica, la cirugía de ligadura de MCA y 2,3,5 cloruro de trifenil tetrazolio (TTC) tinción para la cuantificación de los volúmenes de infarto.

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The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

La arteria cerebral media (MCA) ligadura es una técnica para estudiar la isquemia cerebral focal en modelos animales. En este método, la arteria cerebral media se expone mediante craneotomía y se liga con cauterización. Este método da volumen del infarto altamente reproducible y el aumento de post-operatorio las tasas de supervivencia en comparación con otros métodos disponibles.

La aplicación de la Permanente Ligadura arteria cerebral media en el ratón

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Modelado de accidente cerebrovascular en ratones - Oclusión arteria cerebral media con el modelo de filamento

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Investigación

Medicina

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Modelo de ratón de la oclusión arteria cerebral media

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

Utilizando una ventana craneal para visualizar la arteria cerebral media Durante la endotelina-1 inducida por oclusión de la arteria cerebral media

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

Sistema optimizado para la monitorización de la perfusión cerebral en el modelo de rata de Carrera intraluminal oclusión arteria cerebral media

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Permanente oclusión vascular cerebral<em&gt; Vía</em&gt; Ligadura doble y transección

Stroke is a leading cause of death, disability, and socioeconomic loss worldwide. The majority of all strokes result from an interruption in blood flow ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Carrera Modelado en ratones: Coagulación permanente de la arteria cerebral media Distal

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Arteria embólico cerebral media oclusión (MCAO) para el ictus isquémico con homólogas coágulos de sangre en las ratas

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

La ligadura permanente de la arteria coronaria descendente anterior en ratones: un modelo de remodelación post infarto de miocardio e insuficiencia cardiaca

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Realización Permanente distal cerebral media carótida común con oclusión de la arteria en ratas de edad avanzada para el Estudio de la isquemia cortical con sostenida de la discapacidad

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

Surgical Approach for Middle Cerebral Artery Occlusion and Reperfusion Induced Stroke in Mice

Técnica quirúrgica para la oclusión de la arteria cerebral media y la reperfusión del movimiento inducidos en ratones

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ...