Name: the application of permanent middle cerebral artery ligation in the mouse
Uploaded: 2011-07-25T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse at JoVE.com

Den kirurgiska tekniken ursprungligen förvärvades i labbet av Dr William D. Hill vid Medical College of Georgia. Författarna vill också tacka Dr David A. Rempe och Landa Prifti för användning av dissekering kameran. Denna forskning stöds av NIH NS041744, NS051279, F31 NS064700 och AHA 30815697D.

Detta protokoll godkändes av University of Rochester kommitté ägnas åt etiska användningen av djur i forskning (UCAR). Aseptisk teknik bör följas under protokollet. Användning av sterila handskar och en mask krävs. All utrustning, material, kemikalier och verktyg som används under protokollet beskrivs i tabell 1. 1. Pre-kirurgisk förberedelse <ol><li> Injicera möss subkutant med buprenorfin (0,05 mg) 2 timmar före operation, direkt efter operatione...

<ol>
	<li>Britton, M., Rafols, J., Alousi, S., Dunbar, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+middle+cerebral+artery+occlusion+on+central+nervous+system+apoptotic+events+in+normal+and+diabetic+rats.">The effects of middle cerebral artery occlusion on central nervous system apoptotic events in normal and diabetic rats.</a> Int J Exp Diabesity Res. 4, 13-20 (2003).</li><li>Ciceri, P., Rabuffetti, M., Monopoli, A., Nicosia, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+leukotrienes+in+a+model+of+focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat.">Production of leukotrienes in a model of focal cerebral ischaemia in the rat.</a> Br J Pharmacol. 133, 1323-1329 (2001).</li><li>Jin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+transplantation+of+human+neural+precursor+cells+improves+outcome+from+focal+cerebral+ischemia+in+aged+rats.">Delayed transplantation of human neural precursor cells improves outcome from focal cerebral ischemia in aged rats.</a> Aging Cell. 9, 1076-1083 (2010).</li><li>McCaig, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+GADD34+expression+after+focal+cerebral+ischaemia.">Evolution of GADD34 expression after focal cerebral ischaemia.</a> Brain Res. 1034, 51-61 (2005).</li><li>Shirotani, T., Shima, K., Chigasaki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+studies+of+extracellular+metabolites+in+the+striatum+after+distal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+stroke-prone+spontaneously+hypertensive+rats.">In vivo studies of extracellular metabolites in the striatum after distal middle cerebral artery occlusion in stroke-prone spontaneously hypertensive rats.</a> Stroke. 26, 878-884 (1995).</li><li>Wu, Y. P., Tan, C. K., Ling, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+Fos-like+immunoreactivity+in+the+brain+and+spinal+cord+of+rats+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Expression of Fos-like immunoreactivity in the brain and spinal cord of rats following middle cerebral artery occlusion.</a> Exp Brain Res. 115, 129-136 (1997).</li><li>Tamura, A., Graham, D. I., McCulloch, J., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat:+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Focal cerebral ischaemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 1, 53-60 (1981).</li><li>Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+middle+cerebral+artery+occlusion:+evaluation+of+the+model+and+development+of+a+neurologic+examination.">Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination.</a> Stroke. 17, 472-476 (1986).</li><li>Carswell, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+and+gender+influences+on+sensitivity+to+focal+cerebral+ischemia+in+the+stroke-prone+spontaneously+hypertensive+rat.">Genetic and gender influences on sensitivity to focal cerebral ischemia in the stroke-prone spontaneously hypertensive rat.</a> Hypertension. 33, 681-685 (1999).</li><li>Mary, V., Wahl, F., Uzan, A., Stutzmann, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enoxaparin+in+experimental+stroke:+neuroprotection+and+therapeutic+window+of+opportunity.">Enoxaparin in experimental stroke: neuroprotection and therapeutic window of opportunity.</a> Stroke. 32, 993-999 (2001).</li><li>Menzies, S. A., Hoff, J. T., Betz, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats:+a+neurological+and+pathological+evaluation+of+a+reproducible+model.">Middle cerebral artery occlusion in rats: a neurological and pathological evaluation of a reproducible model.</a> Neurosurgery. 31, 100-107 (1992).</li><li>Iaci, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+growth+factor+2+promotes+functional+recovery+with+treatment+initiated+up+to+7+days+after+permanent+focal+ischemic+stroke.">Glial growth factor 2 promotes functional recovery with treatment initiated up to 7 days after permanent focal ischemic stroke.</a> Neuropharmacology. 59, 640-649 (2010).</li><li>Richard, M. J. P., Khan, B. V. C. B. J., Saleh, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+mechanisms+by+which+lipoic+acid+confers+protection+during+the+early+stages+of+cerebral+ischemia:+A+possible+role+for+calcium.">Cellular mechanisms by which lipoic acid confers protection during the early stages of cerebral ischemia: A possible role for calcium.</a> Neuroscience Research. , (2011).</li><li>Heiss, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+derangement+of+periinfarct+viable+tissue+in+ischemic+stroke.">Progressive derangement of periinfarct viable tissue in ischemic stroke.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 12, 193-203 (1992).</li><li>Nedergaard, M., Gjedde, A., Diemer, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+ischemia+of+the+rat+brain:+autoradiographic+determination+of+cerebral+glucose+utilization,+glucose+content,+and+blood+flow.">Focal ischemia of the rat brain: autoradiographic determination of cerebral glucose utilization, glucose content, and blood flow.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 6, 414-424 (1986).</li><li>Nowicki, J. P., Assumel-Lurdin, C., Duverger, D., MacKenzie, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+evolution+of+regional+energy+metabolism+following+focal+cerebral+ischemia+in+the+rat.">Temporal evolution of regional energy metabolism following focal cerebral ischemia in the rat.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 8, 462-473 (1988).</li><li>Butcher, S. P., Bullock, R., Graham, D. I., McCulloch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+between+amino+acid+release+and+neuropathologic+outcome+in+rat+brain+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Correlation between amino acid release and neuropathologic outcome in rat brain following middle cerebral artery occlusion.</a> Stroke. 21, 1727-1733 (1990).</li><li>Arlicot, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+and+quantification+of+remote+microglial+activation+in+rodent+models+of+focal+ischaemia+using+the+TSPO+radioligand+CLINDE.">Detection and quantification of remote microglial activation in rodent models of focal ischaemia using the TSPO radioligand CLINDE.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 37, 2371-2380 (2010).</li><li>Moyanova, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+for+type+4+metabotropic+glutamate+receptors+against+ischemic+brain+damage.">Protective role for type 4 metabotropic glutamate receptors against ischemic brain damage.</a> J Cereb Blood Flow Metab. , (2010).</li><li>Ortolano, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+imaging+of+new+targets+for+pharmacological+intervention+in+stroke:+real-time+tracking+of+T-cells+in+the+ischaemic+brain.">Advances in imaging of new targets for pharmacological intervention in stroke: real-time tracking of T-cells in the ischaemic brain.</a> Br J Pharmacol. 159, 808-811 (2010).</li><li>O'Neill, M. J., A, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+cerebral+ischemia.">Rodent models of focal cerebral ischemia.</a> Current Protocols in Neuroscience. , 9.6.1-9.6.32 (2000).</li><li>Lin, T. N., He, Y. Y., Wu, G., Khan, M., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+brain+edema+on+infarct+volume+in+a+focal+cerebral+ischemia+model+in+rats.">Effect of brain edema on infarct volume in a focal cerebral ischemia model in rats.</a> Stroke. 24, 117-121 (1993).</li><li>Filiano, A. J., Tucholski, J., Dolan, P. J., Colak, G., Johnson, G. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transglutaminase+2+protects+against+ischemic+stroke.">Transglutaminase 2 protects against ischemic stroke.</a> Neurobiol Dis. 39, 334-343 (2010).</li></ol>

Den permanenta MCA ligation metod ger mycket reproducerbar infarkt volymer och ökad postoperativ överlevnad jämfört med andra tillgängliga metoder. Enkelheten och den korta tid (~ 30 min) av förfarandet göra det ännu mer praktiskt. Metoden används flitigt i både möss och råttor. Denna teknik kräver en invasiv kirurgi under ett stereomikroskop. Därför är erfarenhet från drift under ett mikroskop och finslipa en lyckad kraniotomi viktigt. Det är bäst att etablera konsekventa...

<table border="1"><tbody><tr><th> NAMN </th><th> FÖRETAG OCH Katalognummer </th></tr><tr><td> A. Lösningar och kemikalier </td><td></td></tr><tr><td> Povidon-jodlösning, Kirurgiska Scrub </td><td> Aplicare, 82-209 </td></tr><tr><td> 70% etanol </td><td> Koptec, V1001 </td></tr><tr><td> 2,3,5 Triphenyltetrazolium klorid (TTC) </td><td> Sigma, T8877 </td></tr><tr><td> 4% Paraformaldehyd </td><td> Elektronmikroskopi vetenskaper, 159SP </td></tr><tr><td> Fosfatbuffrad saltlösning, pH: 7,4 </td><td> Tillverkad och steriliseras i labbet. </td></tr><tr><td> Mineralolja </td><td> PML Microbiologicals, R6570 </td></tr><tr><td> Isofluorane </td><td> Butler Company, 029.405 </td></tr><tr><td> Buprenorfin (0.3mg/ml) </td><td> Hospira, NDC 0409-2012-32 </td></tr><tr><td> Artificiella tårar </td><td> Butler Company, 007.312 </td></tr><tr><td> Recovery Gel </td><td> Rensa H 2 O, 72-01-5022 </td></tr><tr><td> B. Kirurgisk Material och Utrustning </td><td></td></tr><tr><td> C57/BL6 mus, 10-12 veckor gamla </td><td> Kolonin var uppfödd i universitetsstaden vivarium </td></tr><tr><td> 100% syrgas tank </td><td> Airgas </td></tr><tr><td> Narkos Vaporizer och Flödesmätare </td><td> Surgivet, modell 100 </td></tr><tr><td> Värmedyna med rektalsond </td><td> Fine Science Tools, TR200 </td></tr><tr><td> Analysera mikroskop </td><td> Zeiss, STEMI 2000 </td></tr><tr><td> Värmepanel </td><td> Petco Services Ltd 0307-013 </td></tr><tr><td> Små fartyg Cauterizer Set </td><td> Fine Science Tools, 18.000-00 </td></tr><tr><td> Mini Slangpumpar </td><td> Harvard Apparatur, MPII </td></tr><tr><td> 1 ml spruta </td><td> BD, 329.650 </td></tr><tr><td> 18G nål </td><td> Becton Dickinson, 305.196 </td></tr><tr><td> Surgical 5,0 Nylon Suture </td><td> Ethilon, 698H </td></tr><tr><td> Sektionering Block </td><td> Kent Vetenskapliga, 1mm </td></tr><tr><td> Single Edge rakblad </td><td> Elektronmikroskopi vetenskaper, 71.962 </td></tr><tr><td> Etikettejp </td><td> Scienceware, Bel-art produkter F13463-2075 </td></tr><tr><td> Slingervävnader Svampar </td><td> Kendall Trygghet 2252, Johnson och Johnson 6415 </td></tr><tr><td> Bomull Tips applikatorer </td><td> Puritanska 806-WCL </td></tr><tr><td> C. Kirurgi Verktyg </td><td></td></tr><tr><td> Kirurgiska våren Saxar </td><td> Fine Science Tools 15.003-08 </td></tr><tr><td> Microdissecting tång vinklad </td><td> Fine Science Tools 5 / 45 </td></tr><tr><td> Microdissecting pincett böjda </td><td> Fine Science Tools 5 Ti </td></tr><tr><td> Fin rak sax </td><td> Fine Science Tools 14.568-12 </td></tr><tr><td> Böjda ben rongeur </td><td> Fine Science Tools 16.021-14 </td></tr><tr><td> Hartman Hemostat Böjd </td><td> Fine Science Tools 13.003-10 </td></tr></tbody></table> Tabell 1. Listan över material, verktyg och kemikalier som används för MCA ligering förfarande. A. lösningar och kemikalier, B. Kirurgisk materiel och utrustning, C. Kirurgi Tools.

the application of permanent middle cerebral artery ligation in the mouse

Fokal cerebral ischemi är bland de vanligaste typen av stroke hos patienter. På grund av den kliniska betydelsen det har varit en långvarig insats för att utveckla lämpliga djurmodeller för att studera de händelser som utvecklas under ischemisk förolämpning. Dessa tekniker inkluderar övergående eller permanent, fokal eller global ischemi modeller med hjälp av många olika djurmodeller, med de vanligaste är gnagare. Den permanenta MCA ligation metod som också är kallad pMCAo i litteraturen används i stor utsträckning som en central ischemi modell i gnagare 1-6. Denna metod beskrevs för råttor av Tamura et al. 1981 7. I detta protokoll ett kraniotomi användes för att få tillgång till MCA och den proximala regionerna blockerad av electrocoagulation. Den infarkter innebär oftast kortikal och ibland striatala regioner beroende på var i ocklusion. Denna teknik är nu väl etablerad och används i många laboratorier 8-13. Tidig användning av denna teknik har lett till definition och beskrivning av &quot;infarkt kärna&quot; och &quot;Penumbra&quot; 14-16, och det är ofta används för att utvärdera potentiella nervskyddande föreningar 10, 12, 13, 17. Även om de inledande studierna utfördes på råttor, har permanent MCA ligation använts framgångsrikt i möss med smärre ändringar 18-20. Denna modell ger reproducerbara infarkter och ökade efter överlevnad. Ungefär 80% av ischemisk stroke hos människor hända i MCA området 21 och därmed detta är en mycket relevant modell för stroke studier. För närvarande finns det en brist på effektiva behandlingar tillgängliga för strokepatienter, och det finns därför ett behov av bra modeller för att testa eventuella farmakologiska substanser och utvärdera fysiologiska resultat. Denna metod kan också användas för att studera intracellulära mekanismer hypoxi svar in vivo. Här presenterar vi MCA ligation operation i ett C57/BL6 mus. Vi beskriver före kirurgisk förberedelse, MCA ligation kirurgi och 2,3,5 Triphenyltetrazolium klorid (TTC) färgning för kvantifiering av infarkt volymer.

Watch this Scientific Journal Video about The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse at JoVE.com

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

Middle cerebral artär (MCA) ligatur är en teknik för att studera fokal cerebral ischemi i djurmodeller. I denna metod är den mellersta cerebral artär exponeras genom kraniotomi och knyts ihop med kauterisation. Denna metod ger mycket reproducerbar infarkt volymer och ökad postoperativ överlevnad jämfört med andra tillgängliga metoder.

Tillämpningen av permanenta Mellanöstern Cerebral Artery Ligation i musen

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Modellering stroke hos möss - Middle Cerebral artärocklusion med glödlamporna modell

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Musmodell av Middle Cerebral artärocklusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

Använda en Kranial fönster för att visualisera den mellersta cerebrala artären under Endotelin-1 inducerad Middle cerebral artärocklusion

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

Optimerat system för cerebral perfusion övervakning i råtta Stroke Modell av Intraluminal Middle cerebral artärocklusion

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Permanent Cerebral kärlocklusion<em&gt; Via</em&gt; Dubbel Ligature och transektion

Stroke is a leading cause of death, disability, and socioeconomic loss worldwide. The majority of all strokes result from an interruption in blood flow ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Modellering stroke hos möss: Permanent Koagulation av den distala Middle Cerebral Artery

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Emboli Middle Cerebral artärocklusion (kortex) för ischemisk stroke med Homologa Blodproppar i råttor

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Permanent Ligering av vänster främre Fallande Kranskärls hos möss: En modell av efter hjärtinfarkt Remodelling och hjärtsvikt

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Utföra ständiga Distal Middle Cerebral med gemensamma hals artärocklusion i åldrade råttor för att studera kortikal ischemi med fördröjd funktionshinder

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

Surgical Approach for Middle Cerebral Artery Occlusion and Reperfusion Induced Stroke in Mice

Kirurgisk metod för Middle Cerebral artärocklusion och reperfusion inducerad Stroke hos möss

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ...