עבודה זו מומנה על ידי המכונים הלאומיים לבריאות מענק GM086822, מקווה לב מכון פרס יסוד מדעי, ואת מרדוק MJ מחקר הצדקה אמון מכללת התוכנית למדע. בחר ריאגנטים אלקטרופורזה וניתוח תוכנה תמונה סופקו בנדיבות על ידי Bio-Rad.

1. הכנת cytosol התא המכיל GR פונקציונלי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הערה טכנית: חוצצי כל צריך להיות בקירור כל צעד של פרוטוקול זה, לרבות centrifugations ו הדגירה, צריכה להתבצע על הקרח או 4 ° C, אלא אם צוין אחרת. הטמפרטורה הנמוכה היא חיונית כדי למנוע השפלה של מתחמי...

<ol>
	<li>Pratt, W. B., Toft, D. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+signaling+protein+function+and+trafficking+by+the+hsp90/hsp70-based+chaperone+machinery.">Regulation of signaling protein function and trafficking by the hsp90/hsp70-based chaperone machinery.</a> Exp. Biol. Med. 228, 111-133 (2003).</li><li>Murphy, P. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+glucocorticoid+receptor+steroid+binding+and+trafficking+by+the+hsp90/hsp70-based+chaperone+machinery:+implications+for+clinical+intervention.">Regulation of glucocorticoid receptor steroid binding and trafficking by the hsp90/hsp70-based chaperone machinery: implications for clinical intervention.</a> Leukemia. 19, 710-712 (2005).</li><li>Pratt, W. B., Morishima, Y., Osawa, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Hsp90+chaperone+machinery+regulates+signaling+by+modulating+ligand+binding+clefts.">The Hsp90 chaperone machinery regulates signaling by modulating ligand binding clefts.</a> J. Biol. Chem. 283, 22885-22889 (2008).</li><li>Dittmar, K. D., Hutchison, K. A., Owens-Grillo, J. K., Pratt, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstitution+of+the+steroid+receptor&#149;hsp90+heterocomplex+assembly+system+of+rabbit+reticulocyte+lysate.">Reconstitution of the steroid receptor&#149;hsp90 heterocomplex assembly system of rabbit reticulocyte lysate.</a> J. Biol. Chem. 271, 12833-12839 (1996).</li><li>Morishima, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Hsp+organizer+protein+hop+enhances+the+rate+of+but+is+not+essential+for+glucocorticoid+receptor+folding+by+the+multiprotein+Hsp90-based+chaperone+system.">The Hsp organizer protein hop enhances the rate of but is not essential for glucocorticoid receptor folding by the multiprotein Hsp90-based chaperone system.</a> J. Biol. Chem. 275, 6894-6900 (2000).</li><li>Murphy, P. J. M., Kanelakis, K. C., Galigniana, M. D., Morishima, Y., Pratt, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stoichiometry,+abundance,+and+functional+significance+of+the+hsp90/hsp70-based+multiprotein+chaperone+machinery+in+reticulocyte+lysate.">Stoichiometry, abundance, and functional significance of the hsp90/hsp70-based multiprotein chaperone machinery in reticulocyte lysate.</a> J. Biol. Chem. 276, 30092-30098 (2001).</li><li>Dittmar, K. D., Pratt, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Folding+of+the+glucocorticoid+receptor+by+the+reconstituted+Hsp90-based+chaperone+machinery.+The+initial+hsp90.p60.hsp70-dependent+step+is+sufficient+for+creating+the+steroid+binding+conformation.">Folding of the glucocorticoid receptor by the reconstituted Hsp90-based chaperone machinery. The initial hsp90.p60.hsp70-dependent step is sufficient for creating the steroid binding conformation.</a> J. Biol. Chem. 272, 13047-13054 (1997).</li><li>Kanelakis, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+the+hsp70-binding+protein+BAG-1+on+glucocorticoid+receptor+folding+by+the+hsp90-based+chaperone+machinery.">Differential effects of the hsp70-binding protein BAG-1 on glucocorticoid receptor folding by the hsp90-based chaperone machinery.</a> J. Biol. Chem. 274, 34134-34140 (1999).</li><li>Morishima, Y., Kanelakis, K. C., Murphy, P. J. M., Shewach, D. S., Pratt, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+iterative+ratcheting+of+receptor-bound+hsp70+between+its+ATP+and+ADP+conformations+during+assembly+of+glucocorticoid+receptor.hsp90+heterocomplexes.">Evidence for iterative ratcheting of receptor-bound hsp70 between its ATP and ADP conformations during assembly of glucocorticoid receptor.hsp90 heterocomplexes.</a> Biochemistry. 40, 1109-1116 (2001).</li><li>Murphy, P. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pifithrin-alpha+inhibits+p53+signaling+after+interaction+of+the+tumor+suppressor+protein+with+hsp90+and+its+nuclear+translocation.">Pifithrin-alpha inhibits p53 signaling after interaction of the tumor suppressor protein with hsp90 and its nuclear translocation.</a> J. Biol. Chem. 279, 30195-30201 (2004).</li><li>Murphy, P. J. M., Morishima, Y., Kovacs, J. J., Yao, T. P., Pratt, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+the+dynamics+of+hsp90+action+on+the+glucocorticoid+receptor+by+acetylation/deacetylation+of+the+chaperone.">Regulation of the dynamics of hsp90 action on the glucocorticoid receptor by acetylation/deacetylation of the chaperone.</a> J. Biol. Chem. 280, 33792-33799 (2005).</li><li>Morishima, Y., Murphy, P. J. M., Li, D. P., Sanchez, E. R., Pratt, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stepwise+assembly+of+a+glucocorticoid+receptor&#149;hsp90+heterocomplex+resolves+two+sequential+ATP-dependent+events+involving+first+hsp70+and+then+hsp90+in+opening+of+the+steroid+binding+pocket.">Stepwise assembly of a glucocorticoid receptor&#149;hsp90 heterocomplex resolves two sequential ATP-dependent events involving first hsp70 and then hsp90 in opening of the steroid binding pocket.</a> J. Biol. Chem. 275, 18054-18060 (2000).</li><li>Pratt, W. B., Toft, D. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Steroid+receptor+interactions+with+heat+shock+protein+and+immunophilin+chaperones.">Steroid receptor interactions with heat shock protein and immunophilin chaperones.</a> Endocr. Rev. 18, 306-360 (1997).</li><li>Bodwell, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+phosphorylated+sites+in+the+mouse+glucocorticoid+receptor.">Identification of phosphorylated sites in the mouse glucocorticoid receptor.</a> J. Biol. Chem. 266, 7549-7555 (1991).</li><li>Penna, A., Cahalan, M. W. e. s. t. e. r. n. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blotting+using+the+Invitrogen+NuPage+Novex+Bis+Tris+minigels.">Blotting using the Invitrogen NuPage Novex Bis Tris minigels.</a> J. Vis. Exp. (7), e264-e264 (2007).</li><li>Choo, Y. S., Zhang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+Protein+Ubiquitination.">Detection of Protein Ubiquitination.</a> J. Vis. Exp. (30), e1293-e1293 (2009).</li><li>Murphy, P. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+and+mechanism+of+assembly+of+a+glucocorticoid+receptor&amp;bull;Hsp70+complex+that+is+primed+for+subsequent+Hsp90-dependent+opening+of+the+steroid+binding+cleft.">Visualization and mechanism of assembly of a glucocorticoid receptor&amp;bull;Hsp70 complex that is primed for subsequent Hsp90-dependent opening of the steroid binding cleft.</a> J. Biol. Chem. 278, 34764-34773 (2003).</li><li>Schrum, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-sensitivity+detection+and+quantitative+analysis+of+native+protein-protein+interactions+and+multiprotein+complexes+by+flow+cytometry.">High-sensitivity detection and quantitative analysis of native protein-protein interactions and multiprotein complexes by flow cytometry.</a> Sci STKE. 389, pl2-pl2 (2007).</li><li>Davis, T. R., Schrum, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IP-FCM:+Immunoprecipitation+Detected+by+Flow+Cytometry.">IP-FCM: Immunoprecipitation Detected by Flow Cytometry.</a> J. Vis. Exp. (46), e2066-e2066 (2010).</li><li>Felts, S. J., Karnitz, L. M., Toft, D. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functioning+of+the+Hsp90+machine+in+chaperoning+checkpoint+kinase+I+(Chk1)+and+the+progesterone+receptor+(PR).">Functioning of the Hsp90 machine in chaperoning checkpoint kinase I (Chk1) and the progesterone receptor (PR).</a> Cell Stress Chaperones. 12, 353-363 (2007).</li><li>Cintron, N. S., Toft, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+the+requirements+for+Hsp40+and+Hsp70+in+the+Hsp90+chaperone+pathway.">Defining the requirements for Hsp40 and Hsp70 in the Hsp90 chaperone pathway.</a> J. Biol. Chem. 281, 26235-26244 (2006).</li></ol>

Assay שתוארו לעיל ניתן להתאים מבחן מספר עצום של מצבים המשפיעים על פעולות המלווה של המנגנון המלווה hsp90/hsp70-based וכן מחייב GR סטרואידים. זהו שינוי של שיטות 4,8,9,17 שדווח קודם לכן, והוא נועד לנצל את ההתקדמות בטכנולוגיה אלקטרופורזה ולהיות נגיש לקהילה מחקר רחב יותר. Cofactors נוס...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> שם מגיב </th><th> חברה </th><th> מספר קטלוגי </th><th> תגובות </th></tr><tr><td> Sf9 בתאי חרקים </td><td> Invitrogen </td><td></td><td> עבור ביטוי baculovirus של GR עכבר רקומביננטי </td></tr><tr><td> L929 תאים </td><td> ATCC </td><td> CRL-2173 </td><td> עבור אנדוגני עכבר GR cytosol הכנה (חלופה ביטוי baculovirus) </td></tr><tr><td> FiGR hybridoma תאים </td><td> ATCC </td><td> CRL-2173 </td><td> להכנת מיימת המכיל אנטי GR נוגדנים חד שבטיים (חלופה נוגדן BuGR2 מטוהרים) </td></tr><tr><td> השלם את ה-Mini-מעכבי פרוטאז, EDTA ללא </td><td> רוש ומדע יישומי </td><td> 11836170001 </td><td></td></tr><tr><td> חלבון A-Sepharose </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> P3391 </td><td></td></tr><tr><td> ארנב reticulocyte lysate </td><td> הקטרים ​​הירוק (אורגון, WI) </td><td></td><td> מקור עשיר של מכונות אנדוגני המלווה hsp90/hsp70 </td></tr><tr><td> קריאטין phosphokinase </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> C3755 </td><td> עבור ה-ATP-התחדשות מערכת </td></tr><tr><td> phosphocreatine </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> P7936 </td><td> עבור ה-ATP-התחדשות מערכת </td></tr><tr><td> אנטי GR עכבר נוגדנים חד שבטיים (BuGR2) </td><td> פירס / Thermo Scientific </td><td> MA1-510 </td><td> משמש GR immunoadsorption ו נוגדן ראשוני כמו סופג המערבי </td></tr><tr><td> אנטי Hsp90 עכבר נוגדנים חד שבטיים (AC88) </td><td> אנזו מדעי החיים </td><td> ADI-SPA-830 </td><td> משמש הנוגדן העיקרי במערב סופג </td></tr><tr><td> אנטי hsp70 עכבר נוגדנים חד שבטיים (N27F3-4) </td><td> אנזו מדעי החיים </td><td> ADI-SPA-820 </td><td> משמש הנוגדן העיקרי במערב סופג </td></tr><tr><td> IgG בסרום של העכבר </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> 038K7690 </td><td> משמש הנוגדן nonimmune שליטה שלילית של immunoadsorption </td></tr><tr><td> אנטי עכבר IgG-peroxidase המצומד </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> A4416 </td><td> משמש הנוגדן משני המערבי סופג </td></tr><tr><td> Experion microfluidic מערכת אלקטרופורזה </td><td> Bio-Rad </td><td> 7007001 </td><td> החלופה המקובלת SDS-PAGE </td></tr><tr><td> [1,2,4,6,7 - 3 ח] dexamethasone </td><td> PerkinElmer </td><td> NET1192001MC </td><td> בעקבות אמצעי בטיחות </td></tr></tbody></table>

biochemical reconstitution of steroid receptor&#x2022;hsp90 protein  complexes and reactivation of ligand binding

Hsp90 הוא חלבון חיוני ורב מאוד המלווה המולקולרי נמצא להסדיר יותר מ 150 חלבונים איתות אוקריוטים, כולל גורמי תעתוק (קולטנים גרעיני למשל, p53) ו קינאזות חלבון (למשל Src, רף, Akt קינאז) מעורב אופניים התא, tumorigenesis, אפופטוזיס, וכן מספר רב של מסלולים 1,2 אוקריוטים איתות. רבים מבין אלה חלבונים &quot;לקוח&quot; עבור Hsp90, ההרכבה של קולטן סטרואידים • Hsp90 מתחמי הוא הטוב ביותר מוגדר (איור 1). אנו מציגים כאן קולטן glucocorticoid להתאמה (GR) assay immunoprecipitation ו במבחנה GR • Hsp90 שיטה הכינון מחדש כי ניתן להשתמש בקלות לחקור פעילות אוקריוטים Hsp90 פונקציונלי, Hsp90 בתיווך ליגנד רצפטור סטרואידים מחייב, מולקולרית cofactor דרישות המלווה. לדוגמה, assay זה יכול לשמש כדי לבדוק את דרישות Hsp90 cofactor ואת ההשפעות של הוספת מרכיבים חיצוניים לתהליך הכינון מחדש. GR כבר מערכת שימושית במיוחד ללימוד Hsp90 כי הקולטן חייב להיות מאוגד Hsp90 יש מחייב ליגנד פתוח שסוע הנגיש 3 סטרואידים. GR אנדוגני, unliganded נמצא בציטופלסמה של בתאי יונקים מחויב noncovalently כדי Hsp90. מצאו כמו GR אנדוגני • Hsp90 heterocomplex, ליגנד GR מחייב שסוע פתוח מסוגל סטרואידים מחייב. אם Hsp90 מנתק מ GR, או אם תפקידה הוא עכבות, הקולטן אינו מסוגל להיקשר סטרואידים דורש הכינון מחדש של GR • Hsp90 heterocomplex לפני פעילות מחייב סטרואידים משוחזר 4. GR ניתן immunoprecipitated מ cytosol התא באמצעות נוגדן חד שבטי, וחלבונים כגון Hsp90 ומורכבת כדי GR ניתן assayed ידי כתם המערבי. פעילות מחייב סטרואידים של GR immunoprecipitated ניתן לקבוע על ידי דוגרים immunopellet עם [3 ח] סטרואידים. ניסויים קודמים הראו Hsp90 בתיווך הפתיחה של הכריכה GR ליגנד שסוע מחייב hsp70, המלווה המולקולרי second חיוני גם כדאיות התא האיקריוטים. פעילות ביוכימית של Hsp90 ו hsp70 הם catalyzed ידי הופ חלבונים שיתוף המלווה, hsp40, 5 ו - p23. המלווה multiprotein מכונות המכיל Hsp90, הופ hsp70, ו hsp40 הם endogenously הנוכחית בציטופלסמה תא אוקריוטים, ו lysate reticulocyte מספק המלווה עשירים מקור חלבון 6. בשיטה הציג, GR הוא immunoadsorbed מ cytosol התא הפשיטו של מכונות המלווה אנדוגני hsp90/hsp70 באמצעות תנאים מלח קל. GR הפשיטו מלח הוא מודגרות אז עם lysate reticulocyte, ATP, ו-K +, שתוצאתה הכינון מחדש של GR • Hsp90 heterocomplex ו מחדש של פעילות מחייב סטרואידים 7. שיטה זו יכולה להיות מנוצל כדי לבדוק את ההשפעות של cofactors המלווה שונים, חלבונים רומן, וניסיוני מעכבי Hsp90 או GR כדי לקבוע משמעות תפקודית שלהם על Hsp90 בתיווך 8-11 מחייב סטרואידים.

Watch this Scientific Journal Video about Biochemical Reconstitution of Steroid ReceptorÃ¢â‚¬Â¢Hsp90 Protein  Complexes and Reactivation of Ligand Binding at JoVE.com

Biochemical Reconstitution of Steroid ReceptorÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã‚Â¢Hsp90 Protein  Complexes and Reactivation of Ligand Binding

<em&gt; במבחנה</em&gt; שיטה להכנת קולטן glucocorticoid תפקודית (GR) • Hsp90 קומפלקסים חלבונים מטוהרים מן חלבונים lysates הסלולר מתואר. השיטה משתמשת immunoadsorption של GR רקומביננטי ואחריו מלח הפשטת והרכבתה מחדש חלבון מורכב. חשיבותה של cofactors ותנאי חיץ נדונים, כמו גם יישומים שיטת פוטנציאליים.

הכינון ביוכימיים של קולטן סטרואידים • Hsp90 קומפלקסים חלבונים ו מחדש של ליגנד הכבילה

Hsp90 is an essential and highly abundant molecular chaperone protein that has been found to regulate more than 150 eukaryotic signaling proteins, ...

Research

JoVE Journal

Biology

Biochemical Reconstitution of Steroid Receptor&#x2022;Hsp90 Protein  Complexes and Reactivation of Ligand Binding

Identification of protein complexes with quantitative proteomics in S. cerevisiae

זיהוי של קומפלקסים חלבונים עם proteomics כמותיים cerevisiae ס

Lipids are the building blocks of cellular membranes that function as barriers and in compartmentalization of cellular processes, and recently, as ...

Analyzing Large Protein Complexes by Structural Mass Spectrometry

ניתוח מערכות חלבון גדול על ידי ספקטרומטריית מסה מבנית

Living cells control and regulate their biological processes through the coordinated action of a large number of proteins that assemble themselves into an ...

Biochemical Titration of Glycogen In vitro

Biochemical Titration of Glycogen In vitro

כותרות ביוכימית של גליקוגן<em&gt; במבחנה</em

Glycogen is the main energetic polymer of glucose in vertebrate animals and plays a crucial role in whole body metabolism as well as in cellular ...

Protein Purification-free Method of Binding Affinity Determination by Microscale Thermophoresis

שיטה ללא טיהור חלבונים של קביעת זיקה מחייבת ידי thermophoresis Microscale

Quantitative characterization of protein  interactions is essential in practically any field of life sciences,  particularly drug discovery. Most of ...

Identification of Post-translational Modifications of Plant Protein Complexes

זיהוי לאחר translational השינויים של קומפלקסי חלבוני צמח

Plants adapt quickly to changing environments due to elaborate perception and signaling systems. During pathogen attack, plants rapidly respond to ...

Determination of Protein-ligand Interactions Using Differential Scanning Fluorimetry

נחישות של אינטראקציות חלבון ליגנד שימוש דיפרנציאל סריקת Fluorimetry

A wide range of methods are currently available for determining the dissociation constant between a protein and interacting small molecules. However, most ...

In Vitro Reconstitution of Light-harvesting Complexes of Plants and Green Algae

In Vitro Reconstitution of Light-harvesting Complexes of Plants and Green Algae

במבחנת כינונה מחדש של מכלולי אור קציר של צמחים ואצות ירוקות

In plants and green algae, light is captured by the light-harvesting complexes (LHCs), a family of integral membrane proteins that coordinate chlorophylls ...

Functional Reconstitution and Channel Activity Measurements of Purified Wildtype and Mutant CFTR Protein

מדידות הכינון פונקציונלי ופעילות הערוץ של מטוהרים wildtype וחלבון CFTR Mutant

The Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) is a unique channel-forming member of the ATP Binding Cassette (ABC) superfamily of ...

Growth-based Determination and Biochemical Confirmation of Genetic Requirements for Protein Degradation in Saccharomyces cerevisiae

Growth-based Determination and Biochemical Confirmation of Genetic Requirements for Protein Degradation in Saccharomyces cerevisiae

קביעה מבוססת צמיחה ואישור ביוכימית של דרישות גנטיות לפירוק חלבונים ב<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em

Regulated protein degradation is crucial for virtually every cellular function. Much of what is known about the molecular mechanisms and genetic ...

Genetic and Biochemical Approaches for In Vivo and In Vitro Assessment of Protein Oligomerization: The Ryanodine Receptor Case Study

Genetic and Biochemical Approaches for In Vivo and In Vitro Assessment of Protein Oligomerization: The Ryanodine Receptor Case Study

גישות גנטיות ביוכימיים עבור<em&gt; In vivo</em&gt; ו<em&gt; במבחנה</em&gt; הערכת oligomerization חלבון: מקרה המבחן קולטן Ryanodine

Oligomerization is often a structural requirement for proteins to accomplish their specific cellular function. For instance, tetramerization of the ...