Name: absolute quantum yield measurement of powder samples
Uploaded: 2012-05-12T14:00:00
Duration: 14 min 20 s
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1. Configuração do Sistema <ol><li> F-7000 Espectrofotômetro de fluorescência equipado com alta fotomultiplicador faixa de sensibilidade ampliada R-928F detector. </li><li> F-7000 Acessórios: rodamina B, a luz do difusor, vermelho de filtro e sub-padrão fonte de luz foram utilizados para gerar os factores de correcção espectrais para o instrumento. </li><li> Quantum acessório Rendimento de medição, que inclui: 60 mm Integração esfera, telhas de óxido de alumínio branco, Spectralon branco padrão, células em pó (2ea), pó de alumínio Óxido de software e Quantum Rendimento. </li><li> Programa de relatório gerador eo modelo apropriado será utilizada para o cálculo das coordenadas de cromaticidade. </li></ol> 2. Configuração do Sistema <ol><li> Ligue o F-7000 Hitachi espectrofotómetro de fluorescência e permitir que a lâmpada de xénon de aquecer durante uma hora. Começar a usar o compartimento da amostra padrão (titular cuvete) instalado no instrumento. </li></ol> 3. Acquisition de Integração de Fatores de Correção Sphere Ao medir os fatores de correção Integração esfera, o software seleciona automaticamente os parâmetros de teste de medição listadas na Tabela 1. <table border="1"><tbody><tr><td colspan="2"> Condições analíticas </td></tr><tr><td> Medição </td><td> Comprimento de onda de digitalização </td></tr><tr><td> O modo de digitalização </td><td> Síncrono </td></tr><tr><td> Modo de dados </td><td> Fluorescência </td></tr><tr><td> EM WL </td><td> 200 nm </td></tr><tr><td> EX Iniciar WL </td><td> 200 nm </td></tr><tr><td> WL End EX </td><td> 900 nm </td></tr><tr><td> Velocidade de digitalização </td><td> 240 nm / min </td></tr><tr><td> Atrasar </td><td> 5,0 s </td></tr><tr><td> Fenda EX </td><td> 5,0 nm </td></tr><tr><td> EM Slit </td><td> 20 nm </td></tr><tr><td> Tensão PMT </td><td> 250 V </td></tr><tr><td> Espectros corrigidos </td><td> ON </td></tr><tr><td> Resposta </td><td> Automático </td></tr></tbody></table> Tabela 1. 3,1. Aquisição de dados do difusor <ol><li> Coloque difusor no compartimento da amostra padrão e fechar o compartimento da amostra. </li><li> Clique sobre o Rendimento janela Quantum de Medição Fator de Correção e, em seguida, na medição do difusor. </li><li> Digite o nome do arquivo: &quot;IS_factor_F70_diffuser&quot; para os dados do difusor e clique em OK (vídeo 1). </li><li> Após a medição, o arquivo será salvo na pasta &quot;correta&quot; de Soluções FL. Figura 1 é um exemplo dos dados de medição do difusor. </li></ol> 3,2. Aquisição de fator de correção para nenhuma amostra (de referência) &lt;ol&gt; <li> Remova o compartimento da amostra padrão do instrumento, loja difusor, em seguida, instalar a esfera de integração. </li><li> Encher a célula em pó com o pó de óxido de alumínio até uma altura de pelo menos 25 mm a certificar-se o pó a cobrir completamente a porta da esfera de integração. Toque na parte inferior da célula cuidadosamente para compactar o pó. </li><li> Coloque o azulejo óxido de alumínio branco no porto de referência (P2) da esfera de integração (a um monocromador de frente para o emissão) e da célula em pó de óxido de alumínio no porto de amostra (P1) da esfera de integração (a um monocromador de frente para o excitação ). </li><li> Clique sobre o Rendimento janela Correção Medição Quantum Factor, em seguida, sobre a Integração Medição Sphere (sem amostra) (Vídeo 2). </li><li> O software irá lembrá-lo para definir as amostras. Digite o nome de &quot;É com nenhuma amostra&quot; e clique em OK. </li><li> Após a medição, o arquivo será salvo na pasta &quot;Correção<html> t &quot;das Soluções FL. A Figura 2 é um exemplo da esfera de integração sem dados de medição da amostra. </li></ol> 3,3. Aquisição de factor de correcção na presença de uma amostra: <ol><li> Remover a célula com pó de óxido de alumínio e substituí-la com o padrão branco Spectralon. (O padrão deve ser Spectralon de frente para o monocromador de excitação (P1)). </li><li> Clique sobre o Rendimento janela Correção Medição Quantum Factor e, em seguida, sobre a Integração Medição Sphere (com amostra). O software irá lembrá-lo para definir o material de Reflectância padrão para a medição. </li><li> Digite o nome: &quot;É com a amostra&quot; para a esfera de integração com arquivo de dados de exemplo e clique OK (Vídeo 3). </li><li> Após a medição, o arquivo será salvo na pasta &quot;correta&quot; de Soluções FL. Figura 3 é um exemplo da esfera de integração com dados de medição da amostra. </li></ol>&quot;&gt; NOTA: Em caso de necessidade de usar filtros de corte para bloquear a luz de dispersão de segunda ordem no lado de emissão que interferem com o pico de fluorescência, você terá que medir uma linha de base usando apenas o difusor e também o difusor eo filtro apropriado Estes. arquivos de dados serão utilizados pelo software para o cálculo de rendimento quântico. Na prática, nós recomendamos medir todos os filtros de corte, como parte da configuração inicial do sistema. 4. Medição da amostra (Pó O salicilato de sódio) Quantum a medição do rendimento envolve a aquisição de um espectro de emissão para ambos nenhuma amostra-(de referência) e na presença de uma amostra. Selecione os parâmetros analíticos de medida, como segue: <ol><li> Clique sobre o &quot;Método&quot; botão e, em geral varredura de comprimento de onda guia de seleção como o modo de medição e digite as informações apropriadas sobre o operador e acessórios(Vídeo 4). </li><li> Clique no botão &quot;Instrumento&quot; tab e digite os parâmetros de medição para o instrumento como mostrado na Tabela 2 (vídeo 5). </li></ol><table border="1"><tbody><tr><td colspan="2"> Condições analíticas </td></tr><tr><td> Medição </td><td> Comprimento de onda de digitalização </td></tr><tr><td> O modo de digitalização </td><td> Emissão </td></tr><tr><td> Modo de dados </td><td> Fluorescência </td></tr><tr><td> EX WL </td><td> 350 nm </td></tr><tr><td> EM Iniciar WL </td><td> 330 nm </td></tr><tr><td> EM Fim WL </td><td> 600 nm </td></tr><tr><td> Velocidade de digitalização </td><td> 1200 nm / min </td></tr><tr><td> Atrasar </td><td> 0 s </td></tr><tr><td> Fenda EX </td><td> 5,0 nm </td></tr><tr><td> EM Slit </td><td> 5,0 nm </td></tr><tr><td> Tensão PMT </td><td> 350 V </td></tr><tr><td> Espectros corrigidos </td><td> ON </td></tr><tr><td> Resposta </td><td> Automático </td></tr><tr><td> Espectros corrigidos </td><td> ON </td></tr></tbody></table> Tabela 2. <ol start="3"><li> Não há configurações adicionais são necessárias neste momento já que as configurações da guia do Monitor de Processamento e Relatório pode ser feita após os dados terem sido medidos. Estamos indo só para revê-las e, em seguida, clique no botão OK, a fim de definir os parâmetros de medição selecionados no instrumento (Vídeo 6). </li><li> Como opção, as configurações selecionadas poderiam ser salvos para uso futuro. Vamos proceder agora medir o padrão de referência de alumínio Óxido usando excitação direta. </li><li> Coloque a célula em pó com Al2O3 pó no porto de medição da amostra (P1) (em frente do feixe de excitação). </li><li> Clique no botão &quot;Amostra&quot; botãoe digite o nome da amostra: &quot;P1_Baseline_Al2O3&quot;, em seguida, clique na caixa ao lado de &quot;arquivo Auto&quot;. Selecione a pasta eo nome do arquivo para os dados: &quot;P1_Baseline_Al2O3&quot;, em seguida, clique em &quot;Salvar&quot; e &quot;OK&quot; (vídeo 7). </li><li> Clique em &quot;Measure&quot; botão para medir a amostra Al2O3. (Video 8), depois que a janela de processamento de dados se abre, clique no &quot;Auto escala do eixo&quot; botão de ajuste da escala, para visualizar o pico de espalhamento com excitação direta (Figura 4). </li><li> Agora vamos proceder a medição da amostra de salicilato de sódio usando excitação direta. Clique no botão &quot;Amostra&quot; ícone e digite &quot;Salicilato P1_Sodium&quot; para o nome da amostra e arquivo, clique no botão OK (Video 9). </li><li> Coloque a amostra salicilato de sódio na célula em pó e na porta P1 da esfera de integração (a porta de frente para o feixe de luz de excitação) e clique em &quot;Measure&quot; botão. (Video 10) Quando o processo de dadosing janela se abre, clique no &quot;Auto escala do eixo&quot; para ajustar a escala e visualizar a dispersão e picos de fluorescência. </li><li> Neste momento, vamos repetir as medições para o óxido de alumínio e salicilato de sódio com as amostras colocadas no porto P2 da esfera de integração, a fim de ler os usando excitação indirecta. </li><li> Primeiro clique no &quot;Amostra&quot; botão e digite o nome da amostra e arquivo: &quot;P2_Baseline_Al2O3&quot; para ambos (Video 11). </li><li> Mova o azulejo óxido de alumínio branco a partir de P2 para P1 da esfera de integração e coloque um celular cheio de pó de óxido de alumínio no P2. </li><li> Clique em &quot;Measure&quot; botão para ler a amostra (Video 12). </li><li> Para completar a medição da amostra é preciso medir a amostra de salicilato de sódio utilizando irradiação indireta. Primeiro, digite o exemplo e nomes de arquivo como nas etapas anteriores. O nome será P2_Sodium salicilato (Vídeo 13). </li><li> Coloque a amostra de salicilato de sódio no porto P2 da esfera de integração e clique no botão Measure (Video 14). </li></ol> 5. Quantum Cálculo Rendimento Primeiro vamos continuar carregando os fatores de correção que integram esfera. <ol><li> Clique no botão Cálculo rendimento quântico para abrir o programa de cálculo de rendimento quântico (Video 15). </li><li> Clique no botão Correção Rendimento Ambiente Quantum Factor (vídeo 16). </li><li> Clique na guia Integração Sphere Correção e clique na caixa na frente de &quot;correção esfera Integração&quot;, em seguida, clique na guia filtros de correção e certifique-se o &quot;filtro de correção de&quot; caixa não estiver selecionada, clique novamente na guia Integração Sphere Correção (Video 17 ). </li><li> Clique no botão Load do Diffuse seção Dados de Medição, em seguida, selecione o arquivo &quot;IS_factor_F70 amostra não&quot; ( <strong&gt; Vídeo 18). </li><li> Selecione a opção &quot;IS_factor_F70_diffuser&quot; arquivo e clique no botão de carga (Video 19). </li><li> Clique no botão Load dos dados da medição Integração esfera (sem amostra) seção (Video 20). </li><li> Selecione a opção &quot;IS_factor_F70 nenhuma amostra&quot; do arquivo e clique no botão de carga (Video 21). </li><li> Clique no botão Load dos dados da medição Integração esfera (com amostra) seção (Video 22). </li><li> Selecione a opção &quot;IS_factor_F70 com a amostra de arquivo&quot; e em seguida, no botão de carga (Video 23). </li><li> Comprimento de onda normalizado pode ser deixada a 600 nm ou ajustada para o valor de comprimento de onda em que a correcção esfera de integração é igual a 1. Para fazer isso, verifique se a caixa na frente de &quot;Display janela cálculo rendimento quântico&quot; está selecionado e clique no botão OK do &quot;ajuste do fator de rendimento quântico&quot; window, que vai fechar esta janela (Video 24). </li><li> Agora clique em &quot;Integrar Sphere Correção de&quot; guia do &quot;rendimento quântico de Cálculo&quot; janela e ajustar o cursor até que a leitura correção Integração esfera é &quot;1&quot;, fazendo notar o comprimento de onda (Video 25). </li><li> Clique no &quot;rendimento quântico ajuste do fator de correção&quot; e, se necessária mudança no comprimento de onda normalizada para a leitura obtida na etapa anterior e clique no botão OK (Video 26). </li></ol> O próximo passo é carregar a linha de base e arquivos de dados de exemplo <ol start="13"><li> Clique no &quot;rendimento quântico de Cálculo&quot; guia (Video 27). </li><li> Carregar &quot;dados sem amostra&quot; (arquivo P1_Baseline_ Al2O3) para irradiação direta, clicando no botão de carga e de carga &quot;de dados com a amostra&quot; (salicilato de arquivo P1_Sodium) para irradiação direta (Video 28). </li><li&gt; Em seguida, vamos proceder para selecionar o &quot;espalhamento&quot; e &quot;fluorescência&quot; regiões (Vídeo 29). </li><li> Agora vamos calcular o rendimento quântico de irradiação direta da amostra. Clique no botão &quot;Cálculo&quot; botão e ler os resultados (Vídeo 30). Vamos precisar destes dados para o cálculo final do rendimento quântico para a amostra, tendo em consideração a excitação indireta. </li><li> Clique no arquivo de texto e salvar os dados sob o nome de arquivo &quot;Irradiação QY Direct&quot; (Vídeo 31). </li><li> Usando arquivos de dados P2_Baseline_Al2O3 e salicilato P2_Sodium, vamos calcular o rendimento quântico para excitação indireta (Video 32) Agora vamos salvar esses dados para o cálculo final rendimento quântico. </li><li> Clique no arquivo texto e salve o arquivo de texto de dados com o nome de &quot;irradiação QY indireta&quot; (Vídeo 33) Agora vamos abrir os dois arquivos de texto em Excel com os dados de rendimento quântico para a direçãot e excitação indireta. Finalmente, vai calcular o rendimento quântico para a amostra, incluindo o efeito de Excitação indirecta, utilizando a seguinte fórmula: </li></ol> Φ = Φd-(1-Ad) ΦI Onde: Φ é o rendimento quântico corrigida levando em consideração a excitação indireta Φd é o rendimento quântico Interna usando excitação direta. (Internal rendimento quântico = Quantidade de Fluorescência / Quantidade de luz de excitação absorvida.) Anúncio é a absortância para excitação direta. (Esta é a razão entre a quantidade de feixe de excitação absorvida pela amostra). (Absorvância = (Arex - CsEx) / Arex, onde Arex é a quantidade de luz de excitação e CsEx é a quantidade de luz reflectida) ΦI é o rendimento quântico Interna usando IndiExcitação rect Φ = 0,536 - (1 - 0,848) 0,420 Calculado Φ = 0,47216 6. Cálculo da cromaticidade <ol><li> Nós usaremos o gerador de relatório opcional software, juntamente com um modelo de preparado para o cálculo da cromaticidade. </li><li> Abra o arquivo de dados salicilato P1_Sodium (Video 34). </li><li> Clique no botão &quot;Propriedades&quot;, então o &quot;guia&quot; Relatório. Em &quot;Output&quot; &quot;folha de usar gerador de impressão&quot;, selecione no menu suspenso. Em &quot;itens de impressão&quot; template select &quot;FL70Std01_Color-chart.xls&quot; e clique no botão &quot;Abrir&quot;. Não há necessidade de selecionar a faixa de comprimento de onda e intervalo, uma vez que este é feito automaticamente pelo Report Generator (Video 35). </li><li> O passo seguinte é o de criar o relatório. Clique no botão &quot;Report&quot; guia ea macro para criar o relatório será executado e salvo em &quot;Relatórios&quot; pasta em formato Excel com o nome de amostra (Video 36). &lt;<html> / Li&gt; <li> Neste momento, podemos abrir o relatório para ver os dados de cor (Vídeo 37). </li></ol> 7. Segredos para o Sucesso <ol><li> Use amostras frescas. </li><li> Esteja ciente de que o material de diferentes fabricantes podem dar resultados diferentes. </li><li> Toque na parte inferior da célula em pó para compactar a amostra e apresentar uma superfície uniforme para a medição. </li><li> Proteger as amostras da luz. Eles se deterioram com a exposição à luz. </li><li> Tente usar uma velocidade mais rápida varredura para minimizar a exposição da amostra à luz. </li></ol> 8. Os resultados representativos 8,1. O salicilato de sódio é conhecido por ter um rendimento quântico de 0,4 a 0,5 <img src="/files/ftp_upload/3066/3066fig1.jpg" alt="A Figura 1" /> Figura 1. <a href="http://jove.com/files/ftp_upload/3066/3066fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver maior figura</a> . iles/ftp_upload/3066/3066fig2.jpg &quot;alt =&quot; Figura 1 &quot;/&gt; Figura 2. <a href="http://jove.com/files/ftp_upload/3066/3066fig2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver maior figura</a> . <img src="/files/ftp_upload/3066/3066fig3.jpg" alt="A Figura 1" /> Figura 3. <a href="http://jove.com/files/ftp_upload/3066/3066fig3large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver maior figura</a> .

<ol>
	<li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Quantum Yield Measurement of Sodium Salicylate. FL080002, 1 (2008).</li><li>Lakowicz, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+Fluorescence+Spectroscopy.">Principles of Fluorescence Spectroscopy.</a> Science and Business Media, LLC. 60, (2006).</li><li>Horigome, J., Wakui, T., Shirasaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Simple+Correction+Method+for+Determination+of+Absolute+Fluorescence+Quantum+Yields+of+Solid+Samples+with+a+conventional+Fluorescence+Spectrophotometer.">A Simple Correction Method for Determination of Absolute Fluorescence Quantum Yields of Solid Samples with a conventional Fluorescence Spectrophotometer.</a> Bunseki Kagako. 58 (6), 553-559 (2009).</li></ol>

Luis A. Moreno é empregado por Hitachi High Technologies America, que produz o instrumento utilizado neste artigo.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome do reagente </td><td> Companhia </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentários </td></tr><tr><td> O salicilato de sódio em pó </td><td> Wako </td><td> 191-03142 </td><td> Mol. peso 160,10 </td></tr></tbody></table>

absolute quantum yield measurement of powder samples

Medição do rendimento quântico de fluorescência se tornou uma ferramenta importante na busca de novas soluções no controle de desenvolvimento, qualidade, avaliação e pesquisa da iluminação, AV equipamentos, material orgânico EL, filmes, filtros e sondas fluorescentes para a indústria de bio-. Rendimento quântico é calculado como a razão entre o número de fotões absorvidos, para o número de fotões emitidos por um material. O rendimento mais elevado do quantum, melhor a eficiência do material fluorescente. Para que as medidas apresentadas neste vídeo, iremos usar o Hitachi F-7000 espectrofotômetro de fluorescência equipado com o rendimento quântico de medição acessório e Relatório programa gerador. Toda a informação fornecida aplica-se a este sistema. Medição do rendimento quântico em amostras de pó é realizada seguindo estes passos: <ol><li> Geração de fatores de correção de instrumentos para a excitação e emissmonocromadores de íons. Este é um requisito importante para a medição correta do rendimento quântico. Tem sido realizado em avanço para o intervalo de medição total do instrumento e não será mostrado neste vídeo devido a limitações de tempo. </li><li> Medição de integrar fatores de correção esfera. O propósito deste passo é de levar em consideração características de reflectividade da esfera de integração utilizado para as medições. </li><li> Referência e medição da amostra usando excitação direta e indireta de excitação. </li><li> Quantum cálculo de rendimento utilizando excitação direta e indireta. Excitação directa é quando a amostra é de frente para directamente feixe de excitação, o que seria a configuração normal de medição. No entanto, porque usamos uma esfera de integração, uma parte dos fótons emitidos resultantes da fluorescência da amostra são refletidos pela esfera de integração e re-excitar a amostra, por isso precisamos levar em consideração a excitação indireta. Esta é a acomodaçãomplished através da medição da amostra colocada no porto de frente para o monocromador de emissão, calculando rendimento quântico indirecta e corrigindo o cálculo directo rendimento quântico. </li><li> Corrigido cálculo de rendimento quântico. </li><li> Cromaticidade coordena o cálculo usando o programa Gerador de Relatórios. </li></ol> Os Hitachi F-7000 rendimento quântico de medição oferecem vantagens do sistema para esta aplicação, como segue: <ul><li> Alta sensibilidade (S / N 800 ou RMS melhores). Sinal é a banda de Raman de água medido nas condições seguintes: comprimento de onda Ex 350 nm, Ex passa-banda e EM 5 nm, resposta 2 seg), o ruído é medido no máximo do pico Raman. Alta sensibilidade permite a medição de amostras, mesmo com baixo rendimento quântico. Usando este sistema, medimos rendimentos quânticos tão baixas como 0,1 para uma amostra de ácido salicílico e tão elevada como 0,8 para uma amostra de tungstato de magnésio. </li><li> Medição de alta precisão com uma gama dinâmica de 6 ordens demagnitude permite medições de ambos os picos de espalhamento afiadas de intensidade elevada, bem como grandes picos de fluorescência de baixa intensidade, nas mesmas condições. </li><li> Rendimento de medição de alta e exposição à luz reduzida para a amostra, devido a uma alta velocidade de digitalização de até 60.000 nm / minuto e função de obturador automático. </li><li> Medição do rendimento quântico em uma faixa de comprimento de onda larga de 240 para 800 nm. </li><li> Medições precisas de rendimento quântico são o resultado de recolha de resposta do instrumento espectral e integrando factores de correcção esfera antes da medição da amostra. </li><li> Grande selecção de parâmetros calculados fornecidos pelo software dedicado e fácil de usar. </li></ul> Durante este vídeo mediremos salicilato de sódio na forma de pó, que é conhecido por ter um valor de rendimento quântico de 0,4 a 0,5.

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Absolute Quantum Yield Measurement of Powder Samples

Neste vídeo vamos demonstrar medir e calcular o rendimento quântico absoluto e cromaticidade coordenadas diretamente em amostras de pó que utilizam o Hitachi F-7000 Quantum Sistema de Medição de Rendimento.

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