Name: placing growth factor-coated beads on early stage chicken embryos
Uploaded: 2007-10-01T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Placing Growth Factor-Coated Beads on Early Stage Chicken Embryos at JoVE.com

<p class="jove_step" style=";text-align:right;direction:rtl"> 1. הסר ביצים מן החממה </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> ב-E2 2.5 (~ 17 סנט HH), להסיר את הביצים ולהכין אותם בהתאם. הם יכולים להיות עבד או מיד חזר החממה עבור כמה שעות. הביצים ניתן להציב בטמפרטורת החדר בבטחה במשך יותר משעה. ביצים יכולים להישאר בחוץ למשך מניפולציות. לפעמים אלה י...

<ol>
	<li>Korn, M. J., Cramer, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Windowing+Chicken+Eggs+for+Developmental+Studies.">Windowing Chicken Eggs for Developmental Studies.</a> <em style='font-style: italic'>Jounal of Visualized Experiments</em>. <b>8</b>, (2007).</li><li>Crossley, P. H., Martinez, S., Ohkubo, Y., Rubenstein, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinate+expression+of+Fgf8,+Otx2,+Bmp4,+and+Shh+in+the+rostral+prosencephalon+during+development+of+the+telencephalic+and+optic+vesicles.">Coordinate expression of Fgf8, Otx2, Bmp4, and Shh in the rostral prosencephalon during development of the telencephalic and optic vesicles.</a> <em style='font-style: italic'>Neuroscience</em>. <b>108</b>, 183-206 (2001).</li><li>Alexandre, P., Bachy, I., Marcou, M., Wassef, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positive+and+negative+regulations+by+FGF8+contribute+to+midbrain+roof+plate+developmental+plasticity.">Positive and negative regulations by FGF8 contribute to midbrain roof plate developmental plasticity.</a> <em style='font-style: italic'>Development </em>. <b>133</b>, 2905-2913 (2006).</li></ol>

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> בהתאם החלבון אתה רוצה להשתמש, ישנם פרוטוקולים שונים על איך להכין את החרוזים. בניסויים אלה, אנו משתמשים הפרין, אקריליק חרוזים, אבל Affi ג&#39;ל חרוזים יכול לשמש גם. מצאנו כי הפרין, אקריליק חרוזים קל יותר לתמרן בסביבה מימית של הביצה אלבומין. חרוזים הם ספוגים אני 5 של חלבון לילה בשעה 4 ° C. ?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Eggs</td>
<td>Animal</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fertilized, E2-2.5 (~ St. 17 HH)
</td>
</tr>
<tr>
<td>Incubator</td>
<td>Profi-I</td>
<td>Lyon</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>India Ink</td>
<td>Tool</td>
<td>Higgins</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Prepare a 4% solution in sterile PBS.</td>
</tr>
<tr>
<td>Sterile PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Alternatively, an antibody cocktail can be used</td>
</tr>
<tr>
<td>1ml syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>27G 1/2 needles</td>
<td>Tool</td>
<td>BD</td>
<td>305109</td>
<td>Angled at 90 degrees</td>
</tr>
<tr>
<td>Forceps</td>
<td>Tool</td>
<td>World Precision Instruments</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>size 55</td>
</tr>
<tr>
<td>Hemostats</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissection scissors</td>
<td>Tool</td>
<td>World Precision Instruments</td>
<td>500086</td>
<td>vannas, 8.5cm</td>
</tr>
<tr>
<td>Parafilm tape</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>to seal eggs</td>
</tr>
<tr>
<td>Tungsten Probe</td>
<td>Tool</td>
<td>Electron Microscopy Sciences</td>
<td>62091</td>
<td>Tool #24.  Handle optional. </td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

placing growth factor-coated beads on early stage chicken embryos

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> בצינור העצבי מבטא חלבונים רבים בדפוסי spatiotemporal ספציפיים במהלך ההתפתחות. חלבונים אלה הוכחו להיות קריטי לקביעת גורל התא, נדידת תאים, היווצרות של מעגלים עצביים. אינדוקציה דפוסים עצביים לערב המוךפו&quot;גנטי שהולך עצם חלבון (BMP), סוניק הקיפוד (ששש), גורם גדילה פיברובלסטים (FGF), בין היתר. בפרט, את דפוס הביטוי של Fgf8 הוא בסמיכות לאזורים להביע BMP4 ו ששש. דפוס זה עולה בקנה אחד עם הביטוי אינטראקציות התפתחותי המאפשרים דפוסים בתוך telencephalon. </p><p style=";text-align:right;direction:rtl"> כאן אנו מספקים הדגמה חזותית של שיטה שבה כהכנה אובו ניתן להשתמש כדי לבדוק את ההשפעות של Fgfs במבנה של המוח הקדמי. חרוזים הם מצופים חלבון והושמו הצינור העצבי בפיתוח לספק חשיפה מתמשכת. כי ההליך משתמשת קטן, חרוזים להציב בזהירות, היא פולשנית ומאפשרת כמה חרוזים כדי להיות ממוקם בתוך צינור עצבי יחיד. יתר על כן, השיטה מאפשרת המשך הפיתוח, כך עוברים ניתן לנתח בשלב בוגר יותר לזהות שינויים באנטומיה של דפוסים עצביים. זה פרוטוקול פשוט אבל שימושי מאפשר הדמיה בזמן אמת. הוא מספק אמצעים לערוך שינויים מוגבל במרחב ובזמן לרמות חלבון אנדוגני. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Placing Growth Factor-Coated Beads on Early Stage Chicken Embryos at JoVE.com

Placing Growth Factor-Coated Beads on Early Stage Chicken Embryos

<p class="jove_content">קיים מגוון של גורמי גדילה וחלבונים אינטראקציה לגרום לתאים לקחת על גורלות תאים שונים במהלך ההתפתחות. כאן אנו מדגימים את השימוש כהכנה אובו לכתובת האינטראקציות האפשריות בין חלבונים שונים בהתפתחות ידי הצבת חרוזים על E2.5 עוברי אפרוח.</p>

הצבת פקטור מצופה חרוזים צמיחה על עוברי תרנגולת בשלב מוקדם

The neural tube expresses many proteins in specific spatiotemporal patterns during development.   These proteins have been shown to be critical for cell ...

Research

JoVE Journal

Biology

Growth Factor-Coated Bead Placement on Dorsal Forebrain Explants

פקטור מצופה צמיחה השמה ביד על Explants forebrain הגבי

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

הכנת תרבויות העצבית מ Midgastrula עוברים שלב תסיסנית

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos

ב Electroporations אובו של HH 10 עוברים שלב עוף

Large size and external development of the chicken embryo have long made it a valuable tool in the study of developmental biology.  With the advent of ...

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

שיטת לתרבות מוקדם של עוברים צ&#39;יק לשעבר vivo (תרבות חדש)

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

הר שלם כפול באתרו הכלאה של עוברים צ&#39;יק מוקדם

Chromatin Immunoprecipitation Assay for Tissue-specific Genes using Early-stage Mouse Embryos

הכרומטין Assay immunoprecipitation עבור גנים ספציפיים רקמות באמצעות שלבים מוקדמים של עוברי עכברים

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful tool to identify protein:chromatin interactions that occur in the context of living cells 1-3. This ...

Gene Transfer into Older Chicken Embryos by <em>ex ovo</em> Electroporation

Gene Transfer into Older Chicken Embryos by ex ovo Electroporation

ין העברת לעוברי עוף מבוגרים יותר על ידי<em&gt; לג&#39;ימי לשעבר</em&gt; Electroporation

The chicken embryo provides an  excellent model system for studying gene function and regulation during  embryonic development. In ovo electroporation is ...

Efficient and Rapid Isolation of Early-stage Embryos from <em>Arabidopsis thaliana</em> Seeds

Efficient and Rapid Isolation of Early-stage Embryos from Arabidopsis thaliana Seeds

בידוד יעיל ומהיר של עוברים משלבים מוקדמים<em&gt; Thaliana ארבידופסיס</em&gt; זרעים

In flowering plants, the embryo develops within a nourishing tissue - the endosperm - surrounded by the maternal seed integuments (or seed coat). As a ...

Dissection and Downstream Analysis of Zebra Finch Embryos at Early Stages of Development

נתיחה וניתוח במורד הזרם של הזברה פינק עוברים בשלבים מוקדמים של פיתוח

The zebra finch (Taeniopygiaguttata) has become an increasingly important model organism in many areas of research including toxicology1,2, behavior3, and ...

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca<sup>2+</sup>-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

הקרנת מבחני עבור הערכה של השפעות על Ca<sup>2 +</sup>תפוקה בינונית-איתות ותגובה Acrosome זרע אנושי

Ca2+-signaling is essential to normal sperm cell function and male fertility. Similarly, the acrosome reaction is vital for the ability of a human sperm ...