Name: whole mount preparation of the adult drosophila ventral nerve cord for giant fiber dye injection
Uploaded: 2011-06-04T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole Mount Preparation of the Adult Drosophila Ventral Nerve Cord for Giant Fiber Dye Injection at JoVE.com

وأيد المشروع وصفها من حيث عدد المنح R01HD050725 من المعهد الوطني لصحة الطفل والتنمية البشرية إلى العلامة المحتوى هو فقط من مسؤولية الكتاب ولا تمثل بالضرورة وجهة النظر الرسمية للمعهد الوطني لصحة الطفل والتنمية البشرية أو المعاهد الوطنية للصحة. نشكر أعضاء المختبر Godenschwege فضلا Schreader باربرا لمساهمتها في مخطوطة والفيديو.

1. تشريح الأعصاب من الحبل البطني يمكن إجراء تشريح وصبغ لملء GF في درجة حرارة الغرفة. تشريح لجميع الخطوات الباردة (4 درجات مئوية) وينبغي استخدام المياه المالحة لإبطاء عملية التمثيل الغذائي والحفاظ على الخلايا العصبية على قيد الحياة ل...

<ol>
	<li>Power, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+thoracico-abdominal+nervous+system+of+an+adult+insect+Drosophila+melanogaster.">The thoracico-abdominal nervous system of an adult insect Drosophila melanogaster.</a> J. Comp. Neurol. 88, 347-409 (1948).</li><li>Allen, M. J., Godenschwege, T. A., Tanouye, T. A., Phelan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Making+an+escape:+development+and+function+of+the+Drosophila+giant+fibre+system.">Making an escape: development and function of the Drosophila giant fibre system.</a> Semin. Cell Dev. Biol. 17, 31-41 (2006).</li><li>Boerner, J., Duch, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Average+shape+standard+atlas+for+the+adult+Drosophila+ventral+nerve+cord.">Average shape standard atlas for the adult Drosophila ventral nerve cord.</a> J. Comp. Neurol. 518, 2437-2455 (2010).</li><li>Gu, H., O'Dowd, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+synaptic+transmission+in+adult+Drosophila+Kenyon+cells+in+sity.">Cholinergic synaptic transmission in adult Drosophila Kenyon cells in sity.</a> J. Neurosci. 26, 265-272 (2006).</li><li>Boerner, J., Godenschwege, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+for+the+Drosophila+ventral+nerve+cord+standard+in+neuronal+circuit+reconstruction+and+in-depth+analysis+of+mutant+morphology.">Application for the Drosophila ventral nerve cord standard in neuronal circuit reconstruction and in-depth analysis of mutant morphology.</a> J. Neurogent. 24, 158-1567 (2010).</li><li>Godenschwege, T. A., Kristiansen, L. V., Uthaman, S. B., Hortsch, M., Murphey, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+conderved+role+for+Drosophila+Neuroglian+and+human+L1-CAM+in+central-synapse+formation.">A conderved role for Drosophila Neuroglian and human L1-CAM in central-synapse formation.</a> Curr. Biol. 16, 12-23 (2006).</li><li>Uthaman, S. B., Godenschwege, T. A., Murphey, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mechanism+distinct+from+highwire+for+the+Drosophila+ubiquitin+conjugase+bendless+in+synaptic+growth+and+maturation.">A mechanism distinct from highwire for the Drosophila ubiquitin conjugase bendless in synaptic growth and maturation.</a> J. Neurosci. 28, 8615-8623 (2008).</li><li>Storkebaum, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dominant+mutations+in+the+tyrosyl-tRNA+synthetase+gene+recapitulate+in+Drosophila+features+of+human+Charcot-Marie-Tooth+neuropathy.">Dominant mutations in the tyrosyl-tRNA synthetase gene recapitulate in Drosophila features of human Charcot-Marie-Tooth neuropathy.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106, 11782-11787 (2009).</li><li>Allen, M. J., Godenschwege, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+recordings+from+the+Drosophila+giant+fiber+system+(GFS).">Electrophysiological recordings from the Drosophila giant fiber system (GFS).</a> Cold Spring Harb. Protoc. 2010, pdb.prot5453-pdb.prot5453 (2010).</li><li>Augustin, H., Allen, M. J., Partridge, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+Recordings+from+the+Giant+Fiber+Pathway+of+D.+melanogaster.">Electrophysiological Recordings from the Giant Fiber Pathway of D. melanogaster.</a> J. Vis. Exp. , (2011).</li></ol>

يمكن تشريح الجهاز العصبي دون استخراج من الجسم يطير. هذا وقد اثنين من المزايا : أولا ، يسبب ضررا قليلا تشريح الجهاز العصبي ، والثانية ، ومعظم الأعصاب البقاء تعلق على العضلات والحواس. أداء التشريح ، كما هو موضح ، ويعد نموذج لوضع العلامات على التوالي إلى الأمام من صبغ GFS. ?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> اسم كاشف </th><th> شركة </th><th> فهرس العدد </th><th> تعليقات </th></tr><tr><td> Sylgard سيليكون إلاستومر 184 كيت </td><td> داو كورننغ </td><td></td><td></td></tr><tr><td> تشريح مجهر </td><td> AmScope </td><td> SM - 2TZ </td><td></td></tr><tr><td> Vannas مقص فائق </td><td> أكاديمية موسيقية </td><td> VS1023 </td><td></td></tr><tr><td> دومون الملقط Dumontstar 55 </td><td> أدوات العلوم غرامة </td><td> 11295-51 </td><td></td></tr><tr><td> دبابيس أوسترليتز الحشرات </td><td> أدوات العلوم غرامة </td><td> 26002-10 </td><td> Ø 0.1mm </td></tr><tr><td> أقطاب البورسليكات الزجاج </td><td> العالم آلات دقيقة </td><td> 1B100F - 4 </td><td></td></tr><tr><td> العمودي الماصة بولير 700c </td><td> ديفيد Kopf الآلات </td><td> نموذج 700C </td><td></td></tr><tr><td> وسيفر صفراء CH dilithium الملح </td><td> سيغما </td><td> L0259 </td><td> 1 ٪ في H 2 O </td></tr><tr><td> ثابت مجهر المرحلة منتصبة والكاميرا </td><td> نيكون </td><td> FN - 1 وكاميرا DS - U2 </td><td></td></tr><tr><td> خطة فلور 10X الهدف الجوية </td><td> نيكون </td><td> CFI خطة فلور 10X NA 0.3 WD 16mm </td><td></td></tr><tr><td> ثر المياه 40X غمس الهدف </td><td> نيكون </td><td> CFI فلور 40X W NA 0.80 WD 2.0mm </td><td></td></tr><tr><td> الهيدروليكية Micromanipulator 3D </td><td> Narishige الدولية </td><td> نموذج MW0 - 3 </td><td></td></tr><tr><td> مكبر الصوت </td><td> الحصول على الآلات ، وشركة </td><td> نموذج 5A </td><td></td></tr></tbody></table>

whole mount preparation of the adult drosophila ventral nerve cord for giant fiber dye injection

لتحليل مورفولوجيا محواري وشجيري الخلايا العصبية ، فمن الضروري الحصول على العلامات الدقيقة الهياكل العصبية. تحضير عينات المسمى جيدا مع قليل من دون تلف الأنسجة تمكننا من تحليل الخلايا والتشكل لمقارنة العينات الفردية لبعضهم البعض ، مما يسمح بالتالي تحديد الحالات الشاذة متحولة. في أسلوب أظهر تشريح الجهاز العصبي لا يزال معظمهم داخل يطير الكبار. من خلال شق ظهري ، يتم فتح البطن والصدر ويتم إزالة معظم الأعضاء الداخلية. ويتعرض فقط الجانب الظهري للحبل العصب البطنية (VNC) وسرطان عنق الرحم الضامة (سي) التي تحتوي على محاور عصبية كبيرة من الألياف العملاقة (GFS) 1 ، في حين أن المخ يحتوي على خلايا الجسم والتشعبات GF يبقى 2 في الرأس سليما . وينبغي في هذا التحضير لا تزال تعلق معظم أعصاب VNC لعضلاتهم. بعد التشريح ، ويتجلى ملء الخلايا من الألياف العملاقة (GF) مع صبغة الفلورسنت. في سي تقع المحاوير GF على السطح الظهري ، وبالتالي يمكن تصور بسهولة تحت المجهر مع النقيض تدخل الفرق (DIC) البصريات. هذا يسمح للحقن المحاوير GF مع صبغة في هذا الموقع لتسمية GF بأكملها بما في ذلك المحاور والمحطات الخاصة في فنك. هذا الأسلوب يؤدي إلى تلطيخ موثوقة وقوية من GFS السماح تصوير الخلايا العصبية على الفور بعد ملء مع epifluorescent المجهر. بدلا من ذلك ، يمكن تعزيز إشارة الفلورسنت القياسية المناعية باستخدام الإجراءات المناسبة للفحص المجهري 3 ارتفاع القرار مبائر.

Watch this Scientific Journal Video about Whole Mount Preparation of the Adult Drosophila Ventral Nerve Cord for Giant Fiber Dye Injection at JoVE.com

Whole Mount Preparation of the Adult Drosophila Ventral Nerve Cord for Giant Fiber Dye Injection

و<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; تشريح الكبار<em&gt; ذبابة الفاكهة</emويتجلى&gt; الحبل البطني العصب (VNC). هذا الأسلوب تشريح خاص يسبب ضررا قليلا إلى VNC يسمح بوضع العلامات اللاحقة من الخلايا العصبية العملاقة الألياف مع صبغة الفلورسنت لتصوير عالية الدقة.

كله من جبل إعداد الكبار ذبابة الفاكهة الحبل الاعصاب الاماميه للحقن صبغ الألياف العملاق

To analyze the axonal and dendritic morphology of neurons, it is essential to obtain accurate labeling of neuronal structures. Preparing well labeled ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Whole Mount Preparation of the Adult Drosophila Ventral Nerve Cord for Giant Fiber Dye Injection

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

التصور الجهاز العصبي الجنينية في جبل لالجامع ذبابة الفاكهة الأجنة

The Drosophila embryo is an attractive model system for investigating the cellular and molecular basis of neuronal development. Here we describe the ...

Electrophysiological Recordings from the Giant Fiber Pathway of D. melanogaster

Electrophysiological Recordings from the Giant Fiber Pathway of D. melanogaster

تسجيلات الكهربية من الألياف المسار عملاق د. melanogaster</em

When startled adult D. melanogaster react by jumping into the air and flying away. In many invertebrate species, including D. melanogaster, the "escape" ...

Paired Nanoinjection and Electrophysiology Assay to Screen for Bioactivity of Compounds using the Drosophila melanogaster Giant Fiber System

Paired Nanoinjection and Electrophysiology Assay to Screen for Bioactivity of Compounds using the Drosophila melanogaster Giant Fiber System

تقرن Nanoinjection والفحص الكهربية للكشف عن النشاط الحيوي للمركبات باستخدام ذبابة الفاكهة السوداء البطن نظام الألياف العملاق

Screening compounds for in vivo activity can be used as a first step to identify candidates that may be developed into pharmacological agents1,2. We ...

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

استنساخه سحق الفأر العصب الوركي وتقييم لاحق للتجديد من قبل الجامعة جبل تحليل العضلات

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

DiI-Labeling of DRG Neurons to Study Axonal Branching in a Whole Mount Preparation of Mouse Embryonic Spinal Cord

الجاذبة - DRG وصفها من الخلايا العصبية لدراسة المحاور المتفرعة في إعداد جبل الجامعة الحبل الشوكي الفأر الجنينية

Here we  present a technique to label the trajectories of small groups of DRG neurons  into the embryonic spinal cord by diffusive staining using the ...

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

تشريح العضلات Abdominis المستعرض لتحليل تقاطع العصبية والعضلية جبل كامل

Analysis of neuromuscular junction morphology can give important insight into the physiological status of a given motor neuron. Analysis of thin flat ...

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

كله من جبل Immunolabeling الشم مستقبلات الخلايا العصبية في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; الهوائي

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this ...

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

و<em&gt; في المختبر</em&gt; ماوس الكبار إعداد العضلات العصبية لدراسة خصائص اطلاق Afferents العضلات

Muscle sensory neurons innervating muscle spindles and Golgi tendon organs encode length and force changes essential to proprioception. Additional ...

Whole Mount Dissection and Immunofluorescence of the Adult Mouse Cochlea

جبل كله تشريح والمناعي من الكبار ماوس القوقعة

The organ of Corti, housed in the cochlea of the inner ear, contains mechanosensory hair cells and surrounding supporting cells which are organized in a ...

The Preparation of Oblique Spinal Cord Slices for Ventral Root Stimulation

لإعداد المائل الحبل الشوكي شرائح لبطني الجذر تحفيز

Electrophysiological recordings from spinal cord slices have proven to be a valuable technique to investigate a wide range of questions, from cellular to ...