Name: whole mount preparation of the adult drosophila ventral nerve cord for giant fiber dye injection
Uploaded: 2011-06-04T14:00:00
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설명이 프로젝트는 내용이 전적으로 저자의 책임이며 반드시 아동 보건 인간 발달이나 국립 연구소의 공식 견해를 대변하지 않는 태그를 아동 보건 인간 발달의 국립 연구소에서 부여 번호 R01HD050725 지원했습니다 보건 국립 연구소. 우리는 원고와 동영상을 자신의 입력을위한 Godenschwege 실험실뿐만 아니라 바바라 Schreader의 회원 감사합니다.

1. 복부 신경 코드의 해부 GF의 필링 해부와 염료는 실온에서 수행할 수 있습니다. 모든 해부는 추운 단계 (4 ° C) 호수가 세포 신진 대사를 느리게하고 더 이상 신경이 살아 유지하는 데 사용해야합니다. <ol><li> CO 2와 함께 성인 파리 (4 일간 이상)을 마취하거나 그들이 움직일 때까지 얼음에 그들을 진정. 얼음 Anesthetizing 것은 더 많은 시간을 (최대 30 분)이 필요합니다?...

<ol>
	<li>Power, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+thoracico-abdominal+nervous+system+of+an+adult+insect+Drosophila+melanogaster.">The thoracico-abdominal nervous system of an adult insect Drosophila melanogaster.</a> J. Comp. Neurol. 88, 347-409 (1948).</li><li>Allen, M. J., Godenschwege, T. A., Tanouye, T. A., Phelan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Making+an+escape:+development+and+function+of+the+Drosophila+giant+fibre+system.">Making an escape: development and function of the Drosophila giant fibre system.</a> Semin. Cell Dev. Biol. 17, 31-41 (2006).</li><li>Boerner, J., Duch, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Average+shape+standard+atlas+for+the+adult+Drosophila+ventral+nerve+cord.">Average shape standard atlas for the adult Drosophila ventral nerve cord.</a> J. Comp. Neurol. 518, 2437-2455 (2010).</li><li>Gu, H., O'Dowd, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+synaptic+transmission+in+adult+Drosophila+Kenyon+cells+in+sity.">Cholinergic synaptic transmission in adult Drosophila Kenyon cells in sity.</a> J. Neurosci. 26, 265-272 (2006).</li><li>Boerner, J., Godenschwege, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+for+the+Drosophila+ventral+nerve+cord+standard+in+neuronal+circuit+reconstruction+and+in-depth+analysis+of+mutant+morphology.">Application for the Drosophila ventral nerve cord standard in neuronal circuit reconstruction and in-depth analysis of mutant morphology.</a> J. Neurogent. 24, 158-1567 (2010).</li><li>Godenschwege, T. A., Kristiansen, L. V., Uthaman, S. B., Hortsch, M., Murphey, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+conderved+role+for+Drosophila+Neuroglian+and+human+L1-CAM+in+central-synapse+formation.">A conderved role for Drosophila Neuroglian and human L1-CAM in central-synapse formation.</a> Curr. Biol. 16, 12-23 (2006).</li><li>Uthaman, S. B., Godenschwege, T. A., Murphey, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mechanism+distinct+from+highwire+for+the+Drosophila+ubiquitin+conjugase+bendless+in+synaptic+growth+and+maturation.">A mechanism distinct from highwire for the Drosophila ubiquitin conjugase bendless in synaptic growth and maturation.</a> J. Neurosci. 28, 8615-8623 (2008).</li><li>Storkebaum, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dominant+mutations+in+the+tyrosyl-tRNA+synthetase+gene+recapitulate+in+Drosophila+features+of+human+Charcot-Marie-Tooth+neuropathy.">Dominant mutations in the tyrosyl-tRNA synthetase gene recapitulate in Drosophila features of human Charcot-Marie-Tooth neuropathy.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106, 11782-11787 (2009).</li><li>Allen, M. J., Godenschwege, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+recordings+from+the+Drosophila+giant+fiber+system+(GFS).">Electrophysiological recordings from the Drosophila giant fiber system (GFS).</a> Cold Spring Harb. Protoc. 2010, pdb.prot5453-pdb.prot5453 (2010).</li><li>Augustin, H., Allen, M. J., Partridge, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+Recordings+from+the+Giant+Fiber+Pathway+of+D.+melanogaster.">Electrophysiological Recordings from the Giant Fiber Pathway of D. melanogaster.</a> J. Vis. Exp. , (2011).</li></ol>

신경 계통은 플라이 본체에서 추출하지 않고 해부를하실 수 있습니다. 이 두 장점을 가지고 먼저, 해부 신경 시스템에 약간의 손상을 초래하고, 둘째, 대부분의 신경은 근육과 감각 기관에 붙어있어. 로 설명 절개를, 공연하는 것은 GFS의 정직 염료 라벨에 대한 샘플을 준비합니다. 편리, GFS에 postsynaptic motoneurons은 근육에 붙어있어. Axons 따라서, 더 이상 신경이 살아 유지 피해가 있습니다. 또한, 신?...

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 댓글 </th></tr><tr><td> Sylgard 184 실리콘 엘라스토머 키트 </td><td> 다우 코닝 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 해부 현미경 </td><td> AmScope </td><td> SM - 2TZ </td><td></td></tr><tr><td> Vannas 가위 극상의 </td><td> 아카데믹 인스 트루먼 트의 </td><td> VS1023 </td><td></td></tr><tr><td> 더몬트 집게 Dumontstar 55 </td><td> 파인 과학 도구 </td><td> 11295-51 </td><td></td></tr><tr><td> 아우 스터 리츠의 곤충 핀 </td><td> 파인 과학 도구 </td><td> 26002-10 </td><td> Ø 0.1mm </td></tr><tr><td> Borosilicate 유리 전극 </td><td> 세계 정밀 계측기 </td><td> 1B100F - 4 </td><td></td></tr><tr><td> 수직 피펫 풀러 700c </td><td> 데이비드 Kopf 인 스트 루먼트 </td><td> 모델 700C </td><td></td></tr><tr><td> 루시퍼 옐로우 CH dilithium 소금 </td><td> 시그마 </td><td> L0259 </td><td> H 2 O에 1퍼센트 </td></tr><tr><td> 고정 스테이지 입식 현미경 &amp; 카메라 </td><td> 니콘 </td><td> FN - 1 &amp; DS - U2 카메라 </td><td></td></tr><tr><td> 계획 플루어 10X 에어 목표 </td><td> 니콘 </td><td> CFI 계획 플루어 16mm 10X NA 0.3 WD </td><td></td></tr><tr><td> 플루어 40X 물이 목표 디핑 </td><td> 니콘 </td><td> CFI 플루어 40X W NA 0.80 WD 2.0mm </td><td></td></tr><tr><td> 3D 유압 Micromanipulator </td><td> Narishige 국제 </td><td> 모델 MW0 - 3 </td><td></td></tr><tr><td> 증폭기 </td><td> 악기를 얻기 주식 회사 </td><td> 모델 5A </td><td></td></tr></tbody></table>

whole mount preparation of the adult drosophila ventral nerve cord for giant fiber dye injection

뉴런의 axonal와 돌기 형태를 분석하기 위해서는의 연결 구조의 정확한 라벨을 얻기 위해 필수적입니다. 노 조직 손상이 거의 잘 레이블 샘플을 준비하는 것은 그러므로 돌연변이 변이의 식별을 허용, 우리는 세포 형태를 분석하고 서로에게 개별 샘플을 비교할 수 있습니다. 시연 절개 방법에서 신경 시스템은 성인 플라이 내부에 대부분 남아있다. 지느러미 절개를 통해 복부와 흉부 열리고 있으며, 대부분의 내부 장기가 제거됩니다. GF 셀 본문과 dendrites을 포함하고있는 두뇌 손상 머리에이 남아있는 동안 복부 신경 코드 (VNC)와 거대한 섬유 (GFS) 1의 큰 axons를 포함하는 자궁 결합 (CVC)의 단지 등의 측면이 노출 . 이 준비에서 VNC 대부분의 신경들은 근육에 연결되어 유지됩니다. 해부 다음, 형광 염료와 함께 거대한 섬유 (GF)의 세포내 작성이 증명됩니다. CVC에서는 GF의 axons는 등의 표면에 위치하고 있으며 따라서 차등 간섭 대비 (DIC) 광학 장치와 현미경으로 쉽게 시각하실 수 있습니다. 이것은이 사이트에서 염료와 GF의 axons의 주입은 VNC에서 axons과 단말기를 포함한 전체 GF 레이블을 수 있습니다. 이 방법은 신경이 epifluorescent 현미경으로 기입 후 즉시 군데 수 있도록 GFS의 안정적이고 강력한 얼룩을 초래합니다. 또는 형광 신호는 높은 해상도 공촛점 현미경에 적합한 표준 immunohistochemistry 절차 3을 사용 강화 수 있습니다.

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Whole Mount Preparation of the Adult Drosophila Ventral Nerve Cord for Giant Fiber Dye Injection

<em&gt; 생체내에</em성인&gt; 해부<em&gt; Drosophila</em&gt; 복부 신경 코드 (VNC)이 증명됩니다. 이 특별한 절개 방법은 고해상도 이미징을위한 형광 염료와 함께 거대한 섬유 뉴런의 후속 라벨을 허용 VNC 거의 손상을 초래합니다.

성인 전체 마운트 준비 Drosophila</em장 섬유 염료 주입을위한> 복부 신경 코드

To analyze the axonal and dendritic morphology of neurons, it is essential to obtain accurate labeling of neuronal structures. Preparing well labeled ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Whole Mount Preparation of the Adult Drosophila Ventral Nerve Cord for Giant Fiber Dye Injection

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

전체 마운트의 배아 신경 계통의 시각화 Drosophila 태아

The Drosophila embryo is an attractive model system for investigating the cellular and molecular basis of neuronal development. Here we describe the ...

연구

신경과학

Electrophysiological Recordings from the Giant Fiber Pathway of D. melanogaster

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의 거대한 섬유 패스에서 Electrophysiological 레코딩 D. melanogaster</em

When startled adult D. melanogaster react by jumping into the air and flying away. In many invertebrate species, including D. melanogaster, the "escape" ...

Paired Nanoinjection and Electrophysiology Assay to Screen for Bioactivity of Compounds using the Drosophila melanogaster Giant Fiber System

Paired Nanoinjection and Electrophysiology Assay to Screen for Bioactivity of Compounds using the Drosophila melanogaster Giant Fiber System

를 사용하여 화합물 Bioactivity위한 이점 Nanoinjection 및 화면에 대한 전기 생리학 분석 Drosophila melanogaster 거대 섬유 시스템

Screening compounds for in vivo activity can be used as a first step to identify candidates that may be developed into pharmacological agents1,2. We ...

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

전체 마운트 근육 분석에 의한 재현성 마우스 좌골 신경 크러시와 중생의 후속 평가

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

DiI-Labeling of DRG Neurons to Study Axonal Branching in a Whole Mount Preparation of Mouse Embryonic Spinal Cord

마우스 배아 척수의 전체 마운트 준비 분기 Axonal 공부 DRG 뉴런의 DiI - 라벨링

Here we  present a technique to label the trajectories of small groups of DRG neurons  into the embryonic spinal cord by diffusive staining using the ...

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

전신 탈염 신경 근육 정션 분석을위한 트랜스 대 복부 근육의 해부

Analysis of neuromuscular junction morphology can give important insight into the physiological status of a given motor neuron. Analysis of thin flat ...

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

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에있는 후각 수용체 뉴런의 전체 마운트 Immunolabeling<em&gt; 초파리</em&gt; 안테나

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this ...

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

<em&gt; 체외</em근육의 구 심성의 소성 특성을 연구&gt; 성인 마우스 근육 - 신경 준비

Muscle sensory neurons innervating muscle spindles and Golgi tendon organs encode length and force changes essential to proprioception. Additional ...

Whole Mount Dissection and Immunofluorescence of the Adult Mouse Cochlea

전체 마운트 해부 및 성인 마우스 달팽이관의 면역 형광

The organ of Corti, housed in the cochlea of the inner ear, contains mechanosensory hair cells and surrounding supporting cells which are organized in a ...

The Preparation of Oblique Spinal Cord Slices for Ventral Root Stimulation

복부 루트 자극에 대한 사선 척수 조각의 준비

Electrophysiological recordings from spinal cord slices have proven to be a valuable technique to investigate a wide range of questions, from cellular to ...

성인 전체 마운트 준비 Drosophila 복부 신경 코드