Name: igy technology: extraction of chicken antibodies from egg yolk by polyethylene glycol (peg) precipitation
Uploaded: 2011-05-01T14:00:00
Duration: 7 min 26 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol PEG Precipitation at JoVE.com

Эта работа была поддержана грантом немецкого Федерального министерства образования и исследований (проект BiGRUDI [Bi ologische G efahrenlagen: R isikobewertung, и ltraschnelle D etektion унд я dentifizierung фон bioterroristisch relevanten Agenzien, 13N9594]). Мы благодарим В. Diemar (Charité-Universitätsmedizin Берлине, Institut für Pharmakologie) за отличную техническую помощь.

1. Протокол - IgY-экстракция с помощью ПЭГ-осадков Рис. 1 приводится схема IgY-экстракции (см. таблицу 2). Протокол был впервые описан в Полсон и соавт. 1980 год. Все шаги должны быть выполнены с использованием латексных перчаток. <ol><li> Яичной скорлупы тщательно трещины и желток переносится на &quot;желток ложкой&quot;, чтобы удалить как можно больше яичного белка, насколько возможно. </li><li> Желток переносится на фильтровальную бумагу и проката, чтобы удалить остатки яичного белка, то кожа желток режется с ланцетом или аналогичного инструмента (пипетки). Желток выливают в 50 мл трубки и яйца объем зарегистрированных (V1). </li><li> Два раза объем яичный желток ФСБ смешивают с желтком (ΣV1 + V2), после этого 3,5% ПЭГ 6000 (в граммах, измельченный) от общего объема добавляется и перемешивают, а затем на 10 минут катался по прокатке смесителя. Это шаг отделяет процедуры извлечения суспензии в два этапа. Одна фаза состоит из &quot;твердых желток и жировые вещества&quot; (в оригинале котировки Полсон и соавт. 1980) и водянистые фазы, содержащей IgY и других белков. </li><li> Трубы центрифугировали при 4 ° С в течение 20 мин (10 000 оборотов в минуту по 13 000 мкг, Heraeus Multifuge 3SR +, фиксированный угол ротора). Супернатант (V3) заливается через складчатый фильтр и переведен в новую трубу. </li><li> 8,5% ПЭГ 6000 в граммах (рассчитанный в соответствии с новым объема) будут добавлены в трубке, встряхивали и проката на постоянной смесителя, как в шаге 3. </li><li> Повторите шаг 4 с той разницей, что супернатант отбрасывается. </li><li> Осадок тщательно растворяют в 1 мл PBS с помощью палки стекла и vortexer. PBS будет добавлен в конечном объеме 10 мл (V4). Раствор смешивают с 12% ПЭГ 6000 (м / о, 1,2 г) и обрабатывают, как в шаге 3 (вихрь, прокат смесителя). </li><li> Повторите шаг 6 и растворить гранулы тщательно в 800 мкл PBS (стеклянной палочкой и вихревые). Подождите, пока пузырьки воздуха исчезают, а затем передать (пипетки) экстракт диализа капсулы. Промойте трубку с 400 мкл PBS и добавить объем диализа устройство (версии 5). (Для приготовления диализных устройств и мембран см. приложение). </li><li> Экстракт диализу в течение ночи в 0,1% физиологического раствора (1600 мл) и осторожно перемешивают с помощью магнитной мешалки. Следующим утром, солевые заменяется PBS и диализ в течение еще трех часов. </li><li> После этого IgY-экстракт вытащил из диализа капсулу пипетки и переданы в 2 мл труб. Конечный объем составляет около 2 мл (V6). </li><li> Содержание белка (мг / мл) образцов измеряется фотометрически при 280 нм (1:50 разбавляют PBS) и рассчитывается в соответствии с Ламберта-Бера с коэффициента экстинкции 1,33 для IgY (см. рис. 2), рис . 4 показывает качество подготовки (чистота и восстановление около 80%). </li><li> Желательно хранить образцы в аликвоты при -20 ° C (не замораживать образцы при -70 ° С). </li><li> Качество последние приготовления анализируется простой SDS-PAGE, как описано в протоколе Юпитера <a href="http:/www.jove.com/details.php?id=1916">http:/www.jove.com/details.php?id=1916</a> </li></ol> 2. Приложение-перед использованием диализа пакет должен быть подготовлен в следующем образом в соответствии с рекомендациями производителя: <ol><li> 20 пакетиков диализа разрезают на куски по 30 см и приводится в 2000 Стакан стеклянный мл. </li><li> 1750 мл 5 мМ ЭДТА-раствору добавляют. </li><li> Стеклянная воронка находится над мешки для того, чтобы сумки покрыты раствора ЭДТА. Раствор нагревают и кипятят в течение 5 мин (плитка). Раствор сливают и сумки промывают три раза дистиллированной водой. </li><li> Еще раз 1750 мл ЭДТА-раствору добавляют, кипятят 5 мин и промывают три раза дистиллированной водой как указано выше. </li><li> Наконец диализа мешки кипятят 10 мин в дистиллированной воде и хранили при 4 ° C. Выньте диализа мешки с помощью пинцета стерилизовать. </li></ol> 3. Представитель результаты <img src="/files/ftp_upload/3084/3084fig1.jpg" alt="Рисунок 1" /> Рисунок 1. Принципиальная схема IgY-экстракция с помощью полиэтиленгликоля осадков в соответствии с первоначальным описанием Полсон и соавт. 1980 год. <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/3084/3084largefig1.jpg">Для просмотра больших изображений, нажмите здесь.</a> <img src="/files/ftp_upload/3084/3084fig2.jpg" alt="Рисунок 2" /> Рисунок 2. Разработка полного IgY в яичном желтке иммунизированных кур в зависимости от возраста. Учитывая это еженедельное среднее общее IgY / яйцо и SD (п = 4 кур-несушек). Из [Паули и соавт. 2009]). <img src="/files/ftp_upload/3084/3084fig3.jpg" alt="Рисунок 3" /> Рисунок 3. Layiнг потенциала в области мониторинга четырех кур, иммунизированных различными антигенами. Стрелки указывают дату иммунизации (из [Паули и соавт. 2009]). <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/3084/3084largefig3.jpg">Для просмотра больших изображений, нажмите здесь.</a> <img src="/files/ftp_upload/3084/3084fig4.jpg" alt="Рисунок 4" /> Рисунок 4. Полиакриламидном-Gelelectrophoresis индивидуальной подготовки IgY из разных яиц в восстановительных условиях Полоса 1 - маркер молекулярного веса, переулок 2 - IgY стандарта, Lane 3-5 - различные образцы IgY приготовленного, как описано в протоколе. Эти последние приготовления в соответствии с шагом 10 из протокола. HC - тяжелые цепи, LC - светло chaines,? - Незначительные примеси соответствующие молекулярным весом около 35 кДа (вероятно, С-концевой фрагмент предшественника вителлогенина II, [Klimentzou и др., 2006.]). <table border="1"><tbody><tr><td>&nbsp;</td><td> Куриные 21 (антиген) </td><td> Куриные 22 (антиген) </td><td> Куриные 19 (антиген В) </td><td> Куриные 23 (антиген С) </td></tr><tr><td> Яйцо числа (всего IgY) 1, 2-летний период </td><td> 625 (38 г) </td><td> 626 (38 г) </td><td> 545 (33 г) </td><td> 608 (37 г) </td></tr><tr><td> Яйцо числа (всего МГГ), первый год </td><td> 345 (20 г) </td><td> 304 (16 г) </td><td> 326 (18 г) </td><td> 308 (17 г) </td></tr><tr><td> Яйцо числа (всего МГГ), второй год </td><td> 280 (18 г) </td><td> 322 (21 г) </td><td> 219 (15 г) </td><td> 300 (20 г) </td></tr><tr><td> % От макс. возможное число яйцо (первый год) 2 </td><td> 106 </td><td> 93 </td><td> 100 </td><td> 95 </td></tr><tr><td> % От макс. возможное число яиц (второй год) </td><td> 86 </td><td> 99 </td><td> 67 </td><td> 92 </td></tr><tr><td> количество обработанных яиц </td><td> 565 </td><td> 620 </td><td> 283 </td><td> 401 </td></tr></tbody></table> 1 Общая сумма IgY рассчитывается путем умножения количества яиц средним значением 60 мг белка в яйце в соответствии с данными на рисунке 2. 2 макс. возможное число яйца в год составляет 325 в соответствии с информацией селекционера. Таблица 1. Два года статистика яйцо яйценоскость кур, иммунизированных различными антигенами. Укладка мощности в процентах не более четырех кур после иммунизации различными антигенами, а также IgY-исхода в течение двух лет (см. также рис. 3), [Паули и соавт. 2009]). <table border="1"><tbody><tr><td> Яйцо Nr. </td><td> Курица Nr. Укладка дате </td><td> V1 [мл] желток </td><td> V2 [мл] PBS </td><td> 1. PEG предшествующий. [Г] </td><td> Том [мл] после </td><td> 2. PEG предшествующий. [Г] </td><td> Гранула </td><td> 3. PEG предшествующий. [Г] </td><td> Гранула </td><td> Том [мл] </td><td> Общий белок мг / мл </td><td> Исправлено общего белка мг / мл </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> 2xV1 ΣV1 + V2 </td><td> 3,5% [м / о] ΣV1 + V2 </td><td> предшествующий., centrif. и фильтрации V3 </td><td> 8,5% [м / о] V3 </td><td> растворяется в мл PBS V4 </td><td> 12% [/ об] V4 </td><td> Растворенный в мл PBS V5 </td><td> После диализа против PBS V6 </td><td> A280/ml </td><td> A280/ml: 1.33 </td></tr><tr><td> 1 </td><td> H293 / 22.10. </td><td> 15 </td><td> 30 45 </td><td> 1,58 </td><td> 31 </td><td> 2,63 </td><td> 10 </td><td> 1,2 </td><td> 1,2 </td><td> 1,7 </td><td> 35,0 </td><td> 26,3 </td></tr><tr><td> 2 </td><td> H293 / 23.10. </td><td> 13 </td><td> 26 39 </td><td> 1,37 </td><td> 25 </td><td> 2,12 </td><td> 10 </td><td> 1,2 </td><td> 1,2 </td><td> 1,7 </td><td> 28,8 </td><td> 21,6 </td></tr></tbody></table> Таблица 2. Образцовый протокол PEG осадков

<ol>
	<li>Akita, E. M., Nakai, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+four+purification+methods+for+the+production+of+immunoglobulins+from+eggs+laid+by+hens+immunized+with+an+enterotoxigenic+E.+coli+strain.">Comparison of four purification methods for the production of immunoglobulins from eggs laid by hens immunized with an enterotoxigenic E. coli strain.</a> J. Immunol. Methods. 160, 207-214 (1993).</li><li>De Meulenaer, B., Huyghebaert, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+purification+of+chicken+egg+yolk+immunoglobulins:+a+review.">Isolation and purification of chicken egg yolk immunoglobulins: a review.</a> Food Agricult. Immunol. 13, 275-288 (2001).</li><li>Klimentzou, P., Paravatou-Petsotas, M., Zikos, C. h., Beck, A., Skopeliti, M., Czarnecki, J., Tsitsilonis, O., Voelter, W., Livaniou, E., Evangelatos, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+immunochemical+evaluation+of+antibodies+Y+for+the+poorly,+immunogenic+polypeptide+prothymosin+alpha.">Development and immunochemical evaluation of antibodies Y for the poorly, immunogenic polypeptide prothymosin alpha.</a> Peptides. 27, 183-193 (2006).</li><li>Pauly, D., Dorner, M., Zhang, X., Hlinak, A., Dorner, B., Schade, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+of+laying+capacity,+immunoglobulin+Y+concentration,+and+antibody+titer+development+in+chickens+immunized+with+ricin+and+botulinum+toxins+over+a+two-year+period.">Monitoring of laying capacity, immunoglobulin Y concentration, and antibody titer development in chickens immunized with ricin and botulinum toxins over a two-year period.</a> Poultry Science. 88, 281-290 (2009).</li><li>Polson, A., von Wechmar, M. B., van Regenmortel, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+viral+IgY+antibodies+from+yolks+of+immunized+hens.">Isolation of viral IgY antibodies from yolks of immunized hens.</a> Immunol. Commun. 9, 475-493 (1980).</li><li>Schade, R., Behn, I., Erhard, M., Hlinak, A., Staak, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chicken egg yolk antibodies, production and application : IgY-Technology. , (2001).</li><li>Schade, R., Calzado, E. G., Sarmiento, R., Chacana, P. A., Porankiewicz-Asplund, J., Terzolo, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chicken+egg+yolk+antibodies+(IgY-technology):+a+review+of+progress+in+production+and+use+in+research+and+human+and+veterinary+medicine.">Chicken egg yolk antibodies (IgY-technology): a review of progress in production and use in research and human and veterinary medicine.</a> Altern. Lab Anim. 33, 129-154 (2005).</li><li>Witkowski, P. T., Bourquain, D. R., Hohn, O., Schade, R., Nitsche, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+gun-supported+DNA+immunisation+of+chicken+for+straightforward+production+of+poxvirus-specifiv+IgY+antibodies.">Gene gun-supported DNA immunisation of chicken for straightforward production of poxvirus-specifiv IgY antibodies.</a> J. Immunol. Methods. 341, 146-153 (2009).</li></ol>

Эксперименты на животных были проведены в соответствии с руководящими принципами и правилами установленными Landesamt меха Gesundheit унд Soziales Берлине (H 0069/03).

Выбор подходящего метода очистки IgY зависит от масштаба очистки (лабораторных или промышленных), эффективность затрат, технологии (лабораторное оборудование), и воздействие на окружающую среду (управление отходами). Различные методы добычи IgY были подробно рассмотрен Де Meulenaer &amp; Huyghebaert (2001, для обзора см. также Шаде и соавт. 2005). В целом, эти методы могут быть разделены на три основные группы: <ol><li> Осадки методами: с участием аммония или сульфата натрия, полиэтиленгликоль (ПЭГ), каприловой кислоты и caragenean. </li><li> Хроматографические методы: аффинной хроматографии, ионообменной хроматографии, гидрофобной хроматографии взаимодействия, thiophylic хроматографии взаимодействия, и гель-фильтрации хроматографии. </li><li> Ультрафильтрации. </li></ol> Чистота IgY препарата может быть увеличена на комбинации методов, например, ПЭГ осадков могут быть объединены с аффинной хроматографии. В некоторых случаях, в зависимости от конечного применения, водный экстракт IgY достаточно для достижения хороших результатов (Акита и Накаи 1993). По нашему опыту, IgY-образец получаем с помощью ПЭГ-осадков работал очень хорошо в много различных иммунологических анализов. За счет стандартизации PEG-метода осаждения один технический помощник способен обрабатывать около 84 яиц в неделю, что соответствует сумме от общего числа IgY от 4 до 7 г в неделю. Простой расчет: несушки является иммунизированных антигеном. Через несколько прививки повышения курицы производит специфические антитела (АТ) с титр 1:50000 в течение периода в 30 дней. 30 яиц х 2 мл IgY экстракт (см. протокол и рис. 3) соответствует 60 мл общего IgY, который, в свою очередь, соответствует Ab-разведении 3000 л (мощностью ведро 10 л), это означает, что с 3000 л решения Ab 300 ведра могут быть заполнены. Таким образом, с учетом такого огромного количества Ab-это не проблема для хранения Аб-пул постоянное качество и специфику. Этот метод уменьшает заряд / много изменчивости в противном случае наблюдается в polyspecific Ab. Несмотря на аспекте количества, IgY Ab еще больше преимуществ по сравнению с IgG млекопитающих: Нет активации системы комплемента млекопитающих, нет перекрестной реактивности с HAMA (человеческих анти мышиного антитела), ревматоидный фактор или человеческие группы крови антигенов (отсутствие heteroagglutinins). Выдающимися преимуществами IgY-Ab является так называемый филогенетический расстояния. Филогенетические расстояние причина часто описывают различия между особенностями Ab млекопитающих и куры, даже тогда, когда одинаково прививки. В дополнение к различиям между млекопитающих и птичьего иммунной системы сами, различия в филогенетического развития в этих двух классов животного вносит свой вклад в различные особенности Ab. Некоторые авторы сообщают, что куры часто производят Abs против филогенетически хорошо сохранились и млекопитающих, белки или пептиды более эффективно, чем кролики (см. обзор Шаде и др. a. 2005). Как следствие, сохраняется антиген может оставаться &quot;в масках&quot;, чтобы кролик иммунной системы, и тем самым вызывают только слабые или &quot;тихая&quot; ответ. Кроме того, если кур и кроликов, иммунизированных млекопитающих же антиген, очень часто куры ответить Ab-специфичность, что редко могут быть достигнуты в кроликов. Также аспект животных очень важно, поскольку Ab являются неинвазивным извлечены из яичного желтка. В сочетании с Джином-Gun (плазмиды) иммунизации IgY производства полностью неинвазивным (Витковский и соавт. 2009). В заключение производства Ab у кур и IgY-экстракция с помощью ПЭГ-осадки очень рентабельным и приводит к весьма специфический Ab со стабильной титры до 1:1000000. В связи с филогенетической расстояние между Aves и Mammalia, курица в состоянии производить конкретные Ab против хорошо сохранились и млекопитающих антигенов, в отличие от, например, кроликов. Огромный объем Ab получен IgY-технология открывает двери и для использования IgY-Ab в человеческой и ветеринарной медицине для терапевтических / профилактических целях.

<ol><li> Диализировать сумка Visking, Тип 27/32, отрезали -14 кДа, Карл Рот GmbH, Карлсруэ, Германия </li><li> Сокол трубы Blue Max, 50 мл конические полипропиленовые трубы, Becton Dickinson Лабораторное оборудование, Франклин озер Нью-Йорк, США </li><li> Сложенный фильтр MN 615 ¼, ∅ 150 мм, Карл Рот GmbH, Карлсруэ, Германия Heraeus </li><li> Магнитная мешалка, Variomag Mono, H + P Labortechnik AG, Oberschleissheim, Германия </li><li> Микро-диализировать-капсулы 5,0 мл, Карл Рот GmbH, Карлсруэ, Германия </li><li> Multifuge 3SR +, Thermo Scientific, Langenselbold, Германия </li><li> Фотометр УФ-160A, Shimadzu Deutschland GmbH, Дуйсбург, Германия </li><li> Полиэтиленгликоль 6000, Rotipuran Ph. Карл Рот GmbH, Карлсруэ, Германия </li><li> Готовые PBS-буфера 10x, Roche Diagnostics GmbH, Мангейм, Германия </li><li> Роликовые Смеситель SRT2, Стюарт, Стаффордшир, Великобритания </li><li> Vibrofix VF2, Янке и Кункель, IKA-Labortechnik, Staufen i.Br., Германия </li><li> Желток ложкой, Fackelmann (Хозяйственные эффекты), Германия </li></ol>

igy technology: extraction of chicken antibodies from egg yolk by polyethylene glycol (peg) precipitation

Куры могут пройти иммунизацию с помощью им вакцинации (мышцы грудной, влево и вправо, объемом впрыска 0,5-1,0 мл) или с помощью генно-Gun-плазмиды иммунизации. В зависимости от иммуногенность антигена, высокие титры антител (до 1:100000 - 1:1000000) может быть достигнуто только после одного или 3 - 4 прививки импульс. Как правило, курица откладывает яйца непрерывно в течение около 72 недель, после укладки уменьшается мощность. Этот протокол описывает добычу от общего числа IgY из яичного желтка с помощью осаждения процедуры (PEG. Полсон и соавт. 1980). Метод включает в себя два важных шагов. Первое удаление липидов и второй осадков от общего числа IgY из супернатанта шагу. После диализа против буфера (как правило, PBS) IgY-экстракт может храниться при температуре -20 ° С в течение более года. Чистотой экстракта составляет около 80%, общая IgY на яйцо составляет от 40-80 мг, в зависимости от возраста несушки. Общая IgY содержание увеличивается с возрастом курица из примерно 40 мг / яйцо до 80 мг / яйцо (в отношении PEG осадков). Яйценоскость на курицу в год составляет около 325 яиц. Это означает, что общий потенциал урожая от 20 г общего IgY / год на основе среднего содержания IgY 60 мг общего IgY / яйцо (см. Таблицу 1).

Watch this Scientific Journal Video about IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol PEG Precipitation at JoVE.com

IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol PEG Precipitation

Этот протокол описывает, в частности, добыча от общего числа IgY из яичного желтка с помощью полиэтилена осадков гликоль и дает общую информацию о IgY технологии.

IgY Технология: Добыча Куриный Антитела из яичного желтка на полиэтиленгликоля (ПЭГ) осадков

Hens can be immunized by means of  i.m. vaccination (Musculus pectoralis, left and right, injection volume  0.5-1.0 ml) or by means of Gene-Gun ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol (PEG) Precipitation

Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis

Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis

Признание эпидермального трансглутаминазе по IgA и тканей трансглутаминазе 2 Антитела в редких случаях Резус Дерматит

Tissue transglutaminase 2 (tTG2) is an intestinal digestive enzyme which deamidates already partially digested dietary gluten e.g. gliadin peptides. In ...

A Simple Chelex Protocol for DNA Extraction from Anopheles spp.

A Simple Chelex Protocol for DNA Extraction from Anopheles spp.

Простой протокол Chelex для выделения ДНК из<em&gt; Anopheles</em&gt; SPP.

Endemic countries are increasingly adopting molecular tools for  efficient typing, identification and surveillance against malaria parasites and  vector ...

Detection of Invasive Pulmonary Aspergillosis in Haematological Malignancy Patients by using Lateral-flow Technology

Обнаружение инвазивный легочный аспергиллез в гематологических больных злокачественных новообразований с помощью бокового потока технологии

Invasive pulmonary aspergillosis (IPA) is a leading cause of morbidity and mortality in haematological malignancy patients and hematopoietic stem cell ...

Purification and Visualization of Lipopolysaccharide from Gram-negative Bacteria by Hot Aqueous-phenol Extraction

Очистка и визуализация липополисахарида из грамотрицательных бактерий горячих водно-фенольной экстракции

Lipopolysaccharide (LPS)  is a major component of Gram-negative bacterial outer membranes. It is a tripartite molecule consisting of  lipid A, which is ...

Influenza Virus Propagation in Embryonated Chicken Eggs

Грипп Вирус Распространение в куриные эмбрионы

Influenza infection is associated with about 36,000 deaths and more than 200,000 hospitalizations every year in the United States. The continuous ...

Generation of Recombinant Human IgG Monoclonal Antibodies from Immortalized Sorted B Cells

Генерация рекомбинантного человеческого IgG моноклональных антител из иммортализованных клеток Сортировка В

Finding new methods for generating human monoclonal antibodies is an active research field that is important for both basic and applied sciences, ...

Generation of Murine Monoclonal Antibodies by Hybridoma Technology

Генерация мышиных моноклональных антител с помощью гибридом технологии

Monoclonal antibodies are universal binding molecules and are widely used in biomedicine and research. Nevertheless, the generation of these binding ...

A Method to Assess Fc-mediated Effector Functions Induced by Influenza Hemagglutinin Specific Antibodies

Метод оценки Fc опосредованной эффекторных функций, вызванных гриппа гемагглютинин специфические антитела

Antibodies play a crucial role in coupling the innate and adaptive immune responses against viral pathogens through their antigen binding domains and ...

Generation of Discriminative Human Monoclonal Antibodies from Rare Antigen-specific B Cells Circulating in Blood

Поколение дискриминационных человеческих моноклональных антител от редких антиген специфические клетки, циркулирующие в крови

Monoclonal antibodies (mAbs) are powerful tools useful for both fundamental research and in biomedicine. Their high specificity is indispensable when the ...

Extraction of Hemocytes from Drosophila melanogaster Larvae for Microbial Infection and Analysis

Extraction of Hemocytes from Drosophila melanogaster Larvae for Microbial Infection and Analysis

Извлечение Hemocytes из личинки Drosophila melanogaster микробной инфекции и анализа

During the pathogenic infection of Drosophila melanogaster, hemocytes play an important role in the immune response throughout the infection. Thus, the ...