Name: tracking morphogenetic tissue deformations in the early chick embryo
Uploaded: 2011-10-17T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo at JoVE.com

وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح R01 R01 GM075200 وHL083393 (LAT). نعترف زمالات لدعم BAF من المعاهد الوطنية للصحة T90 DA022871 ومعهد مالينكرودت من الأشعة ، وللVDV من منحة 09PRE2060795 من رابطة القلب الاميركية

1. إعداد التجريبية العامة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحضير الأنسجة المتوسطة الثقافة في تدفق الصفحي هود. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تمييع متوسطة Dulbecco في التعديل النسر (DMEM) (1 زجاجة لتر مع 4.5g / L الجلوكوز ، وبيكربونات الصوديوم ،...

<ol>
	<li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.">A series of normal stages in the development of the chick embryo.</a> Journal of Morphology. 88, 49-92 (1951).</li><li>Canfield, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+beveling+micropipettes+using+a+computer+hard+drive.">Dry beveling micropipettes using a computer hard drive.</a> J. Neurosci. Methods. 158, 19-21 (2006).</li><li>Voronov, D. A., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+looping+in+experimental+conditions:+the+effects+of+extraembryonic+forces.">Cardiac looping in experimental conditions: the effects of extraembryonic forces.</a> Developmental Dynamics. 224, 413-421 (2002).</li><li>Filas, B. A., Bayly, P. V., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+stress+as+a+regulator+of+cytoskeletal+contractility+and+nuclear+shape+in+embryonic+epithelia.">Mechanical stress as a regulator of cytoskeletal contractility and nuclear shape in embryonic epithelia.</a> Ann. Biomed. Eng. 39, 443-454 (2011).</li><li>Kozel, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastic+fiber+formation:+a+dynamic+view+of+extracellular+matrix+assembly+using+timer+reporters.">Elastic fiber formation: a dynamic view of extracellular matrix assembly using timer reporters.</a> J. Cell. Physiol. 207, 87-96 (2006).</li><li>Filas, B. A., Efimov, I. R., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+as+a+tool+for+measuring+morphogenetic+deformation+of+the+looping+heart.">Optical coherence tomography as a tool for measuring morphogenetic deformation of the looping heart.</a> Anat. Rec. 290, 1057-1068 (2007).</li><li>Varner, V. D., Voronov, D. A., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanics+of+head+fold+formation:+investigating+tissue-level+forces+during+early+development.">Mechanics of head fold formation: investigating tissue-level forces during early development.</a> Development. 137, 3801-3811 (2010).</li><li>Van Essen, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+integrated+software+suite+for+surface-based+analyses+of+cerebral+cortex.">An integrated software suite for surface-based analyses of cerebral cortex.</a> J. Am. Med. Inform. Assoc. 8, 443-459 (2001).</li><li>Filas, B. A., Knutsen, A. K., Bayly, P. V., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+for+measuring+deformation+of+folding+surfaces+during+morphogenesis.">A new method for measuring deformation of folding surfaces during morphogenesis.</a> J. Biomech. Eng. 130, 061010-061010 (2008).</li><li>Yuan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Co-registered+optical+coherence+tomography+and+fluorescence+molecular+imaging+for+simultaneous+morphological+and+molecular+imaging.">Co-registered optical coherence tomography and fluorescence molecular imaging for simultaneous morphological and molecular imaging.</a> Phys. Med. Biol. 55, 191-206 (2010).</li><li>Zamir, E. A., Czirok, A., Rongish, B. J., Little, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+digital+image-based+method+for+computational+tissue+fate+mapping+during+early+avian+morphogenesis.">A digital image-based method for computational tissue fate mapping during early avian morphogenesis.</a> Ann. Biomed. Eng. 33, 854-865 (2005).</li><li>Blanchard, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+tectonics:+morphogenetic+strain+rates,+cell+shape+change+and+intercalation.">Tissue tectonics: morphogenetic strain rates, cell shape change and intercalation.</a> Nat. Methods. 6, 458-464 (2009).</li></ol>

وتعرض اثنين من التقنيات لوضع العلامات نسيج الثقافة البيضة السابقين لافراخ الدجاج في وقت مبكر. الأول يستخدم الأصباغ الفلورية محبة للدهون تسليمها عبر جزيئات الحديد المغناطيسي في وقت واحد لتسمية مئات من الخلايا. ومع ذلك ، هذا الأسلوب هو حاليا غير متوافق مع التصوي?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> المادة / الكاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> DMEM -- ارتفاع نسبة الجلوكوز </td><td> سيغما الدريخ </td><td> D5796 </td><td></td></tr><tr><td> البنسلين / الستربتوميسين / نيومايسين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> P4083 </td><td></td></tr><tr><td> مصل الدجاج </td><td> Invitrogen </td><td> 16110-082 </td><td></td></tr><tr><td> التخزين المؤقت للفوسفات Dulbecco المالحة </td><td> سيغما الدريخ </td><td> D1408 </td><td> 10X </td></tr><tr><td> Whatman مرشح ورقة # 2 </td><td> Whatman </td><td> 1002 090 </td><td> ضربات 90mm قطرها </td></tr><tr><td> الزجاج Micropipettes </td><td> العالم الدقةالصكوك (WPI) </td><td> TW150 - 6 </td><td> الداخلية قطرها 1.5mm </td></tr><tr><td> صلاح الغيدان </td><td> Invitrogen </td><td> D - 282 </td><td></td></tr><tr><td> انخفاض الحديد </td><td> مالينكرودت شركة بيكر </td><td> 5320 </td><td></td></tr><tr><td> 10 ميكرومتر القطر المجهرية (أسود) </td><td> شركة Polysciences </td><td> 24294 </td><td></td></tr><tr><td> دلتا تي الطبق (الفاصل الزمني للثقافة) </td><td> Bioptechs </td><td> 04200415B </td><td> سميكة ، أسود 0.17mm </td></tr><tr><td> دلتا الطبق الثقافة T4 المراقب </td><td> Bioptechs </td><td> 0420-4-03 </td><td></td></tr><tr><td> مضخة صغيرة الأجهزة تدفق متغير </td><td> فيشر العلمية </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

tracking morphogenetic tissue deformations in the early chick embryo

التشوهات الجنينية ظهائر الخضوع المعقدة (مثل الانحناء والبرم ، وقابلة للطي ، وتمتد) لتشكيل أجهزة بدائية للجنين في وقت مبكر. تتبع علامات إيمانية على أسطح هذه الأوراق الخليوي هي طريقة راسخة لتقدير كميات تخلقية مثل انكماش النمو والقص. ومع ذلك ، وليس وضع العلامات السطحية جميع التقنيات قابلة للتكيف بسهولة إلى طرائق التصوير التقليدية ، وتمتلك مزايا مختلفة والقيود. هنا ، نحن تصف طرق وضع العلامات اثنين وتوضيح فائدة كل أسلوب. في الأسلوب الأول ، يتم تطبيق المئات من التسميات الفلورية في الوقت نفسه إلى الجنين باستخدام جزيئات الحديد المغناطيسي. ثم يتم استخدام هذه التسميات لكمية تشوهات الأنسجة 2 - D أثناء التشكل. في الطريقة الثانية ، تستخدم المجهرية البوليسترين كعوامل التباين في غير الغازية التصوير الضوئي التماسك (أكتوبر) التصوير المقطعي لتتبع تشوهات الأنسجة 3 - D. وقد نجحت هذه التقنياتلاي تنفيذها في مختبرنا لstudythe الآليات المادية أضعاف رأس في وقت مبكر ، والقلب ، ونمو الدماغ ، وينبغي أن تكون قابلة للتكيف لعمليات واسعة النطاق التخلق.

Watch this Scientific Journal Video about Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo at JoVE.com

Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo

توضح هذه المقالة السطحية ووضع العلامات<em&gt; البيضة السابقين</em&gt; زراعة الأنسجة في جنين الفرخ المبكر. وتعرض تقنيات قابلة للمرور الوقت حقل مشرق ، ومضان ، التصوير المقطعي البصري والتماسك. التسميات السطحية تتبع للقرار spatiotemporal كميات عالية تمكن الحركية مثل سلالات التخلق (التشوهات) يتم حسابها في البعدين وثلاثة على حد سواء.

تتبع التشويهات الأنسجة التخلق في جنين الفرخ المبكر

Embryonic epithelia undergo complex deformations (e.g. bending, twisting, folding, and stretching) to form the primitive organs of the early embryo. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

طريقة لثقافة الفرخ المبكر فيفو السابقين الأجنة (الثقافة الجديدة)

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

الجامعة جبل مزدوجة في الموقع التهجين لافراخ الدجاج في وقت مبكر

Assay for Neural Induction in the Chick Embryo

مقايسة لتحريض العصبية في الأجنة الفرخ

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

الكهربية في تسجيل ذبابة الفاكهة الأجنة

Drosophila is a premier genetic model for the study of both embryonic development and functional neuroscience. Traditionally, these fields are quite ...

Quantitation of &gamma;H2AX Foci in Tissue Samples

Quantitation of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX Foci in Tissue Samples

الكميات بؤر γH2AX في عينات الأنسجة

DNA double-strand breaks (DSBs) are particularly lethal and genotoxic lesions, that can arise either by endogenous (physiological or pathological) ...

Single Cell Transfection in Chick Embryos

وحيد الخلية في الأجنة ترنسفكأيشن الفرخ

A central theme in developmental biology is the diversification of lineages and the elucidation of underlying molecular mechanisms. This entails a ...

Chromatin Immunoprecipitation Assay for Tissue-specific Genes using Early-stage Mouse Embryos

مناعي لونين الفحص الجينات الأنسجة الخاصة باستخدام أجنة فئران في مرحلة مبكرة

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful tool to identify protein:chromatin interactions that occur in the context of living cells 1-3. This ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

الوقت الفاصل بين مرحلة التطور الجنيني المبكر من الميكروسكوب في انواع معينة ايليجانس

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

في Electroporation OVO في شبكية العين الفرخ الجنينية

Chicken embryonic retina is an excellent tool to study retinal development in higher vertebrates. Because of large size and external development, it is ...

Mouse Embryonic Development in a Serum-free Whole Embryo Culture System

الفأر الجنينية التنمية في الجامعة نظام الثقافة الأجنة الخالية من المصل

Mid-gestation stage mouse embryos were cultured utilizing a serum-free culture medium prepared from commercially available stem cell media supplements in ...