Name: tracking morphogenetic tissue deformations in the early chick embryo
Uploaded: 2011-10-17T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund door NIH beurzen R01 GM075200 en R01 HL083393 (LAT). Wij erkennen fellowship ondersteuning van BAF van NIH T90 DA022871 en de Mallinckrodt Instituut voor Radiologie, en voor VDV uit te verlenen 09PRE2060795 van de American Heart Association.

1. Algemeen Experimentele Voorbereiding <ol><li> Bereid weefselkweek medium in de laminaire stroming kap. <ol><li> Verdunnen Dulbecco&#39;s Modified Eagle&#39;s Medium (DMEM) (1 L fles met 4,5 g / L glucose, natrium-bicarbonaat, en L-glutamine). Voeg 10 ml penicilline / streptomycine / neomycine antibiotica. </li><li> Verwijder de 100 ml DMEM met een steriele pipet en overdracht te vervangen door 100 ml chick serum. </li><li> Aliquot de DMEM/10% kuiken serum / 1% antibiotica in steriele 15 ml conische flacons en bevri...

<ol>
	<li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.">A series of normal stages in the development of the chick embryo.</a> Journal of Morphology. 88, 49-92 (1951).</li><li>Canfield, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+beveling+micropipettes+using+a+computer+hard+drive.">Dry beveling micropipettes using a computer hard drive.</a> J. Neurosci. Methods. 158, 19-21 (2006).</li><li>Voronov, D. A., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+looping+in+experimental+conditions:+the+effects+of+extraembryonic+forces.">Cardiac looping in experimental conditions: the effects of extraembryonic forces.</a> Developmental Dynamics. 224, 413-421 (2002).</li><li>Filas, B. A., Bayly, P. V., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+stress+as+a+regulator+of+cytoskeletal+contractility+and+nuclear+shape+in+embryonic+epithelia.">Mechanical stress as a regulator of cytoskeletal contractility and nuclear shape in embryonic epithelia.</a> Ann. Biomed. Eng. 39, 443-454 (2011).</li><li>Kozel, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastic+fiber+formation:+a+dynamic+view+of+extracellular+matrix+assembly+using+timer+reporters.">Elastic fiber formation: a dynamic view of extracellular matrix assembly using timer reporters.</a> J. Cell. Physiol. 207, 87-96 (2006).</li><li>Filas, B. A., Efimov, I. R., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+as+a+tool+for+measuring+morphogenetic+deformation+of+the+looping+heart.">Optical coherence tomography as a tool for measuring morphogenetic deformation of the looping heart.</a> Anat. Rec. 290, 1057-1068 (2007).</li><li>Varner, V. D., Voronov, D. A., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanics+of+head+fold+formation:+investigating+tissue-level+forces+during+early+development.">Mechanics of head fold formation: investigating tissue-level forces during early development.</a> Development. 137, 3801-3811 (2010).</li><li>Van Essen, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+integrated+software+suite+for+surface-based+analyses+of+cerebral+cortex.">An integrated software suite for surface-based analyses of cerebral cortex.</a> J. Am. Med. Inform. Assoc. 8, 443-459 (2001).</li><li>Filas, B. A., Knutsen, A. K., Bayly, P. V., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+for+measuring+deformation+of+folding+surfaces+during+morphogenesis.">A new method for measuring deformation of folding surfaces during morphogenesis.</a> J. Biomech. Eng. 130, 061010-061010 (2008).</li><li>Yuan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Co-registered+optical+coherence+tomography+and+fluorescence+molecular+imaging+for+simultaneous+morphological+and+molecular+imaging.">Co-registered optical coherence tomography and fluorescence molecular imaging for simultaneous morphological and molecular imaging.</a> Phys. Med. Biol. 55, 191-206 (2010).</li><li>Zamir, E. A., Czirok, A., Rongish, B. J., Little, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+digital+image-based+method+for+computational+tissue+fate+mapping+during+early+avian+morphogenesis.">A digital image-based method for computational tissue fate mapping during early avian morphogenesis.</a> Ann. Biomed. Eng. 33, 854-865 (2005).</li><li>Blanchard, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+tectonics:+morphogenetic+strain+rates,+cell+shape+change+and+intercalation.">Tissue tectonics: morphogenetic strain rates, cell shape change and intercalation.</a> Nat. Methods. 6, 458-464 (2009).</li></ol>

Twee weefsel labeling technieken worden gepresenteerd voor de ex ovo cultuur van de vroege kippenembryo&#39;s. De eerste maakt gebruik van fluorescerende kleurstoffen lipofiele geleverd via magnetische ijzerdeeltjes gelijktijdig label van honderden cellen. Echter, deze methode is momenteel niet compatibel met optische coherentie tomografie, als fluorescerende kleurstoffen vertonen over het algemeen weinig contrast van de omringende weefsels met behulp van 10 oktober. Daarom tonen we een alternatieve ...

<table border="1"><table border="1"><tbody><tr><td> Materiaal / Reagens </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogus nummer </td><td> Reacties </td></tr><tr><td> DMEM - hoge glucose- </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D5796 </td><td></td></tr><tr><td> Penicilline / streptomycine / Neomycine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P4083 </td><td></td></tr><tr><td> Kip Serum </td><td> Invitrogen </td><td> 16110-082 </td><td></td></tr><tr><td> Dulbecco&#39;s fosfaat gebufferde fysiologische zoutoplossing </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D1408 </td><td> 10X </td></tr><tr><td> Whatman # 2 Filter Paper </td><td> Whatman papier </td><td> 1002 090 </td><td> 90mm diameter </td></tr><tr><td> Glas Micropipetten </td><td> Wereld PrecisionInstrumenten (WPI) </td><td> TW150-6 </td><td> 1,5 mm binnendiameter </td></tr><tr><td> Dii </td><td> Invitrogen </td><td> D-282 </td><td></td></tr><tr><td> Minder ijzer </td><td> Mallinckrodt Baker Inc </td><td> 5320 </td><td></td></tr><tr><td> 10 micrometer Diameter microsferen (zwart) </td><td> Polysciences Inc </td><td> 24294 </td><td></td></tr><tr><td> Delta T Dish (voor time-lapse cultuur) </td><td> Bioptechs </td><td> 04200415B </td><td> 0.17mm dik, zwart </td></tr><tr><td> Delta T4 Cultuur Dish Controller </td><td> Bioptechs </td><td> 0420-4-03 </td><td></td></tr><tr><td> Mini-Pomp Variable Flow Device </td><td> Fisher Scientific </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

tracking morphogenetic tissue deformations in the early chick embryo

Embryonale epitheel ondergaan complexe vervormingen (bijv. buigen, draaien, vouwen, en uitrekken) om de primitieve organen van het vroege embryo te vormen. Volgen de vaste markeringen op de oppervlakken van deze cellulaire bladen is een bekende methode voor het schatten van morfogenetische grootheden zoals groei, krimp, en afschuiving. Echter, niet alle oppervlakte-labeling technieken zijn makkelijk aan te passen aan conventionele beeldvorming en bezitten verschillende voordelen en beperkingen. Hier beschrijven we twee etikettering methoden en illustreren het nut van elke techniek. In de eerste methode, zijn honderden fluorescerende labels tegelijk toegepast op het embryo met behulp van magnetische ijzerdeeltjes. Deze labels worden vervolgens gebruikt om de hoeveelheid 2-D weefsel vervormingen tijdens de morfogenese. In de tweede methode, zijn polystyreen microsferen gebruikt als contrastmiddelen in niet-invasieve optische coherentie tomografie (OCT) beeldvorming naar 3-D weefsel vervormingen te volgen. Deze technieken zijn succesvolly geïmplementeerd in ons lab aan fysische mechanismen van de vroege hoofd vouwen, hart, en de ontwikkeling van de hersenen studythe, en moet worden aangepast aan een breed scala morfogenetische processen.

Watch this Scientific Journal Video about Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo at JoVE.com

Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo

Dit artikel beschrijft het oppervlak etikettering en de<em&gt; Ex ovo</em&gt; Weefselkweek in het begin van kippenembryo. Technieken ontvankelijk voor time-lapse helderveld, fluorescentie en optische coherentie tomografie beeldvorming worden gepresenteerd. Tracking oppervlak van etiketten met een hoge resolutie kunnen spatiotemporele kinematische grootheden als morfogenetische stammen (vervormingen) worden berekend in zowel twee en drie dimensies.

Tracking Morfogenetische Tissue vervormingen in de vroege Chick Embryo

Embryonic epithelia undergo complex deformations (e.g. bending, twisting, folding, and stretching) to form the primitive organs of the early embryo. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

Methode voor Cultuur van Early kippenembryo&#39;s ex vivo (Nieuwe Cultuur)

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

Dubbele Hele Mount in situ hybridisatie van het vroege embryo&#39;s Chick

Assay for Neural Induction in the Chick Embryo

Test voor Neurale Inductie in het kippenembryo

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Elektrofysiologische opname in de Drosophila Embryo

Drosophila is a premier genetic model for the study of both embryonic development and functional neuroscience. Traditionally, these fields are quite ...

Quantitation of &gamma;H2AX Foci in Tissue Samples

Quantitation of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX Foci in Tissue Samples

Kwantificatie van γH2AX Foci in weefselmonsters

DNA double-strand breaks (DSBs) are particularly lethal and genotoxic lesions, that can arise either by endogenous (physiological or pathological) ...

Single Cell Transfection in Chick Embryos

Single Cell Transfectie in kippenembryo&#39;s

A central theme in developmental biology is the diversification of lineages and the elucidation of underlying molecular mechanisms. This entails a ...

Chromatin Immunoprecipitation Assay for Tissue-specific Genes using Early-stage Mouse Embryos

Chromatine immunoprecipitatie assay for Tissue-specifieke genen met behulp van een vroeg stadium muizenembryo&#39;s

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful tool to identify protein:chromatin interactions that occur in the context of living cells 1-3. This ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse microscopie van de vroege embryogenese in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

In Ovo Elektroporatie in Embryonale Chick Retina

Chicken embryonic retina is an excellent tool to study retinal development in higher vertebrates. Because of large size and external development, it is ...

Mouse Embryonic Development in a Serum-free Whole Embryo Culture System

Muis embryonale ontwikkeling in een Serumvrij Hele Embryo Cultuur System

Mid-gestation stage mouse embryos were cultured utilizing a serum-free culture medium prepared from commercially available stem cell media supplements in ...