Name: tracking morphogenetic tissue deformations in the early chick embryo
Uploaded: 2011-10-17T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo at JoVE.com

Эта работа была поддержана грантами NIH R01 и R01 GM075200 HL083393 (LAT). Мы признаем, общение поддержку BAF от NIH T90 DA022871 и Mallinckrodt Институт радиологии, так и для ВДВ с 09PRE2060795 гранта от Американской ассоциации сердца.

1. Генеральный экспериментальной подготовки <ol><li> Подготовка среды тканевой культуры в ламинарном боксе. <ol><li> Развести Средний Дульбеко изменения Орла (DMEM) (1 л бутылка с 4,5 г / л глюкозы, натрия бикарбонат, и L-глютамин). Добавить 10 мл пенициллина / стрептомицина / неомицин антибиотиков. </li...

<ol>
	<li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.">A series of normal stages in the development of the chick embryo.</a> Journal of Morphology. 88, 49-92 (1951).</li><li>Canfield, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+beveling+micropipettes+using+a+computer+hard+drive.">Dry beveling micropipettes using a computer hard drive.</a> J. Neurosci. Methods. 158, 19-21 (2006).</li><li>Voronov, D. A., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+looping+in+experimental+conditions:+the+effects+of+extraembryonic+forces.">Cardiac looping in experimental conditions: the effects of extraembryonic forces.</a> Developmental Dynamics. 224, 413-421 (2002).</li><li>Filas, B. A., Bayly, P. V., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+stress+as+a+regulator+of+cytoskeletal+contractility+and+nuclear+shape+in+embryonic+epithelia.">Mechanical stress as a regulator of cytoskeletal contractility and nuclear shape in embryonic epithelia.</a> Ann. Biomed. Eng. 39, 443-454 (2011).</li><li>Kozel, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastic+fiber+formation:+a+dynamic+view+of+extracellular+matrix+assembly+using+timer+reporters.">Elastic fiber formation: a dynamic view of extracellular matrix assembly using timer reporters.</a> J. Cell. Physiol. 207, 87-96 (2006).</li><li>Filas, B. A., Efimov, I. R., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+as+a+tool+for+measuring+morphogenetic+deformation+of+the+looping+heart.">Optical coherence tomography as a tool for measuring morphogenetic deformation of the looping heart.</a> Anat. Rec. 290, 1057-1068 (2007).</li><li>Varner, V. D., Voronov, D. A., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanics+of+head+fold+formation:+investigating+tissue-level+forces+during+early+development.">Mechanics of head fold formation: investigating tissue-level forces during early development.</a> Development. 137, 3801-3811 (2010).</li><li>Van Essen, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+integrated+software+suite+for+surface-based+analyses+of+cerebral+cortex.">An integrated software suite for surface-based analyses of cerebral cortex.</a> J. Am. Med. Inform. Assoc. 8, 443-459 (2001).</li><li>Filas, B. A., Knutsen, A. K., Bayly, P. V., Taber, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+for+measuring+deformation+of+folding+surfaces+during+morphogenesis.">A new method for measuring deformation of folding surfaces during morphogenesis.</a> J. Biomech. Eng. 130, 061010-061010 (2008).</li><li>Yuan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Co-registered+optical+coherence+tomography+and+fluorescence+molecular+imaging+for+simultaneous+morphological+and+molecular+imaging.">Co-registered optical coherence tomography and fluorescence molecular imaging for simultaneous morphological and molecular imaging.</a> Phys. Med. Biol. 55, 191-206 (2010).</li><li>Zamir, E. A., Czirok, A., Rongish, B. J., Little, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+digital+image-based+method+for+computational+tissue+fate+mapping+during+early+avian+morphogenesis.">A digital image-based method for computational tissue fate mapping during early avian morphogenesis.</a> Ann. Biomed. Eng. 33, 854-865 (2005).</li><li>Blanchard, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+tectonics:+morphogenetic+strain+rates,+cell+shape+change+and+intercalation.">Tissue tectonics: morphogenetic strain rates, cell shape change and intercalation.</a> Nat. Methods. 6, 458-464 (2009).</li></ol>

Два метода маркировки ткани представлены для бывших ово культуры ранних зародышей цыплят. Первый использует флуоресцентные красители липофильных доставляется через магнитные частицы железа одновременно этикетке сотни клеток. Однако этот метод в настоящее время не совместима с...

<table border="1"><table border="1"><tbody><tr><td> Материал / реагент </td><td> Компания </td><td> Номер по каталогу </td><td> Комментарии </td></tr><tr><td> DMEM - высокий уровень глюкозы в </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D5796 </td><td></td></tr><tr><td> Пенициллина / стрептомицина / Неомицин </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P4083 </td><td></td></tr><tr><td> Куриные сыворотки </td><td> Invitrogen </td><td> 16110-082 </td><td></td></tr><tr><td> Фосфаты Дульбеко буферном растворе </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D1408 </td><td> 10X </td></tr><tr><td> Ватман № 2 фильтровальной бумаги </td><td> Ватман </td><td> 1002 090 </td><td> 90мм диаметр </td></tr><tr><td> Стекло Микропипетки </td><td> Всемирный PrecisionИнструменты (ИОЦ) </td><td> TW150-6 </td><td> 1,5 мм внутреннего диаметра </td></tr><tr><td> DII </td><td> Invitrogen </td><td> D-282 </td><td></td></tr><tr><td> Железный Уменьшение </td><td> Mallinckrodt Бейкер ООО </td><td> 5320 </td><td></td></tr><tr><td> 10 мкм Диаметр микросфер (черный) </td><td> Polysciences ООО </td><td> 24294 </td><td></td></tr><tr><td> Delta T Блюдо (на время перерыва культуры) </td><td> Bioptechs </td><td> 04200415B </td><td> 0.17mm толстый, черный </td></tr><tr><td> Delta T4 Контроллер Блюдо культуры </td><td> Bioptechs </td><td> 0420-4-03 </td><td></td></tr><tr><td> Мини-насос переменного потока устройства </td><td> Fisher Scientific </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

tracking morphogenetic tissue deformations in the early chick embryo

Эмбриональные эпителия претерпевают сложные деформации (например, изгиб, кручение, складывающиеся, и растяжения) в форме примитивных органов раннего эмбриона. Отслеживание исходных точек маркеров на поверхности этих сотовых листов устоявшихся метод оценки морфогенетических величины, такие как рост, сокращение, и сдвига. Однако не все методы поверхности маркировка могут быть легко приспособлены к обычным методам обработки изображений и обладают различными преимуществами и ограничениями. Здесь мы рассмотрим два метода маркировки и иллюстрируют полезность каждой техники. В первом методе, сотни флуоресцентных меток применяются одновременно эмбрион с использованием магнитных частиц железа. Эти метки используются затем для количество 2-D деформации ткани при морфогенезе. При втором способе, полистирол микросферы используются в качестве контрастных агентов в неинвазивной оптической когерентной томографии (ОКТ) изображений для отслеживания 3-D деформации ткани. Эти методы были успешнымиLy реализованы в нашей лаборатории, чтобы studythe физических механизмов раннего раз голову, сердце и развитие мозга, и должны быть адаптированы к широкому морфогенетических процессов диапазоне.

Watch this Scientific Journal Video about Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo at JoVE.com

Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo

В этой статье описываются поверхности и маркировке<em&gt; Ех ово</em&gt; Культур тканей в начале куриного эмбриона. Методы поддаются покадровой светлого поля, флуоресценции и оптической когерентной томографии представлены. Отслеживание поверхности этикетки с высокой пространственно-временной детализации позволяет кинематических величин, таких как штаммы морфогенетических (деформаций), которые будут рассчитаны в двух и трех измерениях.

Отслеживание Деформации Морфогенетические тканей в раннем куриного эмбриона

Embryonic epithelia undergo complex deformations (e.g. bending, twisting, folding, and stretching) to form the primitive organs of the early embryo. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

Метод культуры раннего куриных эмбрионов исключая виво (Новая Культура)

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

Дважды Всего горе на месте гибридизация раннего куриных эмбрионов

Assay for Neural Induction in the Chick Embryo

Анализ для нейронных Индукция в куриных эмбрионах

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Электрофизиологические Запись в Drosophila Эмбрионов

Drosophila is a premier genetic model for the study of both embryonic development and functional neuroscience. Traditionally, these fields are quite ...

Quantitation of &gamma;H2AX Foci in Tissue Samples

Quantitation of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX Foci in Tissue Samples

Количественная оценка γH2AX Очаги в образцах тканей

DNA double-strand breaks (DSBs) are particularly lethal and genotoxic lesions, that can arise either by endogenous (physiological or pathological) ...

Single Cell Transfection in Chick Embryos

Одноместный Трансфекция сотовый на куриных эмбрионах

A central theme in developmental biology is the diversification of lineages and the elucidation of underlying molecular mechanisms. This entails a ...

Chromatin Immunoprecipitation Assay for Tissue-specific Genes using Early-stage Mouse Embryos

Хроматин Иммунопреципитация Пробирной для тканеспецифические Гены использованием ранней стадии эмбрионы мыши

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful tool to identify protein:chromatin interactions that occur in the context of living cells 1-3. This ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Покадровый Микроскопия раннего эмбриогенеза в Caenorhabditis Элеганс

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

В Ovo Электропорация в эмбриональной сетчатки Chick

Chicken embryonic retina is an excellent tool to study retinal development in higher vertebrates. Because of large size and external development, it is ...

Mouse Embryonic Development in a Serum-free Whole Embryo Culture System

Мышь эмбрионального развития целая культура системе эмбрионов бессывороточных

Mid-gestation stage mouse embryos were cultured utilizing a serum-free culture medium prepared from commercially available stem cell media supplements in ...