Name: neural tube closure in mouse whole embryo culture
Uploaded: 2011-10-21T12:00:00
Duration: 7 min 37 s
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हम विच्छेदन और संस्कृति तकनीक के साथ उपयोगी सलाह के लिए ए Hadjantonakis (स्लोअन-Kettering संस्थान) की प्रयोगशाला और एल Niswander (कोलोराडो डेनवर यू) की प्रयोगशाला को धन्यवाद देना चाहूंगा. इस काम JDG और RO1NS05897 एल Niswander और जे Nadeau (सिस्टम्स बायोलॉजी के लिए संस्थान) के साथ सहयोग में मेर एनआरएसए NS059562 द्वारा समर्थित किया गया है.

<ol>
	<li>Cockroft, D. L., Copp, A. J., Cockroft, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+and+culture+of+post+implantation+embryos.">Dissection and culture of post implantation embryos.</a> Mammalian Postimplantation Embryos A Practical Approach. , (1990).</li><li>Gray, J. D., Ross, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanistic+insights+into+folate+supplementation+from+Crooked+tail+and+other+NTD-prone+mutant+mice.">Mechanistic insights into folate supplementation from Crooked tail and other NTD-prone mutant mice.</a> Birth Defects Res. A. Clin. Mol. Teratol. 85, 314-321 (2009).</li><li>Kaufman, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Atlas of Mouse Development. , (1992).</li><li>Ybot-Gonzalez, P., Savery, D., Gerrelli, D., Signore, M., Mitchell, C. E., Faux, C. H., Greene, N. D., Copp, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Convergent+extension,+planar-cell-polarity+signalling+and+initiation+of+mouse+neural+tube+closure.">Convergent extension, planar-cell-polarity signalling and initiation of mouse neural tube closure.</a> Development. 134, 789-799 (2007).</li><li>Ross, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene-environment+interactions,+folate+metabolism+and+the+embryonic+nervous+system.">Gene-environment interactions, folate metabolism and the embryonic nervous system.</a> Wiley Interdiscip Rev Syst Biol Med. 2, 471-480 (2010).</li></ol>

ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

जो कि अपने विकास के दौरान भ्रूण के आंतरिक से मातृ, अंतर्गर्भाशयी कारकों को अलग करने की क्षमता embryogenesis के सभी चरणों के अध्ययन के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण है. यहाँ हम RhoA kinase के कपाल neurulation पूर्व utero पर एक छोटा सा अणु अवरोध करनेवाला है, जिससे दवा की मातृ चयापचय के चर को हटाने के प्रभाव का विश्लेषण किया है. यह औषधीय हेरफेर कपाल neurulation और संसृत विस्तार पर एक गहरा प्रभाव पड़ता है. इस परिसर के लिए संवेदनशीलता अलग आनुवंशिक माउस म्यूटेंट के बीच तुलना की जा सकती है. यहाँ प्रस्तुत पद्धति का भी विकास में अन्य आणविक मार्ग के अध्ययन के लिए लागू किया जा सकता सकता, अभिकर्मकों की एक किस्म का उपयोग भ्रूण में सेलुलर समारोह के सीधे हेरफेर की अनुमति है.

<table border="1"><tbody><tr><th> नाम </th><th> कंपनी </th><th> सूचीपत्र संख्या </th><th> टिप्पणियाँ </th></tr><tr><td> विच्छेदन के लिए stereomicroscope </td><td> Leica </td><td> M165 </td><td></td></tr><tr><td> प्रेसिजन इनक्यूबेटर </td><td> बीटीसी इंजीनियरिंग (ब्रिटेन) </td><td> बीटीसी 001 </td><td></td></tr><tr><td> घूर्णन बोतल संस्कृति यूनिट </td><td> बीटीसी </td><td> बीटीसी 003 </td><td></td></tr><tr><td> यूनिट घूर्णन के लिए कांच की बोतलें </td><td> बीटीसी </td><td> 005 बीटीसी </td><td></td></tr><tr><td> सिलिकॉन रबर डाट </td><td> बीटीसी </td><td> बीटीसी 007 </td><td></td></tr><tr><td> सिलिकॉन रबर कॉर्क </td><td> बीटीसी </td><td> 008 बीटीसी </td><td></td></tr><tr><td> गैस bubbler Inlet </td><td> बीटीसी </td><td> 012 बीटीसी </td><td></td></tr><tr><td> गैस bubbler Inlet जाल </td><td> बीटीसी </td><td> 013 बीटीसी </td><td></td></tr><tr><td> गैस bubbler आउटलेट </td><td> बीटीसी </td><td> 014 बीटीसी </td><td></td></tr><tr><td> गैस सिलेंडर </td><td> TechAir </td><td></td><td> 20% 2 हे, 5% सीओ 2 </td></tr><tr><td> गैस नियामक </td><td> TechAir </td><td></td><td></td></tr><tr><td> पुरुष चूहा सीरम </td><td> Harlan लेबोरेटरीज </td><td> 4520 </td><td></td></tr><tr><td> DMEM w / ओ phenol के लाल </td><td> Invitrogen </td><td> 31053 </td><td></td></tr><tr><td> 10 एमएल सिरिंज </td><td> BD </td><td> 309604 </td><td></td></tr><tr><td> सिरिंज फ़िल्टर </td><td> Nalgene </td><td> 190-2545 </td><td></td></tr><tr><td> बड़े विदारक कैंची (ब्लंट टिप) </td><td> VWR </td><td> 82027-594 </td><td></td></tr><tr><td> अतिरिक्त ठीक है बॉन कैंची </td><td> ठीक वैज्ञानिक उपकरण (FST) </td><td> 14084-08 </td><td></td></tr><tr><tघ&gt; Dumot # 5 संदंश </td><td> FST </td><td> 11252-50 </td><td></td></tr><tr><td> Tyrode खारा </td><td></td><td></td><td> के रूप में 1990 Cockroft में वर्णित </td></tr><tr><td> 10 सेमी प्रयोज्य पेट्री डिश </td><td> BD </td><td> 351029 </td><td></td></tr></tbody></table>

neural tube closure in mouse whole embryo culture

जेनेटिक माउस मॉडल स्तनधारी न्यूरल ट्यूब बंद करने के अध्ययन में एक महत्वपूर्ण उपकरण है (ग्रे और रॉस, 2009, रॉस, 2010). हालांकि, माउस भ्रूण के अध्ययन utero में हमारी असमर्थता को सीधे pharmacologically ब्याज की अभिकर्मक पर मातृ चयापचय के प्रभाव से अलगाव में भ्रूण में हेरफेर के द्वारा सीमित है. आहार के माध्यम से या इंजेक्शन द्वारा एक छोटा सा अणु, पुनः संयोजक प्रोटीन, या siRNA, माँ को इन पदार्थों के वितरण का उपयोग चाहे, इन अस्थिर यौगिकों शारीरिक गढ़ है कि उन्हें भ्रूण तक पहुँचने से रोकने सकता है की एक किस्म के अधीन होगा. संस्कृतियों में पूरे भ्रूण की जांच करने के लिए विकास पर आंतरिक भ्रूण प्रभाव से मातृ अलग करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. यहाँ, हम संवर्धन माउस रोलर इनक्यूबेटर तंत्र है कि सामान्य विच्छेदन के बाद न्यूरल ट्यूब बंद (ईद्भोकेट, 1990) के लिए अनुमति देता है अत्यधिक समृद्ध मीडिया का उपयोग भ्रूण के लिए एक विधि प्रस्तुत करते हैं. संस्कृति में एक बार कर सकते हैं, भ्रूणइन विट्रो तकनीक है कि अन्यथा संभव नहीं हो सकता है अगर भ्रूण utero में अभी भी थे में पारंपरिक चालाकी का उपयोग कर. भ्रूण भाई बहन समय विभिन्न बिंदुओं पर एकत्र किया जा सकता E9.5-10 neurulation के विभिन्न पहलुओं, E7-7.5 से होने वाली (तंत्रिका प्लेट गठन, बस neurulation की दीक्षा से पहले) का अध्ययन (कपाल गुना और दुम का neuropore के समापन पर बंद करने, कॉफ़मैन, 1992). इस प्रोटोकॉल में, हम timepoints कि कपाल neurulation के अध्ययन के लिए इष्टतम हैं पर भ्रूण विदारक के लिए हमारे विधि प्रदर्शित करता है. भ्रूण E8.5 (लगभग 10-12 somities) dissected किया जाएगा है, न्यूरल ट्यूब बंद होने की दीक्षा के बाद, लेकिन पहले भ्रूण मोड़ और कपाल तंत्रिका गुना बंद है, और E10 (26-28 somities) तक संस्कृति में बनाए रखा, कपाल जब neurulation पूरा होना चाहिए.

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Neural Tube Closure in Mouse Whole Embryo Culture

कि मातृ चयापचय नजरअंदाज neurulation दौरान माउस भ्रूण के प्रत्यक्ष औषधीय हेरफेर के लिए अनुमति विधि वर्णित है. तकनीक समय बिंदु और औषधीय एजेंट द्वारा अलग neurulation के विभिन्न पहलुओं का अध्ययन करने के लिए अनुकूलित किया जा सकता है.

माउस पूरे भ्रूण संस्कृति में तंत्रिका ट्यूब क्लोजर

Genetic mouse models are an important tool in the study of mammalian neural tube closure (Gray &amp; Ross, 2009; Ross, 2010).  However, the study of mouse ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

विच्छेदन और भ्रूणीय स्पाइनल कॉर्ड से Commissural न्यूरॉन्स की संस्कृति

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

व्यवहार Endocrinology और प्रायोगिक अर्थशास्त्र मेल: टेस्टोस्टेरोन और सामाजिक निर्णय करना

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

Production of Chick Embryo Extract for the Cultivation of Murine Neural Crest Stem Cells

चिकी भ्रूण निकालें के murine तंत्रिका शिखा स्टेम सेल की खेती के लिए उत्पादन

The neural crest arises from the neuro-ectoderm during embryogenesis and persists only temporarily. Early experiments already proofed pluripotent ...

Establishing Embryonic Mouse Neural Stem Cell Culture Using the Neurosphere Assay

भ्रूण माउस तंत्रिका स्टेम सेल संस्कृति की स्थापना Neurosphere परख का उपयोग

In mammalians, stem cells acts as a source of undifferentiated cells to maintain cell genesis and renewal in different tissues and organs during the life ...

Localizing Protein in 3D Neural Stem Cell Culture: a Hybrid Visualization Methodology

3D तंत्रिका स्टेम सेल संस्कृति में localizing प्रोटीन: एक हाइब्रिड विज़ुअलाइज़ेशन पद्धति

The importance of 3-dimensional (3D) topography in influencing neural stem and progenitor cell (NPC) phenotype is widely acknowledged yet challenging to ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

माउस प्रमस्तिष्क प्रांतस्था में Microregional Hypoxia की अंतर्जात NADH प्रतिदीप्ति की दो photon इमेजिंग द्वारा जांच

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य माउस sciatic तंत्रिका और पूरे पर्वत स्नायु विश्लेषण द्वारा पुनर्जनन के बाद आकलन क्रश

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

Isolation and Culture of Neural Crest Cells from Embryonic Murine Neural Tube

अलगाव और भ्रूण murine तंत्रिका ट्यूब से तंत्रिका शिखा कोशिकाओं की संस्कृति

The embryonic neural crest (NC) is a multipotent progenitor population that originates at the dorsal aspect of the neural tube, undergoes an epithelial to ...

In ovo Electroporation of miRNA-based Plasmids in the Developing Neural Tube and Assessment of Phenotypes by DiI Injection in Open-book Preparations

In ovo Electroporation of miRNA-based Plasmids in the Developing Neural Tube and Assessment of Phenotypes by DiI Injection in Open-book Preparations

विकास तंत्रिका और खुली किताब की तैयारी में इंजेक्शन DiI phenotypes का आकलन ट्यूब में miRNA आधारित प्लास्मिड के ओवो electroporation

Commissural dI1 neurons have been extensively studied to elucidate the mechanisms underlying axon guidance during development1,2. These neurons are ...

Chicken Embryo Spinal Cord Slice Culture Protocol

चिकन भ्रूण स्पाइनल कॉर्ड स्लाइस संस्कृति प्रोटोकॉल

Slice cultures can facilitate the manipulation of  embryo development both pharmacologically and through gene manipulations. In  this reduced system, ...