Name: in vivo liver endocytosis followed by purification of liver cells by liver perfusion
Uploaded: 2011-11-10T12:00:00
Duration: 12 min 35 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vivo Liver Endocytosis Followed by Purification of Liver Cells by Liver Perfusion at JoVE.com

نود أن نشكر الدكتور بول يغل في جامعة. أوكلاهوما لاستخدام ريتوكسيماب 30 لاكتشاف مستقبلات HARE/Stabilin-2 ويجل جانيت للحصول على المساعدة التقنية لها. ويتم تمويل هذا البحث من جامعة نبراسكا لصناديق البحوث.

<ol>
	<li>Elvevold, K., Smedsrod, B., Martinez, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+liver+sinusoidal+endothelial+cell:+a+cell+type+of+controversial+and+confusing+identity.">The liver sinusoidal endothelial cell: a cell type of controversial and confusing identity.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver. Physiol. 294, G391-G400 (2008).</li><li>Friedman, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+stellate+cells:+protean,+multifunctional,+and+enigmatic+cells+of+the+liver.">Hepatic stellate cells: protean, multifunctional, and enigmatic cells of the liver.</a> Physiol. Rev. 88, 125-172 (2008).</li><li>Smedsrod, B., Pertoft, H., Gustafson, S., Laurent, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scavenger+functions+of+the+liver+endothelial+cell.">Scavenger functions of the liver endothelial cell.</a> Biochem. J. 266, 313-327 (1990).</li><li>Shiratori, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+sinusoidal+cell+function+in+vivo.">Quantification of sinusoidal cell function in vivo.</a> Semin. Liver. Dis. 13, 39-49 (1993).</li><li>Smedsrod, B., Pertoft, H., Eriksson, S., Fraser, J. R., Laurent, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+in+vitro+on+the+uptake+and+degradation+of+sodium+hyaluronate+in+rat+liver+endothelial+cells.">Studies in vitro on the uptake and degradation of sodium hyaluronate in rat liver endothelial cells.</a> Biochem. J. 223, 617-626 (1984).</li><li>Harris, E. N., Kyosseva, S. V., Weigel, J. A., Weigel, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression,+processing,+and+glycosaminoglycan+binding+activity+of+the+recombinant+human+315-kDa+hyaluronic+acid+receptor+for+endocytosis+(HARE).">Expression, processing, and glycosaminoglycan binding activity of the recombinant human 315-kDa hyaluronic acid receptor for endocytosis (HARE).</a> J. Biol. Chem. 282, 2785-2797 (2007).</li><li>Alkhouri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Combination+of+the+Pediatric+NAFLD+Fibrosis+Index+and+Enhanced+Liver+Fibrosis+Test+Identifies+Children+with+Fibrosis.">A Combination of the Pediatric NAFLD Fibrosis Index and Enhanced Liver Fibrosis Test Identifies Children with Fibrosis.</a> Clin. Gastroenterol. Hepatol. , (2010).</li><li>Huebert, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalized+liver+endothelial+cells:+a+cell+culture+model+for+studies+of+motility+and+angiogenesis.">Immortalized liver endothelial cells: a cell culture model for studies of motility and angiogenesis.</a> Lab. Invest. 90, 1770-1781 (2010).</li><li>Zhou, B., Weigel, J. A., Fauss, L., Weigel, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+the+hyaluronan+receptor+for+endocytosis+(HARE).">Identification of the hyaluronan receptor for endocytosis (HARE).</a> J. Biol. Chem. 275, [pii]- (2000).</li><li>Krause, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatocyte-supported+serum-free+culture+of+rat+liver+sinusoidal+endothelial+cells.">Hepatocyte-supported serum-free culture of rat liver sinusoidal endothelial cells.</a> J. Hepatol. 32, 718-726 (2000).</li><li>Esser, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+endothelial+growth+factor+induces+endothelial+fenestrations+in+vitro.">Vascular endothelial growth factor induces endothelial fenestrations in vitro.</a> J. Cell. Biol. 140, 947-959 (1998).</li><li>Seglen, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+isolated+rat+liver+cells.">Preparation of isolated rat liver cells.</a> Methods. Cell. Biol. 13, 29-83 (1976).</li><li>Blomhoff, R., Berg, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+cultivation+of+rat+liver+stellate+cells.">Isolation and cultivation of rat liver stellate cells.</a> Methods. Enzymol. 190, 58-71 (1990).</li><li>Harris, E. N., Baggenstoss, B. A., Weigel, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+and+human+HARE/stabilin-2+are+clearance+receptors+for+high-+and+low-molecular-weight+heparins.">Rat and human HARE/stabilin-2 are clearance receptors for high- and low-molecular-weight heparins.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 296, G1191-G1199 (2009).</li><li>Karaa, A., Kamoun, W. S., Clemens, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidative+stress+disrupts+nitric+oxide+synthase+activation+in+liver+endothelial+cells.">Oxidative stress disrupts nitric oxide synthase activation in liver endothelial cells.</a> Free. Radic. Biol. Med. 39, 1320-1331 (2005).</li><li>Gustafson, S., Bjorkman, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulating+hyaluronan,+chondroitin+sulphate+and+dextran+sulphate+bind+to+a+liver+receptor+that+does+not+recognize+heparin.">Circulating hyaluronan, chondroitin sulphate and dextran sulphate bind to a liver receptor that does not recognize heparin.</a> Glycoconj. J. 14, 561-568 (1997).</li><li>Oie, C. I., Olsen, R., Smedsrod, B., Hansen, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liver+sinusoidal+endothelial+cells+are+the+principal+site+for+elimination+of+unfractionated+heparin+from+the+circulation.">Liver sinusoidal endothelial cells are the principal site for elimination of unfractionated heparin from the circulation.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 294, 520-528 (2008).</li><li>Harris, E. N., Weigel, J. A., Weigel, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+hyaluronan+receptor+for+endocytosis+(HARE/Stabilin-2)+is+a+systemic+clearance+receptor+for+heparin.">The human hyaluronan receptor for endocytosis (HARE/Stabilin-2) is a systemic clearance receptor for heparin.</a> J. Biol. Chem. 283, 17341-17350 (2008).</li><li>Knook, D. L., Sleyster, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Separation+of+Kupffer+and+endothelial+cells+of+the+rat+liver+by+centrifugal+elutriation.">Separation of Kupffer and endothelial cells of the rat liver by centrifugal elutriation.</a> Exp. Cell. Res. 99, 444-449 (1976).</li><li>Graupera, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sinusoidal+endothelial+COX-1-derived+prostanoids+modulate+the+hepatic+vascular+tone+of+cirrhotic+rat+livers.">Sinusoidal endothelial COX-1-derived prostanoids modulate the hepatic vascular tone of cirrhotic rat livers.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 288, 763-770 (2005).</li><li>Yannariello-Brown, J., Zhou, B., Ritchie, D., Oka, J. A., Weigel, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+ligand+blot+assay+detects+different+hyaluronan-binding+proteins+in+rat+liver+hepatocytes+and+sinusoidal+endothelial+cells.">A novel ligand blot assay detects different hyaluronan-binding proteins in rat liver hepatocytes and sinusoidal endothelial cells.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 218, 314-319 (1996).</li><li>Duryee, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipopolysaccharide+is+a+cofactor+for+malondialdehyde-acetaldehyde+adduct-mediated+cytokine/chemokine+release+by+rat+sinusoidal+liver+endothelial+and+Kupffer+cells.">Lipopolysaccharide is a cofactor for malondialdehyde-acetaldehyde adduct-mediated cytokine/chemokine release by rat sinusoidal liver endothelial and Kupffer cells.</a> Alcohol Clin. Exp. Res. 28, 1931-1938 (2004).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

التخدير من الفئران من خلال طريقة قطرة شنقا في اللاوعي التي isoflurane يدفع البخار هو الأسلوب المفضل لدراستنا. ويمكن أيضا أن تستخدم المرذاذ بدلا من الحقنة مع القطن للحفاظ على الحيوانات خارج الغرفة ، ولكن العمليات الجراحية يتم ذلك بسرعة ، ليست مطلوبة. إضافة إلى البولي ايثيلين جلايكول isoflurane لخفض ضغط البخار ومعدل التبخر. كثيرا جدا سوف بخار isoflurane لحث الموت بسرعة كبيرة جدا. إذا مات الحيوان قبل مقنى الكبد ومتبيض مع TBS ، وتجميع تجلط الدم قد في الكبد ومنع غسل الفعال للsinusoids والهضم مع كولاجيناز. بالإضافة إلى ذلك قد يكون من المفيد الهيبارين كمضاد للتخثر ولكنه لا يستخدم في هذه الدراسات منذ نستخدم الهيبارين وصفت بأنها التحقيق لدينا. غالبا ما يتم استبدال حل Gey مخزنة في المياه المالحة (GBSS) من قبل مختبرات أخرى لتنقية ثانية. في حين أنه مفيد لتنقية المجلس الأعلى للتعليم ، التهاب الكبدatocytes لا تتسامح مع GBSS فضلا عن المخازن 1-3 و viabilities لا يصل تقريبا. عند قياس الإلتقام ، فمن الممارسة السليمة لقياس مستويات الخلفية في الجهاز وتنقيته في خلايا الكبد. هذا الأسلوب هو واحد من اثنين لتنقية كفاءة SECS بعد نضح الكبد مع كولاجيناز. الأسلوب الآخر يفصل الخلايا غير متني بواسطة الطرد المركزي تصويل 19 بدلا من التدرج Percoll. مزايا لاستخدام أكثر من التدرجات تصويل Percoll viabilities هي الخلية أعلى قليلا والأرقام. الجانب السلبي هو أن الطرد المركزي تصويل يتطلب الدوار المتخصصة ، وأجهزة الطرد المركزي المخصصة ، ومضخة تمعجية معا والتي تكلف عشرات الآلاف من الدولارات. هذا الأسلوب يتطلب سوى استخدام جهاز طرد مركزي طاولة المبردة ومضخة تمعجية الذي هو المعيار في مختبرات عديدة. فصل SECS وKCS بواسطة التصاق الانتقائي هو أسلوب قياسي20-22. ولئن كان صحيحا أن SECS ستلتزم الزجاج والبلاستيك ، والنقطة الرئيسية هي استخدام حمض غسل الزجاج نظيفة مع عدم وجود أكثر من 15 دقيقة الحضانة عند 37 درجة مئوية في 5 ٪ CO 2. KCS سوف تلتزم دائما أسرع من SECS ويستحسن أن يغسل بلطف KCS مع وسائل الإعلام لاستخراج أي SECS المتبقية التي أصبحت فضفاضة يعلق. كما يتم حذف Pronase البروتياز وغيرها من الخطوات الهضم كولاجيناز في هذا البروتوكول لزيادة viabilities الخلايا. البروتياز هضم مستقبلات خارج الخلية ، وربما تحول دون التصاق الخلوية في الخطوات تنقية النهائي. الطريقة المعروضة هنا لديها تشكيلة واسعة من التطبيقات. على الرغم من أننا تظهر النتيجة النهائية التي اتخذت في البداية للحصول على الهيبارين التروية ، وإزالة الكبد للحصول على خلايا الكبد الأولية ، قد KC ، SECS ، وHSCs يكون مفيدا لعدد من الدراسات التي تنطوي على المسارات الأيضية ، مناعي ، والأنشطة زبال ، وغيرها الفسيولوجية ستوديوفاق. أصعب جزء من هذا الإجراء هو جيد إقناء ؛ إدخال القنية ، والهضم للكبد ، والتعامل مع الكبد دون الحاجة لقسطرة زلة من الوريد البابي.

<ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> العازلة 1 : 142 مم كلوريد الصوديوم 6.7 ملي بوكل ، 10 HEPES مم ، 1.5 ٪ BSA ، ودرجة الحموضة 7.4 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> العازلة 2 (العازلة التروية) : 67،0 مم كلوريد الصوديوم ، 6.7 ملي بوكل ، 4.8 ملي CaCl 2 - H2O ، 101.0 ملي HEPES ، BSA 1.5 ٪ ، ودرجة الحموضة 7.4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> العازلة 3 : 137 مم كلوريد الصوديوم و 4.7 ملي بوكل ، MgSO 4 0.7 مم ، 1.2 مم 2 - CaCl 2H 2 O ، 10 HEPES مم ، 1.5 ٪ BSA ، ودرجة الحموضة 7.4 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> RPMI / BSA : 15G / L في جيش صرب البوسنة RPMI </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> TRIS - مخزنة المالحة (TBS) : 154 مم كلوريد الصوديوم ، و 10 قاعدة Trizma ملي الملح. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كولاجيناز : كولاجيناز A (# 11088785103) من شركة روش ، كولاجيناز النوع الأول (# LS004691) من رثينجتون بيوكيميائية أو أنا كولاجيناز (# C0130) أو IA (# C9891) من سيغما الدريخ. </li></ul> جميع أملاح هم من سيغما الدريخ <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم </td><td> شركة </td><td> نموذج / كتالوج # </td><td> تعليق </td></tr><tr><td> 20L ماء الحمام </td><td> ThermoFisher </td><td> 2231 </td><td> المياه حوالي 45 درجة مئوية للتعويض عن التبريد </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> داخل الأنابيب. </td></tr><tr><td> مضخة تمعجية </td><td> الغمد Parmer </td><td> 7553-70 </td><td> سلسلة Masterflex </td></tr><tr><td> المبردة الطرد المركزي </td><td> Sorvall </td><td> أسطورة XTR </td><td></td></tr><tr><td> القسطرة </td><td> العلوم البيولوجية دينار بحريني </td><td> 381444 </td><td></td></tr><tr><td> Dessicator الغرفة </td><td> الصياد </td><td> 08595E </td><td> استخدام لوحة داخلية </td></tr><tr><td> Percoll </td><td> سيغما </td><td> P4937 </td><td></td></tr><tr><td> مصل بقري الزلال </td><td> SeraCare </td><td> AP - 4510-01 </td><td></td></tr><tr><td> شبكة 100 ميكرون </td><td> مختبرات الطيف </td><td> 146488 </td><td></td></tr><tr><td> 30 ميكرومتر شبكة </td><td> مختبرات الطيف </td><td> 146506 </td><td></td></tr><tr><td> RPMI 1640 </td><td> Invitrogen </td><td> 21870 </td><td></td></tr><tr><td> البولي ايثيلين جلايكول </td><td> معمل الطيفق </td><td> PO107 </td><td></td></tr></tbody></table>

in vivo liver endocytosis followed by purification of liver cells by liver perfusion

الكبد هو مركز الأيضية للجسم الثدييات وبمثابة تصفية الدم. ويتضح في البنية الأساسية للكبد في الشكل (1) الذي يتكون أكثر من 85 ٪ من كتلة الكبد من خلايا الكبد ، وتتكون النسبة المتبقية البالغة 15 ٪ من الكتلة الخلوية لخلايا كوبفر (KCS) ، والخلايا النجمية (HSCs) ، و الخلايا البطانية الجيبية (ثانية). SECS تشكل جدران الأوعية الدموية داخل الكبد وتحتوي على التشكل داخل متخصصة تسمى نافذي في السيتوبلازم. نوفذة من السيتوبلازم هو مظهر من الثقوب (~ 100 ميكرون) داخل الخلايا بحيث الفعل SECS بمثابة غربال فيه معظم كيلومكرونات ، وبقايا الكيلومكرونات والجزيئات ، ولكن ليس الخلايا ، بالمرور إلى خلايا الكبد وHSCs 1 (الشكل 1). نظرا لعدم وجود الغشاء القاعدي ، والفجوة بين SECS وتشكيل خلايا الكبد من Disse الفضاء. HSCs تشغل هذه المساحة وتلعب دورا بارزا في التنظيم وردا على طnjury ، وتخزين حمض الريتينويك ومناعي لل2 الكبد. SECS هي من بين الأكثر نشاطا endocytically خلايا الجسم تعرض فيها مجموعة من المستقبلات زبال في كل خلية 3 السطح. وتشمل هذه SR - A ، وStabilin 1 - 2 - Stabilin. عموما ، يتم أخذ الجسيمات الغروية صغيرة أقل من 230 نانومتر ، والجزيئات في المرحلة العازلة بنسبة SECS ، بينما هو endocytosed الجزيئات الكبيرة والحطام الخلوية (phagocytosed) بواسطة KCS 4. وبالتالي ، فإن إزالة القسم الأكبر من المواد خارج الخلية مثل الجليكوزامينوجليكان من الدم يعتمد بشكل كبير على صحة وظائف التقامي SECS من 5،6. على سبيل المثال ، زيادة في مستويات hyaluronan الدم يدل على مرض الكبد تتراوح ما بين خفيفة إلى أشكال أكثر خطورة 7. باستثناء تقرير واحد 8 ، لا توجد خطوط الخلية SEC خلدت في الوجود. حتى هذا الخط هو خلد الخلية دي التفاضليةated في أنه لا يعبر عن مستقبلات زبال التي موجودة على SECS الابتدائية (البيانات المتوفرة لدينا ، لا يظهر). يجب إجراء جميع الدراسات الخلية البيولوجية على الخلايا الأولية التي تم الحصول عليها حديثا من الحيوان. للأسف ، في ظل ظروف SECS dedifferentiate ثقافة موحدة ويجب أن تستخدم في غضون أيام 1 أو 2 على بمعزل عن الحيوان. ويتميز تمايز SECS عن طريق التعبير عن Stabilin - 2 أو مستقبلات هير 9 ، CD31 ، ووجود نوفذة حشوية 1. ويمكن تمديد تمايز SECS بإضافة عامل نمو بطانة الاوعية في وسائل الإعلام أو الثقافة أو عن طريق زرع الخلايا الكبدية في المتوسط ​​10،11 مكيفة. في هذا التقرير ، سوف ندلل من النشاط التقامي SECS في الجهاز سليمة باستخدام الراديو المسمى الهيبارين لhyaluronan لمستقبلات Stabilin SEC - 2 - محددة. ثم سنقوم تنقية الكبد وSECS من الكبد perfused لقياس الإلتقام.

Watch this Scientific Journal Video about In vivo Liver Endocytosis Followed by Purification of Liver Cells by Liver Perfusion at JoVE.com

In vivo Liver Endocytosis Followed by Purification of Liver Cells by Liver Perfusion

يجب إجراء دراسة خلايا الكبد البطانية الجيبية (ثانية) مع الخلايا الأولية التي تم الحصول عليها من الحيوان كما لا توجد خطوط الخلايا. هذا الأسلوب يعتمد على الهضم والكبد الطرد المركزي المغاير لتنقية ثانية لزراعة اللاحقة والتجريب.

في الإلتقام الكبد المجراة تلاه تنقية خلايا الكبد الكبد الإرواء

The liver is the metabolic center of the mammalian body and serves as a filter for the blood.  The basic architecture of the liver is illustrated in ...

Research

JoVE Journal

Biology

In vivo Liver Endocytosis Followed by Purification of Liver Cells by Liver Perfusion

Isolation of CD133+ Liver Stem Cells for Clonal Expansion

عزل CD133 خلايا + الجذعية الكبد للتوسع نسيلي

Liver stem cell, or oval cells, proliferate during chronic liver injury, and are proposed to differentiate into both hepatocytes and cholangiocytes. In ...

Isolation of Rat Portal Fibroblasts by In situ Liver Perfusion

Isolation of Rat Portal Fibroblasts by In situ Liver Perfusion

عزل الخلايا الليفية بوابة الجرذ من قبل<em&gt; في الموقع</em&gt; الكبد الإرواء

Liver fibrosis is defined  by the excessive deposition of extracellular matrix by activated  myofibroblasts. There are multiple precursors of hepatic ...

Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks

افعل ذلك بنفسك جهاز لاستخراج العينات Cryopreserved سقطت سهوا في صهاريج التخزين المبردة

Liquid nitrogen is colorless, odorless, extremely cold (-196 &deg;C) liquid kept under pressure. It is commonly used as a cryogenic fluid for long term ...

Chromatin Isolation by RNA Purification (ChIRP)

Chromatin Isolation by RNA Purification ChIRP

لونين عزل من قبل تنقية الحمض النووي الريبي (السقسقة)

Long noncoding RNAs are key regulators of chromatin states for important biological processes such as dosage compensation, imprinting, and developmental ...

Isolation of Human Hepatocytes by a Two-step Collagenase Perfusion Procedure

عزل خلايا الكبد البشرية من قبل خطوتين كولاجيناز الإرواء الداخلي

The liver, an organ with an exceptional regeneration capacity, carries out a wide range of functions, such as detoxification, metabolism and homeostasis. ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

في فيفو تتبع 4 الأبعاد للالجذعية المكونة للدم والسلف الكبار في خلايا الفأر قبي نخاع العظم

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

A Protocol for Lentiviral Transduction and Downstream Analysis of Intestinal Organoids

بروتوكول لLentiviral تنبيغ وتحليل المصب من المعوية Organoids

Intestinal crypt-villus structures termed organoids, can be kept in sustained culture three dimensionally when supplemented with the appropriate growth ...

A Standardized Method for the Analysis of Liver Sinusoidal Endothelial Cells and Their Fenestrations by Scanning Electron Microscopy

طريقة موحدة لتحليل خلايا الكبد خاص بالمنحنى البطانية وFenestrations من خلال المجهر الإلكتروني

Liver sinusoidal endothelial cells are the gateway to the liver, their transcellular fenestrations allow the unimpeded transfer of small and dissolved ...

Protocol for Isolation of Primary Human Hepatocytes and Corresponding Major Populations of Non-parenchymal Liver Cells

بروتوكول لعزل خلايا الكبد الإنسان الابتدائية والموافق السكان الرئيسية للخلايا الكبد غير متني

Beside parenchymal hepatocytes, the liver consists of non-parenchymal cells (NPC) namely Kupffer cells (KC), liver endothelial cells (LEC) and hepatic ...

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

برازي تحليل جلايكورتيكود: رصد الغدة الكظرية غير الغازية في الخيليات

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...