Name: dissecting host-virus interaction in lytic replication of a model herpesvirus
Uploaded: 2011-10-07T12:00:00
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저자는 박사 제임스 (Zhijian)을 감사드립니다 Mavs 등의 필수 시약, 제공 첸 (UT 남서, 분자 생물학) - / - 마우스, 박사 르네 토 (캘리포니아 로스 앤젤레스 대학, 약학 및 분자 의학 )이 유학 γHV68의 세균 인공 염색체를 제공.

1. γHV68와 마우스 감염 <ol><li> 로 6 년 8 주 오래된, 성별 일치 littermate 마우스 (8-12 마우스 / 그룹)은 바이러스 감염에 사용됩니다. 쥐가 선적 후 사 전체 일 (96 시간) 이상 순응 할 수 있습니다. </li><li> 바이러스를 사용하여 프로토콜 단계는 표준 BSL2주의를 사용하여 바이오 안전성 수준 2 (BSL2)의 캐비닛에서 수행해야합니다. </li><li> 단지 실험하기 전에 마우스를 당 멸균 PBS의 30 μl에 γHV68의 (40 1 개 ...

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	<li>Akira, S., Uematsu, S., Takeuchi, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogen+recognition+and+innate+immunity.">Pathogen recognition and innate immunity.</a> Cell. 124, 783-801 (2006).</li><li>Medzhitov, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recognition+of+microorganisms+and+activation+of+the+immune+response.">Recognition of microorganisms and activation of the immune response.</a> Nature. 449, 819-826 (2007).</li><li>Speck, S. H., Virgin, H. 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바이러스 감염에 대응 MAVS에 의존 타고난 면역 신호 경로는 바이러스 염증성 크린 시토 킨 10-14의 생산을 촉진하기 활성화됩니다. 인간의 종양 발생 Kaposi 육종 - 관련 herpesvirus과 엡스타인 - 바 바이러스 3,4의 모델 바이러스로 손쥐 γHV68를 사용하여, 우리는 γHV68 usurps MAVS - IKKβ 경로는 전사 활성화 5를 통해 바이러스 lytic 복제를 홍보 할 것을 발견했습니다. 유전자 변형 MEFs?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td></tr><tr><td> Lipofectamine 2000 </td><td> Invitrogen </td><td> 11668-019 </td></tr><tr><td> 전기 MAX DH10B 능력 세포 </td><td> Invitrogen </td><td> 18290-015 </td></tr><tr><td> Methylcellulose </td><td> 시그마 </td><td> M0512 </td></tr><tr><td> POWERPREP HP 플라스미드 Miniprep 시스템 </td><td> OriGene </td><td> NP100004 </td></tr><tr><td> POWERPREP HP 플라스미드 Midiprep 시스템 </td><td> OriGene </td><td> NP100006 </td></tr></tbody></table>

dissecting host-virus interaction in lytic replication of a model herpesvirus

바이러스 감염에 대한 응답으로, 호스트는 바이러스 시토 킨 생산 1,2로 이어질 타고난 면역 신호 경로를 활성화 등 다양한 방어 반응을 개발하고 있습니다. 호스트를 이식하기 위해서는, 바이러스는 호스트 항 바이러스 반응을 회피하고 신호 경로를 조작 할 고맙게 여기게됩니다. 호스트 바이러스 상호 작용을 이루는 물질은 바이러스 감염에 대한 소설 치료 전략의 개발에 빛을 발산합니다. 손쥐 γHV68은 밀접하게 인간의 종양 발생 Kaposi 육종 - 관련 herpesvirus 및 Epsten - 바 바이러스 3,4에 관한 것입니다. 실험실 쥐 γHV68 감염은 인간 herpesviruses를 사용할 수 없습니다 생체에서 호스트 응답 및 바이러스 감염의 전체 과정을 검토 할 수있는 다루기 쉬운 작은 동물 모델을 제공합니다. 이 프로토콜에서는, 우리는 γHV68 lytic replic에 phenotypic 특성에 대한 방법의 패널 및 호스트 신호 구성 요소의 분자 절개를 제시생체 및 예 생체 내 두 ation. 유전자 변형 마우스 종자의 사용 가능 여부는 생체 내 γHV68 급성 감염시 호스트 신호 경로의 역할의 심문을 할 수 있습니다. 또한 이러한 결함 마우스 종자로부터 격리 마우스 배아 섬유 아세포의 (MEFs는) 추가 γHV68 lytic 복제 예를 생체 동안 이러한 분자의 역할을 해부하는 데 사용할 수 있습니다. virological 및 분자 생물학의 assays 사용하여, 우리는 호스트 바이러스 상호 작용의 분자 메커니즘을 정확히하고 바이러스 lytic 복제에 필수적 호스트 및 바이러스 유전자를 식별 할 수 있습니다. 마지막으로, 세균 인공 염색체 (BAC) 시스템은 특별히 호스트 바이러스 상호 작용을 방해 바이러스 요소 (들)에 변이의 도입을 용이하게한다. 이러한 변이를 들고 재조합 γHV68는 구성 요소를 신호 키 호스트의 결함 MEFs의 γHV68 lytic 복제 phenotypes을 요점을 되풀이하는 데 사용할 수 있습니다.이 프로토콜은 생체 및 예 생체 내 개입의 여러 수준에서 호스트 병원체 상호 작용을 심문 할 수있는 훌륭한 전략을 제공합니다. 최근, 우리는 γHV68 usurps 타고난 면역 신호 경로는 바이러스 lytic 복제 5 증진 것을 발견했습니다. 특히, γHV68 드 노보 감염 면역 키나제 IKKβ를 활성화하고 활성화 IKKβ는 바이러스 전사 활성화를 촉진하기 위해 마스터 바이러스 전사 인자, 복제 및 transactivator (RTA)을 phosphorylates. 그렇게함으로써, γHV68 효율적으로 커플 타고난 면역 활성화를 개최하기위한 전사 활성화함으로써 바이러스 트랜 스크립트 등의 lytic 복제를 촉진. 이 연구는 호스트 바이러스 상호 작용을 조사하기 위해 다른 바이러스에 적용 할 수있는 훌륭한 예를 제공합니다.

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Dissecting Host-virus Interaction in Lytic Replication of a Model Herpesvirus

우리는 모델 herpesvirus, 감마 herpesvirus 68 (γHV68)의 lytic 복제에 호스트 신호 분자의 핵심 역할을 식별 할 수있는 프로토콜을 설명합니다. 유전자 변형 마우스 긴장과 γHV68 lytic 복제 배아 섬유 아세포를 활용, 프로토콜 phenotypic 특성화 및 바이러스 lytic 복제에서 바이러스 호스트 상호 작용의 분자 심문을 모두 할 수 있습니다.

모델 Herpesvirus의 Lytic 복제의 해부 호스트 바이러스 상호 작용

In response to viral infection, a host develops various defensive responses, such as activating innate immune signaling pathways that lead to antiviral ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Identifying Dysregulated Genes Induced by Kaposi's Sarcoma-associated Herpesvirus (KSHV)

Identifying Dysregulated Genes Induced by Kaposi's Sarcoma-associated Herpesvirus KSHV

Kaposi의 육종 - 관련 Herpesvirus (KSHV)에 의해 유도된 유전자를 식별 Dysregulated

Currently KS is the most predominant HIV/AIDS related malignancy in Southern Africa and hence the world.1,2 It is characterized as an angioproliferative ...

연구

면역학 및 감염병학

Dissecting Innate Immune Signaling in Viral Evasion of Cytokine Production

사이토 카인 생산의 바이러스 성 회피에 타고난 면역 신호를 해부

In response to a viral infection, the host innate immune response is activated to up-regulate gene expression and production of antiviral cytokines. ...

A Protocol for Analyzing Hepatitis C Virus Replication

C 형 간염 바이러스의 복제를 분석하기위한 프로토콜

Hepatitis C Virus (HCV) affects 3% of the world&#8217;s population and causes serious liver ailments including&#160;chronic hepatitis, cirrhosis, and ...

High-throughput Assay to Phenotype Salmonella enterica Typhimurium Association, Invasion, and Replication in Macrophages

High-throughput Assay to Phenotype Salmonella enterica Typhimurium Association, Invasion, and Replication in Macrophages

표현형 높은 처리량 분석<em&gt; 살모넬라 엔테</em&gt; 티피 뮤 리움 협회, 침략, 그리고 대 식세포에서의 복제

Salmonella species are zoonotic pathogens and leading causes of food borne illnesses in humans and livestock1. Understanding the mechanisms underlying ...

Studying Microbial Communities In Vivo: A Model of Host-mediated Interaction Between Candida Albicans and Pseudomonas Aeruginosa in the Airways

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미생물 커뮤니티를 공부<em&gt; 생체</em&gt; 사이에 호스트 매개 상호 작용의 모델<em&gt; 칸디다 알비 칸스</em&gt; 및<em&gt; 녹농균</em&gt; 항공에

Studying host-pathogen interaction enables us to understand the underlying mechanisms of the pathogenicity during microbial infection. The prognosis of ...

Porphyromonas gingivalis as a Model Organism for Assessing Interaction of Anaerobic Bacteria with Host Cells

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숙주 세포와 혐기성 세균의 상호 작용을 평가하기위한 모델 생물로 포피 진지 발리

Anaerobic bacteria far outnumber aerobes in many human niches such as the gut, mouth, and vagina. Furthermore, anaerobic infections are common and ...

Development and Validation of a Quantitative PCR Method for Equid Herpesvirus-2 Diagnostics in Respiratory Fluids

호흡기 유체의 Equid 헤르페스 바이러스-2 진단에 대한 정량적 PCR 방법의 개발 및 검증

The protocol describes a quantitative RT-PCR method for the detection and quantification of EHV-2 in equine respiratory fluids according to the NF U47-600 ...

An In Vitro Model of the Blood-brain Barrier Using Impedance Spectroscopy: A Focus on T Cell-endothelial Cell Interaction

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<em&gt; 체외</em&gt; 임피던스 분광학을 사용하여 혈액 - 뇌 장벽 모델 : T 세포 - 내피 세포 상호 작용에 초점

Breakdown of the blood-brain barrier (BBB) is a critical step in the development of autoimmune diseases such as multiple sclerosis (MS) and its animal ...

Flow Cytometric Analysis of Natural Killer Cell Lytic Activity in Human Whole Blood

인간의 전체 혈액 자연 살해 세포 용 균성 활동의 유세포 분석

NK cell cytotoxicity is a widely used measure to determine the effect of outside intervention on NK cell function. However, the accuracy and ...

Dissecting Multi-protein Signaling Complexes by Bimolecular Complementation Affinity Purification (BiCAP)

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해 다중 단백질 신호 복합물 분자 보완성 친 화력 정화 (BiCAP)에 의해

The assembly of protein complexes is a central mechanism underlying the regulation of many cell signaling pathways. A major focus of biomedical research ...