Name: recognition of epidermal transglutaminase by iga and tissue transglutaminase 2 antibodies in a rare case of rhesus dermatitis
Uploaded: 2011-12-15T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis at JoVE.com

Forfatterne ønsker å takke Amanda Tardo, Dr. Mostafa Bouljihad, Stephanie feely, Carol Coyne, Dr. Erin Ribka, Dr. Pete Didier og Dorothy Kuebler for deres tekniske assistanse. Dette arbeidet ble støttet av NIH stipend R01-DK076653 og 3R01-DK076653-02S1 til KS og basen driftsstøtte av TNPRC RR000164.

1. Hudbiopsi prøvetaking <ol><li> Før hudbiopsi prosedyre, anesthetize dyr intramuskulært med 2,5 mg / kg av tiletamine hydroklorid og zolazepam hydroklorid telazol blanding (Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, IA). Overvåk dyrene fra administrasjon av anestesi inntil recumbency og deretter fjerne fra kabinettet sitt. </li><li> Fjern hår fra huden området av interesse å utnytte en Oster gylne A5 Enkelt Speed ​​Veterinary Clipper med en størrelse 40 blad (Oster Professional Products, McMinnville, TN) og a...

<ol>
	<li>Diosdado, B., Wijmenga, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+the+adaptive,+innate+and+regulatory+immune+responses+in+the+intestinal+mucosa+of+celiac+disease+patients.">Molecular mechanisms of the adaptive, innate and regulatory immune responses in the intestinal mucosa of celiac disease patients.</a> Expert. Rev. Mol. Diagn. 5 (5), 681-700 (2005).</li><li>Schuppan, D., Dennis, M. D., Kelly, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Celiac+disease:+epidemiology,+pathogenesis,+diagnosis,+and+nutritional+management.">Celiac disease: epidemiology, pathogenesis, diagnosis, and nutritional management.</a> Nutr. Clin. Care. 8 (2), 54-69 (2005).</li><li>Sardy, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+transglutaminase+(TGase+3)+is+the+autoantigen+of+dermatitis+herpetiformis.">Epidermal transglutaminase (TGase 3) is the autoantigen of dermatitis herpetiformis.</a> J. Exp. Med. 195 (6), 747-757 (2002).</li><li>Rose, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autoantibodies+against+epidermal+transglutaminase+are+a+sensitive+diagnostic+marker+in+patients+with+dermatitis+herpetiformis+on+a+normal+or+gluten-free+diet.">Autoantibodies against epidermal transglutaminase are a sensitive diagnostic marker in patients with dermatitis herpetiformis on a normal or gluten-free diet.</a> J. Am. Acad. Dermatol. 61 (1), 39-43 (2009).</li><li>Bethune, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transepithelial+transport+and+enzymatic+detoxification+of+gluten+in+gluten-sensitive+rhesus+macaques.">Transepithelial transport and enzymatic detoxification of gluten in gluten-sensitive rhesus macaques.</a> PLoS ONE. 3 (3), e1857-e1857 (2008).</li><li>Mazumdar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+transepithelial+passage+of+the+immunogenic+33-residue+peptide+from+&#x03B1;-2+gliadin+in+gluten-sensitive+macaques.">Visualization of transepithelial passage of the immunogenic 33-residue peptide from &#x03B1;-2 gliadin in gluten-sensitive macaques.</a> PLoS ONE. 5 (4), e10228-e10228 (2010).</li><li>Schuppan, D., Junker, Y., Barisani, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Celiac+disease:+from+pathogenesis+to+novel+therapies.">Celiac disease: from pathogenesis to novel therapies.</a> Gastroenterol. 137 (6), 1912-1933 (2009).</li><li>Hunt, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newly+identified+genetic+risk+variants+for+celiac+disease+related+to+the+immune+response.">Newly identified genetic risk variants for celiac disease related to the immune response.</a> Nature Genet. 40 (4), 395-402 (2008).</li><li>Abadie, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integration+of+genetic+and+immunological+insights+into+a+model+of+celiac+disease+pathogenesis.">Integration of genetic and immunological insights into a model of celiac disease pathogenesis.</a> Annu. Rev. Immunol. 29, 493-525 (2011).</li></ol>

Vårt nyetablerte ikke-menneskelige primater modell av glutenintoleranse ble nylig brukt til å studere intestinal permeabilitet endringer utløst av kosten gluten 5,6. Plasma tTG2 antistoffer samt intestinal tTG2 + IgA + innskudd ble oppdaget i noen gluten-sensitive makaker. Siden vi nylig identifiserte sjeldne tilfeller av idiopatisk dermatitt i kolonien rhesus-aper, der ingen vanlige (infeksiøs / metabolsk) etiologien kan være etablert, var formålet med denne studien er å vurdere om tTG2 + IgA + antist...

<table border="1"><tbody><tr><td> Navn på reagens eller utstyr </td><td> Firma </td><td> Katalog Antall / Produkt Kode </td><td> Merk </td></tr><tr><td> Anti-Human IgA-FITC * </td><td> Sigma, St. Louis, MO </td><td> F-5259 </td><td> 1:100 arbeider fortynning </td></tr><tr><td> Anti-Human tTG2 </td><td> Thermo Scientific, Kalamazoo, MI </td><td> MS-300-P1ABX </td><td> 1:100 arbeider fortynning </td></tr><tr><td> Anti-Mouse IgG1 ** </td><td> Invitrogen, Carlsbad, CA </td><td> A-21124 </td><td> 1:1,000 arbeider fortynning </td></tr><tr><td> ToPro-3 DNA probe *** </td><td> Invitrogen, Carlsbad, CA </td><td> T-3605 </td><td> 1:1,000 arbeider fortynning </td></tr><tr><td> Sink Formalin (Z-fix) </td><td> Anatech Ltd, Battle Creek, MI </td><td> 171 </td><td></td></tr><tr&gt; <td> Oktober Freezing Medium </td><td> Sakura Finetek, Torrence, CA </td><td> 4583 </td><td></td></tr><tr><td> Cytoseal Montering Medium </td><td> Richard-Allan Scientific, Kalamazoo, MI </td><td> 8312-4 </td><td></td></tr><tr><td> Anti-slukkende Oppløsning </td><td> Sigma, St. Louis, MO </td><td> P 3130 </td><td></td></tr><tr><td> Ethilon (Nylon Suture) </td><td> Ethicon, Johnson &amp; Johnson, Berkshire, Storbritannia </td><td> 663G </td><td></td></tr><tr><td> Miltex Punch Dermal Biopsi Instrument </td><td> Miltex, York, PA </td><td> NA </td><td></td></tr><tr><td> Oster gylne A5 Enkelt Speed ​​Vet Clipper med en størrelse 40 blad </td><td> Oster Produkter, McMinnville, TN </td><td> 78005-050 </td><td></td></tr><tr><td> Leica Tissue Prosessor </td><td> Leica Microsystems Inc., Buffalo Grove, KS </td><td> ASP300 </td><td></td></tr><tr><td> Rotasjonsmikrotom </td><td> Microm International, Waldorf, Tyskland </td><td> HM325 </td><td></td></tr><tr><td> Cryostat </td><td> Thermo Scientific, Kalamazoo, MI </td><td> HM560 </td><td></td></tr><tr><td> Confocal mikroskop </td><td> Leica, Wetzlar, Tyskland </td><td> TCS SP2 </td><td></td></tr></tbody></table> * Fluorescein isothiocyanat ** Secondary (Alexa Fluor 568-konjugerte) antistoff brukes etter tTG2 primære antistoff ** Dye

recognition of epidermal transglutaminase by iga and tissue transglutaminase 2 antibodies in a rare case of rhesus dermatitis

Tissue transglutaminase 2 (tTG2) er en intestinal fordøyelses enzym som deamidates allerede delvis fordøyd kosten gluten f.eks gliadin peptider. Hos genetisk disponerte individer, utløser tTG2 autoimmune reaksjoner som er karakterisert ved produksjon av tTG2 antistoffer og deres direkte avsetning i små tarmveggen 1,2. Tilstedeværelse av slike antistoffer utgjør en av de viktigste kjennetegnene på cøliaki (CD). Epidermal transglutaminase (etg.) er et annet medlem av transglutaminase familien som også kan fungere som en autoantigen i et lite mindretall av CD pasientene. I disse relativt sjeldne tilfeller utløser etg. en autoimmun reaksjon (hudutslett) klinisk kjent som dermatitis herpetiformis (DH). Selv om den eksakte mekanismen for CD og DH patogenese ikke er godt forstått, er det kjent at tTG2 og etg. dele antigene epitoper som kan bli gjenkjent av serum antistoffer fra både CD og DH pasienter 3,4. (Macaca mulatta) med dermatitt (Tabell 1, fig. 1 og 2) ble brukt til å studere de berørte vev. I ett dyr (EM96) en spektral overlapping av IgA og tTG2 antistoffer (Fig. 3) ble demonstrert. Tilstedeværelsen av dobbel-positive tTG2 + IgA + celler var fokusert i den dype epidermis, rundt dermal papillae. Dette er konsistent med lesjoner beskrevet i DH pasienter 3. Da EM96 var plassert på en glutenfri diett, dermatitt, samt tTG2 + IgA + innskudd forsvant og var ikke lenger synlig (figur 1-3). Dermatitt dukket imidlertid basert på re-introduksjon av kosttilskudd gluten i EM96 (ikke vist). I andre makaker inklusive dyr med urelaterte dermatitt, ble tTG2 + IgA + innskudd ikke er oppdaget. Glutenfri diett-avhengig syndenes dermatitt i EM96 sammen med tilstedeværelse av tTG2 + IgA + celler i huden sin foreslå en autoimmun, DH-lignendemekanisme for utvikling av denne tilstanden. Dette er den første rapporten om DH-aktig dermatitt i enhver ikke-menneskelige primater.

Watch this Scientific Journal Video about Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis at JoVE.com

Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis

Dermatitis herpetiformis (DH) er en kronisk inflammatorisk tilstand karakterisert ved en autoimmun reaksjon mellom IgA og epidermal transglutaminase (etg.). DH utvikler seg i en svært liten del av gluten-sensitive og / eller cøliaki pasienter. Resultatene av denne studien indikerer at DH kan også utvikle seg i en Rhesus ape vert med symptomer på idiopatic dermatitt.

Anerkjennelse av epidermal Transglutaminase av IgA og Tissue Transglutaminase to antistoffer i et sjeldent tilfelle av Rhesus Dermatitis

Tissue transglutaminase 2 (tTG2) is an intestinal digestive enzyme which deamidates already partially digested dietary gluten e.g. gliadin peptides. In ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis

Multicolor Flow Cytometry Analyses of Cellular Immune Response in Rhesus Macaques

The rhesus macaque model is currently the best available model for HIV-AIDS with respect to understanding the pathogenesis as well as for the development ...

IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol (PEG) Precipitation

IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol PEG Precipitation

Hens can be immunized by means of  i.m. vaccination (Musculus pectoralis, left and right, injection volume  0.5-1.0 ml) or by means of Gene-Gun ...

Identification of Rare Bacterial Pathogens by 16S rRNA Gene Sequencing and MALDI-TOF MS

Identifisering av sjeldne bakterielle patogener av 16S rRNA Gene Sequencing og MALDI-TOF MS

There are a number of rare and, therefore, insufficiently described bacterial pathogens which are reported to cause severe infections especially in ...

Antibody Binding Specificity for Kappa (V&#954;) Light Chain-containing Human (IgM) Antibodies: Polysialic Acid (PSA) Attached to NCAM as a Case Study

Antibody Binding Specificity for Kappa VÃƒÅ½Ã‚Âº Light Chain-containing Human IgM Antibodies: Polysialic Acid PSA Attached to NCAM as a Case Study

Antistoff bindingsspesifisitet for Kappa (Vκ) lett kjede som inneholder menneske (IgM) antistoffer: Polysialic Acid (PSA) Knyttet til NCAM som en Case Study

Antibodies of the IgM isotype are often neglected as potential therapeutics in human trials, animal models of human diseases as well as detecting agents ...

Generation of Murine Monoclonal Antibodies by Hybridoma Technology

Generering av monoklonale antistoffer fra mus ved Hybridoma Technology

Monoclonal antibodies are universal binding molecules and are widely used in biomedicine and research. Nevertheless, the generation of these binding ...

Analysis of Simian Immunodeficiency Virus-specific CD8+ T-cells in Rhesus Macaques by Peptide-MHC-I Tetramer Staining

Analysis of Simian Immunodeficiency Virus-specific CD8+ T-cells in Rhesus Macaques by Peptide-MHC-I Tetramer Staining

Analyse av Simian Immunodeficiency Virus-spesifikke CD8<sup&gt; +</sup&gt; T-celler i rhesusape av Peptide-MHC-I Tetramer Farging

Peptide-major histocompatibility complex class I (pMHC-I) tetramers have been an invaluable tool to study CD8+ T-cell responses. Because these reagents ...

Detection and Enrichment of Rare Antigen-specific B Cells for Analysis of Phenotype and Function

Oppdagelse og berikelse av Rare antigen-spesifikke B-celler for analyse av fenotype og funksjon

B cells reactive with a specific antigen usually occur at a frequency of &lt;0.05% of lymphocytes. For decades researchers have sought methods to isolate ...

Effects of Exposure of Formaldehyde to a Rat Model of Atopic Dermatitis Induced by Neonatal Capsaicin Treatment

Effekter av eksponering av formaldehyd i en rotte modell av Atopic Dermatitis indusert av Neonatal Capsaicin behandling

Atopic dermatitis is chronically relapsing pruritic eczema and prevails around the world especially in developed countries. Complex interactions between ...

A Method to Assess Fc-mediated Effector Functions Induced by Influenza Hemagglutinin Specific Antibodies

Metode for å vurdere funksjoner Fc-mediert effektor av influensa Hemagglutinin spesifikke antistoffer

Antibodies play a crucial role in coupling the innate and adaptive immune responses against viral pathogens through their antigen binding domains and ...

Generation of Discriminative Human Monoclonal Antibodies from Rare Antigen-specific B Cells Circulating in Blood

Generasjon av Discriminative menneskelige monoklonale antistoffer fra sjeldne Antigen-spesifikke B celler i blodet

Monoclonal antibodies (mAbs) are powerful tools useful for both fundamental research and in biomedicine. Their high specificity is indispensable when the ...