Name: recognition of epidermal transglutaminase by iga and tissue transglutaminase 2 antibodies in a rare case of rhesus dermatitis
Uploaded: 2011-12-15T12:00:00
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Os autores gostariam de agradecer a Amanda Tardo, Dr. Mostafa Bouljihad, Stephanie Feely, Carol Coyne, Dr. Erin Ribka, Dr. Didier e Pete Dorothy Kuebler por sua assistência técnica. Este trabalho foi financiado pelo NIH concede R01-DK076653 e 3R01-DK076653-02S1 para KS e da subvenção de funcionamento base do TNPRC RR000164.

1. Coleta de amostra de biópsia de pele <ol><li> Antes de procedimento de biópsia de pele, anestesiar animais por via intramuscular com 2,5 mg / kg de cloridrato de tiletamina e cloridrato de zolazepam mistura telazol (Fort Dodge Saúde Animal, Fort Dodge, IA). Monitorar os animais desde a administração do anestésico até decúbito e depois remover do seu gabinete. </li><li> Remover os pêlos da área de interesse da pele utilizando uma de Ouro Oster A5 Clipper Single Speed ​​Veterinária com uma lâmina de t...

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	<li>Diosdado, B., Wijmenga, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+the+adaptive,+innate+and+regulatory+immune+responses+in+the+intestinal+mucosa+of+celiac+disease+patients.">Molecular mechanisms of the adaptive, innate and regulatory immune responses in the intestinal mucosa of celiac disease patients.</a> Expert. Rev. Mol. Diagn. 5 (5), 681-700 (2005).</li><li>Schuppan, D., Dennis, M. D., Kelly, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Celiac+disease:+epidemiology,+pathogenesis,+diagnosis,+and+nutritional+management.">Celiac disease: epidemiology, pathogenesis, diagnosis, and nutritional management.</a> Nutr. Clin. Care. 8 (2), 54-69 (2005).</li><li>Sardy, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+transglutaminase+(TGase+3)+is+the+autoantigen+of+dermatitis+herpetiformis.">Epidermal transglutaminase (TGase 3) is the autoantigen of dermatitis herpetiformis.</a> J. Exp. Med. 195 (6), 747-757 (2002).</li><li>Rose, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autoantibodies+against+epidermal+transglutaminase+are+a+sensitive+diagnostic+marker+in+patients+with+dermatitis+herpetiformis+on+a+normal+or+gluten-free+diet.">Autoantibodies against epidermal transglutaminase are a sensitive diagnostic marker in patients with dermatitis herpetiformis on a normal or gluten-free diet.</a> J. Am. Acad. Dermatol. 61 (1), 39-43 (2009).</li><li>Bethune, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transepithelial+transport+and+enzymatic+detoxification+of+gluten+in+gluten-sensitive+rhesus+macaques.">Transepithelial transport and enzymatic detoxification of gluten in gluten-sensitive rhesus macaques.</a> PLoS ONE. 3 (3), e1857-e1857 (2008).</li><li>Mazumdar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+transepithelial+passage+of+the+immunogenic+33-residue+peptide+from+&#x03B1;-2+gliadin+in+gluten-sensitive+macaques.">Visualization of transepithelial passage of the immunogenic 33-residue peptide from &#x03B1;-2 gliadin in gluten-sensitive macaques.</a> PLoS ONE. 5 (4), e10228-e10228 (2010).</li><li>Schuppan, D., Junker, Y., Barisani, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Celiac+disease:+from+pathogenesis+to+novel+therapies.">Celiac disease: from pathogenesis to novel therapies.</a> Gastroenterol. 137 (6), 1912-1933 (2009).</li><li>Hunt, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newly+identified+genetic+risk+variants+for+celiac+disease+related+to+the+immune+response.">Newly identified genetic risk variants for celiac disease related to the immune response.</a> Nature Genet. 40 (4), 395-402 (2008).</li><li>Abadie, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integration+of+genetic+and+immunological+insights+into+a+model+of+celiac+disease+pathogenesis.">Integration of genetic and immunological insights into a model of celiac disease pathogenesis.</a> Annu. Rev. Immunol. 29, 493-525 (2011).</li></ol>

Nosso recém-criado modelo de primatas não-humanos da sensibilidade ao glúten foi recentemente utilizado para estudar as mudanças da permeabilidade intestinal desencadeada pelo glúten na dieta 5,6. Plasma tTG2 anticorpos, assim como intestinal tTG2 + + depósitos de IgA foram detectados em alguns macacos glúten-sensível. Desde que identificado recentemente incidentes raros de dermatite idiopática em colônia de macacos rhesus, onde nenhuma etiologia (infecciosas / metabólica) usual pôde ser estabelec...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome do reagente ou equipamento </td><td> Companhia </td><td> Número Catálogo / Código </td><td> Nota </td></tr><tr><td> IgA anti-humana-FITC * </td><td> Sigma, St. Louis, MO </td><td> F-5259 </td><td> 1:100 diluição de trabalho </td></tr><tr><td> Anti-Human tTG2 </td><td> Thermo Scientific, Kalamazoo, MI </td><td> MS-300-P1ABX </td><td> 1:100 diluição de trabalho </td></tr><tr><td> Anti-IgG1 ** </td><td> Invitrogen, Carlsbad, CA </td><td> A-21124 </td><td> 1:1.000 diluição de trabalho </td></tr><tr><td> ToPro-3 DNA *** sonda </td><td> Invitrogen, Carlsbad, CA </td><td> T-3605 </td><td> 1:1.000 diluição de trabalho </td></tr><tr><td> Zinco formalina (Z-fix) </td><td> Anatech Ltd., Battle Creek, MI </td><td> 171 </td><td></td></tr><tr&gt; <td> Congelamento outubro Médio </td><td> Sakura Finetek, Torrence, CA </td><td> 4583 </td><td></td></tr><tr><td> Cytoseal Montagem Médio </td><td> Richard Allan-Científico, Kalamazoo, MI </td><td> 8312-4 </td><td></td></tr><tr><td> Anti-Quenching Solução </td><td> Sigma, St. Louis, MO </td><td> P 3130 </td><td></td></tr><tr><td> Ethilon (Sutura Nylon) </td><td> Ethicon, Johnson &amp; Johnson, Berkshire, Reino Unido </td><td> 663G </td><td></td></tr><tr><td> Miltex Soco instrumento de biópsia cutânea </td><td> Miltex, York, PA </td><td> NA </td><td></td></tr><tr><td> Oster A5 Ouro Clipper Vet Único de velocidade com uma lâmina de tamanho 40 </td><td> Oster Produtos, McMinnville, TN </td><td> 78005-050 </td><td></td></tr><tr><td> Leica Processor Tissue </td><td> Leica Microsystems Inc., Buffalo Grove, KS </td><td> ASP300 </td><td></td></tr><tr><td> Micrótomo rotativo </td><td> Microm International, Waldorf, na Alemanha </td><td> HM325 </td><td></td></tr><tr><td> Criostato </td><td> Thermo Scientific, Kalamazoo, MI </td><td> HM560 </td><td></td></tr><tr><td> Microscópio confocal </td><td> Leica, Wetzlar, Alemanha </td><td> TCS SP2 </td><td></td></tr></tbody></table> * Isotiocianato de fluoresceína ** Anticorpo secundário (Alexa Fluor 568-conjugados) usado após tTG2 anticorpo primário ** Dye

recognition of epidermal transglutaminase by iga and tissue transglutaminase 2 antibodies in a rare case of rhesus dermatitis

Transglutaminase tecidular 2 (tTG2) é uma enzima digestiva intestinal que deamidates já parcialmente digeridos da dieta do glúten peptídeos gliadina por exemplo. Em indivíduos geneticamente predispostos, tTG2 desencadeia respostas auto-imunes que se caracterizam pela produção de anticorpos e tTG2 sua deposição direta em 1,2 parede do intestino delgado. A presença de tais anticorpos constitui uma das características principais da doença celíaca (CD). Transglutaminase epidérmica (ETG) é outro membro da família transglutaminase, que também pode funcionar como auto-antígeno em uma pequena minoria de pacientes com DC. Nestes casos relativamente raros, ETG desencadeia uma reação auto-imune (erupção cutânea) clinicamente conhecida como dermatite herpetiforme (DH). Embora o mecanismo exato da patogênese da DH CD e não é bem compreendida, sabe-se que tTG2 e ETG epítopos antigênicos partes que podem ser reconhecidas por anticorpos de soro de pacientes de CD e DH 3,4. (Macaca mulatta) com dermatite (Tabela 1, fig. 1 e 2) foi usado para estudar os tecidos afetados. Em um animal (EM96) uma sobreposição espectral de IgA e tTG2 anticorpos (Fig. 3) foi demonstrada. A presença de duplo-positivos tTG2 + + células IgA foi focada na epiderme profunda, em torno da papila dérmica. Isto é consistente com lesões descritas em pacientes DH 3. Quando EM96 foi colocado em uma dieta livre de glúten, a dermatite, bem como tTG2 + IgA + depósitos desapareceu e já não eram detectáveis ​​(Figs. 1-3). Dermatite reapareceu no entanto, com base na re-introdução do glúten na dieta EM96 (não mostrado). Em macacos, incluindo animais com dermatite independentes, o tTG2 + + depósitos de IgA não foram detectadas. Dieta sem glúten-dependente remissão de dermatite em EM96 juntamente com presença de IgA + + tTG2 células em sua pele sugerem uma auto-imunes, como a DH-mecanismo para o desenvolvimento dessa condição. Este é o primeiro relatório de DH-como a dermatite em qualquer primata não-humano.

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Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis

Dermatite herpetiforme (DH) é uma condição inflamatória crônica caracterizada por uma reação auto-imune entre IgA e transglutaminase epidérmica (ETG). DH se desenvolve em uma parcela muito pequena dos pacientes glúten-sensíveis e / ou doença celíaca. Os resultados deste estudo indicam que a DH também pode se desenvolver em um hospedeiro macaco rhesus com sintomas da dermatite idiopática.

Reconhecimento da transglutaminase epidérmica por 2 Anticorpos IgA transglutaminase tecidular e em um caso raro de Rhesus Dermatite

Tissue transglutaminase 2 (tTG2) is an intestinal digestive enzyme which deamidates already partially digested dietary gluten e.g. gliadin peptides. In ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis

Multicolor Flow Cytometry Analyses of Cellular Immune Response in Rhesus Macaques

Fluxo multicolor de Citometria de Análises de resposta imune celular em macacos rhesus

The rhesus macaque model is currently the best available model for HIV-AIDS with respect to understanding the pathogenesis as well as for the development ...

Imunologia e Infecção

IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol (PEG) Precipitation

IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol PEG Precipitation

Tecnologia IgY: Extração de anticorpos de gema de ovo de galinha por polietileno glicol (PEG) Precipitação

Hens can be immunized by means of  i.m. vaccination (Musculus pectoralis, left and right, injection volume  0.5-1.0 ml) or by means of Gene-Gun ...

Identification of Rare Bacterial Pathogens by 16S rRNA Gene Sequencing and MALDI-TOF MS

Identificação de patógenos bacterianos raras, seqüência do gene 16rRNA e MALDI-TOF MS

There are a number of rare and, therefore, insufficiently described bacterial pathogens which are reported to cause severe infections especially in ...

Antibody Binding Specificity for Kappa (V&#954;) Light Chain-containing Human (IgM) Antibodies: Polysialic Acid (PSA) Attached to NCAM as a Case Study

Antibody Binding Specificity for Kappa VÃƒÅ½Ã‚Âº Light Chain-containing Human IgM Antibodies: Polysialic Acid PSA Attached to NCAM as a Case Study

A ligação do anticorpo especificidade para Kappa (VK) Humanos (IgM) Anticorpos contendo Cadeia Luz: Acid polissiálico (PSA) Anexado a MACN como um estudo de caso

Antibodies of the IgM isotype are often neglected as potential therapeutics in human trials, animal models of human diseases as well as detecting agents ...

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Geração de anticorpos monoclonais murinos pelo hibridoma Tecnologia

Monoclonal antibodies are universal binding molecules and are widely used in biomedicine and research. Nevertheless, the generation of these binding ...

Analysis of Simian Immunodeficiency Virus-specific CD8+ T-cells in Rhesus Macaques by Peptide-MHC-I Tetramer Staining

Analysis of Simian Immunodeficiency Virus-specific CD8+ T-cells in Rhesus Macaques by Peptide-MHC-I Tetramer Staining

Análise de células T CD8 específicas do vírus da imunodeficiência símia<sup&gt; +</sup&gt; Células-T em Rhesus Macaques por Peptide-MHC-I tetrâmero coloração

Peptide-major histocompatibility complex class I (pMHC-I) tetramers have been an invaluable tool to study CD8+ T-cell responses. Because these reagents ...

Detection and Enrichment of Rare Antigen-specific B Cells for Analysis of Phenotype and Function

Detecção e enriquecimento da Rare células B antígeno-específica para a análise do fenótipo e função

B cells reactive with a specific antigen usually occur at a frequency of &lt;0.05% of lymphocytes. For decades researchers have sought methods to isolate ...

Effects of Exposure of Formaldehyde to a Rat Model of Atopic Dermatitis Induced by Neonatal Capsaicin Treatment

Efeitos da exposição de formol para um modelo do rato da dermatite atópica, induzido pela capsaicina Neonatal tratamento

Atopic dermatitis is chronically relapsing pruritic eczema and prevails around the world especially in developed countries. Complex interactions between ...

A Method to Assess Fc-mediated Effector Functions Induced by Influenza Hemagglutinin Specific Antibodies

Um método para avaliar funções efetoras mediada por Fc induzidas por anticorpos específicos de hemaglutinina de gripe

Antibodies play a crucial role in coupling the innate and adaptive immune responses against viral pathogens through their antigen binding domains and ...

Generation of Discriminative Human Monoclonal Antibodies from Rare Antigen-specific B Cells Circulating in Blood

Geração dos anticorpos monoclonais humanos discriminativa de rara B antígeno-específicas células circulantes no sangue

Monoclonal antibodies (mAbs) are powerful tools useful for both fundamental research and in biomedicine. Their high specificity is indispensable when the ...