Name: recognition of epidermal transglutaminase by iga and tissue transglutaminase 2 antibodies in a rare case of rhesus dermatitis
Uploaded: 2011-12-15T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis at JoVE.com

Författarna vill tacka Amanda Tardo, Dr Mostafa Bouljihad, Stephanie Feely, Carol Coyne, Dr Erin Ribka, Dr Pete Didier och Dorothy Kuebler för tekniskt bistånd. Detta arbete fick stöd av NIH bidrag R01-DK076653 och 3R01-DK076653-02S1 till KS och basen driftsbidrag av TNPRC RR000164.

1. Hudbiopsi provtagning <ol><li> Innan hudbiopsi förfarande, bedöva djur intramuskulärt med 2,5 mg / kg tiletamine hydroklorid och zolazepam hydroklorid telazol blandning (Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, IA). Övervaka djur från administrationen av narkos tills VILA och ta sedan ut från sin inhägnad. </li><li> Ta bort hår från huden område av intresse att använda en Oster Golden A5 Single Speed ​​veterinärmedicinska Clipper med en storlek 40 blad (Oster Professionella Produkter, McMinnville, TN) ...

<ol>
	<li>Diosdado, B., Wijmenga, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+the+adaptive,+innate+and+regulatory+immune+responses+in+the+intestinal+mucosa+of+celiac+disease+patients.">Molecular mechanisms of the adaptive, innate and regulatory immune responses in the intestinal mucosa of celiac disease patients.</a> Expert. Rev. Mol. Diagn. 5 (5), 681-700 (2005).</li><li>Schuppan, D., Dennis, M. D., Kelly, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Celiac+disease:+epidemiology,+pathogenesis,+diagnosis,+and+nutritional+management.">Celiac disease: epidemiology, pathogenesis, diagnosis, and nutritional management.</a> Nutr. Clin. Care. 8 (2), 54-69 (2005).</li><li>Sardy, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+transglutaminase+(TGase+3)+is+the+autoantigen+of+dermatitis+herpetiformis.">Epidermal transglutaminase (TGase 3) is the autoantigen of dermatitis herpetiformis.</a> J. Exp. Med. 195 (6), 747-757 (2002).</li><li>Rose, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autoantibodies+against+epidermal+transglutaminase+are+a+sensitive+diagnostic+marker+in+patients+with+dermatitis+herpetiformis+on+a+normal+or+gluten-free+diet.">Autoantibodies against epidermal transglutaminase are a sensitive diagnostic marker in patients with dermatitis herpetiformis on a normal or gluten-free diet.</a> J. Am. Acad. Dermatol. 61 (1), 39-43 (2009).</li><li>Bethune, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transepithelial+transport+and+enzymatic+detoxification+of+gluten+in+gluten-sensitive+rhesus+macaques.">Transepithelial transport and enzymatic detoxification of gluten in gluten-sensitive rhesus macaques.</a> PLoS ONE. 3 (3), e1857-e1857 (2008).</li><li>Mazumdar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+transepithelial+passage+of+the+immunogenic+33-residue+peptide+from+&#x03B1;-2+gliadin+in+gluten-sensitive+macaques.">Visualization of transepithelial passage of the immunogenic 33-residue peptide from &#x03B1;-2 gliadin in gluten-sensitive macaques.</a> PLoS ONE. 5 (4), e10228-e10228 (2010).</li><li>Schuppan, D., Junker, Y., Barisani, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Celiac+disease:+from+pathogenesis+to+novel+therapies.">Celiac disease: from pathogenesis to novel therapies.</a> Gastroenterol. 137 (6), 1912-1933 (2009).</li><li>Hunt, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newly+identified+genetic+risk+variants+for+celiac+disease+related+to+the+immune+response.">Newly identified genetic risk variants for celiac disease related to the immune response.</a> Nature Genet. 40 (4), 395-402 (2008).</li><li>Abadie, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integration+of+genetic+and+immunological+insights+into+a+model+of+celiac+disease+pathogenesis.">Integration of genetic and immunological insights into a model of celiac disease pathogenesis.</a> Annu. Rev. Immunol. 29, 493-525 (2011).</li></ol>

Vår nybildade icke-mänskliga primater modell av gluten känslighet användes nyligen för att studera tarmens permeabilitet förändringar till följd av kosten gluten 5,6. Plasma tTG2 antikroppar samt intestinal tTG2 + IgA + avlagringar upptäcktes hos några gluten känsliga makaker. Eftersom vi nyligen identifierat sällsynta fall av idiopatisk dermatit i kolonin rhesus makaker, där inga vanliga (infektiösa / ämnesomsättning) etiologi kunde fastställas, var syftet med denna studie för att utvärder...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reagensets namn eller utrustning </td><td> Företag </td><td> Katalognummer / Product Code </td><td> Not </td></tr><tr><td> Anti-Human IgA-FITC * </td><td> Sigma, St Louis, MO </td><td> F-5259 </td><td> 1:100 bruksspädning </td></tr><tr><td> Anti-Human tTG2 </td><td> Thermo Scientific, Kalamazoo, MI </td><td> MS-300-P1ABX </td><td> 1:100 bruksspädning </td></tr><tr><td> Anti-mus IgG1 ** </td><td> Invitrogen, Karlsbad, Kalifornien </td><td> A-21.124 </td><td> 1:1,000 bruksspädning </td></tr><tr><td> ToPro-3 DNA-probe *** </td><td> Invitrogen, Karlsbad, Kalifornien </td><td> T-3605 </td><td> 1:1,000 bruksspädning </td></tr><tr><td> Zink Formalin (Z-fix) </td><td> Anatech Ltd, Battle Creek, MI </td><td> 171 </td><td></td></tr><tr&gt; <td> Oktober Frysning Medium </td><td> Sakura Finetek, Torrence, CA </td><td> 4583 </td><td></td></tr><tr><td> Cytoseal Montering Medium </td><td> Richard-Allan Vetenskapliga, Kalamazoo, MI </td><td> 8312-4 </td><td></td></tr><tr><td> Anti-Släckning Lösning </td><td> Sigma, St Louis, MO </td><td> P 3130 </td><td></td></tr><tr><td> Ethilon (Nylon Suture) </td><td> Ethicon, Johnson &amp; Johnson, Berkshire, Storbritannien </td><td> 663G </td><td></td></tr><tr><td> Miltex Punch Dermal Biopsi Instrument </td><td> Miltex, York, PA </td><td> NA </td><td></td></tr><tr><td> Oster Golden A5 Single Speed ​​Vet Clipper med en storlek 40 blad </td><td> Oster Produkter, McMinnville, TN </td><td> 78005-050 </td><td></td></tr><tr><td> Leica Tissue Processor </td><td> Leica Microsystems Inc., Buffalo Grove, KS </td><td> ASP300 </td><td></td></tr><tr><td> Rotary mikrotom </td><td> MicroM International, Waldorf, Tyskland </td><td> HM325 </td><td></td></tr><tr><td> Kryostat </td><td> Thermo Scientific, Kalamazoo, MI </td><td> HM560 </td><td></td></tr><tr><td> Konfokalmikroskop </td><td> Leica, Wetzlar, Tyskland </td><td> TCS SP2 </td><td></td></tr></tbody></table> * Fluoresceinisothiocyanat ** Sekundär (Alexa Fluor 568-konjugerade) antikropp som används efter tTG2 primära antikroppen ** Dye

recognition of epidermal transglutaminase by iga and tissue transglutaminase 2 antibodies in a rare case of rhesus dermatitis

Tissue transglutaminas 2 (tTG2) är en intestinal matsmältningsorganen enzym som deamidates redan delvis smälta födan gluten peptider t.ex. gliadin. I genetiskt predisponerade individer, triggers tTG2 autoimmuna reaktioner som kännetecknas av produktionen av tTG2 antikroppar och deras direkta nedfallet i små tarmväggen 1,2. Förekomsten av sådana antikroppar utgör en av de viktigaste kännetecknen för celiaki (CD). Epidermal transglutaminas (ETG) är en annan medlem av transglutaminas familjen som också kan fungera som ett autoantigen i en liten minoritet av CD patienter. I dessa relativt sällsynta fall utlöser ETG en autoimmun reaktion (hudutslag) kliniskt kallas dermatitis herpetiformis (DH). Även om den exakta mekanismen för CD och DH patogenes inte är väl beskriven, är det känt att tTG2 och ETG epitoper dela antigen som kan kännas igen av antikroppar från både CD och DH patienter 3,4. (Macaca mulatta) med dermatit (tabell 1, figur. 1 och 2) användes för att studera de drabbade vävnaderna. I ett djur (EM96) en spektral överlappning av IgA och tTG2 antikroppar (Fig. 3) visades. Förekomsten av dubbla positiva tTG2 + IgA + celler var fokuserad i det djupa överhuden, runt dermal papiller. Detta överensstämmer med skador som beskrivs i DH patienter 3. När EM96 var placerad på en glutenfri kost, dermatit, liksom tTG2 + IgA + insättningar försvann och var inte längre detekterbar (bild 1-3). Dermatit återkom dock, baserat på återinförande av kosten gluten i EM96 (visas ej). I andra makaker inklusive djur med oberoende dermatit var tTG2 + IgA + insättningar inte upptäcks. Glutenfri kost-beroende eftergift av dermatit i EM96 tillsammans med närvaron av tTG2 + IgA + celler i huden antyder en autoimmun, DH-liknandemekanism för utveckling av detta tillstånd. Detta är den första rapporten från DH-liknande dermatit hos icke-mänskliga primater.

Watch this Scientific Journal Video about Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis at JoVE.com

Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis

Dermatitis herpetiformis (DH) är en kronisk inflammatorisk tillstånd som kännetecknas av en autoimmun reaktion mellan IgA och epidermal transglutaminas (ETG). DH utvecklas i en mycket liten del av gluten-känsliga och / eller celiaki patienter. Resultaten från denna studie indikerar att DH också kan utvecklas i en rhesusapa värd med symtom på idiopatisk dermatit.

Erkännande av Epidermal transglutaminas av IgA och Tissue transglutaminas 2 antikroppar i ett enstaka fall av Rhesus Dermatit

Tissue transglutaminase 2 (tTG2) is an intestinal digestive enzyme which deamidates already partially digested dietary gluten e.g. gliadin peptides. In ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Recognition of Epidermal Transglutaminase by IgA and Tissue Transglutaminase 2 Antibodies in a Rare Case of Rhesus Dermatitis

Multicolor Flow Cytometry Analyses of Cellular Immune Response in Rhesus Macaques

Multicolor flödescytometrisystem Analyser av cellulära immunförsvaret i Rhesus makaker

The rhesus macaque model is currently the best available model for HIV-AIDS with respect to understanding the pathogenesis as well as for the development ...

IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol (PEG) Precipitation

IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol PEG Precipitation

IgY Teknik: Utvinning av Kyckling Antikroppar från äggula med polyetylenglykol (PEG) Nederbörd

Hens can be immunized by means of  i.m. vaccination (Musculus pectoralis, left and right, injection volume  0.5-1.0 ml) or by means of Gene-Gun ...

Identification of Rare Bacterial Pathogens by 16S rRNA Gene Sequencing and MALDI-TOF MS

Identifiering av sällsynta mängden sjukdomsalstrande bakterier från 16S rRNA Gene sekvensering och MALDI-TOF MS

There are a number of rare and, therefore, insufficiently described bacterial pathogens which are reported to cause severe infections especially in ...

Antibody Binding Specificity for Kappa (V&#954;) Light Chain-containing Human (IgM) Antibodies: Polysialic Acid (PSA) Attached to NCAM as a Case Study

Antibody Binding Specificity for Kappa VÃƒÅ½Ã‚Âº Light Chain-containing Human IgM Antibodies: Polysialic Acid PSA Attached to NCAM as a Case Study

Antikroppsbindande specificitet för Kappa (Vk) Lätt kedja som innehåller mänskliga (IgM) Antikroppar: polysialinsyra (PSA) Bifogat till NCAM som en fallstudie

Antibodies of the IgM isotype are often neglected as potential therapeutics in human trials, animal models of human diseases as well as detecting agents ...

Generation of Murine Monoclonal Antibodies by Hybridoma Technology

Generering av murina monoklonala antikroppar genom hybridomteknik

Monoclonal antibodies are universal binding molecules and are widely used in biomedicine and research. Nevertheless, the generation of these binding ...

Analysis of Simian Immunodeficiency Virus-specific CD8+ T-cells in Rhesus Macaques by Peptide-MHC-I Tetramer Staining

Analysis of Simian Immunodeficiency Virus-specific CD8+ T-cells in Rhesus Macaques by Peptide-MHC-I Tetramer Staining

Analys av Simian Immunodeficiency Virus-specifika CD8<sup&gt; +</sup&gt; T-celler i rhesusmakaker av peptid-MHC-I tetramer färgning

Peptide-major histocompatibility complex class I (pMHC-I) tetramers have been an invaluable tool to study CD8+ T-cell responses. Because these reagents ...

Detection and Enrichment of Rare Antigen-specific B Cells for Analysis of Phenotype and Function

Detection och anrikning av sällsynta antigenspecifika B-celler för analys av Fenotyp och funktion

B cells reactive with a specific antigen usually occur at a frequency of &lt;0.05% of lymphocytes. For decades researchers have sought methods to isolate ...

Effects of Exposure of Formaldehyde to a Rat Model of Atopic Dermatitis Induced by Neonatal Capsaicin Treatment

Effekterna av exponering av formaldehyd för en råtta modell av atopisk dermatit orsakas av Neonatal Capsaicin behandling

Atopic dermatitis is chronically relapsing pruritic eczema and prevails around the world especially in developed countries. Complex interactions between ...

A Method to Assess Fc-mediated Effector Functions Induced by Influenza Hemagglutinin Specific Antibodies

En metod för att bedöma Fc-medierad effektor funktioner induceras av influensa Hemagglutinin specifika antikroppar

Antibodies play a crucial role in coupling the innate and adaptive immune responses against viral pathogens through their antigen binding domains and ...

Generation of Discriminative Human Monoclonal Antibodies from Rare Antigen-specific B Cells Circulating in Blood

Generation av diskriminerande humana monoklonala antikroppar från sällsynta Antigen-specifika B-celler som cirkulerar i blodet

Monoclonal antibodies (mAbs) are powerful tools useful for both fundamental research and in biomedicine. Their high specificity is indispensable when the ...