Name: isolation &#38; characterization of hoechstlow cd45negative mouse lung mesenchymal stem cells
Uploaded: 2011-10-26T13:00:00
Duration: 16 min 55 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation & Characterization of Hoechstlow CD45negative Mouse Lung Mesenchymal Stem Cells at JoVE.com

AHA GIA0855953G, NIH 1R01 HL091105 - 01 :이 작품은 SMM에 부여하여 자금을했습니다. 추가 지원에 의해 제공되었다 : DW : NIH RO1DK075013, DDK 및 Kleberg 재단, UCCC 유동세포계측법 코어 (NIH 5 P30 CA 46934-15), UCCC Microarray 코어 (NCI P30 CA 46934-14).

1. 폐 격리 <ol><li> 멸균 기술을 사용 과다 다음 isoflurane의 과다와 생쥐 성인 쥐 (C57Bl6J,, 18-20그램 시대에 80~10주) 희생. 프로필 변종 사이에 약간 달라집니다. </li><li> 수술, 횡경막을 제거하려면 마우스의 양쪽 옆으로 ribcage를 절단하여 흉강을 엽니다. 인산의 3 5mls를 사용하여 부드럽게 오른쪽 심장 심실을 perfusing하여 폐에서 혈액을 플러쉬 식염수 (PBS)는 버퍼. </li><li> (HBSS) 염분 버퍼 행크스 가득 배양 접시에있는 기관 및 대형 기관지과 장소를 제거하는 폐 엽 (叶)을 해부하다. 모든 폐 엽 (叶)의 집게의 다음 컬렉션은 접시의 뚜껑에 조직을 배치하는 데 사용됩니다. 조직은 다음 그들은 부유하고 이동 있도록 많은 그들 촉촉한 아니지만 유지하는 충분한 액체와 일회용 scalpels를 사용하여 작은 조각으로 다진 있습니다. </li><li> 쥐를 중 하나 hindlimb을 해부하다와 플로 설정 얼룩 컨트롤로 사용할 수있는 골수를 분리w cytometry 게이츠. 골수 (BM)로 이전 한 설명을 얼룩. </li></ol> 2. 폐 조직에서 단일 세포 현탁액의 준비 <ol><li> , 무균 HBSS에 녹아있는 미리 예열 0.2 % 워딩턴 2 형 collagenase (CAT # LS004202 워싱턴의 Biochemicals, 레이크 우드, 뉴저지)의 5mls 각 폐는 0.2g의 부피 비율에 최적화된 조직 무게를 사용하여 소화됩니다. 혼합물은 30 분 2,3에 대해 37 ° C의 물을 욕조에 포장되어 있습니다. </li><li> 폐 조직 소화가 10ml 피펫 (약 10 반복)를 통해 쉽게 흐르는 때까지 샘플을 씹다. 37 추가 15 분 품어 ° C는 조직이보다 균일한 단일 세포 현탁액을 소화하고 보장 완료. </li><li> HBSS와 폐암 세포 현탁액을 희석하고 잔여 조직 조각을 해산하기 위해 5ml 피펫과 씹다. </li><li> 소화되지 않은 조직 파편을 제거하는 70μM 셀 스트레이너를 사용하여 현탁액을 필터링합니다. 샘플 multipl로 나눌 수 있습니다이 시점에서 전자 원뿔 튜브 하나의 셀 스트레이너를 오버로드 방지하고 시간을 감소합니다. </li><li> 펠렛 1,500 RPM과 가만히 따르다 뜨는 10 분 세포 현탁액. </li><li> 5 분 RT에서, 부화, Resuspend 세포 펠렛 부드럽게 방 온도 RBC 용해 버퍼를 (CAT # 00-4333-57 eBiosciences, 샌디에고, CA)를 사용하여. 용해 버퍼를 inactivate과 파편과 세포 집계를 제거하는 40μM 셀 스트레이너를 사용하여 세포 현탁액을 필터링하는 HBSS의 동일한 볼륨을 추가합니다. </li><li> 각 샘플의 피펫 10μl는 스테인드하고 폐 및 hemocytometer를 사용하여 BM 샘플 모두에 대한 셀 번호를 계산합니다. 참고 : 세포의 전체 볼륨을 기록합니다. </li><li> 펠렛 10 분 1,500 rpm으로 원심 분리하여 폐 세포의 단일 세포 현탁액. </li><li> 포함하는 고양이 # 11965-092) 2퍼센트 태아 bovi, prewarmed에 1x10 6 셀 / ML (37 ° C) DMEM + (Dulbecco의 수정 이글 배지, 높은 혈당 (Gibco, Carlsbad, CA에서 폐 및 BM 세포 모두 ResuspendNE 혈청 (FBS)와 10mM HEPES. </li><li> Hoechst 33342 염색 (시그마 화학 회사, 세인트 루이스, MO, 고양이 # B2261)의 1mg/ml 재고 솔루션을 준비 물과 1,4을 소독 필터링합니다. Hoechst의 염료는 -80 ° C.에 aliquots으로 저장될 수 있습니다 </li><li> 단일 세포 현탁액에 5μg/ml의 최종 농도 (1mg/ml 주식의 200x 희석)에 Hoescht 33,342 염료를 추가합니다. </li><li> 37 정확히 90 분 ° C의 물을 욕조에 부드럽게 역전과 부화하여 세포를 섞는다. </li></ol> 3. 얼룩 및 유동세포계측법 분석을위한 폐 세포 현탁액의 준비 <ol><li> 90 분 후 Hoechst 스테인드 폐 세포의 모든 단계 ° C 또는 염료 유출을 방지하기 위해 얼음에 4 실행해야합니다. 4 10 분 1,500 rpm으로 원심 분리하여 펠렛은 세포 ° C와 얼음처럼 차가운 얼룩 버퍼 (PBS 2퍼센트 FBS)에 세포를 resuspend. </li><li> PBS 2 %를 포함하는 300 - 600μl를 사용하여 더 이상 7 1x10 이상의 세포 / 튜브의 농도에서 세포 ResuspendFBS 및 10mM HEPES를. </li><li> 폐 및 BM 샘플에 고양이 # 559864) 10-15 분 얼음 품어 동안 흠없는 컨트롤 포함,.. 적절하게 CD45 항체를 (일반적으로 CD45 - APC의 1:200 희석 (BD Pharmingen, 샌디에고, CA tittered 추가 실험 절차는 분석 성문을 설정하는 데 유용합니다. </li><li> 4 펠렛 세포 ° C 1500 rpm으로 5 분. 냉장 얼룩 버퍼 (PBS 2퍼센트 FBS) 500 μl에 뜨는 및 resuspend 세포를 가만히 따르다. (; 고양이 # 14-956 - 1D Fisherbrand, Schaumburg, IL) prechilled 스냅 캡 폴리 프로필렌 튜브로 전송. </li><li> 죽은 세포를 제외 2μg/ml의 최종 농도에 대한 샘플에 (PI, PBS에 200μg/ml 주식) propidium 요오드화물의를 추가합니다. PI는 흐름 cytometric 분석시 올바른 형광 프로필을 달성하기 위해 Hoechst 33342 염색와 함께 사용해야합니다. </li><li> 얼음에 저장 튜브는 유동세포계측법 분석까지 빛으로부터 보호. </li></ol> 4. 유동세포계측법 분석 정의 및 분리하는사이드 인구 (SP)를 감지하는 Hoechst 염료 유출을 사용하여 폐 Mesenchymal의 줄기 세포 (MSC 폐) 인구 <ol><li> 이 분석은 다음과 악기 요구 사항이 있습니다 : </li><ul><li> 488 NM 및 UV (350-355 nm의) 레이저 </li><li> 파란 (65분의 450)과 빨간색 (50분의 675) 필터와 UV 레이저 경로 2 경보기. </li><li> UV 붉은 감지기가 빨간 신호에 대한 높은 감도를 가지고 있어야합니다. 이것은 오래된 세포 sorters 문제있을 수 있습니다. </li><li> 50-10에서 샘플을 유지하기 위해 냉각기 장치 ° C. </li></ul><li> 레이저를 정렬하고 제조 업체의 프로토콜 다음과 같은 세포 분류에 설정합니다. </li><li> 빨간색 (X 축)과 파란색 (Y 축) 선형 스케일을 사용하여 Hoechst 신호를 수집합니다. </li><li> 후행 측면 인구의 적절한 표시할 수 있도록 줄거리 중심의 오른쪽 상단의 G0/G1 피크를 배치하는 photomultiplier 튜브 전압을 조정합니다. 세포주기의 S - 위상 및 전체 G2의 부분은 줄거리의 오른쪽 상단에있는 오프 스케일 수 있습니다. 파란색 시그마붉은 신호가 희미 동안 nal은 비교적 밝은 있습니다. 일반 MoFlo XDP (베크 만 보습 바로 앞에 달린 풀베는 날, 마이애미, 플로리다) 전압은 파란색 425과 빨간색 6백50아르. </li><li> 죽은 세포는 PI를 사용하여 밖으로 문이 있습니다. 표준 PI 경로 (여기 488nm, 방출 630nm)을 사용할 수 있습니다. 또한, PI는 또한 UV 레이저에 의해 흥분하고 죽은 세포 인구 측면 인구의 오른쪽 (SP) 줄거리에 대한 규모를 놓여있다. 이것은 FITC와 PE 등 다른 fluorochromes에서 PI 신호를 보상하기 위해 필요 완화. 원래 Goodell 방법는 5-7 후자 절차를 따랐다. </li><li> 분석 기간 동안 상대적으로 낮은 압력 차등을 유지하고 측면 인구의 꽉 해상도를 보장하기 위해 정렬. </li><li> SP 떨어져 폐 세포의 주요 인구의 측면 팔로 나타납니다. 이 인구는 Hoechst 낮은 칭했다입니다. </li><li> Hoechst 낮은 / SP는 히스토그램 2,3 (F를 사용하여 CD45 긍정적이고 부정적인 인구를 분리하는 분석이다igure 1). </li><li> Hoechst 낮은 CD45 neg 폐 MSC 인구의 선택과 게이팅 다음 전지는 96 - 웰 플레이트 3에 클론을 분리 튜브 또는 하나의 세포로하거나 혼합 인구로 분류하여 수집될 수 있습니다. </li><li> 정렬 스트림 편향을 정렬 플레이트는 일반적으로 튜브 정렬에 사용되는보다 수직 정렬 스트림을 만드는 데 2​​5 % 조정에있다. </li><li> 왼쪽 상단에 테스트 스트림 펄스를 전송하고 다음 96 - 웰 플레이트 잘 오른쪽 아래로 정렬 스트림을 목표로하고 있습니다. </li><li> 각 우물에 세포의 원하는 번호를 입금 분류기 소프트웨어 플레이트지도를 설정합니다. </li><li> 단세포 클론을 분리하려면 단일 폐 MSC는 문화 매체의 150μl (α - 가상 20% FBS와 보충)에 96 - 웰 플레이트에 잘으로 정렬됩니다. 정렬 다음 미디어의 추가 100μl이 추가됩니다. </li></ol> 5. 폐 MSC와 클론의 분리, 문화 및 특성 <ol><li> Cultur정렬 아래의 E와 혼합 폐 MSC 인구 및 단일 세포 클론의 확장 표준 문화 조건을 사용하여 동일 (37 ° C 5 % CO 2와&gt; 95 % 습도). 세포는 16 시간 동안 다음과 같은 고립을 준수하기 위해 사용할 수 있습니다. 미디어는 (α - 가상 20% FBS와 보충) 매 48 시간 대체됩니다. 세포가 더 빨리 세포 분열 따위에 의해 번식하기 시작하고 그들이 passaged 아르 75-80%의 합류 (그림 2) 사이에 도달했을 때. </li><li> 세포 prewarmed HBSS로 씻어서 0.5 % 트립신 / EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) (Cellgro, 매나 사스, VA, 고양이 # 25-053 - CL)과 incubated 아르 37 ° 2 분 미만에 대한 C. 세포는 세포 현탁액의 모양을 확인하는 거꾸로 범위를 사용하여 모니터링할 수 있습니다. </li><li> 폐 MSC는 다음 문화의 현재 확산 속도에 따라 1시 2분 또는 1시 3분의 비율로 나누어집니다. </li><li> 전통적인 mesenchymal adipocyte와 chondrocyte osteoblast의 lineages 및 접수 mesenchymal 마커 그들의 세포 표면 표현으로 차별 폐 MSC의 기능 I의 각 세포 준비 평가. Cytogenetic banding 분석은 또한 총 염색체 이상 2,3,8-11의 부재를 확인하기 위해 수행됩니다. </li></ol> 6. 콜로니 형성 분석을 사용하여 폐 MSC의 열거 (CFU - F) <ol><li> 1x10 6 셀 / ML의 최종 농도를 완료 MesenCult 매체 (줄기 세포 기술, 밴쿠버, BC)에 세포를 희석. </li><li> 6x10 4 셀, 3x10 4 셀, 미디어 10ml에 1.5 X10 4 셀 및 0.75 X10 4 셀 100mm 접시에 최종 농도를 달성하기위한 일련 dilutions를 수행합니다. 분석은 각 세포 농도에 대한 중복 또는 세중의에 수행하고 작은 표면 영역에 대한 크기를 조정있을 수 있습니다. </li><li> 표준 조건 하에서 10 일간 문화 세포. 일 10 세포는 PBS로 씻어서 실온에서 5 분 100 % 메탄올을 사용하여 고정하고 있습니다. </li><li> 0.4 % W / V Giemsa 염색법의 솔루션 얼룩하여 CFU - F의 식민지를 감지(시그마 화학 주식, 세인트 루이스, 미주리)은 탈이온수와 1시 20분을 희석. 공기 건조에 샘플을 허용하고 식민지 회 이상 25 세포 (그림 3)이있는 콜로니의 수를 계량. </li></ol> 7. T - 세포 증식 및 Apoptosis에 폐 MSC의 Immunomodulatory 속성 분석 <ol><li> 물론 당 6.25x10 4 폐 MSC 세포는 96 - 웰 플레이트에 도금 및 야간 2 서 사용할 수 있습니다. </li><li> CD4 + ovalbumin 323-339 펩타이드를 인식 T 세포와 T 세포 수용체 (TCR) 유전자 변형 마우스, OT - II의 spleens의 세포는 +, CD19 +, MHC - II + 및 CD25 + 세포와 CD8을 파괴하여 정화 아르 Miltenyi AutoMACS 세포 분류기 (Miltenyi, 어번, CA). 항원 제시 세포 (APC)가 긍정적으로 MHC - II + 세포에게 12 정렬하여 절연하고 있습니다. </li><li> APC는 4 % paraformaldehyde에 고정 PBS / 5% BSA/2mM EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) 3 번 씻어 및 0.5μg/ml 또는 5μg / M와 함께로드됩니다리터 OVA323의 펩타이드. </li><li> APC를 체포 가상, 성장 96 - 웰 플레이트에있는 폐 MSC에 추가됩니다. </li><li> 이상 순도 95 프로지 CD4 + 1x10 5 세포 5μM Carboxyfluorescein succinimidyl 에스테르 (CFSE, 시그마, 세인트 루이스, 미주리 주)로 표시 아르 PBS와 어둠 속에 5 분 incubated, PBS - 5 % BSA로 씻은 다음에 추가 DMEM 5% FBS 미디어에 APC와 폐 MSC 세포. 전지는 다음 96시간에 대한 incubated 수 있습니다. </li><li> CD4 (APC - Cy7), CD8 (ViolBlue), T - 세포는 다음 안티 안티 CD40 (Cy5)에 묻은 게있다 Vbeta 5 (PE)와 Miltenyi MacsQuant 7 채널 흐름 cytometer (Miltenyi, Aurburn, CA)와를 사용하여 assayed FloJo 분석 소프트웨어 (Treestar, 애쉬 랜드, OR). 확산이 배경에 비해 CFSE의 의미 형광 강도의 감소로 측정, T 세포는 CFSE으로 표시하고 (그림 4) APC에 노출되지 않습니다. T - 세포는 trypan 파랑 제외로 평가된이 시간과 생존에 계산됩니다. </li></ol> 8. 대표 결과 : 그림 1. 흐름 cytometric 분석과 폐에 MSC의 정의. 폐 조직 다이제스트의 단세포 정지는 Hoechst 33342 물들일하고의 차이를 감지 유동세포계측법에 의해 분석됩니다. 앞으로 흩어 (FSC)와 측면 산란 (SSC)와 B. Hoechst 파란색과 빨간색 형광. 사이드 인구 (SP)의 존재는 게이트 볼 수 있습니다. Hoechst 낮은 SP는 다음 C를 분리하는 분석이다. 폐 MSC의 CD45 부정적인 인구. 폐 SP의 부정적인 비율로 CD45 양성은 일반적으로 70:30 / 60:40입니다. <img src="/files/ftp_upload/3159/3159fig2.jpg" alt="그림 2"/> 그림 2. 폐에 MSC의 분리 및 문화. 셀 정렬하여 폐 MSC의 수집에 따라 세포는 α - 가상 supplem를 사용하여 30mm 요리를 도금 아르20% FBS와 ented.가. 갓 정렬 세포는 작은 원형 밝은 나타납니다. B는. mesenchymal 표현형로 ​​약 2-3 주 식민지가 분명지고 확산이 더 확실한되면. <img src="/files/ftp_upload/3159/3159fig3.jpg" alt="그림 3"/> 그림 3. 콜로니 형성 - Fibroblast 분석하여 MSC의 열거. 확대 폐 MSC는 A. 10 일 후에. CFU - F 분석에 대해 설명한 절차에 따라 도금 및 Giemsa 얼룩 식민지가 분명 있습니다. B. 식민지가 큰 및 구성 몇백 세포. C. 세포가 mesenchymal 표현형를 표시합니다. A &amp; B, 스케일 바 = 0.5 cm, C의 스케일 바 = 0.14 cm. <img src="/files/ftp_upload/3159/3159fig4.jpg" alt="그림 4"/> 그림 4. CFSE 기반의 T 세포 증식 분석. 폐암의 MSC와 antige의 존재의 부재에N 발표 세포 (APC)는 + / - ovalbumin (OVA) CD40 양성 이펙터 T 세포는 (붉은 동그라미) 확산을 나타냅니다 CFSE 강도의 감소를 보여줍니다. T - 세포 막의 형광 강도 CFSE 모든 세포 분열의 예와 stoichiometrically 감소하게된다. 모든 부서를. 폐 MSC, APC의 면전에서 + / - OVA, CD40 양성 이펙터 T 세포는 (붉은 동그라미) 확산의 부족을 나타냅니다 CFSE 강도에 큰 변화를 입증하지 않습니다.

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관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

우리는 처음 주민 폐 MSC의 특정 인구를 분리 BM 조혈 세포를 식별하는 데 사용하는 방법을 적응했습니다. 고립의 재현성로 인해 이러한 세포도 잘 MSC로 특성화했다. 그들의 기원은 성인 마우스 폐에 거주합니다 (파생 BM 반대) 및 2 문서화 phenotypic와 분자 프로파일로 정의되었습니다. 반복이 특징 인구를 분리하는 능력은 조직의 항상성 및 질병 동안 생물 학적 중요성과 폐 MSC의 역할의 진학이 가능합니다. murine과 인간 모두 폐 조직의 생체내이 인구의 최근 정의는 부상과 질병 중 폐 복구를 촉진하는 내생 세포의 구조에 감독 치료 전략의 개발을 용이하게합니다.

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 댓글 (옵션) </th></tr><tr><td> 인산염은 식염수 (PBS)를 버퍼 </td><td> 시그마 </td><td> P - 5368 </td><td></td></tr><tr><td> 행크스 소금 솔루션을 버퍼 (HBSS) </td><td> 써모 과학 </td><td> SH30588.01 </td><td></td
></tr><tr><td> 0.2 % 워싱턴 제 2 형 collagenase </td><td> 워싱턴의 Biochemicals </td><td> LS004202 </td><td></td
></tr><tr><td> 붉은 혈액 세포 용해 완충액 </td><td> eBiosciences </td><td> 00-4333-57 </td><td></td
></tr><tr><td> DMEM </td><td> Invitrogen Gibco </td><td> 11965-092 </td><td></td
></tr><tr><td> Hoechst 33342 염색 </td><td> 시그마 </td><td> B2261 </td><td></td
></tr><tr><td> CD45 - APC </td><td> BD Pharmingen </td><td> 559,864 </td><td></td
></tr><tr><td> Propidium 요오드화물의 </td><td> 시그마 </td><td> 81,845 </td><td></td
></tr><tr><td> - 가상 </td><td> 써모 과학 </td><td> SH30265.01 </td><td>; </td
></tr><tr><td> FBS </td><td> Invitrogen </td><td> 16000-069 </td><td></td
></tr><tr><td> 0.5 % 트립신 / EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) </td><td> Cellgro </td><td> 25-053 - CL </td><td></td
></tr><tr><td> 완벽한 MesenCult 매체 </td><td> 세포 기술을 줄기 </td><td> 05,511 </td><td></td
></tr><tr><td> 0.4 % W / V Giemsa 염색법의 솔루션 </td><td> 시그마 </td><td> GS1L </td><td></td
></tr><tr><td> 4 % paraformaldehyde </td><td> 전자 현미경 서비스 </td><td> 15,710 </td><td> 16 % paraformeldehyde는 PBS를 사용하여 4퍼센트로 희석합니다 </td
></tr><tr><td> Carboxyfluorescein succinimidyl 에스테르 (CFSE) </td><td> 시그마 </td><td> 21,888 </td><td></td
></tr></tbody></table>

isolation &#38; characterization of hoechstlow cd45negative mouse lung mesenchymal stem cells

조직 주민 mesenchymal 줄기 세포 (MSC)는 조직 복구 또는 재생, 섬유증, 염증, angiogenesis 및 종양 형성의 중요한 규제하고 있습니다. 이러한 연구는 주민 폐 MSC 이러한 폐 섬유증 (PF) 및 동맥 고혈압 (PAH)와 같은 질병 중 폐 조직 항상성, 부상 및 수리하는 동안 역할을하는 것이 좋습니다 함께 찍은. 여기 주민 폐 MSC의 인구를 정​​의하는 기술을 설명합니다. 이 마커 세트 정의를 사용하여 생체내 폐 조직이 인구의 정의는 유동세포계측법 및 특정 세포 종류와 기능의 연구에 의해 잘 특징 줄기 세포 인구의 반복 고립을 용이하게합니다.

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Isolation & Characterization of Hoechstlow CD45negative Mouse Lung Mesenchymal Stem Cells

이 문서에서 우리는 murine 주민 폐 mesenchymal 줄기 세포 (MSC 폐), 그들의 확장, 특성화 및 immunomodulatory 속성의 분석의 절연을 보여줍니다.

Hoechst의 분리 및 특성 낮은 CD45 부정적인 마우스 폐 Mesenchymal 줄기 세포

Tissue resident mesenchymal stem cells (MSC) are important regulators of tissue repair or regeneration, fibrosis, inflammation, angiogenesis and tumor ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation &#38; Characterization of Hoechstlow CD45negative Mouse Lung Mesenchymal Stem Cells

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells (ECFCs)

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells MSCs and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells ECFCs

인간 탯줄의 분리 및 동물 혈청 무료 확장 Mesenchymal Stromal 세포 (MSCS)와 내피 콜로니 형성 전구 세포 (ECFCs)을 유래

The umbilical cord is a rich source for progenitor cells with high proliferative potential including mesenchymal stromal cells (also termed mesenchymal ...

연구

생물학

Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells

절연 및 마우스 배아 새싹 세포의 유도

The ability of embryonic germinal cells (EG) to differentiate into primordial germinal cells (PGCs) and later into gametes during early developmental ...

Isolation of Retinal Stem Cells from the Mouse Eye

마우스 아이의 망막 줄기 세포의 분리

The adult mouse retinal stem cell (RSC) is a rare quiescent cell found within the ciliary epithelium (CE) of the mammalian eye1,2,3. The CE is made up of ...

Isolation of Mouse Salivary Gland Stem Cells

마우스 침샘에 줄기 세포의 분리

Mature salivary glands of both human and mouse origin comprise a minimum of five cell types, each of which facilitates the production and excretion of ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

유도 만능의 줄기 세포에서 파생 마우스의 생성

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Induction and Analysis of Epithelial to Mesenchymal Transition

간엽 전환을 유도하고 상피의 분석

Epithelial  to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during  development. Misregulation of this  process has been implicated ...

Isolation and Culture of Dental Epithelial Stem Cells from the Adult Mouse Incisor

성인 마우스 앞니의 치아 상피 줄기 세포의 분리 및 문화

Understanding the cellular and molecular mechanisms that underlie tooth regeneration and renewal has become a topic of great interest1-4, and the mouse ...

Isolation of CD146+ Resident Lung Mesenchymal Stromal Cells from Rat Lungs

Isolation of CD146+ Resident Lung Mesenchymal Stromal Cells from Rat Lungs

CD146의 분리<sup&gt; +</sup쥐 폐에서&gt; 주민 폐 중간 엽 기질 세포

Mesenchymal stromal cells (MSCs) are increasingly recognized for their therapeutic potential in a wide range of diseases, including lung diseases. Besides ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

트랜스-내부 세포 배아 줄기 세포의 대량 주입 리드 더 높은 Chimerism 요금

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...

Isolation, Characterization, And High Throughput Extracellular Flux Analysis of Mouse Primary Renal Tubular Epithelial Cells

마우스 기본 신장 관 상피 세포의 고립, 특성, 및 높은 처리량 세포 외 유출 분석

Mitochondrial dysfunction in the renal tubular epithelial cells (TECs) can lead to renal fibrosis, a major cause of&#160;chronic kidney disease (CKD). ...