Name: isolation &#38; characterization of hoechstlow cd45negative mouse lung mesenchymal stem cells
Uploaded: 2011-10-26T13:00:00
Duration: 16 min 55 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation & Characterization of Hoechstlow CD45negative Mouse Lung Mesenchymal Stem Cells at JoVE.com

Эта работа финансировалась за счет грантов для SMM: AHA GIA0855953G, NIH 1R01 HL091105-01. Дополнительную поддержку оказали: DW: NIH RO1DK075013, DDK и Kleberg Фонда; UCCC Основные проточной цитометрии (NIH 5 P30 CA 46934-15), UCCC Microarray основных (NCI P30 CA 46934-14).

<ol>
	<li>Goodell, M., Brose, K., Paradis, G., Conner, A. S., Mulligan, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+functional+properties+of+murine+hematopoietic+stem+cells+that+are+replicating+in+vivo.">Isolation and functional properties of murine hematopoietic stem cells that are replicating in vivo.</a> J. Exp. Med. 183, 1797-1806 (1996).</li><li>Jun, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Pathology+of+Bleomycin+Induced+Fibrosis+is+Associated+with+Loss+of+Resident+Lung+Mesenchymal+Stem+Cells+Which+Regulate+Effector+T-Cell+Proliferation.">The Pathology of Bleomycin Induced Fibrosis is Associated with Loss of Resident Lung Mesenchymal Stem Cells Which Regulate Effector T-Cell Proliferation.</a> STEM CELLS. , (2011).</li><li>Martin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+lung+side+population+cells+have+mesenchymal+stem+cell+potential.">Adult lung side population cells have mesenchymal stem cell potential.</a> Cytotherapy. 10, 140-151 (2008).</li><li>Majka, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+progenitor+populations+in+skeletal+muscle+are+bone+marrow+derived+and+exhibit+different+cell+fates+during+vascular+regeneration.">Distinct progenitor populations in skeletal muscle are bone marrow derived and exhibit different cell fates during vascular regeneration.</a> The Journal of Clinical Investigation. 111, 71-79 (2003).</li><li>Goodell, M. A., McKinney-Freeman, S., Camargo, F. D., Helgason, D. C., Miller, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+in+Molecular+Biology.">Methods in Molecular Biology.</a> Basic Cell Culture Protocols. 290, 343-352 (2005).</li><li>Tadjali, M., Zhou, S., Rehg, J., Sorrentino, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prospective+Isolation+of+Murine+Hematopoietic+Stem+Cells+by+Expression+of+an.">Prospective Isolation of Murine Hematopoietic Stem Cells by Expression of an.</a> Abcg2/GFP Allele. Stem Cells. 24, 1556-1563 (2006).</li><li>Zhou, S., Schuetz, J. D., Bunting, K. D., Colapietro, A. -. M., Sampath, J., Morris, J. J., Lagutina, I., Grosveld, G. C., Osawa, M., Nakauchi, H., Sorrentino, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ABC+transporter+Bcrp1/ABCG2+is+expressed+in+a+wide+variety+of+stem+cells+and+is+a+molecular+determinant+of+the+side-population+phenotype.">The ABC transporter Bcrp1/ABCG2 is expressed in a wide variety of stem cells and is a molecular determinant of the side-population phenotype.</a> Nature Medicine. 7, 1028-1034 (2001).</li><li>Chateauvieux, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+profile+of+mouse+stromal+mesenchymal+stem+cells.">Molecular profile of mouse stromal mesenchymal stem cells.</a> Physiological Genomics. 29, 128-138 (2007).</li><li>Gregory, C. A., Prockop, D. J., Spees, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-hematopoietic+bone+marrow+stem+cells:+Molecular+control+of+expansion+and+differentiation.">Non-hematopoietic bone marrow stem cells: Molecular control of expansion and differentiation.</a> Experimental Cell Research. 306, 330-335 (2005).</li><li>Menicanin, D., Bartold, P., Zannettino, A., Gronthos, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+Profiling+of+Mesenchymal+Stem+Cells.">Genomic Profiling of Mesenchymal Stem Cells.</a> Stem Cell Reviews and Reports. 5, 36-50 (2009).</li><li>Summer, R., Fitzsimmons, K., Dwyer, D., Murphy, J., Fine, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+an+Adult+Mouse+Lung+Mesenchymal+Progenitor+Cell+Population.">Isolation of an Adult Mouse Lung Mesenchymal Progenitor Cell Population.</a> Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 37, 152-159 (2007).</li><li>Waid, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+unique+T+cell+subset+described+as+CD4loCD40++T+cells+(TCD40)+in+human+type+1+diabetes.">A unique T cell subset described as CD4loCD40+ T cells (TCD40) in human type 1 diabetes.</a> Clinical Immunology. 124, 138-148 (2007).</li></ol>

Нет конфликта интересов объявлены.

Мы адаптировали метод первоначально использовался для выявления Б. М. гемопоэтических клеток, чтобы изолировать специфической популяции резидентов MSC легких. Из-за воспроизводимость изоляции этих клеток были тогда хорошо охарактеризованы как MSC. Их происхождение было определено в качестве резидента в легких взрослой мыши (в отличие от Б. М. производные) и фенотипические и молекулярного профиля документально 2. Способность неоднократно изолировать эту характеризуется населения позволяет дальнейшее изучение биологических значение и роль легких MSC в гомеостаз ткани и болезней. Последнее определение этой категории населения в естественных условиях и в мышиной и человеческой легочной ткани способствует развитию терапевтической стратегии, направленной на спасение эндогенные клетки для облегчения легкого ремонта в течение травмы и болезни.

<table border="1"><tbody><tr><th> Название реагента </th><th> Компания </th><th> Номер по каталогу </th><th> Комментарии (необязательно) </th></tr><tr><td> Фосфатным буферным раствором (PBS) </td><td> Сигма </td><td> P-5368 </td><td></td></tr><tr><td> Хэнкс буфер солевом растворе (HBSS) </td><td> Thermo Scientific </td><td> SH30588.01 </td><td></td
></tr><tr><td> 0,2% Уортингтон 2 типа коллагеназы </td><td> Уортингтон Biochemicals </td><td> LS004202 </td><td></td
></tr><tr><td> Красные клетки крови лизирующего буфера </td><td> eBiosciences </td><td> 00-4333-57 </td><td></td
></tr><tr><td> DMEM </td><td> Invitrogen Gibco </td><td> 11965-092 </td><td></td
></tr><tr><td> Hoechst 33342 красителя </td><td> Сигма </td><td> B2261 </td><td></td
></tr><tr><td> CD45-APC </td><td> BD Pharmingen </td><td> 559864 </td><td></td
></tr><tr><td> Пропидий йодида </td><td> Сигма </td><td> 81845 </td><td></td
></tr><tr><td> -MEM </td><td> Thermo Scientific </td><td> SH30265.01 </td><td>; </td
></tr><tr><td> FBS </td><td> Invitrogen </td><td> 16000-069 </td><td></td
></tr><tr><td> 0,5% трипсина / ЭДТА </td><td> Cellgro </td><td> 25-053-Cl </td><td></td
></tr><tr><td> Полный средний MesenCult </td><td> Stem Cell Технологии </td><td> 05511 </td><td></td
></tr><tr><td> 0,4% вес / объем Гимза красящим раствором </td><td> Сигма </td><td> GS1L </td><td></td
></tr><tr><td> 4% параформальдегида </td><td> Услуги электронной микроскопии </td><td> 15710 </td><td> 16% paraformeldehyde разбавляют до 4% с помощью PBS </td
></tr><tr><td> Карбоксифлуоресцеина сукцинимидил эфира (CFSE) </td><td> Сигма </td><td> 21888 </td><td></td
></tr></tbody></table>

isolation &#38; characterization of hoechstlow cd45negative mouse lung mesenchymal stem cells

Ткань резидент мезенхимальные стволовые клетки (МСК) являются важными регуляторами восстановления тканей или регенерация, фиброз, воспаление, ангиогенез и образование опухолей. Взятые вместе, эти исследования показывают, что резидент MSC легких играть роль в легочной ткани гомеостаза, травм и ремонта в течение таких заболеваний, как легочный фиброз (ПФ) и артериальная гипертензия (ЛАГ). Здесь мы опишем технологию для определения населения резидентов MSC легких. Определение этой категории населения в естественных условиях легочной ткани с помощью определить набор маркеров облегчает повторное изоляции хорошо известных населению стволовых клеток путем проточной цитометрии и изучение определенного типа клеток и функции.

Watch this Scientific Journal Video about Isolation & Characterization of Hoechstlow CD45negative Mouse Lung Mesenchymal Stem Cells at JoVE.com

Isolation & Characterization of Hoechstlow CD45negative Mouse Lung Mesenchymal Stem Cells

В этой статье мы покажем изоляции мышиного резидент легких мезенхимальные стволовые клетки (легких MSC), их расширение, характеристика и анализ иммуномодулирующими свойствами.

Изоляция и характеристика Hoechst Низкий CD45 Отрицательный Мышь легких мезенхимальных стволовых клеток

Tissue resident mesenchymal stem cells (MSC) are important regulators of tissue repair or regeneration, fibrosis, inflammation, angiogenesis and tumor ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation &#38; Characterization of Hoechstlow CD45negative Mouse Lung Mesenchymal Stem Cells

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells (ECFCs)

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells MSCs and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells ECFCs

Выделение и животных Сыворотка свободного расширения прав пуповины производных мезенхимальных стромальных клеток (МСК) и эндотелиальных колонии Формирование клеток-предшественников (ECFCs)

The umbilical cord is a rich source for progenitor cells with high proliferative potential including mesenchymal stromal cells (also termed mesenchymal ...

Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells

Выделение и Вывод мышиных эмбриональных зародышевых клеток

The ability of embryonic germinal cells (EG) to differentiate into primordial germinal cells (PGCs) and later into gametes during early developmental ...

Isolation of Retinal Stem Cells from the Mouse Eye

Выделение стволовых клеток сетчатки от мыши глаз

The adult mouse retinal stem cell (RSC) is a rare quiescent cell found within the ciliary epithelium (CE) of the mammalian eye1,2,3. The CE is made up of ...

Isolation of Mouse Salivary Gland Stem Cells

Выделение мышью слюнных желез стволовых клеток

Mature salivary glands of both human and mouse origin comprise a minimum of five cell types, each of which facilitates the production and excretion of ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

Генерация Мыши, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Induction and Analysis of Epithelial to Mesenchymal Transition

Индукционные и анализ эпителиальных к мезенхимальных перехода

Epithelial  to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during  development. Misregulation of this  process has been implicated ...

Isolation and Culture of Dental Epithelial Stem Cells from the Adult Mouse Incisor

Выделение и Культура Стоматологическая эпителиальных стволовых клеток из взрослых мышей резца

Understanding the cellular and molecular mechanisms that underlie tooth regeneration and renewal has become a topic of great interest1-4, and the mouse ...

Isolation of CD146+ Resident Lung Mesenchymal Stromal Cells from Rat Lungs

Isolation of CD146+ Resident Lung Mesenchymal Stromal Cells from Rat Lungs

Выделение CD146<sup&gt; +</sup&gt; Resident легких мезенхимальных стромальных клеток крысы легких

Mesenchymal stromal cells (MSCs) are increasingly recognized for their therapeutic potential in a wide range of diseases, including lung diseases. Besides ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

Транс внутренняя ячейка массы впрыска эмбриональных стволовых клеток приводит к более высоким ставкам химеризма

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...

Isolation, Characterization, And High Throughput Extracellular Flux Analysis of Mouse Primary Renal Tubular Epithelial Cells

Изоляция, характеристики и высокую пропускную способность внеклеточного Flux анализ мышь первичной почечной трубчатых эпителиальных клеток

Mitochondrial dysfunction in the renal tubular epithelial cells (TECs) can lead to renal fibrosis, a major cause of&#160;chronic kidney disease (CKD). ...