Name: heart dissection in larval, juvenile and adult zebrafish, danio rerio
Uploaded: 2011-09-30T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio at JoVE.com

Marie Birne, Areti Tsiola, Jaymie Estevez ve Arelys Uribe teşekkür ederiz. Bu çalışma CUNY Araştırma Vakfı ve Howard Hughes Tıp Enstitüsü Hibe Lisans Öğrencileri için Yaz Programı (SPUR) ve NIH RO3&#39;ü 41702-00-01 kısmen desteklenmiştir. Araştırma ayrıca, Queens College ve bazı deneyler Görüntüleme, Queens College&#39;da Hücresel ve Moleküler Biyoloji Core Tesisi ekipman yapıldı tarafından desteklenmiştir.

Zebra balığı 28 Queens College Hayvan Tesis 13 standart protokoller ° C ile yetiştirildik Bireysel balık çift veya grup çiftleşmelerin preformed ve Oluşan embriyolar temizlenmeli ve 28 ° C inkübatör saklanan olmalıdır. Balık sağlık günlük muayene edilmelidir. 5 gün sonrası fertilizasyon (dpf), 10-15 balık yoğunlukta balık tanklarının içine ayrılmış olmalıdır ve balık tesisi kreş girdi. 15, 30, 45, 60, 90, 180 dpf&#39;e: Burada sunulan protokolü için zebrafish ergin aşamal...

<ol>
	<li>Ahmad, N., Long, S., Rebagliati, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+southpaw+joins+the+roster:+the+role+of+the+zebrafish+nodal-related+gene+southpaw+in+cardiac+LR+asymmetry.">A southpaw joins the roster: the role of the zebrafish nodal-related gene southpaw in cardiac LR asymmetry.</a> Trends Cardiovasc Med. 14, 43-49 (2004).</li><li>Armstrong, E. J., Bischoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+valve+development:+endothelial+cell+signaling+and+differentiation.">Heart valve development: endothelial cell signaling and differentiation.</a> Circ Res. 95, 459-470 (2004).</li><li>Bakkers, J., Verhoeven, M. C., Abdelilah-Seyfried, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shaping+the+zebrafish+heart:+from+left-right+axis+specification+to+epithelial+tissue+morphogenesis.">Shaping the zebrafish heart: from left-right axis specification to epithelial tissue morphogenesis.</a> Dev Biol. 330, 213-220 (2009).</li><li>Glickman, N. S., Yelon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+development+in+zebrafish:+coordination+of+form+and+function.">Cardiac development in zebrafish: coordination of form and function.</a> Semin Cell Dev Biol. 13, 507-513 (2002).</li><li>Heicklen-Klein, A., McReynolds, L. J., Evans, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+the+zebrafish+model+to+study+GATA+transcription+factors.">Using the zebrafish model to study GATA transcription factors.</a> Semin Cell Dev Biol. 16, 95-106 (2005).</li><li>Schoenebeck, J. J., Yelon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Illuminating+cardiac+development:+Advances+in+imaging+add+new+dimensions+to+the+utility+of+zebrafish+genetics.">Illuminating cardiac development: Advances in imaging add new dimensions to the utility of zebrafish genetics.</a> Semin Cell Dev Biol. 18, 27-35 (2007).</li><li>Beis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+and+cellular+analyses+of+zebrafish+atrioventricular+cushion+and+valve+development.">Genetic and cellular analyses of zebrafish atrioventricular cushion and valve development.</a> Development. 132, 4193-4204 (2005).</li><li>Lepilina, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dynamic+epicardial+injury+response+supports+progenitor+cell+activity+during+zebrafish+heart+regeneration.">A dynamic epicardial injury response supports progenitor cell activity during zebrafish heart regeneration.</a> Cell. 127, 607-619 (2006).</li><li>Wills, A. A., Holdway, J. E., Major, R. J., Poss, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulated+addition+of+new+myocardial+and+epicardial+cells+fosters+homeostatic+cardiac+growth+and+maintenance+in+adult+zebrafish.">Regulated addition of new myocardial and epicardial cells fosters homeostatic cardiac growth and maintenance in adult zebrafish.</a> Development. 135, 183-192 (2008).</li><li>Parichy, D. M., Elizondo, M. R., Mills, M. G., Gordon, T. N., Engeszer, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+table+of+postembryonic+zebrafish+development:+staging+by+externally+visible+anatomy+of+the+living+fish.">Normal table of postembryonic zebrafish development: staging by externally visible anatomy of the living fish.</a> Dev Dyn. 238, 2975-3015 (2009).</li><li>Huang, C. J., Tu, C. T., Hsiao, C. D., Hsieh, F. J., Tsai, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Germ-line+transmission+of+a+myocardium-specific+GFP+transgene+reveals+critical+regulatory+elements+in+the+cardiac+myosin+light+chain+2+promoter+of+zebrafish.">Germ-line transmission of a myocardium-specific GFP transgene reveals critical regulatory elements in the cardiac myosin light chain 2 promoter of zebrafish.</a> Dev Dyn. 228, 30-40 (2003).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Zebrafish+Book,+A+guide+for+the+laboratory+use+of+zebrafish+(Danio+rerio).">The Zebrafish Book, A guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio).</a> , (1995).</li></ol>

Post-embriyonik balık zebrafish kalp diseksiyonu için bu yöntemleri hasarsız bir kalp tümüyle kaldırılmasını sağlar. Bu teknikte basittir ve dış kesimler için kalbin zarar görmesini önlemek kılavuzları sağlarken, sürekli bir yandan küçük balıklar için önemlidir. Diseksiyonu sırasında bir önemli adım kalp bu kese içinde doğrudan gümüş perikard belirlemektir. Perikard görselleştirme vücut boşluğunda bulma ve sonuçta kalp formunu kaldırarak önemli bir ...

<table border="1"><tbody><tr><th> Malzeme </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th><th> Yorumlar (isteğe bağlı) </th></tr><tr><td> Paraformaldehit </td><td> EMD </td><td> PX0055 </td><td> PBS içinde .04g/mL </td></tr><tr><td> Forseps # 55 </td><td> FST </td><td> 11295-51 </td><td></td></tr><tr><td> Mikro-makas </td><td> FST </td><td> 15005-08 </td><td></td></tr><tr><td> Pin tutucu </td><td> FST </td><td> 26016-12 </td><td></td></tr><tr><td> Mikro-needles </td><td> FST </td><td> 10130-10 </td><td></td></tr><tr><td> Nutrient Agar </td><td> BBL </td><td> 11472 </td><td> Distile H 2 O 23g / L </td></tr><tr><td> Petri kutularına </td><td> BD Falcon </td><td> 351029 </td><td></td></tr><tr><td> PCR 8-tüp şeritler </td><td> ABD Bilimsel </td><td> 1402-2500 </td><td></td></tr><tr><td> Dijital Kaliper </td><td> Fisher Scientific </td><td> 14-648-17 </td><td></td></tr></tbody></table>

heart dissection in larval, juvenile and adult zebrafish, danio rerio

Zebra balığı çalışma (son değerlendirmeleri görmek 1-6) embriyonik kalp gelişimi için yararlı ve pratik bir model organizma haline gelmiştir, ancak 7-10 sınırlı kalmıştır yetişkin kalp geliştirilmesi yoluyla post-embriyonik inceleyerek işe . Olgunlaşan ve yaşlanma kalp değişen morfoloji incelenmesi, genç ve yetişkin kalpleri evreleme ve izole etmek için uygun teknikler eksikliği ile sınırlıdır. Balığın ömrü boyunca kalp gelişimini analiz etmek için, çeşitli aşamalarda zebrafish kalpleri incelemek ve onları daha fazla analiz için 11 fotoğraf. Kalbin morfolojik özellikleri kolayca sayısal ve bireysel kalpleri daha bir dizi standart yöntemler ile analiz edilebilir. Zebra balığı değişken oranlı büyüme ve olgunlaşma, dolayısıyla balık olgunlaşma bir göstergesi olarak post-fiksasyon, fotoğraf ve ölçü balık uzunluğu, yaş daha balık boyutu ile daha fazla ilişkili. Bu protokol ile 30mm ve VL 1mm SL veya daha büyük, yetişkin 100μm ventrikül uzunluğu (VL) kalplerini larva 3.5mm standart uzunluğu (SL) arasında değişen iki ayrı zebrafish için, boyut bağımlı diseksiyon teknikleri, açıklar. Larva ve ergin balıklar oldukça farklı bir vücut ve organ morfolojisi vardır. Larva sadece daha küçük değil, daha az pigment ve her organ görsel olarak tespit etmek çok zordur. Bu nedenle, biz farklı diseksiyon teknikleri kullanır. Euthanization sonra doğrudan disseke kalpleri kulakçıklar gibi çok gevşek ve balon ile aşağıdaki fiksasyon kaldırıldı kalpleri ile karşılaştırıldığında, daha değişken bir morfoloji olduğunu keşfettiği gibi, pre-diseksiyonu fiksasyon yöntemleri kullanılır. Balık, in vivo morfolojisi ve oda pozisyonlar (veriler gösterilmemiştir) korumak diseksiyon önce sabit . Buna ek olarak, gösteri amaçlı, kalp (miyokard) belirli GFP transgenik Tg (myl7 GFP) yararlanmak için bize tüm kalp görüntülemenizi sağlar ve geliştirme erken aşamalarında özellikle yararlıdır twu34 (12), kalp morfolojisi çevre dokulara daha az belirgindir. Kalp Diseksiyon in situ hibridizasyon, immunohistokimya, RNA ekstraksiyonu veya diğer post-embriyonik zebrafish kolay analitik yöntemler kullanarak kalp gelişme ve olgunlaşma altında yatan hücre ve moleküler biyoloji daha fazla analiz yapar. Bu protokol, kalp gelişim olgunlaşma ve yaşlanma çalışma için değerli bir teknik sağlayacaktır.

Watch this Scientific Journal Video about Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio at JoVE.com

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Birden fazla gelişim evreleri zebrafish kalp diseksiyonu ve izolasyon için açık, standart bir yöntem açıklanmıştır. Annotation ve miktar teknikler de tartışılmaktadır.

Larvaların Kalp Diseksiyon, Çocuk ve Yetişkin Zebra balığı, Danio rerio</em

Zebrafish have become a beneficial and practical model organism for the study of embryonic heart development (see recent reviews1-6), however, work ...

Research

JoVE Journal

Biology

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Dissection of Larval CNS in Drosophila Melanogaster

Drosophila melanogaster Larvaların MSS diseksiyonu

The central nervous system (CNS) of Drosophila larvae is complex and poorly understood.  One way to investigate the CNS is to use immunohistochemistry to ...

Drosophila Larval NMJ Dissection

Drosophila Larvaların NMJ Diseksiyon

The Drosophila neuromuscular junction (NMJ) is an established model system used for the study of synaptic development and plasticity. The widespread use ...

Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish (Danio rerio)

Gross and Fine Dissection of Inner Ear Sensory Epithelia in Adult Zebrafish Danio rerio

Yetişkin Zebra balığı İç Kulak Duyu Epiteli Brüt ve Güzel Diseksiyon ( Danio rerio)

Neurosensory epithelia in the inner ear are the crucial structures for hearing and balance functions. Therefore, it is important to understand the ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

Yetişkin Zebra balığı Organları diseksiyonu

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Dissection and Staining of Drosophila Larval Ovaries

Dissection and Staining of Drosophila Larval Ovaries

Diseksiyon ve boyanması Drosophila Larvaların Yumurtalıkların

Many organs depend on stem cells for their development during embryogenesis and for maintenance or repair during adult life. Understanding how stem cells ...

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney

Yetişkin Zebra balığı Böbrek diseksiyonu

Researchers working in the burgeoning field of adult stem cell biology seek to understand the signals that regulate the behavior and function of stem ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

Morpholinos in vivo Elektroporasyon Yetişkin Zebra balığı Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish (Danio rerio) Laboratory: An Introduction

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish Danio rerio Laboratory: An Introduction

Bir Zebra balığı Düzenli Bakım ve Onarım (<em&gt; Br.rerio</em&gt;) Laboratuvar: An Introduction

This protocol describes regular care and maintenance of a zebrafish laboratory. Zebrafish are now gaining popularity in genetics, pharmacological and ...

In Vivo Modeling of the Morbid Human Genome using Danio rerio

In Vivo Modeling of the Morbid Human Genome using Danio rerio

Br.rerio kullanarak Morbid İnsan Genomu İn Vivo Modelleme

Here,  we present methods for the development of assays to query potentially clinically  significant nonsynonymous changes using in  vivo complementation ...

Gavaging Adult Zebrafish

Yetişkin Zebra balığı Gavaging

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...