Name: procedures for rat in situ skeletal muscle contractile properties
Uploaded: 2011-10-15T14:00:00
Duration: 9 min 49 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Procedures for Rat in situ Skeletal Muscle Contractile Properties at JoVE.com

Araştırma Fen ve Kanada&#39;nın Mühendislik Araştırma Konseyi tarafından desteklenen.

1. Giriş <ol><li> MacIntosh laboratuar birkaç yıldır medial gastroknemius kas preparatı kullanmaya ve bundan önce, bütün gastroknemius kas hazırlık olarak Dr Phil Gardiner ile geliştirilmiştir. 1 </li></ol> 2. Anestezi <ol><li> Yetişkin Sprague-Dawley sıçanları (200-300 g), genellikle in situ kasılma özelliklerini çalışmada için laboratuarımızda kullanılmıştır. Sıçan piyasada bulunan veya bir havlu ile kapsayan ve tutarak, pleksiglas cihazda kısıtlı olabilir. </li><li> Biz 85:15 karışık (100 mg · mL -1, her biri), xylazine / ketamine kullanın ve intramüsküler 2,3 rat ağırlığı 100 g için 0.1 ml yönetmek. Pentobarbital (50-60 mg kg-1, intraperiteneal) ya da sodyum izofluran (% 2-3.5, inhaler) 4 de kullanılabilir. </li><li> Anestezik etkisi alıyor olsa da, kesin bir ağırlık elde ve sol arka ekstremite traş edilebilir. Bu, aynı zamanda iyi bir Time tüm elektronik açık ve hazır olduğundan emin olmak için. Bu bilgisayarlar, gerinim ölçer amplifikatör, yağ ısıtıcı ve diğerleri dahildir. </li><li> Refleks yanıtı periyodik olarak geri dönüşü kontrol edin ve (100 g başına 0,05-0,1 ml) gerektiği gibi anestezi tamamlar. </li></ol> 3. Cerrahi başlatılıyor <ol><li> Biz ameliyat için sıçan hareketsiz bir pleksiglas platformunu kullanacak. Basit maskeleme bandı iş yapar. Hayvan sağ ön, sol bacak uzanan olduğundan emin olun. Gözleri yağlayıcı bir damla ekleyin. Biz parafin yağı kullanın. Aksi takdirde, gözleri ketamin anestezisi ile kurur. </li><li> Küçük bir cerrahi hafif yararlıdır. Bu bir hayvan sıcak tutmak için yeterli ısı yayar. Alternatif olarak, bir su ısıtma battaniyesi kullanılabilir. Geçmeden önce kornea veya parmak-tutam refleksleri olduklarından emin olmak için kontrol edin. Bu işlem akut çünkü Steril teknik, gerekli değildir. Hayvan anestezi kurtarmak olmaz. Biz anestezi ile sıçan euthanizebütün işlemler tamamlanana doz (0.2 ml, intrakardiyak). </li><li> İlk kesi topuk Vertebral kolon deri yoluyla. Kesme derinliği kontrol edilebilir ve makas alttaki dokulara gelen cilt ayırmak için kullanılır, çünkü makas kullanın. Sıçanlar böylece sürece büyük kan damarlarının kaçınmak gibi, kanama sınırlı olacaktır, mükemmel hemostaz var. Izotonik salin bulanmış gazlı bez ile kaplı maruz yüzeylerde, mümkün tutun. </li><li> Cilt bağ dokusu ayrıldıktan sonra, yüzeysel kas tabakası kesilir. Çok derin gitmek için değil emin olun, siz siyatik sinir ya da kan damarları veya ilgi kas zarar istemiyorum. Gastroknemius kası üzerinde başlayın ve proksimal kesim, cilt insizyonu ile aynı hat boyunca. Peek altında siyatik sinir bulmak ve önlemek için. Sonra sinir görmek, size kesi ile yolunu izleyin, ama iyi sinir üzerinde kalabilirler. Mus arasında net bir dikiş yokturcles. Bu bulun ve diz doğru olduğunu dikiş boyunca kesti. Izleyin ve kan damarlarının kaçının. </li></ol> 4. Kemik saç iğnesi için femur pilot delik hazırlayın <ol><li> Çıplak kemik açığa femur kaudal yönü üzerinde kas ince katman sayesinde kesin. Bir el döner aracı, matkap, veya pin yardımcısı, (0.9 mm karbon çelik frez) kullanarak, korteks boyunca küçük bir pilot delik ve sadece medulla içine. Çok derinden delmeyin veya aşırı kanama neden olur. Bu delik myograph taban üzerinde immobilize etmek için bir uyluk kemiği pim yerleştirmek için daha sonra kullanılır. </li></ol> 5. Medial gastroknemius kasının innervasyon Isolate <ol><li> Bir sonraki adım bir diseksiyon mikroskobu gerektirir. Popliteal sinir medial gastroknemius kasının arkasında kaybolur yerini bulun. Yavaşça çeşitli dallarında dışarı yayılır ve medial gastroknemius kası innerve duymadığınız tüm kesti. Inervasyonu mikrostimülasyonla ile tespit edilebilir. Thi Ats aşamada da siyatik sinir yüzeysel dallar kesilir emin olun. </li><li> Şimdi siyatik sinir uzak bağ dokusu temizlemek, böylece sinir manşet (daha sonra) daldı olabilir. Hafifçe sinir tedavi emin olun. Sinirin herhangi streç inexcitability yol ve zamanından önce deneme bitirebilirsiniz. </li></ol> 6. Aşil tendonu ve gastroknemius kas ayırma <ol><li> Makas ara sıra yardımıyla diseksiyon, diğer dokulardan gastroknemus kas ayırmak için de kullanılabilir. Plantaris tendon, Aşil tendonu altından çıkardı bağladı ve kesilebilir. Kravat sadece tendonu tutmak yardımcı olmak için kullanılır ve tendon kesilir ve plantaris önemli bir uzunluk için gastroknemius kas ayrılır hemen sonra kesilebilir. Bir kare düğüm bir # 1 ipek Aşil tendonu etrafında dikilen ve kravat yerleştirin. Çok sıkı çekmeyin, ya da tendon hasar görecektir. Biz calcan kesmek için kemik rongeurs kullanın<html> yine aşil tendonuna bağlanır kemik küçük bir parça bırakarak eus. Kemik sadece tendon değil kesilmiş olduğundan emin olmak için yatay kesim yüzeyleri tutun. Bu Aşil tendonu sonra myograph yapıştırılmış olabilir sağlar. </li><li> Gastroknemius alt boyunca soleus görülebilir. Yine, diseksiyon gastroknemius kas soleus ayırmak için de kullanılabilir. Biz medial gastroknemius izole etmek istiyorum, bu yüzden hala aşil tendonuna bağlanır sadece kas. Distal ucuna yakın, soleus tendon kesin. Sonra medial ve lateral gastroknemius kas ayırmak ve aşil tendonuna bağlanır sadece medial gastroknemius kas bırakarak, yatay Tendon kesebilir. Kendi uzunluğunun yaklaşık% 50 boyunca, uzak medial yanal gastroknemus kas çekin. Bu uzunluk ötesinde, lifler kesişir ve hasar daha fazla çekme sonuçlanacaktır. Kas bağ dokusu arınmış olduğundan emin olmak için kontrol edin. </li></ol>e &quot;&gt; 7. tibia Cut <ol><li> Sadece orta nokta üzerinde, sap etrafında bir bağ yerleştirin. Bu doku içine kesmeden sıkı olması gerekiyor. Ipe önce ikinci bir döngü kaymasını önlemeye yardımcı olur. Yine sabitlemek için bir kare düğüm kullanın. </li><li> Küçük bir testere kullanarak, uzak alt bacak kesti. Bu kesim tibia boyunca yarıda ilgili olmalıdır. </li><li> Tibia medulla içine keskin bir prob yerleştirin. Bu prob myograph taban üzerinde kaval kemiği hareketsiz hale getirmek için kullanılır. </li><li> Michel klipler kullanarak, cilt 2 kırıntılılar takın. Bu ve ek elastikler ısıtılmış parafin yağı ile dolu olacak bir kap oluşturmak üzere kas çevresinde cilt kadar tutmak için kullanılır. </li></ol> [OPSİYONEL] 8. Sonometric kristalleri (isteğe bağlı adım) 5 takın <ol><li> Düşük ayarda bir ısıtma yastığı hayvan yerleştirin. Bir rektal sonda, önceden takılmış değil ise, bu aşamada eklenebilir. Yağlamak için parafin yağı küçük bir damla kullanın. </li><li>Mikrostimülasyonla kullanarak, kas içinden, bir demet ve uçlarını tanımlamaktadır. Kas kökenli ve yerleştirme hem site içine bir 21 gauge iğne Poke. </li><li> İğne ve veteriner bağ cerrahi yapıştırıcı ile mühür tarafından yapılan deliğe sonometric kristal kaydırın. Tutkal çok küçük bir damla kullanın, o kristal üzerine doğru yerleştirildiğinden emin. Akut açı ile kağıt kesme parçasına tutkal uygulanması doğru tutkalı uygulayarak yardımcı olur. Bu mikrostimülasyonla ile tespit edilmiştir salkım yerleştirilmesi az bir ek kristal yerleştirerek uygulanır. </li></ol> [DEVAM] 9. (Bkz. Şekil 1) aygıtı içinde monte <ol><li> Kolu yönelmiştir tibial probu ile, myograph baz sıçan yerleştirin. Bacak immobilize etmek için, tutucu içinde sonda yerleştirin. </li><li> Bir kap oluşturmak ve lastikler ile güvenli, kenarlarında deri yukarı çekin. </li><li> Pilot kullanarak, femur içine matkap ucu (1/16 th inç)cerrahi hazırlığı sırasında oluşturulan delik. Eğer femur kırılması gibi matkap ucu (iğne mengenesi içinde) yerleştirmek gibi ön kısmında femur destekleyen emin olun zamanından deney sonlandırma neden olabilir. Femur hareketsiz bir çapraz bar takılan iğne mengenesi. </li><li> Kas kökenli geri yakın sinir uyarıcı manşet (katot kas doğru) ve germe ile siyatik sinir distal güdük yerleştirin. Bu teller stimülatör bağlayın. </li><li> Üzerinde strain gauge sensörlerine sahiptir kolu için Aşil tendonu takın. Kuytu bağla, ama daha sonra ayarı için bazı oda bırakın. Kas uyum kolu ile dik olduğundan emin olun. </li><li> Isıtılmış parafin yağı ile deri ile oluşan doldurun. </li><li> Isı lambası ve hayvanın başının üzerinde folyodan yapılmış pozisyonu kalkanları ve kuvvet dönüştürücü açın. Ek folyo kalkan hayvanın çekirdek sıcaklığı exce sağlamak için, gerekli olabileceked 38 ° C. Dize bolluk medial gastroknemius ve kuvvet dönüştürücü arasındaki bağlantı kaldırılana kadar kas uzunluğu ayarlanabilir. </li></ol> 10. Maksimal gerilimi ve referans uzunluğu ayarlama <ol><li> Kas ısınırken, stimülatör kurmak ve stimülasyon gerilimi test edin. Bu stimülasyon çok kısa bir puls süresine de ayarlanmış olduğundan emin olmak için önemlidir. Biz 50 μs kullanın. Maksimal voltajı, 1 daha az V 0,5 V Başlangıç ​​olarak kasılan genlik artmaz kadar gerilimi artırmak gerekir. Maksimal voltajı motor üniteleri aktive düşük gerilim. Biz genellikle çift maksimal gerilimi teşvik veya hangisi daha yüksek ise 3 V. </li><li> Tipik olarak, deneyler büyük seğirme kasılma verir uzunlukta kas ile başlayacak. Bir kasılma, tek bir teşvik edici darbe ile elde edilir. Kas uzunluğu başka bir seğirme için yaklaşık 1 mm artar. Bu seğirme genlik sürece tekrarlanırartmaktadır. Bir kez genliği azalır seğirme, uzunluğu büyük genlik seğirme verdi birini iade edilecektir. </li><li> Uzunluğu bu ilk ayar sonra, biz bir &quot;koşullandırma tetanik daralma&quot; olarak bakın ne ile sistemi test. Stimülatör 500 ms için 200 Hz&#39;de darbeleri sunmak için ayarlanır. Bu uyarım Teslim tamamen erimiş tetanik kasılma neden olur. Kas tarafından üretilen kuvvet kas düğümlendiği de dahil olmak üzere, tüm bağlantılarda sıkılır. Potansiasyon 4 yayılımı için uygun bir dinlenmeden sonra, kas referans uzunluğu (bölüm 9.2 &#39;ye bakınız) sıfırlanır. Genellikle, Klima tetanik kasılma bazı salkım uzunluğu kısalmasına izin vermiş, böylece kas büyük genlik seğirme kasılma verir uzunluğunu geri almak için biraz gergin gerekmektedir. </li></ol> 11. Deneme başlatın <ol><li> Tipik bir deney uzunluğu adjustm içerecektirent ve / veya stimülasyon desenleri çeşitli ile stimülasyon. Veri toplama süresi, salkım uzunluk ve elektromiyogram ile, sadece güç ya da kuvvet içerebilir. </li></ol> [OPSİYONEL] 12. Kuvvet-frekans ilişkisi 2 <ol><li> Yeterince ilgi herhangi bir frekansta güç bir platoya ulaşmak üzere tren süresini ayarlayın. Maksimum izometrik kuvveti 200 Hz&#39;de medial gastroknemius kas elde edilir. Tren süresinin en az 200 ms olmalıdır; artık düşük frekanslar için iyidir, ama birkaç kasılmalar kuvvet-frekans ilişkisi tam aralığı belirlemek için kullanılır, bazı yorgunluk neden olur. Biz genellikle 0, 20, 40, 60, 80, 100 ve 200 Hz&#39;de kasılmalar kullanın. Frekansların bu aralığının kuvvet-frekans ilişkisi tam kapsamlı tarif olmasını sağlayacaktır. Kasılmalar arasında uygun dinlenme (1-10 dk) yorgunluğu önlemek için izin verilmelidir. </li></ol> 13. Kuvvet-uzunluk relationship 6 <ol><li> Tahmini optimum uzunluğu önceden belirlenmiş olan bir kuvvet-boy ilişkisi sistematik bir servo-motor aparatı kullanılarak +4 mm -4 mm kas uzunluğunu ayarlamak ile tespit edilebilir. Bu maksimal stimülasyon (200 Hz) kullanılarak yapılmalıdır ama biz çok kısa kasılmalar aynı gerçek optimum uzunluğu 7 verecektir bulduk. Submaksimal kasılmalar, seyirmesi gibi kullanılabilir, ancak bu gücün 8 uzunluğu-bağımlılığı farklı bir verecektir. </li><li> Kuvvet-boy ilişkisi belirlenmesinde önemli bir yönü ölçülen kuvvet oluştuğu fasikül uzunlukta pasif kuvvet tahmin etmek bir ihtiyaçtır. Aktif gücü toplam kuvvet ve uygun pasif kuvvet arasındaki fark olarak hesaplanır. Paralel elastik yapıları pasif hükmündedir ve bu serileri elastik yapısı ile seri olduğundan, toplam kuvvet için pasif kuvvet katkısı serisi ela olarak azaltmak gerekirSTIC yapılar bir daralma 3 sırasında gerilir. Pasif kuvvet ilgili tüm kas uzunluklarında tanınıyor sonra, uygun pasif kuvvet veya ölçüm sisteminin uygunluğu ve kas-tendon ünitesi içerisinde serisi yapılar tahminine göre sonomicrometry kullanarak salkım uzunluğu sürekli ölçümü ile tahmin edilebilir. Bu yapılmaz ise, bunların hazırlanması ve tepe kuvvetlerin en uygun uzunluk, ihmal edilir. </li></ol> 14. Kuvvet-hız ilişkisi 9 <ol><li> Eğer kuvvet-hız ilişkisini belirlemek istiyorsanız, size uzunluğu değişim yük veya oranı da kontrol sağlayan bir sistemi, kuvvet dönüştürücüleri takmanız gerekmektedir. Kolay ve en maliyet-etkin bir yöntem kontrollü bir yük kısalma kısıtlamak için hava basıncı kullanmaktır. Sistemimizde, kas dayanak bir tarafında koluna bağlı olduğu ve hava basıncı diğer tarafta uzunluk değişikliği engellemektedir. Bir uzunluk sensörü needs Eğer izotonik kasılmalar sırasında kas uzunluğunda değişiklik tespit edebiliyoruz böylece istihdam edilecek. Bu düzenleme, pnömatik direnç ile afterloaded kasılmaları izin verir. Çift tankları izotonik yük sürümü ile izometrik kasılma izin verebilir. 15-20 kasılmalar toplam yaklaşık yüksüz maksimum izometrik değişen yükleri ile alınmalıdır. Denklem için veri takılması sırasında, izometrik% 90 üzerinde yüklerin 9 kullanılmamalıdır. </li></ol> 15. Temsilcisi Sonuçlar: Örnek kasılmalar Şekil 2&#39;de sunulmuştur. Bu kasılmalar kuvvet frekans ilişkiyi göstermek için elde edilmiştir. Bu kasılmaların pik aktif gücü hesaplanması ve frekans karşı etkin bir güç komplo, verimleri Şekil 3, kuvvet-frekans ilişkisi. Şekil 2&#39;de sunulan veriler, aşağıdaki eşitliğe uygun olabilir: AF = c / (1 + e ((Af) / b) + d); AF aktif kuvvet, F frekans ve bir,<html> b, c ve d sabitleridir. Sıçan medial gastroknemius kası için stimülasyon yarı maksimal frekansı tipik olmayan yorulmuş kası 2 50-60 Hz. Sonuçlar yukarıdaki denklemi tarafından açıklanan hattına yakın uyacaktır. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3167/3167fig1.jpg" /> Şekil 1 Aparatı ve kas set-up:. Pnömatik set-up sağ izometrik, soldaki gösterilir. Dinamik kasılmalar (13 uyarlanan) arzu edildiğinde sol tarafta gösterilen kol sistemi tercüme tablosuna bağlıdır. Step motor, bir bilgisayar (14 uyarlanmıştır) tarafından kontrol edilir. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/3167/3167fig2.jpg" /> . Şekil 2 Superimposed izometrik kasılmalar: 20, 40, 60, 80, 100 ve 200 Hz. 200 Hz kasılma amplitüdü 8.13 N. les/ftp_upload/3167/3167fig3.jpg &quot;/&gt; . Şekil 3 Kuvvet-frekans ilişkisi: Şekil 2&#39;de kasılmalar Aktif gücü çizilen ve çizgi en uygun çizgisini temsil edilmektedir.

<ol>
	<li>MacIntosh, B. R., Gardiner, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Posttetanic+potentiation+and+skeletal+muscle+fatigue:+interactions+with+caffeine.">Posttetanic potentiation and skeletal muscle fatigue: interactions with caffeine.</a> Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 65, 260-268 (1987).</li><li>Dormer, G. N., Teskey, G. C., MacIntosh, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Force-frequency+and+force-length+properties+in+skeletal+muscle+following+unilateral+focal+ischeaemic+insult+in+a+rat+model.">Force-frequency and force-length properties in skeletal muscle following unilateral focal ischeaemic insult in a rat model.</a> Acta. Physiol. (Oxf.). 197, 227-239 (2009).</li><li>MacIntosh, B. R., MacNaughton, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+length+dependence+of+muscle+active+force:+considerations+for+parallel+elastic+properties.">The length dependence of muscle active force: considerations for parallel elastic properties.</a> J. Appl. Physiol. 98, 1666-1673 (2005).</li><li>Tubman, L. A., MacIntosh, B. R., Rassier, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absence+of+myosin+light+chain+phosphorylation+and+twitch+potentiation+in+atrophied+skeletal+muscle.">Absence of myosin light chain phosphorylation and twitch potentiation in atrophied skeletal muscle.</a> Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 74, 723-728 (1996).</li><li>MacNaughton, M. B., MacIntosh, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+length+during+repetitive+contractions+on+fatigue+in+rat+skeletal+muscle.">Impact of length during repetitive contractions on fatigue in rat skeletal muscle.</a> Pflugers. Arch. 455, 359-366 (2007).</li><li>MacNaughton, M. B., MacIntosh, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reports+of+the+Length+Dependence+of+Fatigue+are+Greatly+Exaggerated.">Reports of the Length Dependence of Fatigue are Greatly Exaggerated.</a> J. Appl. Physiol. 101, 23-29 (2006).</li><li>Rassier, D. E., MacIntosh, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Length-dependent+twitch+contractile+characteristics+of+skeletal+muscle.">Length-dependent twitch contractile characteristics of skeletal muscle.</a> Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 80, 993-1000 (2002).</li><li>Rack, P. M. H., Westbury, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+length+and+stimulus+rate+on+tension+in+the+isometric+cat+soleus+muscle.">The effects of length and stimulus rate on tension in the isometric cat soleus muscle.</a> Journal of Physiology. 204, 443-460 (1969).</li><li>Devrome, A. N., MacIntosh, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biphasic+force-velocity+relationship+in+whole+rat+skeletal+muscle+in+situ.">The biphasic force-velocity relationship in whole rat skeletal muscle in situ.</a> J. Appl. Physiol. 102, 2294-2300 (2007).</li><li>Drzymala-Celichowska, H., Krutki, P., Celichowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Summation+of+motor+unit+forces+in+rat+medial+gastrocnemius+muscle.">Summation of motor unit forces in rat medial gastrocnemius muscle.</a> J Electromyogr. Kinesiol. 20, 599-607 (2010).</li><li>Petrofsky, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+the+recruitment+and+firing+frequencies+of+motor+units+in+electrically+stimulated+muscles+in+the+cat.">Control of the recruitment and firing frequencies of motor units in electrically stimulated muscles in the cat.</a> Medical &#38; Biological Engineering &#38; Computers. 16, 302-308 (1978).</li><li>Bawa, P., Binder, M. D., Ruenzel, P., Henneman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recruitment+order+of+motoneurons+in+stretch+reflexes+is+highly+correlated+with+their+axonal+conduction+velocity.">Recruitment order of motoneurons in stretch reflexes is highly correlated with their axonal conduction velocity.</a> Journal of Neurophysiology. 52, 410-420 (1984).</li><li>Dormer, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Fundamental Contractil Properties of Skeletal Muscle Following a stroke in a Rat Model. Master's Thesis. , (2008).</li><li>MacNaughton, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Length dependence of Fatigue and of Repetitive Contractions. Master's Thesis. , (2005).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Kaliteli kontraktil sonuçlar cerrahi hazırlık bakımı ile elde edilebilir, aparat ve kaliteli elektronik montaj güvenlidir. Bir öğrenci bu ameliyatı öğrenme olduğunda, bazı ortak fişleri şunlardır:, siyatik sinir germe kan akışını bozan ve aşırı kanama. Sinir hasarı önlemek için dikkatli bir şekilde ele alınmalıdır. Siz uygun uzunlukta maksimal tetanik kuvvet Şekil 3, veya maksimum tüm motor üniteleri etkinleştirmek için gerekli uyarım gerilimi 5 volt büyükse gösterilenden çok daha az olup olmadığını sinirine zarar bileceksiniz. Bu ameliyat sırasında bu kas hizmet kan damarlarının önlemek için nispeten kolaydır. Bu gemilere Disruption matkap femur kaudal yüzey konuyor oluşabilir. Kılavuz deliği femur düz bir yüzey üzerinde değil, sondaj kayabilir. Bu durumda, popliteal damarlar bozulduğu olsun olasılığı vardır. Eğerkan havuzları adele çevresinde set-up sonra, bu gemiler bozmuş bir işaretidir. Büyük damar kesilmesine ve bağlı değilse Aşırı kanama da oluşabilir. Dikkat etmeniz gereken büyük damarlar ayak bileği çevresinde olanlardır. Yerinde kas hazırlanmasında kas kasılma özelliklerinin çalışma için değerli bir yaklaşımdır. Bireysel motor üniteleri 10 aktive edilebilir, ama genelde tüm motor üniteler eşzamanlı devreye girer. Bu gönüllü motor ünitesi tarafından alım oluşur normal asenkron aktivasyonu göreceli bir dezavantaj olduğunu, bu yüzden bir sınırlama temsil eder. Ancak, olumlu tarafı, senkron aktivasyon tüm motor birimlerin ortalama yanıt ölçümü sağlar. Senkron aktivasyon önlemek için kullanılır olmuştur iki yaklaşım vardır. Bir uyarıcı tellerin birkaç çift manşeti olan bir elektrot kullanılmasıdır. Bu, her bir çifti ile motor birimlerin bir bölümünün aktivasyonunu sağlarve stimülasyon asenkron aktivasyon elde etmek çiftleri ile döndürebilirsiniz. Aktivasyon yöntemi, 12 ölçü prensibine göre uygun sıra halinde motor üniteleri aktive girişimi için anodal blok 11 ile kombine edilebilir. Bu yaklaşım, tüm motor ünitelerin elektrotlar proksimal çifti ile aktive edilir ve bir blok akım stimülasyonu ile empoze edilir. Bloğu için uyaran genlik aktivasyonu arzu edilmediği için motor üniteleri inhibe etmek için modüle edilebilir. Görünüşe blok düşük voltajda büyük aksonlar etkiler ve giderek daha küçük birimler etkiler. Yerinde sıçan gastroknemius kas hazırlanmasında sağlık ve hastalık iskelet kas kasılması ve biyokimyasal özellikleri çalışma için değerli bir fizyolojik bir yaklaşımdır.

<table border="1"><tbody><tr><th> Ekipman Adı </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th><th> Yorumlar (isteğe bağlı) </th></tr><tr><td> Tırnak makası </td><td></td><td></td><td> Kaliteli pet makası </td></tr><tr><td> Cerrahi lambası </td><td> Dyna-Lume </td><td></td><td> Birkaç Herhangi yapacak </td></tr><tr><td> Myograph </td><td></td><td></td><td> Özel inşa </td></tr><tr><td> Stimülatör </td><td> Çimen </td><td> S-88 </td><td> Birkaç Herhangi yapacak </td></tr><tr><td> Göstergesi amplifikatör Gerinim </td><td> CWE </td><td> PM-1000 </td><td></td></tr><tr><td> Telethermometer </td><td> YSI </td><td> YSI-400 </td><td></td></tr><tr><td> Robotik platformu </td><td> Arrick Robotik </td><td> MD-2 </td><td></td></tr><tr><td> Sonometric amplifikatör </td><td> Sonometrics </td><td> Sonolab </td><td></td></tr><tr><td> Bilgisayar ve veri toplama </td><td> NI boa PCrd </td><td></td><td> Özel yazılım (labview) </td></tr><tr><td> Blok ısıtıcı </td><td> Lab-line </td><td> Multi-blok </td><td></td></tr><tr><td> Sinir manşet </td><td></td><td></td><td> Özel yapılmış </td></tr><tr><td> Microstimulator </td><td></td><td></td><td> Özel yapılmış </td></tr></tbody></table>

procedures for rat in situ skeletal muscle contractile properties

Vücut ısısı normal dolaşımı, bozulmamış tüm kas,: bu fizyolojik koşullar altında iskelet kasının kasılma cevabı elde etmek istendiği birçok durumlar vardır. Bu posttetanic potansiyasyonu, merdiven ve yorgunluk gibi kontraktil yanıtların çalışma içerir. Ayrıca, hastalık, kullanmama, yaralanma, eğitim ve ilaç tedavisinin sonuçları ilgi olabilir. Bu video bu değerli kas hazırlık kurmak ve kullanmak için uygun prosedürler gösterir. Bu hazırlık ayarlamak için, hayvan anestezi olmalı ve medial gastroknemius kasının cerrahi izole edilir, kökeni bozulmamış. Bakım kan ve sinir malzemeleri korumak için alınması gerekir. Siyatik sinirin uzun bölümü bağ dokusu temizlenir ve proksimale kopmuştur. Medial gastroknemius kası innerve yok distal güdük tüm dalları kesilmiş. Distal sinir güdük inser olduğunupaslanmaz çelik uyarıcı teller ile kaplı bir manşet içine ted. Kalkaneus hala aşil tendonuna bağlanır kemik küçük bir parça bırakarak, kopmuştur. Elektromiyografi için Sonometric kristaller ve / veya elektrotların eklenebilir. Metal femur problar ve tibia ile immobilizasyon kas kökenli hareket etmesini önler. Aşil tendon kuvvet transduserine bağlı olduğu ve gevşeyen cilt ısıtılmış parafin yağı ile dolu bir kap oluşturmak için iki taraftan yukarı çekilir. Yağ eşit ısı dağıtır ve evaporatif ısı kaybını en aza indirir. Bir ısı lambası kas üzerinde yönlendirilir, ve kas ve sıçan 37 ° C&#39;ye kadar ısınmasına izin verilir Bu ısınırken, maksimum gerilim ve optimum uzunluk tespit edilebilir. Bu bozulmamış tüm kas üzerinde herhangi bir deney için önemli başlangıç ​​koşulları vardır. Deney kuvvet-frekans ilişkisi, kuvvet-boy ilişkisi, ve kuvvet-hız ilişkisi gibi standart kasılma özelliklerinin belirlenmesi, içerebilir. </p&gt; Cerrahi izolasyon bakım ile, kas-tendon kuvvet dönüştürücü ünitesi ve uygun veri analizi kas ve uyum kökenli immobilizasyon, yüksek kalite ölçümleri bu kas hazırlanması ile elde edilebilir.

Watch this Scientific Journal Video about Procedures for Rat in situ Skeletal Muscle Contractile Properties at JoVE.com

Procedures for Rat in situ Skeletal Muscle Contractile Properties

Bu video cerrahi hazırlık ve sıçan medial gastroknemius kas hazırlık kasılma cevapları incelemek için gerekli prosedürleri gösterir<em&gt; In situ</em&gt;. Bu preparat, fizyolojik koşullar altında iskelet kas kasılma özelliklerini ölçümünü sağlar. Hayvan anestezi ve kas distal ucunda bunları çevreleyen dokudan ayrılmıştır. Aşil kirişi bozulmamış bir sirkülasyon ile 37 derece C &#39;de en kas kasılma tepki ölçümü sağlayan bir kuvvet transduserine eklenir.

Rat Prosedürleri<em&gt; In situ</em&gt; İskelet Kası Kontraktil Özellikleri

There are many circumstances where it is desirable to obtain the contractile response of skeletal muscle under physiological circumstances: normal ...

Research

JoVE Journal

Biology

Procedures for Rat in situ Skeletal Muscle Contractile Properties

In vivo Micro-circulation Measurement in Skeletal Muscle by Intra-vital Microscopy

İskelet kas-içi hayati Mikroskopi in vivo Mikro sirkülasyon Ölçümü

BACKGROUND: Regulatory factors and detailed physiology of in vivo microcirculation have remained not fully clarified after many different modalities of ...

Adult and Embryonic Skeletal Muscle Microexplant Culture and Isolation of Skeletal Muscle Stem Cells

Yetişkin ve Embriyonik İskelet, Kas Microexplant Kültür ve İskelet Kası Kök Hücre İzolasyonu

Cultured embryonic and adult skeletal muscle cells have a number of different uses. The micro-dissected explants technique described in this chapter is a ...

Mitochondrial Isolation from Skeletal Muscle

İskelet Kası Mitokondrial İzolasyon

Mitochondria are organelles controlling the life and death of the cell. They participate in key metabolic reactions, synthesize most of the ATP, and ...

Purification of Progenitors from Skeletal Muscle

İskelet Kası progenitörlerin saflaştırılması

Skeletal muscle contains multiple progenitor populations of distinct embryonic origins and developmental potential. Myogenic progenitors, usually residing ...

Laser-inflicted Injury of Zebrafish Embryonic Skeletal Muscle

Zebra balığı Embriyonik İskelet Kası Lazer-yaralama

Various experimental approaches have been used in mouse to induce muscle injury with the aim to study muscle regeneration, including myotoxin injections ...

Detection and Analysis of DNA Damage in Mouse Skeletal Muscle In Situ Using the TUNEL Method

Detection and Analysis of DNA Damage in Mouse Skeletal Muscle In Situ Using the TUNEL Method

Fare İskelet Kası Algılama ve DNA Hasar Analizi<em&gt; In Situ</em&gt; TÜNEL Yöntemiyle

Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) deoxyuridine triphosphate (dUTP) nick end labeling (TUNEL) is the method of using the TdT enzyme to covalently ...

Isolating Myofibrils from Skeletal Muscle Biopsies and Determining Contractile Function with a Nano-Newton Resolution Force Transducer

İskelet Kas Biyopsilerinden Miyofibrillerin İzlenmesi ve Nano-Newton Çözünürlük Transdüseri ile Kontraktil Fonksiyonun Belirlenmesi

Striated muscle cells are indispensable for the activity of humans and animals. Single muscle fibers are comprised of myofibrils, which consist of ...

Identification, Isolation, and Characterization of Fibro-Adipogenic Progenitors (FAPs) and Myogenic Progenitors (MPs) in Skeletal Muscle in the Rat

Identification, Isolation, and Characterization of Fibro-Adipogenic Progenitors FAPs and Myogenic Progenitors MPs in Skeletal Muscle in the Rat

Sıçandaki İskelet Kasında Fibro-Adipojenik Progenitörlerin (FAP' ler) ve Miyojenik Progenitörlerin (Milletvekilleri) Tanımlanması, İzolasyonu ve Karakterizasyonu

Fibro-adipogenic Progenitors (FAPs) are resident interstitial cells in skeletal muscle that, together with myogenic progenitors (MPs), play a key role in ...

Preparation of Rat Skeletal Muscle Homogenates for Nitrate and Nitrite Measurements

Nitrat ve Nitrit Ölçümleri için Sıçan İskelet Kas Homojenatlarının Hazırlanması

Nitrate ions (NO3-) were once thought to be inert end products of nitric oxide (NO) metabolism. However, previous studies demonstrated that nitrate ions ...

Quantification of Skeletal Muscle Fatty Infiltration via Decellularization

Decellularization-Based Quantification of Skeletal Muscle Fatty Infiltration

Decellularization-Based Quantification of Skeletal Muscle Fatty Infiltration (Video) | JoVE 

İskelet Kası Yağ İnfiltrasyonunun Decellularizasyona Dayalı Miktar Tayini

Fatty infiltration is the accumulation of adipocytes between myofibers in skeletal muscle and is a prominent feature of many myopathies, metabolic ...