1. PBMC의 분리 <ol><li> BD Vacutainer CPT 셀 준비 튜브 나트륨 헤파린과에 혈액 (7.5-8.0 ML)를 그립니다. 튜브는 나트륨 헤파린의 항응고제와 Ficoll - Hypaque 밀도 유체, 더하기 두 액체를 분리 폴리에스터 겔 장벽을 포함하고 있습니다. 1,800 X g에서 20 분 수평 로터 (스윙 아웃 헤드)에 실온 (18 ° C 25 ° C)에서 튜브 / 혈액 샘플을 원심 분리기. 브레이크를 원심 분리기 전환합니다. </li><li> 원심 분리 후, ?...

<ol>
	<li>Bonneville, M., O'Brien, R. L., Born, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#947;+T+cell+effector+functions:+a+blend+of+innate+programming+and+acquired+plasticity.">&#947; T cell effector functions: a blend of innate programming and acquired plasticity.</a> Nat Rev Immunol. 10, 467-478 (2010).</li><li>Hintz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+(E)-4-hydroxy-3-methyl-but-2-enyl+pyrophosphate+as+a+major+activator+for+human+&#947;&#948;+T+cells+in+Escherichia+coli.">Identification of (E)-4-hydroxy-3-methyl-but-2-enyl pyrophosphate as a major activator for human &#947;&#948; T cells in Escherichia coli.</a> FEBS Lett. 509, 317-322 (2001).</li><li>Gober, H. 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여기서 제시하는 방법은 PBMC에서 γδ T 세포의 효율적인 확장이 가능합니다. γδ ​​T 세포가 활성화되고 확대 zoledronate로와 IL - 2는 시토킨 생산 및 세포 독성에 의해 반사 완료 효과기 기능을 개발할 수 있습니다. 그것은보고되었음을 합성 phosphoantigens의 bromohydrin 나트륨 (BrHPP) 및 2 - 메틸 - 3 - butenyl - 1 - 나트륨 (2M3B1PP)는 또한 γδ T 세포를 확장하고 있지만, 그들은 상업적으로 사용할 수 없습니다....

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 댓글 (옵션) </th></tr><tr><td> ZOMETA </td><td> 노바티스 제약 K. K </td><td></td><td> zoledronate </td></tr><tr><td> PROLEUKIN </td><td> 노바티스 제약 </td><td></td><td> 인간 재조합 IL - 2 </td></tr><tr><td> BD Vacutainer CPT 셀 준비 튜브 나트륨 헤파린과 함께 </td><td> BD </td><td> 362753 </td><td></td></tr><tr><td> RPMI1640 </td><td> Invitrogen </td><td> 21870-076 </td><td></td></tr><tr><td> ALyS203 - 중간 </td><td> 셀 과학 기술 연구소 </td><td> 0301-7 </td><td></td></tr><tr><td> OpTmizer </td><td> Invitrogen </td><td> 0080022SA </td><td></td></tr><tr><td> brefeldin </td><td> 시그마 </td><td> B5936 - 200UL </td><td></td></tr><tr><td> phorbol 12 - myristate 13 - 아세테이트 (PMA) </td><td> 시그마 </td><td> P1585 - 1MG </td><td></td></tr><tr><td> ionomycin </td><td> 시그마 </td><td> 13909 - 1ML </td><td></td></tr><tr><td> IntraPrep </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> A07803 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 인간 인 경우에는 3 번 CD - FITC 또는 PE/Cy5 </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> A07746 FITC A07749 PE/Cy5 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 인간 CD4 - ECD </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> 6,604,727 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 인간 CD8-PE/Cy5 </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> 6,607,011 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 인간 CD14-PE/Cy5 </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> A07765 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 인간 CD19 - PE </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> A07769 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 인간 CD45 - ECD </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> A07784 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 인간 CD56-PE/Cy5 </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> A07789 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 인간 TCRαβ - PE </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> A39499 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 인간 TCR - FITC Vγ9 </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> IM1463 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 인간 CD27-PE/Cy5 </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> 6,607,107 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 인간 CD45RA - ECD </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> IM2711 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 인간 CD69 - PE </td><td> BD </td><td> 555531 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 - 인간 NKG2D - PE </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> A08934 </td><td></td></tr><tr><td> 안티 humal IFNγ - PE </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> IM2717U </td><td></td></tr><tr><td> 마우스 IgG1 isotype 제어 PE </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> A07796 </td><td></td></tr><tr><td> 마우스 IgG1 isotype 제어 ECD 또는 PE/Cy5 </td><td> 베크맨 쿨터 </td><td> A07797 A07798 </td><td></td></tr></tbody></table>

expansion of human peripheral blood  &gamma;&delta; t cells using zoledronate

인간 γδ T 세포가 인식하고 스트레스 유발 항원의 다양한 반응, 따라서 본래 광범위한 안티 종양 및 안티 infective 활동을 개발하고 있습니다. 말초혈에서 γδ T 세포의 1 대부분 Vγ9Vδ2 T 세포 수용체 있습니다. 이러한 세포의 주요 histocompatibility 복합 독립적인 방식으로 항원을 인식하고 강한 cytolytic과 Th1과 같은 이펙터 기능을 개발할 수 있습니다. 1 따라서, γδ T 세포가 암 immunotherapy에 대한 매력적인 후보 효과기 세포 수 있습니다. Vγ9Vδ2 T 세포 같은 phosphoantigens에 대응 (E) -4 - 히드록시 -3 - 메틸 -하지만 - 2 - enyl 나트륨 (HMBPP), isoprenoid 생합성 통해 박테리아에 합성하는, 생산 2 isopentenyl 나트륨 (IPP), mevalonate 경로 3. 생리적 조건을 통해 진핵 세포에서 nontransformed 셀에 IPP의 세대 γδ T 세포의 활성화를 위해 충분하지 않습니다. 종양 세포에서 mevalonate 경로의 Dysregulation는 IPP의 축적과 γδ T 세포의 활성화로 연결됩니다. 3 aminobisphosphonates (예 : pamidronate 또는 zoledronate 등) farnesyl 나트륨의 synthase (FPPS), mevalonate 경로에서 IPP의 하류를 연기 효소의 세포내 수준을 억제하기 때문에 IPP 및 γδ T 세포 인식에 sensitibity는 therapeutically aminobisphosphonates 증가 수 있습니다. IPP 축적 aminobisphosphonates와 γδ T 세포를 활성화하여 암 우리에게 immunotherapy 수 aminobisphosphonates의 pharmacologically 관련 농도와 종양 세포보다 nontransfomred 세포에 덜 효율적이다. PBMC는 aminobisphosphonates로 치료하는 경우 4 흥미롭게도, IPP 때문에 효율의 monocytes에 쌓입니다 이러한 세포로 약물 이해. IPP 항원 제시 세포되고 주변 혈액에 Vγ9Vδ2 T 세포를 자극 축적 5 Monocytes가 6. 이러한 메커니즘을 바탕으로, 우리는 zoledronate와 인터루킨를 사용하여 γδ T 세포 문화의 대규모 확장을위한 기술을 개발 -2 (IL - 2). γδ T 세포의 확장 7 다른 방법은 합성 phosphoantigens의 bromohydrin 나트륨 (BrHPP) 8 2 - 메틸 - 3 - butenyl - 1 - 나트륨 (2M3B1PP)를 활용 9. 이러한 방법 중 모든 전 수 입양 immunotherapy에 사용하기 위해 γδ T 세포의 다수의 결과로 생체내 확장. 단, zoledronate은 FDA의 승인을 상용 시약입니다. CD45RA - - Zoledronate - 확장 γδ T 세포는 CD27 표시 효과기 메모리 표현형과 그들의 기능은 IFN - γ 생산 분석 7 평가할 수 있습니다.

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Expansion of Human Peripheral Blood  &#947;&#948; T Cells using Zoledronate

주변 혈액 mononuclear 세포 (PBMC)에서 γδ T 세포를 확장하는 방법을 설명합니다. PBMC - 파생 γδ T 세포는 자극과 zoledronate과 인터루킨 - 2 (IL - 2)를 사용 확장됩니다. γδ ​​T 세포의 대규모 확장이 암의 autologous 세포 immunotherapy에 적용할 수 있습니다.

Zoledronate를 사용하는 사람 말초혈의 확장 γδ T 세포

Human &gamma;&delta; T cells can recognize and respond to a wide variety of stress-induced antigens, thereby developing innate broad anti-tumor and ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Expansion of Human Peripheral Blood  &gamma;&delta; T Cells using Zoledronate

Expansion, Purification, and Functional Assessment of Human Peripheral Blood NK Cells

확장, 정화, 그리고 사람 말초혈 NK 세포 기능 평가

Natural killer (NK) cells play an important role in immune surveillance against a variety of infectious microorganisms and tumors. Limited availability of ...

연구

면역학 및 감염병학

Clinical Application of Sleeping Beauty and Artificial Antigen Presenting Cells to Genetically Modify T Cells from Peripheral and Umbilical Cord Blood

Clinical Application of Sleeping Beauty and Artificial Antigen Presenting Cells to Genetically Modify T Cells from Peripheral and Umbilical Cord Blood

임상 신청<em&gt; 잠자는 숲속의 미녀</em유전자 주변과 배꼽 탯줄 혈액에서 T 세포를 수정하는 셀을 제시&gt;과 인공 항원

The potency of clinical-grade T cells can be improved by combining gene therapy with immunotherapy to engineer  a biologic product with the potential for ...

An In vitro Model to Study Immune Responses of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells to Human Respiratory Syncytial Virus Infection

An In vitro Model to Study Immune Responses of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells to Human Respiratory Syncytial Virus Infection

Human respiratory syncytial  virus (HRSV) infections present a broad spectrum of disease severity, ranging  from mild infections to life-threatening ...

Generation of Human Alloantigen-specific T Cells from Peripheral Blood

말초 혈액에서 인간 Alloantigen 특정 T 세포의 생성

The study of human T lymphocyte biology often involves examination of responses to activating ligands. T cells recognize and respond to processed peptide ...

Isolation and Flow Cytometric Analysis of Human Endocervical Gamma Delta T Cells

인간의 자궁 경부 감마 델타 T 세포의 분리 및 유세포 분석

The female reproductive tract (FRT) mucosal immune system serves as the first line of defense. Better knowledge of the genital mucosa is therefore ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

Dextran Murine 및 인간의 기본 NK 세포의 Lentiviral 변환 효율 향상

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...

Highly Multiplexed, Super-resolution Imaging of T Cells Using madSTORM

madSTORM을 이용한 T 세포의 고해상도 이미징

Imaging heterogeneous cellular structures using single molecule localization microscopy has been hindered by inadequate localization precision and ...

Assessment of the Synaptic Interface of Primary Human T Cells from Peripheral Blood and Lymphoid Tissue

말 초 혈액 및 림프 조직에서 기본 인간 T 세포의 시 냅 스 인터페이스의 평가

The current understanding of the dynamics and structural features of T-cell synaptic interfaces has been largely determined through the use of ...

Flotation-Based T Cell Isolation, Activation, and Expansion from Human Peripheral Blood Mononuclear Cell Samples Using Microbubbles

부유 기반 T 세포 분리, 활성화 및 마이크로버블을 사용한 인간 말초 혈액 단핵 세포 샘플로부터의 확장

The process of isolating T cells from peripheral blood mononuclear&#160;cells (PBMCs) to establish ex vivo cultures is crucial for research, clinical ...

Differentiation of Functional Osteoclasts from Human Peripheral Blood CD14+ Monocytes

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기능성 파골세포와 인간 말초 혈액 CD14+ 단핵구의 분화

Osteoclasts (OCs) are bone-resorbing cells that play a pivotal role in skeletal development and adult bone remodeling. Several bone disorders are caused ...