Name: hyperinsulinemic-euglycemic clamps in conscious, unrestrained mice
Uploaded: 2011-11-16T12:00:00
Duration: 11 min 10 s
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Ce travail a été soutenu par Grant 5-U24-DK059637-10 au Centre de souris Vanderbilt phénotypage métabolique.

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	<li>Ayala, J. E., Bracy, D. P., McGuinness, O. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Considerations+in+the+design+of+hyperinsulinemic-euglycemic+clamps+in+the+conscious+mouse.">Considerations in the design of hyperinsulinemic-euglycemic clamps in the conscious mouse.</a> Diabetes. 55, 390-397 (2006).</li><li>Berglund, E. D., Li, C. Y., Poffenberger, G., Ayala, J. E., Fueger, P. T., Willis, S. E., Jewell, M. M., Powers, A. C., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+metabolism+in+vivo+in+four+commonly+used+inbred+mouse+strains.">Glucose metabolism in vivo in four commonly used inbred mouse strains.</a> Diabetes. 57, 1790-1799 (2008).</li><li>Niswender, K. D., Shiota, M., Postic, C., Cherrington, A. D., Magnuson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+increased+glucokinase+gene+copy+number+on+glucose+homeostasis+and+hepatic+glucose+metabolism.">Effects of increased glucokinase gene copy number on glucose homeostasis and hepatic glucose metabolism.</a> J. Biol. Chem. 272, 22570-22575 (1997).</li><li>Kim, H. J., Higashimori, T., Park, S. Y., Choi, H., Dong, J., Kim, Y. J., Noh, H. L., Cho, Y. R., Cline, G., Kim, Y. B., Kim, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+interleukin-6+and+-10+on+skeletal+muscle+and+liver+insulin+action+in+vivo.">Differential effects of interleukin-6 and -10 on skeletal muscle and liver insulin action in vivo.</a> Diabetes. 53, 1060-1067 (2004).</li><li>Kim, J. K., Fillmore, J. J., Chen, Y., Yu, C., Moore, I. K., Pypaert, M., Lutz, E. P., Kako, Y., Velez-Carrasco, W., Goldberg, I. J., Breslow, J. L., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-specific+overexpression+of+lipoprotein+lipase+causes+tissue-specific+insulin+resistance.">Tissue-specific overexpression of lipoprotein lipase causes tissue-specific insulin resistance.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 98, 7522-7527 (2001).</li><li>Kim, J. K., Fillmore, J. J., Gavrilova, O., Chao, L., Higashimori, T., Choi, H., Kim, H. J., Yu, C., Chen, Y., Qu, X., Haluzik, M., Reitman, M. L., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+rosiglitazone+on+skeletal+muscle+and+liver+insulin+resistance+in+A-ZIP/F-1+fatless+mice.">Differential effects of rosiglitazone on skeletal muscle and liver insulin resistance in A-ZIP/F-1 fatless mice.</a> Diabetes. 52, 1311-1318 (2003).</li><li>Kim, J. K., Fillmore, J. J., Sunshine, M. J., Albrecht, B., Higashimori, T., Kim, D. W., Liu, Z. X., Soos, T. J., Cline, G. W., O'Brien, W. R., Littman, D. R., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKC-theta+knockout+mice+are+protected+from+fat-induced+insulin+resistance.">PKC-theta knockout mice are protected from fat-induced insulin resistance.</a> J. Clin. Invest. 114, 823-827 (2004).</li><li>Kim, J. K., Gavrilova, O., Chen, Y., Reitman, M. L., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+insulin+resistance+in+A-ZIP/F-1+fatless+mice.">Mechanism of insulin resistance in A-ZIP/F-1 fatless mice.</a> J. Biol. Chem. 275, 8456-8460 (2000).</li><li>Kim, J. K., Gimeno, R. E., Higashimori, T., Kim, H. J., Choi, H., Punreddy, S., Mozell, R. L., Tan, G., Stricker-Krongrad, A., Hirsch, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inactivation+of+fatty+acid+transport+protein+1+prevents+fat-induced+insulin+resistance+in+skeletal+muscle.">Inactivation of fatty acid transport protein 1 prevents fat-induced insulin resistance in skeletal muscle.</a> J. Clin. Invest. 113, 756-763 (2004).</li><li>Kim, J. K., Kim, H. J., Park, S. Y., Cederberg, A., Westergren, R., Nilsson, D., Higashimori, T., Cho, Y. R., Liu, Z. X., Dong, J., Cline, G. W., Enerback, S., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte-specific+overexpression+of+FOXC2+prevents+diet-induced+increases+in+intramuscular+fatty+acyl+CoA+and+insulin+resistance.">Adipocyte-specific overexpression of FOXC2 prevents diet-induced increases in intramuscular fatty acyl CoA and insulin resistance.</a> Diabetes. 54, 1657-1663 (2005).</li><li>Kim, J. K., Kim, Y. J., Fillmore, J. J., Chen, Y., Moore, I., Lee, J., Yuan, M., Li, Z. W., Karin, M., Perret, P., Shoelson, S. E., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+fat-induced+insulin+resistance+by+salicylate.">Prevention of fat-induced insulin resistance by salicylate.</a> J. Clin. Invest. 108, 437-446 (2001).</li><li>Kim, J. K., Michael, P. r. e. v. i. s., Peroni, S. F., Mauvais-Jarvis, O. D., Neschen, F., Kahn, S., Kahn, B. B., R, C., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redistribution+of+substrates+to+adipose+tissue+promotes+obesity+in+mice+with+selective+insulin+resistance+in+muscle.">Redistribution of substrates to adipose tissue promotes obesity in mice with selective insulin resistance in muscle.</a> J. Clin. Invest. 105, 1791-1797 (2000).</li><li>Kim, J. K., Zisman, A., Fillmore, J. J., Peroni, O. D., Kotani, K., Perret, P., Zong, H., Dong, J., Kahn, C. R., Kahn, B. B., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+toxicity+and+the+development+of+diabetes+in+mice+with+muscle-specific+inactivation+of+GLUT4.">Glucose toxicity and the development of diabetes in mice with muscle-specific inactivation of GLUT4.</a> J. Clin. Invest. 108, 153-160 (2001).</li><li>Haluzik, M., Gavrilova, O., LeRoith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor-alpha+deficiency+does+not+alter+insulin+sensitivity+in+mice+maintained+on+regular+or+high-fat+diet:+hyperinsulinemic-euglycemic+clamp+studies.">Peroxisome proliferator-activated receptor-alpha deficiency does not alter insulin sensitivity in mice maintained on regular or high-fat diet: hyperinsulinemic-euglycemic clamp studies.</a> Endocrinology. 145, 1662-1667 (2004).</li><li>Haluzik, M., Yakar, S., Gavrilova, O., Setser, J., Boisclair, Y., LeRoith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+resistance+in+the+liver-specific+IGF-1+gene-deleted+mouse+is+abrogated+by+deletion+of+the+acid-labile+subunit+of+the+IGF-binding+protein-3+complex:+relative+roles+of+growth+hormone+and+IGF-1+in+insulin+resistance.">Insulin resistance in the liver-specific IGF-1 gene-deleted mouse is abrogated by deletion of the acid-labile subunit of the IGF-binding protein-3 complex: relative roles of growth hormone and IGF-1 in insulin resistance.</a> Diabetes. 52, 2483-2489 (2003).</li><li>Haluzik, M. M., Lacinova, Z., Dolinkova, M., Haluzikova, D., Housa, D., Horinek, A., Vernerova, Z., Kumstyrova, T., Haluzik, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+insulin+sensitivity+after+peroxisome+proliferator-activated+receptor-alpha+agonist+treatment+is+accompanied+by+paradoxical+increase+of+circulating+resistin+levels.">Improvement of insulin sensitivity after peroxisome proliferator-activated receptor-alpha agonist treatment is accompanied by paradoxical increase of circulating resistin levels.</a> Endocrinology. 147, 4517-4524 (2006).</li><li>Kim, H., Haluzik, M., Asghar, Z., Yau, D., Joseph, J. W., Fernandez, A. M., Reitman, M. L., Yakar, S., Stannard, B., Heron-Milhavet, L., Wheeler, M. B., LeRoith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor-alpha+agonist+treatment+in+a+transgenic+model+of+type+2+diabetes+reverses+the+lipotoxic+state+and+improves+glucose+homeostasis.">Peroxisome proliferator-activated receptor-alpha agonist treatment in a transgenic model of type 2 diabetes reverses the lipotoxic state and improves glucose homeostasis.</a> Diabetes. 52, 1770-1778 (2003).</li><li>Deibert, D. C., DeFronzo, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epinephrine-induced+insulin+resistance+in+man.">Epinephrine-induced insulin resistance in man.</a> J. Clin. Invest. 65, 717-721 (1980).</li><li>Rizza, R. A., Cryer, P. E., Haymond, M. W., Gerich, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenergic+mechanisms+for+the+effects+of+epinephrine+on+glucose+production+and+clearance+in+man.">Adrenergic mechanisms for the effects of epinephrine on glucose production and clearance in man.</a> J. Clin. Invest. 65, 682-689 (1980).</li><li>Nunemaker, C. S., Wasserman, D. H., McGuinness, O. P., Sweet, I. R., Teague, J. C., Satin, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+secretion+in+the+conscious+mouse+is+biphasic+and+pulsatile.">Insulin secretion in the conscious mouse is biphasic and pulsatile.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 290, 523-529 (2006).</li><li>Nunemaker, C. S., Zhang, M., Wasserman, D. H., McGuinness, O. P., Powers, A. C., Bertram, R., Sherman, A., Satin, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Individual+mice+can+be+distinguished+by+the+period+of+their+islet+calcium+oscillations:+is+there+an+intrinsic+islet+period+that+is+imprinted+in+vivo.">Individual mice can be distinguished by the period of their islet calcium oscillations: is there an intrinsic islet period that is imprinted in vivo.</a> Diabetes. 54, 3517-3522 (2005).</li><li>Halter, J. B., Beard, J. C., Jr, P. o. r. t. e., D, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+function+and+stress+hyperglycemia:+plasma+glucose+and+epinephrine+interaction.">Islet function and stress hyperglycemia: plasma glucose and epinephrine interaction.</a> Am. J. Physiol. 247, 47-52 (1984).</li><li>Jacobson, L., Ansari, T., McGuinness, O. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Counterregulatory+deficits+occur+within+24+h+of+a+single+hypoglycemic+episode+in+conscious,+unrestrained,+chronically+cannulated+mice.">Counterregulatory deficits occur within 24 h of a single hypoglycemic episode in conscious, unrestrained, chronically cannulated mice.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 290, 678-684 (2006).</li><li>Jacobson, L., Ansari, T., Potts, J., McGuinness, O. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucocorticoid-deficient+corticotropin-releasing+hormone+knockout+mice+maintain+glucose+requirements+but+not+autonomic+responses+during+repeated+hypoglycemia.">Glucocorticoid-deficient corticotropin-releasing hormone knockout mice maintain glucose requirements but not autonomic responses during repeated hypoglycemia.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 291, 15-22 (2006).</li><li>Ayala, J. E., Bracy, D. P., James, F. D., Julien, B. M., Wasserman, D. H., Drucker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+glucagon-like+peptide-1+receptor+regulates+endogenous+glucose+production+and+muscle+glucose+uptake+independent+of+its+incretin+action.">The glucagon-like peptide-1 receptor regulates endogenous glucose production and muscle glucose uptake independent of its incretin action.</a> Endocrinology. 150, 1155-1164 (2009).</li><li>Fueger, P. T., Bracy, D. P., Malabanan, C. M., Pencek, R. R., Granner, D. K., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hexokinase+II+overexpression+improves+exercise-stimulated+but+not+insulin-stimulated+muscle+glucose+uptake+in+high-fat-fed+C57BL/6J+mice.">Hexokinase II overexpression improves exercise-stimulated but not insulin-stimulated muscle glucose uptake in high-fat-fed C57BL/6J mice.</a> Diabetes. 53, 306-314 (2004).</li><li>Fueger, P. T., Bracy, D. P., Malabanan, C. M., Pencek, R. R., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distributed+control+of+glucose+uptake+by+working+muscles+of+conscious+mice:+roles+of+transport+and+phosphorylation.">Distributed control of glucose uptake by working muscles of conscious mice: roles of transport and phosphorylation.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 286, 77-84 (2004).</li><li>Fueger, P. T., Heikkinen, S., Bracy, D. P., Malabanan, C. M., Pencek, R. R., Laakso, M., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hexokinase+II+partial+knockout+impairs+exercise-stimulated+glucose+uptake+in+oxidative+muscles+of+mice.">Hexokinase II partial knockout impairs exercise-stimulated glucose uptake in oxidative muscles of mice.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 285, 958-963 (2003).</li><li>Fueger, P. T., Hess, H. S., Posey, K. A., Bracy, D. P., Pencek, R. R., Charron, M. J., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+exercise-stimulated+muscle+glucose+uptake+by+GLUT4+is+dependent+on+glucose+phosphorylation+capacity+in+the+conscious+mouse.">Control of exercise-stimulated muscle glucose uptake by GLUT4 is dependent on glucose phosphorylation capacity in the conscious mouse.</a> J. Biol. Chem. , (2004).</li><li>Fueger, P. T., Li, C. Y., Ayala, J. E., Shearer, J., Bracy, D. P., Charron, M. J., Rottman, J. N., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+kinetics+and+exercise+tolerance+in+mice+lacking+the+GLUT4+glucose+transporter.">Glucose kinetics and exercise tolerance in mice lacking the GLUT4 glucose transporter.</a> J. Physiol. 582, 801-812 (2007).</li><li>Shearer, J., Coenen, K. R., Pencek, R. R., Swift, L. L., Wasserman, D. H., Rottman, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+chain+fatty+acid+uptake+in+vivo:+comparison+of+[125I]-BMIPP+and+[3H]-bromopalmitate.">Long chain fatty acid uptake in vivo: comparison of [125I]-BMIPP and [3H]-bromopalmitate.</a> Lipids. 43, 703-711 (2008).</li></ol>

Pas de conflits d&#39;intérêt déclarés.

La pince hyperinsulinémique-euglycémique, ou pince à l&#39;insuline, est largement considéré comme le «gold standard» pour évaluer la méthode action de l&#39;insuline in vivo. Cette technique a été appliquée à plusieurs espèces, y compris les humains, les chiens, les rats et les souris. Compte tenu du nombre croissant de modèles de souris transgéniques pour les troubles métaboliques, la miniaturisation de la technique pour une utilisation chez la souris a apporté des progrès significatifs à la recherche métabolique. Alors que les concepts derrière la pince d&#39;insuline sont simples, dans la pratique, il existe différentes approches pour réaliser des expériences de serrage d&#39;insuline. Ce n&#39;est pas un point insignifiant, puisque la manière dont l&#39;expérience est réalisée affecte les résultats obtenus 1. Nous présentons ici le protocole utilisé par le MMPC Vanderbilt. La distinction essentielle entre notre protocole et celle des autres est que nous utilisons un cathéter artériel pour obtenir des échantillons de sang. Ceci est en contraste avec l&#39;approche plus largement utilisé de l&#39;OBTaining échantillons de sang en coupant l&#39;extrémité de la queue 4, 7, 11, 12, 14-17. L&#39;avantage de l&#39;échantillonnage à partir d&#39;un cathéter artériel est que l&#39;expérience est menée dans une souris conscient et débridée. L&#39;échantillonnage de la queue nécessite souvent retenue et augmente les indices de stress lorsque des échantillons de sang sont grands acquis 1. Les hormones du stress stimulent la production de glucose endogène et altérer l&#39;élimination du glucose 18, 19, pouvant donner l&#39;apparence d&#39;un phénotype résistant à l&#39;insuline. L&#39;échantillonnage de la queue coupée peut exiger spéciales de protection des animaux institutionnel et l&#39;approbation du Comité Utilisez raison de son caractère stressant. La procédure de cathétérisme artériel a été développé pour éviter le stress à la souris de couper la queue. Un aspect clé de l&#39;exécution pinces d&#39;insuline est la capacité à maintenir l&#39;euglycémie. Il n&#39;y a pas d&#39;algorithmes qui peuvent prédire correctement la manière dont le RIF doit être ajustée en fonction des lectures de glucose sanguin. Comme la chirurgie,personnel de mener des expériences de serrage d&#39;insuline deviendra compétent dans le maintien de l&#39;euglycémie raisonnables que par l&#39;expérience. Il est important de noter qu&#39;en raison de leur taux métabolique plus élevé des données obtenues à partir d&#39;études de la souris seront intrinsèquement bruyants. Cela rend la présentation complète des données, y compris les temps de glucose et de la RGI et les valeurs absolues de l&#39;insuline plasmatique, Endora, Rd et Rg crucial pour la capacité de tout lecteur à interpréter les résultats. Le taux élevé de flux de glucose chez la souris (environ 5 fois plus élevé que le taux chez les humains) justifient une fréquence élevée de l&#39;échantillonnage du glucose. Alors que le volume sanguin de la souris est limitée, une fréquence d&#39;échantillonnage minimum d&#39;une fois toutes les 10 minutes est nécessaire pour être certain que d&#39;une pince adéquate a été atteint. Comme le montre la figure 4, les niveaux d&#39;insuline pince peut être différent entre les groupes. Des facteurs tels que les interventions alimentation, les manipulations transgéniques ou des différences dans les souches de fond peut affecter le SAFles niveaux d&#39;insuline Ting, qui peut ensuite affecter les niveaux d&#39;insuline pince. Interprétation des résultats lorsque les niveaux d&#39;insuline sont différents pince peut être problématique. Cela peut être expérimentalement résolu par des expériences pilotes pour sélectionner la vitesse de perfusion d&#39;insuline qui permettent d&#39;atteindre des niveaux d&#39;insuline équivalente pince entre les groupes. Alternativement, la somatostatine peuvent être utilisés pour inhiber la sécrétion de l&#39;hormone du pancréas, l&#39;insuline et le glucagon peut être remplacée au taux expérimentalement contrôlé. Cette dernière approche est plus communément fait dans pinces d&#39;insuline chez les rats que les souris. Si ces approches expérimentales ne sont pas prises, le RIF état ​​stationnaire peut être normalisé au niveau d&#39;insuline pince, ou un indice sensibilité à l&#39;insuline (S I) peuvent être dérivées à partir des données que pince S I = GIR / (G • ΔI), où G est la concentration de glucose en régime permanent et ΔI est la différence entre le jeûne et les concentrations d&#39;insuline pince. Une hypothèse à l&#39;autre approche est que le niveau d&#39;insuline pince atteint estdans la plage où sensibilité à l&#39;insuline est linéairement liée au niveau d&#39;insuline en fonction du groupe étudié. Cette dernière hypothèse pourrait ne pas s&#39;appliquer si l&#39;on compare résistants à l&#39;insuline et les groupes sensibles à l&#39;insuline. Idéalement, une courbe de réponse dose d&#39;insuline doit être généré pour sélectionner la perfusion d&#39;insuline appropriée. Toutefois, en raison de l&#39;exigence d&#39;expériences supplémentaires, ce qui est rarement fait. La polyvalence fournies par cathétérisme artériel s&#39;étend à des approches expérimentales delà pinces euglycémique. Par exemple, les colliers hyperglycémique, dans lequel le glucose est infusée à un taux variable afin de maintenir l&#39;hyperglycémie par rapport à la glycémie à jeun, peut être utilisé pour évaluer la fonction pancréatique endogène in vivo 2, 20, 21. La mesure de la phase de sécrétion d&#39;insuline première fois durant ce test nécessite l&#39;acquisition fréquente des échantillons de sang (soit toutes les minutes 2-5), ce qui n&#39;est pas réalisable lors de l&#39;obtention des échantillons provenant de l&#39;extrémité de la queue. Par ailleurs,catécholamines élevées résultant de l&#39;échantillonnage queue peut nuire à la sécrétion d&#39;insuline et améliorer la sécrétion de glucagon 22. Le protocole de serrage d&#39;insuline peut également être modifiée pour prévoir des niveaux de glucose de tomber à l&#39;hypoglycémie par rapport à l&#39;évaluation de contre-régulation de réponse de 2, 23, 24. Cathétérisme artériel peut aussi être utilisé pour évaluer la dynamique du métabolisme du glucose durant l&#39;exercice 25-30. Ce chiffre est nettement plus avantageux que les approches conventionnelles réalisées à des moments unique de pré-et post-exercice ou ex vivo dans les muscles isolés. Les techniques présentées ici peuvent aussi être utilisés pour évaluer non seulement le glucose, mais aussi le métabolisme des acides gras à 31.

hyperinsulinemic-euglycemic clamps in conscious, unrestrained mice

Diabète de type 2 est caractérisé par un défaut dans l&#39;action d&#39;insuline. La pince hyperinsulinémique-euglycémique, ou pince à l&#39;insuline, est largement considéré comme le «gold standard» pour évaluer la méthode action de l&#39;insuline in vivo. Lors d&#39;une pince à l&#39;insuline, l&#39;hyperinsulinémie est réalisé par une perfusion d&#39;insuline constant. Euglycémie est maintenue par une perfusion de glucose concomitante à un taux variable. Ce taux de glucose variables perfusion (GIR) est déterminée en mesurant la glycémie à intervalles brefs long de l&#39;expérience et en ajustant le RIF en conséquence. Le RIF est indicatif de l&#39;action d&#39;insuline du corps entier, comme des souris avec action de l&#39;insuline améliorée exigent une plus grande RIF. La pince d&#39;insuline peuvent intégrer l&#39;administration de 2 isotopique [14 C] désoxyglucose pour évaluer tissu-spécifique et la captation du glucose [3 - 3 H] glucose pour évaluer la capacité de l&#39;insuline à supprimer le taux d&#39;apparition de glucose endogène (Endora), un marqueur de production hépatique de glucose et de stimuler lataux de disparition du glucose du corps entier (Rd). La miniaturisation de la pince d&#39;insuline pour une utilisation dans des modèles murins de maladies métaboliques génétiques a permis des avancées significatives dans la recherche de diabète. Méthodes pour effectuer des colliers d&#39;insuline varient entre laboratoires. Il est important de noter que la manière dont une pince d&#39;insuline est effectuée peuvent affecter significativement les résultats obtenus. Nous avons publié une évaluation exhaustive des approches différentes pour effectuer pinces d&#39;insuline chez des souris conscientes 1 ainsi que l&#39;évaluation de la réponse métabolique de quatre couramment utilisés souches de souris consanguines en utilisant des techniques de serrage différents 2. Nous présentons ici un protocole pour la réalisation de l&#39;insuline sur pinces consciente, souris effrénée développé par le Centre Vanderbilt souris métaboliques phénotypage (MMPC; URL: www.mc.vanderbilt.edu / MMPC). Cela comprend une description de la méthode d&#39;implantation des cathéters utilisés lors de la pince d&#39;insuline. Le protocole employé par leVanderbilt MMPC utilise un système unique 3 deux-cathéter. Un cathéter est inséré dans la veine jugulaire pour des infusions. Un deuxième cathéter est inséré dans l&#39;artère carotide, ce qui permet de prélèvement de sang, sans la nécessité de restreindre ou de manipuler la souris. Cette technique offre un avantage important à la méthode la plus courante pour obtenir des échantillons de sang pendant pinces insuline qui est de l&#39;échantillon de l&#39;extrémité de la queue coupée. Contrairement à cette dernière méthode, l&#39;échantillonnage à partir d&#39;un cathéter artériel n&#39;est pas stressant de la souris 1. Nous décrivons également des méthodes d&#39;utilisation des perfusions traceurs isotopiques pour évaluer action de l&#39;insuline des tissus spécifiques. Nous fournissons aussi des directives pour la présentation appropriée des résultats obtenus à partir pinces insuline.

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Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

La pince hyperinsulinémique-euglycémique, ou pince à l&#39;insuline, est le gold standard pour évaluer action de l&#39;insuline<em&gt; In vivo</em&gt;. Une méthode pour effectuer des colliers d&#39;insuline chez la souris est décrite. Cela inclut une méthode pour cathétérisme artériel qui permet des expériences à effectuer dans conscient, souris sans retenue avec un stress minimal.

Hyperinsulinémique euglycémique-pinces dans Conscient, Souris illimités

Type 2 diabetes is characterized by a defect in insulin action. The hyperinsulinemic-euglycemic clamp, or insulin clamp, is widely considered the "gold ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Programmed Electrical Stimulation in Mice

Programmé stimulation électrique chez la souris

Genetically-modified mice have emerged as a preferable animal model to study the molecular mechanisms underlying conduction abnormalities, atrial and ...

Recherche

Médecine

Transthoracic Echocardiography in Mice

L&#39;échocardiographie transthoracique chez la souris

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp in the Conscious Rat

Hyperinsulinémique euglycémique-Clamp chez le rat conscient

Type 2 diabetes (T2D) is rapidly rising in prevalence. Characterized by either inadequate insulin production or the inability to utilize insulin produced, ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Infusions de l&#39;artère carotide pour pharmacocinétiques et pharmacodynamiques Analyse des taxanes chez la souris

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Évaluation transcutanée de la fonction rénale dans Rongeurs Conscious

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Nouvelle approche pour l’enregistrement simultané de l’activité nerveuse sympathique rénale et de la pression artérielle avec une perfusion intraveineuse, conscients, souris sans retenue.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Assessment of Respiratory Function in Conscious Mice by Double-chamber Plethysmography

Évaluation de la fonction respiratoire chez des souris conscientes par pléthysmographie Double-chambre

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to ...

Repeated Orotracheal Intubation in Mice

Intubation orotracheal répétée chez les souris

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ...

Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice

Implantation d’ECG télémétrique et de transmetteurs de pression artérielle combinés pour déterminer la sensibilité spontanée aux baroréflexes chez des souris conscientes

Blood pressure (BP) and heart rate (HR) are both controlled by the autonomic nervous system (ANS) and are closely intertwined due to reflex mechanisms. ...

Multi-system Monitoring for Identification of Seizures, Arrhythmias and Apnea in Conscious Restrained Rabbits

Surveillance multi-systèmes pour l’identification des crises, des arythmies et de l’apnée chez les lapins retenus conscients

Patients with ion channelopathies are at a high risk of developing seizures and fatal cardiac arrhythmias. There is a higher prevalence of heart disease ...