1. Instrumentation 
<ol>
<li>To measure the response of olfactory sensory neurons to photolysis of caged compounds we use a flash lamp in combination with a typical patch-clamp recording system including: a patch-clamp amplifier, a recording electrode and a reference electrode connected to the head-stage of a patch-clamp amplifier, a digitizer, a computer, software for data acquisition, micro-manipulators, an epifluorescence microscope, a perfusion system, an anti-vibration table and a Faraday cage (Figure 2).</li>
<li...

<ol>
	<li>Ellis-Davies, G. C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caged+compounds:+photorelease+technology+for+control+of+cellular+chemistry+and+physiology.">Caged compounds: photorelease technology for control of cellular chemistry and physiology.</a> Nat. Methods. 4, 619-628 (2007).</li><li>Pifferi, S., Boccaccio, A., Menini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclic+nucleotide-gated+ion+channels+in+sensory+transduction.">Cyclic nucleotide-gated ion channels in sensory transduction.</a> FEBS Lett. 580, 2853-2859 (2006).</li><li>Bozza, T. C., Kauer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odorant+response+properties+of+convergent+olfactory+receptor+neurons.">Odorant response properties of convergent olfactory receptor neurons.</a> J. Neurosci. 18, 4560-4569 (1998).</li><li>Hagen, V., Bendig, J., Frings, S., Eckardt, T., Helm, S., Reuter, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+Efficient+and+Ultrafast+Phototriggers+for+cAMP+and+cGMP+by+Using+Long-Wavelength+UV/Vis-Activation.">Highly Efficient and Ultrafast Phototriggers for cAMP and cGMP by Using Long-Wavelength UV/Vis-Activation.</a> Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 40, 1045-1048 (2001).</li><li>Kaplan, J. H., Ellis-Davies, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photolabile+chelators+for+the+rapid+photorelease+of+divalent+cations.">Photolabile chelators for the rapid photorelease of divalent cations.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 85, 6571-6575 (1988).</li><li>Rapp, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flash+lamp-based+irradiation+of+caged+compounds.">Flash lamp-based irradiation of caged compounds.</a> Methods. Enzymol. 291, 202-222 (1998).</li><li>Gurney, A. M., Montenegro, I., Queiros, M. A., Daschbach, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flash+photolysis+of+caged+compounds.">Flash photolysis of caged compounds.</a> Microelectrodes: Theory and Applications. , (1991).</li><li>Lagostena, L., Menini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-cell+recordings+and+photolysis+of+caged+compounds+in+olfactory+sensory+neurons+isolated+from+the+mouse.">Whole-cell recordings and photolysis of caged compounds in olfactory sensory neurons isolated from the mouse.</a> Chem. Senses. 28, 705-716 (2003).</li><li>Boccaccio, A., Lagostena, L., Hagen, V., Menini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+adaptation+in+mouse+olfactory+sensory+neurons+does+not+require+the+activity+of+phosphodiesterase.">Fast adaptation in mouse olfactory sensory neurons does not require the activity of phosphodiesterase.</a> J. Gen. Physiol. 128, 171-184 (2006).</li><li>Boccaccio, A., Menini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+development+of+cyclic+nucleotide-gated+and+Ca2++-activated+Cl-+currents+in+isolated+mouse+olfactory+sensory+neurons.">Temporal development of cyclic nucleotide-gated and Ca2+ -activated Cl- currents in isolated mouse olfactory sensory neurons.</a> J. Neurophysiol. 98, 153-160 (2007).</li><li>Sagheddu, C., Boccaccio, A., Dibattista, M., Montani, G., Tirindelli, R., Menini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+concentration+jumps+reveal+dynamic+ion+selectivity+of+calcium-activated+chloride+currents+in+mouse+olfactory+sensory+neurons+and+TMEM16B-transfected+HEK+293T+cells.">Calcium concentration jumps reveal dynamic ion selectivity of calcium-activated chloride currents in mouse olfactory sensory neurons and TMEM16B-transfected HEK 293T cells.</a> J. Physiol. 588, 4189-4204 (2010).</li><li>Balana, B., Taylor, N., Slesinger, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutagenesis+and+Functional+Analysis+of+Ion+Channels+Heterologously+Expressed+in+Mammalian+Cells.">Mutagenesis and Functional Analysis of Ion Channels Heterologously Expressed in Mammalian Cells.</a> J. Vis. Exp. (44), e2189-e2189 (2010).</li><li>Cygnar, K. D., Stephan, A. B., Zhao, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+Responses+of+Mouse+Olfactory+Sensory+Neurons+Using+the+Air-phase+Electroolfactogram+Recording.">Analyzing Responses of Mouse Olfactory Sensory Neurons Using the Air-phase Electroolfactogram Recording.</a> J. Vis. Exp. (37), e1850-e1850 (2010).</li><li>Bernardinelli, Y., Haeberli, C., Chatton, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flash+photolysis+using+a+light+emitting+diode:+an+efficient,+compact,+and+affordable+solution.">Flash photolysis using a light emitting diode: an efficient, compact, and affordable solution.</a> Cell. Calcium. 37, 565-572 (2005).</li></ol>

パッチクランプ記録と組み合わせケージド化合物のフラッシュの光分解は、生理活性分子の濃度の内側と外側の細胞の両方の急激かつ局所ジャンプを取得するために便利なテクニックです。ケージcompounds1のいくつかの種類が合成され、そしてこの技術は、アクティブまたは利用可能なケージド化合物11のいくつかの光分解によって変調することができるイオンチャネルを発現する培?...

<table border="1"><tbody><tr><th>機器の</th><th>会社</th><th>カタログ番号</th><th>コメント</th></tr><tr><td>顕微鏡にアダプターモジュールフラッシュランプ</td><td>ラップオプトエレクトロニクス</td><td>フラッシュキューブ70 </td><td></td></tr><tr><td>空気テーブル</td><td> TMC </td><td> MICRO - G 63から534 </td><td></td></tr><tr><td>デジタイザー</td><td>軸索インスツルメンツ</td><td> Digidata 1322A </td><td></td></tr><tr><td>データ収集ソフトウェア</td><td>軸索インスツルメンツ</td><td> pClamp 8 </td><td></td></tr><tr><td>データ解析ソフトウェア</td><td> WaveMetrics社</td><td>イゴール</td><td></td></tr><tr><td>アダプタモジュールのためのミラー</td><td>ラップオプトエレクトロニクス</td><td> M70/100 </td><td></td></tr><tr><td>電極ホルダー</td><td>軸索インスツルメンツ</td><td> 1 - HL - U </td><td></td></tr><tr><td>ファラデーのかご</td><td>カスタムは行わ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>フィルターキューブ</td><td>オリンポス</td><td> U - MWU </td><td>励起フィルターは削除</td></tr><tr><td>フラッシュランプ</td><td>ラップオプトエレクトロニクス</td><td> JML - C2 </td><td></td></tr><tr><td>鉗子デュモン＃55 </td><td>世界の精密機器</td><td> 14099 </td><td></td></tr><tr><td>ガラスキャピラリー</td><td>世界の精密機器</td><td> PG10165 - 4 </td><td></td></tr><tr><td>ガラスボトムディッシュ</td><td>世界の精密機器</td><td> FD35 - 100 </td><td></td></tr><tr><td>照明器</td><td>オリンポス</td><td>ハイライト3100 </td><td></td></tr><tr><td>倒立顕微鏡</td><td>オリンポス</td><td> IX70 </td><td></td></tr><tr><td>マイクロマニピュレータ</td><td> Luigs＆ノイマン</td><td> SM I </td><td></td></tr><tr><td>マイクロピペットプラー</td><td>ナリシゲ</td><td> PP - 830 </td><td></td></tr><tr><td>モニタ</td><td> HesaVision </td><td> MTB - 01 </td><td></td></tr><tr><td> NDフィルター</td><td>オメガオプティカル</td><td>変化</td><td></td></tr><tr><td>客観100X </td><td>ツァイス</td><td> Fluar 440285 </td><td>ツァイスやOlympuのどちらかの</td></tr><tr><td>客観100X </td><td>オリンポス</td><td> UPLFLN 100XOI2 </td><td>ツァイスやオリンパスのどちらか</td></tr><tr><td>光学UVショートパスフィルター</td><td>ラップオプトエレクトロニクス</td><td> SP400 </td><td></td></tr><tr><td>パッチクランプアンプ</td><td>軸索インスツルメンツ</td><td> Axopatch 200B </td><td></td></tr><tr><td>フォトダイオードの組立</td><td>ラップオプトエレクトロニクス</td><td> PDA </td><td></td></tr><tr><td>石英ライトガイド</td><td>ラップオプトエレクトロニクス</td><td>変化</td><td>我々は、600μmの直径を使用してください</td></tr><tr><td>銀線</td><td>世界の精密機器</td><td> AGT1025 </td><td></td></tr><tr><td>シルバーグランドペレット</td><td>ワーナーの楽器</td><td> 64から1309 </td><td></td></tr><tr><td>キセノン​​アーク燈</td><td>ラップオプトエレクトロニクス</td><td> XBL - JML </td><td></td></tr></tbody></table> <table border="1"><tbody><tr><th>試薬</th><th>会社</th><th>カタログ番号</th></tr><tr><td> BCMCM -ケージドcAMPの</td><td> BioLog </td><td> B016 </td></tr><tr><td>ウシ血清アルブミン（BSA） </td><td>シグマ</td><td> A8806 </td></tr><tr><td>塩化カルシウム標準液0.1 M </td><td>フルカ</td><td> 21059 </td></tr><tr><td>ケージのCa：DMNP - EDTA </td><td>インビトロジェン</td><td> D6814 </td></tr><tr><td>システイン</td><td>シグマ</td><td> C9768 </td></tr><tr><td>コンカナバリンタイプV（ConA） </td><td>シグマ</td><td> C7275 </td></tr><tr><td>塩化セシウム</td><td>シグマ</td><td> C4036 </td></tr><tr><td> DMSO </td><td>シグマ</td><td> D8418 </td></tr><tr><td> DNアーゼI </td><td>シグマ</td><td> D4527 </td></tr><tr><td> EDTA </td><td>シグマ</td><td> E9884 </td></tr><tr><td> EGTA </td><td>シグマ</td><td> E4378 </td></tr><tr><td>グルコース</td><td>シグマ</td><td> G5767 </td></tr><tr><td> HEPES </td><td>シグマ</td><td> H3375 </td></tr><tr><td>塩化カリウム</td><td>シグマ</td><td> P3911 </td></tr><tr><td> KOH </td><td>シグマ</td><td> P1767 </td></tr><tr><td>ロイペプチン</td><td>シグマ</td><td> L0649 </td></tr><tr><td> MgCl2を</td><td>フルカ</td><td> 63020 </td></tr><tr><td>パパイン</td><td>シグマ</td><td> P3125 </td></tr><tr><td>ポリ- L -リジン</td><td>シグマ</td><td> P1274 </td></tr><tr><td> NaClを</td><td>シグマ</td><td> S9888 </td></tr><tr><td> NaOHで</td><td>シグマ</td><td> S5881 </td></tr><tr><td> NaPyruvate </td><td>シグマ</td><td> P2256 </td></tr></tbody></table>

flash photolysis of caged compounds in the cilia of olfactory sensory  neurons

ケージド化合物の光分解は、様々な生理活性化合物1の濃度の急激かつローカライズされた増加の生産を可能にする。ケージド化合物は紫外光のフラッシュと壊れる可能性の化学ケージで生理的に非アクティブに分子である。ここでは、解離マウス嗅神経細胞における嗅覚情報伝達の研究のためのケージド化合物の光分解を組み合わせたパッチクランプ記録を取得する方法を示します。嗅覚情報伝達のプロセス（図1）の受容体に結合する嗅覚は、環状ヌクレオチド依存性（CNG）チャネル2を開くcAMPの増加につながる嗅神経細胞の繊毛で行われます。 CNGチャネルを通じて、CAエントリは、Ca活性化塩素チャネルを活性化する。我々は、マウス嗅上皮3、どのようにケージキャンプ4の光分解またはCa 5をケージでCNGチャネルまたはCa活性化塩素チャネルを活性化するから神経細胞を分離する方法を示しています&lt;/&gt;のSup。我々は、パッチクランプ記録をホールセル電圧クランプの設定8-11の電流を測定するために取られている間、おりから出すのcAMPやCaに毛様体部分に紫外線が点滅を適用するにはフラッシュランプ6,7を使用してください。

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Flash Photolysis of Caged Compounds in the Cilia of Olfactory Sensory  Neurons

ケージド化合物の光分解は、様々な生理活性化合物の濃度の急激かつローカライズされた増加の生産を可能にする。ここでは、解離マウス嗅神経細胞における嗅覚情報伝達の研究のためのケージドcAMPまたはケージのCaの光分解を組み合わせたパッチクランプ記録を取得する方法を示します。

嗅神経細胞の繊毛のケージド化合物のフラッシュフォトリシス

Photolysis of caged compounds allows the production of rapid and localized increases in the concentration of various physiologically active compounds1. ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Analyzing Responses of Mouse Olfactory Sensory Neurons Using the Air-phase Electroolfactogram Recording

空気相Electroolfactogram記録を用いたマウス嗅覚神経細胞の分析応答

Animals depend on olfaction for many critical behaviors, such as finding food sources, avoiding predators, and identifying conspecifics for mating and ...

Live-imaging of PKC Translocation in Sf9 Cells and in Aplysia Sensory Neurons

Sf9細胞でとアメフラシ感覚ニューロンにおけるPKC転座のライブイメージング

Protein kinase Cs (PKCs) are serine threonine kinases that play a central role in regulating a wide variety of cellular processes such as cell growth and ...

Lentivirus-mediated Genetic Manipulation and Visualization of Olfactory Sensory Neurons in vivo

Lentivirus-mediated Genetic Manipulation and Visualization of Olfactory Sensory Neurons in vivo

嗅神経細胞のレンチウイルスを介した遺伝子操作と可視化 in vivoで</em

Development of a precise olfactory circuit relies on accurate projection of olfactory sensory neuron (OSN) axons to their synaptic 
targets in the ...

Intracellular Recording, Sensory Field Mapping, and Culturing Identified Neurons in the Leech, Hirudo medicinalis

Intracellular Recording, Sensory Field Mapping, and Culturing Identified Neurons in the Leech, Hirudo medicinalis

細胞内記録、感覚野のマッピング、および培養は、リーチのニューロンを同定しヒルドmedicinalis</i

The freshwater leech, Hirudo medicinalis, is a versatile model organism that has been used to address scientific questions in the fields of ...

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

における嗅覚受容ニューロンのホールマウント免疫標識<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;アンテナ

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this ...

Whole Mount Labeling of Cilia in the Main Olfactory System of Mice

マウスの主嗅覚系における繊毛のホールマウントのラベリング

The mouse olfactory system comprises 6-10 million olfactory sensory neurons in the epithelium lining the nasal cavity. Olfactory neurons extend a single ...

Perforated Patch-clamp Recording of Mouse Olfactory Sensory Neurons in Intact Neuroepithelium: Functional Analysis of Neurons Expressing an Identified Odorant Receptor

無傷の神経上皮におけるマウス嗅細胞の穿孔パッチクランプ記録：同定された嗅覚受容体を発現するニューロンの機能解析

Analyzing the physiological responses of olfactory sensory neurons (OSN) when stimulated with specific ligands is critical to understand the basis of ...

Live Imaging of the Ependymal Cilia in the Lateral Ventricles of the Mouse Brain

マウスの脳の側脳室における上衣繊毛のライブイメージング

Multiciliated ependymal cells line the ventricles in the adult brain. Abnormal function or structure of ependymal cilia is associated with various ...

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

のコンピュータ追跡することによってアッセイ嗅覚行動<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt; 4象限オルファクトメーターで

A key challenge in neurobiology is to understand how neural circuits function to guide appropriate animal behaviors. Drosophila melanogaster is an ...

Physiological Preparation of Hair Cells from the Sacculus of the American Bullfrog (Rana catesbeiana)

Physiological Preparation of Hair Cells from the Sacculus of the American Bullfrog Rana catesbeiana

ウシガエルの球形嚢（からの有毛細胞の生理的な準備<em&gt;ウシガエル</em&gt;）

The study of hearing and balance rests upon insights drawn from biophysical studies of model systems. One such model, the sacculus of the American ...