1. Instrumentation 
<ol>
<li>To measure the response of olfactory sensory neurons to photolysis of caged compounds we use a flash lamp in combination with a typical patch-clamp recording system including: a patch-clamp amplifier, a recording electrode and a reference electrode connected to the head-stage of a patch-clamp amplifier, a digitizer, a computer, software for data acquisition, micro-manipulators, an epifluorescence microscope, a perfusion system, an anti-vibration table and a Faraday cage (Figure 2).</li>
<li...

<ol>
	<li>Ellis-Davies, G. C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caged+compounds:+photorelease+technology+for+control+of+cellular+chemistry+and+physiology.">Caged compounds: photorelease technology for control of cellular chemistry and physiology.</a> Nat. Methods. 4, 619-628 (2007).</li><li>Pifferi, S., Boccaccio, A., Menini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclic+nucleotide-gated+ion+channels+in+sensory+transduction.">Cyclic nucleotide-gated ion channels in sensory transduction.</a> FEBS Lett. 580, 2853-2859 (2006).</li><li>Bozza, T. C., Kauer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odorant+response+properties+of+convergent+olfactory+receptor+neurons.">Odorant response properties of convergent olfactory receptor neurons.</a> J. Neurosci. 18, 4560-4569 (1998).</li><li>Hagen, V., Bendig, J., Frings, S., Eckardt, T., Helm, S., Reuter, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+Efficient+and+Ultrafast+Phototriggers+for+cAMP+and+cGMP+by+Using+Long-Wavelength+UV/Vis-Activation.">Highly Efficient and Ultrafast Phototriggers for cAMP and cGMP by Using Long-Wavelength UV/Vis-Activation.</a> Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 40, 1045-1048 (2001).</li><li>Kaplan, J. H., Ellis-Davies, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photolabile+chelators+for+the+rapid+photorelease+of+divalent+cations.">Photolabile chelators for the rapid photorelease of divalent cations.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 85, 6571-6575 (1988).</li><li>Rapp, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flash+lamp-based+irradiation+of+caged+compounds.">Flash lamp-based irradiation of caged compounds.</a> Methods. Enzymol. 291, 202-222 (1998).</li><li>Gurney, A. M., Montenegro, I., Queiros, M. A., Daschbach, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flash+photolysis+of+caged+compounds.">Flash photolysis of caged compounds.</a> Microelectrodes: Theory and Applications. , (1991).</li><li>Lagostena, L., Menini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-cell+recordings+and+photolysis+of+caged+compounds+in+olfactory+sensory+neurons+isolated+from+the+mouse.">Whole-cell recordings and photolysis of caged compounds in olfactory sensory neurons isolated from the mouse.</a> Chem. Senses. 28, 705-716 (2003).</li><li>Boccaccio, A., Lagostena, L., Hagen, V., Menini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+adaptation+in+mouse+olfactory+sensory+neurons+does+not+require+the+activity+of+phosphodiesterase.">Fast adaptation in mouse olfactory sensory neurons does not require the activity of phosphodiesterase.</a> J. Gen. Physiol. 128, 171-184 (2006).</li><li>Boccaccio, A., Menini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+development+of+cyclic+nucleotide-gated+and+Ca2++-activated+Cl-+currents+in+isolated+mouse+olfactory+sensory+neurons.">Temporal development of cyclic nucleotide-gated and Ca2+ -activated Cl- currents in isolated mouse olfactory sensory neurons.</a> J. Neurophysiol. 98, 153-160 (2007).</li><li>Sagheddu, C., Boccaccio, A., Dibattista, M., Montani, G., Tirindelli, R., Menini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+concentration+jumps+reveal+dynamic+ion+selectivity+of+calcium-activated+chloride+currents+in+mouse+olfactory+sensory+neurons+and+TMEM16B-transfected+HEK+293T+cells.">Calcium concentration jumps reveal dynamic ion selectivity of calcium-activated chloride currents in mouse olfactory sensory neurons and TMEM16B-transfected HEK 293T cells.</a> J. Physiol. 588, 4189-4204 (2010).</li><li>Balana, B., Taylor, N., Slesinger, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutagenesis+and+Functional+Analysis+of+Ion+Channels+Heterologously+Expressed+in+Mammalian+Cells.">Mutagenesis and Functional Analysis of Ion Channels Heterologously Expressed in Mammalian Cells.</a> J. Vis. Exp. (44), e2189-e2189 (2010).</li><li>Cygnar, K. D., Stephan, A. B., Zhao, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+Responses+of+Mouse+Olfactory+Sensory+Neurons+Using+the+Air-phase+Electroolfactogram+Recording.">Analyzing Responses of Mouse Olfactory Sensory Neurons Using the Air-phase Electroolfactogram Recording.</a> J. Vis. Exp. (37), e1850-e1850 (2010).</li><li>Bernardinelli, Y., Haeberli, C., Chatton, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flash+photolysis+using+a+light+emitting+diode:+an+efficient,+compact,+and+affordable+solution.">Flash photolysis using a light emitting diode: an efficient, compact, and affordable solution.</a> Cell. Calcium. 37, 565-572 (2005).</li></ol>

패치 - 클램프 녹음과 함께 갇힌 화합물의 플래시 광분해은 생리학적으로 활성 분자 내부와 외부에서 세포 모두의 농도에 신속하고 현지 점프를 얻을 수있는 유용한 기술입니다. 갇힌 compounds1 여러 종류의 합성되었으며,이 기술이 활성화하거나 사용 가능한 갇힌 화합물 11 일부 광분해에 의해 변조된 수있는 이온 채널을 표현 교양 세포를 포함한 세포의 다양한 유형에 적용할 수 있습니다...

<table border="1"><tbody><tr><th> 장비 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 댓글 </th></tr><tr><td> 현미경으로 어댑터 모듈 플래시 램프 </td><td> Rapp 광전자 </td><td> FlashCube 70 </td><td></td></tr><tr><td> 에어 테이블 </td><td> TMC </td><td> MICRO - G 63-534 </td><td></td></tr><tr><td> 디지타이저 </td><td> 축삭 인 스트 루먼트 </td><td> Digidata 1322A </td><td></td></tr><tr><td> 데이터 수집 소프트웨어 </td><td> 축삭 인 스트 루먼트 </td><td> pClamp 8 </td><td></td></tr><tr><td> 데이터 분석 소프트웨어 </td><td> WaveMetrics </td><td> 이고르 </td><td></td></tr><tr><td> 어댑터 모듈 미러 </td><td> Rapp 광전자 </td><td> M70/100 </td><td></td></tr><tr><td> 전극 홀더 </td><td> 축삭 인 스트 루먼트 </td><td> 1 - HL - U </td><td></td></tr><tr><td> 패러데이의 새장 </td><td> 사용자가 만든 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 필터 큐브 </td><td> 올림포스 산 </td><td> U - MWU </td><td> 여기 필터를 제거 </td></tr><tr><td> 섬광등 </td><td> Rapp 광전자 </td><td> JML - C2 </td><td></td></tr><tr><td> 집게 뒤몽 # 55 </td><td> 세계 정밀 계측기 </td><td> 14,099 </td><td></td></tr><tr><td> 유리 모세관 </td><td> 세계 정밀 계측기 </td><td> PG10165 - 4 </td><td></td></tr><tr><td> 유리 바닥 요리 </td><td> 세계 정밀 계측기 </td><td> FD35 - 100 </td><td></td></tr><tr><td> 조명기 </td><td> 올림포스 산 </td><td> 하이라이트 3100 </td><td></td></tr><tr><td> 거꾸로 현미경 </td><td> 올림포스 산 </td><td> IX70 </td><td></td></tr><tr><td> Micromanipulators </td><td> Luigs &amp; 노이만 </td><td> SM I </td><td></td></tr><tr><td> Micropipette 풀러 </td><td> Narishige </td><td> PP - 830 </td><td></td></tr><tr><td> 모니터 </td><td> HesaVision </td><td> MTB - 01 </td><td></td></tr><tr><td> 중성 농도 필터 </td><td> 오메가 광학 </td><td> 다양 </td><td></td></tr><tr><td> 목표 100X </td><td> 자이스 혈구 </td><td> Fluar 440,285 </td><td> 자이스 혈구 또는 Olympu 중의 </td></tr><tr><td> 목표 100X </td><td> 올림포스 산 </td><td> UPLFLN 100XOI2 </td><td> 자이스 혈구 또는 올림푸스 중 </td></tr><tr><td> 광학 UV 필터 shortpass </td><td> Rapp 광전자 </td><td> SP400 </td><td></td></tr><tr><td> 패치 - 클램프 증폭기 </td><td> 축삭 인 스트 루먼트 </td><td> Axopatch 200B </td><td></td></tr><tr><td> 포토 다이오드 조립 </td><td> Rapp 광전자 </td><td> PDA </td><td></td></tr><tr><td> 석영 라이트 가이드 </td><td> Rapp 광전자 </td><td> 다양 </td><td> 우리는 600 μm의 직경을 사용하여 </td></tr><tr><td> 실버 와이어 </td><td> 세계 정밀 계측기 </td><td> AGT1025 </td><td></td></tr><tr><td> 실버 지상 펠릿 </td><td> 워너 악기 </td><td> 64-1309 </td><td></td></tr><tr><td> 크세논 아크 램프 </td><td> Rapp 광전자 </td><td> XBL - JML </td><td></td></tr></tbody></table> <table border="1"><tbody><tr><th> 시약 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th></tr><tr><td> BCMCM - 갇힌 CAMP </td><td> BioLog </td><td> B016 </td></tr><tr><td> 소 혈청 알부민 (BSA) </td><td> 시그마 </td><td> A8806 </td></tr><tr><td> CaCl2 표준 용액 0.1 M </td><td> Fluka </td><td> 21,059 </td></tr><tr><td> 갇힌 CA : DMNP - EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) </td><td> Invitrogen </td><td> D6814 </td></tr><tr><td> 시스테인 </td><td> 시그마 </td><td> C9768 </td></tr><tr><td> Concanavalin A 형 V (ConA) </td><td> 시그마 </td><td> C7275 </td></tr><tr><td> CsCl </td><td> 시그마 </td><td> C4036 </td></tr><tr><td> DMSO </td><td> 시그마 </td><td> D8418 </td></tr><tr><td> DNAse I </td><td> 시그마 </td><td> D4527 </td></tr><tr><td> EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) </td><td> 시그마 </td><td> E9884 </td></tr><tr><td> EGTA </td><td> 시그마 </td><td> E4378 </td></tr><tr><td> 포도당 </td><td> 시그마 </td><td> G5767 </td></tr><tr><td> HEPES </td><td> 시그마 </td><td> H3375 </td></tr><tr><td> KCl </td><td> 시그마 </td><td> P3911 </td></tr><tr><td> 코이 </td><td> 시그마 </td><td> P1767 </td></tr><tr><td> 류펩틴 </td><td> 시그마 </td><td> L0649 </td></tr><tr><td> MgCl2 </td><td> Fluka </td><td> 63,020 </td></tr><tr><td> Papain </td><td> 시그마 </td><td> P3125 </td></tr><tr><td> 폴리 - L - 라이신 </td><td> 시그마 </td><td> P1274 </td></tr><tr><td> NaCl </td><td> 시그마 </td><td> S9888 </td></tr><tr><td> NaOH </td><td> 시그마 </td><td> S5881 </td></tr><tr><td> NaPyruvate </td><td> 시그마 </td><td> P2256 </td></tr></tbody></table>

flash photolysis of caged compounds in the cilia of olfactory sensory  neurons

갇힌 화합물의 광분해는 다양한 생리학 활성 화합물 1의 농도에 신속하고화된 증가의 생산 수 있습니다. 갇힌 화합물은 자외선의 플래시에 의해 부러진 수있는 화학 케이지에 의해 만들어진 분자 생리학 비활성됩니다. 여기, 우리는 dissociated 마우스 후각 감각 뉴런의 후각 전달의 연구 갇힌 화합물의 광분해와 함께 패치 - 클램프 녹음을 얻는 방법을 보여줍니다. 후각 전달의 과정 (그림 1) 수용체에 바인딩 odorant는 주기적 염기 - 게이트 (CNG) 채널 2를 열어 캠프의 증가로 연결 후각 감각 뉴런의 속눈썹에서 열립니다. CNG 채널을 통해 CA 항목은 CA - 활성화 망할 CIA 채널을 활성화한다. 우리는 마우스 후각 상피 3 방법에 갇힌 CAMP 4 광분해 또는 칼슘 5 갇힌하여 CNG 채널 또는 CA - 활성화 망할 CIA 채널을 활성화에서 신경을 떼어 놓다하는 방법을 보여 &lt;/&gt;를 한모금. 우리는 패치 - 클램프 녹음이 전체 셀 전압 클램프 구성 8-11에서 전류를 측정하기 위해 이동하는 동안 우리에서 내놓다 캠프 CA에 ciliary 지역 자외선 섬광을 적용하기 위해 플래시 램프 6,7을 사용합니다.

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Flash Photolysis of Caged Compounds in the Cilia of Olfactory Sensory  Neurons

갇힌 화합물의 광분해는 다양한 생리학 활성 화합물의 농도에 신속하고화된 증가의 생산 수 있습니다. 여기, 우리는 갇힌 캠프의 광분해와 함께 또는 dissociated 마우스 후각 감각 뉴런의 후각 전달 연구를위한 CA를 갇힌 패치 - 클램프 녹음을 얻는 방법을 보여줍니다.

강한 감각 뉴런의 속눈썹에 갇힌 화합물의 플래시 광분해

Photolysis of caged compounds allows the production of rapid and localized increases in the concentration of various physiologically active compounds1. ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Analyzing Responses of Mouse Olfactory Sensory Neurons Using the Air-phase Electroolfactogram Recording

에어 - 상 Electroolfactogram 기록을 사용하여 마우스 강한 감각 뉴런의 분석 응답

Animals depend on olfaction for many critical behaviors, such as finding food sources, avoiding predators, and identifying conspecifics for mating and ...

연구

신경과학

Live-imaging of PKC Translocation in Sf9 Cells and in Aplysia Sensory Neurons

Sf9 세포에서 Aplysia 감각 뉴런에서 PKC Translocation의 라이브 영상

Protein kinase Cs (PKCs) are serine threonine kinases that play a central role in regulating a wide variety of cellular processes such as cell growth and ...

Lentivirus-mediated Genetic Manipulation and Visualization of Olfactory Sensory Neurons in vivo

Lentivirus-mediated Genetic Manipulation and Visualization of Olfactory Sensory Neurons in vivo

강한 감각 뉴런의 Lentivirus - 중재 유전자 조작 및 시각화 생체내에</em

Development of a precise olfactory circuit relies on accurate projection of olfactory sensory neuron (OSN) axons to their synaptic 
targets in the ...

Intracellular Recording, Sensory Field Mapping, and Culturing Identified Neurons in the Leech, Hirudo medicinalis

Intracellular Recording, Sensory Field Mapping, and Culturing Identified Neurons in the Leech, Hirudo medicinalis

세포 내 기록, 감각이 필드를 매핑하고, 거머리의 배양 확인 된 뉴런, Hirudo의 medicinalis</i

The freshwater leech, Hirudo medicinalis, is a versatile model organism that has been used to address scientific questions in the fields of ...

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

에있는 후각 수용체 뉴런의 전체 마운트 Immunolabeling<em&gt; 초파리</em&gt; 안테나

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this ...

Whole Mount Labeling of Cilia in the Main Olfactory System of Mice

마우스의 메인 후각 시스템의 섬모의 전체 마운트 라벨링

The mouse olfactory system comprises 6-10 million olfactory sensory neurons in the epithelium lining the nasal cavity. Olfactory neurons extend a single ...

Perforated Patch-clamp Recording of Mouse Olfactory Sensory Neurons in Intact Neuroepithelium: Functional Analysis of Neurons Expressing an Identified Odorant Receptor

본래 Neuroepithelium에서 마우스 강한 감각 뉴런의 천공 패치 클램프 녹음 : 확인 된 부 취제 수용체를 발현 뉴런의 기능 분석

Analyzing the physiological responses of olfactory sensory neurons (OSN) when stimulated with specific ligands is critical to understand the basis of ...

Live Imaging of the Ependymal Cilia in the Lateral Ventricles of the Mouse Brain

마우스 뇌의 좌우 심실의 뇌실막 섬모의 라이브 영상

Multiciliated ependymal cells line the ventricles in the adult brain. Abnormal function or structure of ependymal cilia is associated with various ...

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

의 컴퓨터 추적하여있는 분석 후각 행동<em&gt; 초파리</em&gt; 네 사분면의 후각에

A key challenge in neurobiology is to understand how neural circuits function to guide appropriate animal behaviors. Drosophila melanogaster is an ...

Physiological Preparation of Hair Cells from the Sacculus of the American Bullfrog (Rana catesbeiana)

Physiological Preparation of Hair Cells from the Sacculus of the American Bullfrog Rana catesbeiana

미국 황소 개구리의 Sacculus (헤어 세포의 생리 준비<em&gt; 모이 catesbeiana</em&gt;)

The study of hearing and balance rests upon insights drawn from biophysical studies of model systems. One such model, the sacculus of the American ...