Name: specimen preparation, imaging, and analysis protocols for knife-edge scanning microscopy
Uploaded: 2011-12-09T13:00:00
Duration: 10 min 25 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Specimen Preparation, Imaging, and Analysis Protocols for Knife-edge Scanning Microscopy at JoVE.com

Dit project werd gefinancierd door NIH / NINDS (# 1R01-NS54252), NSF (# 0905041, # 0079874), de Texas Advanced Technology Program (ATP-# 000512 tot 0.146-2001, # ATP-000512-0261-2001), Texas A &amp; M Research Foundation, Department of Computer Science and Engineering aan de Texas A &amp; M University, en 3Scan. We willen graag Bernard Mesa (Micro Star Technologies) bedanken voor technisch advies en ondersteuning voor KESM instrumentatie. Grote delen van het ontwerp en de uitvoering van de KESM werd gedaan door Bruce H. McCormick, die stierf in 2007.

1. Prepareren: Golgi-Cox <ol><li> Dit protocol sluit nauw aan bij het ​​protocol van Mayerich et al.. 7. </li><li> De C57BL/6J muis is diep verdoofd met isofluraan inhalatie-anesthesie en vervolgens onthoofd. </li><li> De hersenen is verwijderd en geplaatst in een Golgi-Cox fixatie-oplossing (1% kalium chromaat, 1% kaliumdichromaat, en 1% kwikchloride in gedeïoniseerd water). </li><li> De hersenen zijn nog in de Golgi-Cox-oplossing in het donker, bij kamertemperatuur, voor 10 tot 16 weken. </li><li> De hersenen zijn gespoeld in gedemineraliseerd water &#39;s nachts in het donker. </li><li> De hersenen gespoeld wordt ondergedompeld in een 5% ammoniumhydroxideoplossing in gedeïoniseerd water voor 7 tot 10 dagen in het donker bij kamertemperatuur. Deze lange voorbereidingstijd was om infiltratie van de hele hersenen zorgen, zodat de zwarte neerslag een kans om geheel vormen in het weefsel had. </li><li> De hersenen zijn weer gespoeld in gedemineraliseerd water bij kamertemperatuur gedurende 4 uur en tkip gedehydrateerd door middel van een gegradeerde reeks van ethyl alcohol: 50% en 70% in de koelkast (4 ° C), en 85%, 95% (3 veranderingen), en 100% (4 tot 5 veranderingen) in de kamertemperatuur. De hersenen zijn nog in elke oplossing voor 24 uur. </li><li> De gedroogde hersenen wordt vervolgens in aceton (3 tot 4 veranderingen, elk voor een dag), gevolgd door een Araldite-aceton-mengsel met Araldite-to-aceton-verhouding van 1:2, 1:1, 2:1, en tenslotte in 100% Araldite (3 verandert, elke keer &#39;s nachts), in de koelkast (4 ° C). </li><li> Tenslotte wordt de behandelde hersenen zijn ingebed in 100% Araldite en verwarmd tot 60 ° C gedurende 3 dagen (cf. inbedding protocol in de Abbott en Sotelo 2). Indien monsters zijn ingebed in LR White dan de specimens worden overgedragen van de laatste 100% ethanol-oplossing door middel van drie veranderingen van LR White oplossing die elk bewaard nacht in de koelkast, dat is een standaard procedure, voorafgaand aan polymerisatie. Drie wijzigingen zijn doen om de volledige infiltratie te verzekeren. Het monster is tkip overgezet op vers LR White, dat is gepolymeriseerd in een ongeopende verpakking bij 60 ° C gedurende 24 uur, dat is de benodigde hoeveelheid tijd en temperatuur voor een goede polymerisatie. </li><li> Fig. 1 toont een Golgi-Cox-lood hersenen ingebed in Araldite. </li><li> De uitgeharde monster blok is vervolgens gemonteerd op de metalen ring met behulp van epoxy monster, en de zijkanten van het blok gesneden als nodig is (zie Fig. 2). </li></ol> 2. Prepareren: Nissl <ol><li> De muis is diep verdoofd met behulp van ketamine en xylazine (1,7 mg ketamine / 0,26 mg xylazine per 20 gram lichaamsgewicht) intraperitoneaal geïnjecteerd en vervolgens doorbloed transcardially met behulp van 50 ml van de ruimtetemperatuur fosfaat-gebufferde zoutoplossing (pH 7,4), gevolgd door 250 ml room temperatuur 10% neutraal gebufferde formaline (pH 7,4). en ten slotte met 3,0 cc van onverdunde Oost-Indische inkt. </li><li> Hele lichaam perfusie met zoutoplossing en fixatief is nodig om het bloed uit het cardiovasculaire systeem en voor de ti vast<html> PUNTEN. Perfusie met Oost-Indische inkt is nodig om volledig te vullen het vaatstelsel van het cardiovasculaire systeem. </li><li> De resulterende hersenen wordt vervolgens gedehydrateerd door een reeks van gesorteerde ethyl alcohol (25% -100%) en vervolgens ingebed in Araldite plastic na het protocol in 1.8-1.9 hierboven. Als LR wit is de inbedding medium dan het protocol in 1.10 hierboven is gevolgd. </li></ol> 4. Prepareren: Generic soorten, generieke organen <ol><li> Voor de generieke geval is, kan fixatie worden gedaan met ofwel 10% neutraal gebufferde formaline of 4% paraformaldehyde. </li><li> Voor kleine hoeveelheden weefsel, is diffusie plaats van de perfusie aanbevolen voor fixatie en kleuring. In het geval van kleine organismen of organen, kunnen vlekken ook worden gedaan tijdens het droogproces. </li><li> De inbedding protocol is hetzelfde als hierboven, maar de tijden voor oplossing infiltratie kan worden verminderd voor organen of organismen die veel kleiner zijn dan hele hersenen van muizen. </li></ol>jove_title &quot;&gt; 5. KESM setup en imaging <ol><li> Zet de pomp, zet op het podium, zet de camera, zet verlichting. </li><li> Verhogen mes en objectief. </li><li> Installeer exemplaar ring. </li><li> Meten monster dimensie en maakt een configuratiebestand voor de KESM Stage Controller2 toepassing. </li><li> Start KESM Stage Controller2 en initialiseren podium. </li><li> Onderste mes / doelstelling, zet pomp. </li><li> Focus objectief en de camera, door te draaien aan de focus knop op de optische trein en het aanpassen van de camera&#39;s gezichtsveld van ten opzichte van het mes rand. </li><li> Druk op [Start] om beeldvorming te starten. </li><li> Zie Fig. 3-8. Zie 9, 7 voor technische details. </li></ol> 6. Beeldverwerking en data voorbereiding <ol><li> Kopieer de KESM Stack Processor executable in de map Data onder het configuratiebestand map (00000, 00001, etc.). </li><li> Voer de KESM Stack Processor tot verlichting artefact te verwijderen en de achtergrond intensiteit normaliseren in allebeelden. Herhaal dit voor alle gegevens submappen. </li><li> Bereid meerschalige tegels uit de dataset en uploaden en het opzetten van de bestanden in de KESM Brain Atlas webserver. </li><li> Zie Fig. 9. </li></ol> 7. Data visualisatie en analyse <ol><li> Visualisatie met behulp van de KESM Brain Atlas. Ga naar <a href="http://kesm.cs.tamu.edu">http://kesm.cs.tamu.edu</a> en selecteer de gewenste atlas. <ol><li> Navigeren zoals bij Google maps. </li><li> In-en uitzoomen als in Google maps. </li><li> Als u naar een andere diepte, kiest u hoe diep je moet gaan op elke stap van het pull-down menu en klik vervolgens op beide [+] of [-] te verhogen of te verlagen z diepte. </li><li> Stel de overlay nummer met behulp van het pull-down menu. </li><li> Stel de overlay interval met behulp van het pull-down menu. </li><li> Zie Fig. 11. </li></ol></li><li> Visualisatie met behulp van MeVisLab. <ol><li> De lancering MeVisLab. </li><li> Maak een nieuw project. </li><li> In de volgende, kunnen nieuwe modules worden creëren door Typing in de module naam in de opdracht vak. </li><li> Maak een module [Compose3Dfrom2DFiles], en ga naar de gewenste map. Geef bestand string in en klik op in [GetFileList]. Zorg ervoor dat de geselecteerde beelden kunnen passen in het geheugen. Klik op [Create3D] om volume te creëren. </li><li> Maak een module [SetWorldMatrix], en zet de &quot;Scale&quot; onder &quot;Elementary transformaties&quot; x, y, z om de juiste voxel grootte (0,6, 0,7, 1,0 voor een 10x 0.45NA doelstelling). Link [Compose3Dfrom2DFiles] op [SetWorldMatrix]. </li><li> Stel Matrix en transformeert onder &quot;Matrix Composition&quot; naar &quot;Negeren&quot;, &quot;Negeer&quot;, &quot;Forward&quot;. </li><li> Maak een module [Arithmetic1] en stel de &quot;Function&quot; naar &quot;Invert (Max-IMG)&quot;. Link [SetWorldMatrix] op [Arithmetic1]. </li><li> Maak een module [View3D] en sluit [Arithmetic1]. </li><li> In View3D, terwijl de rechter muisknop wordt ingedrukt, bewegen met de muis om de drempel aan te passen. U kunt bijsnijden regio&#39;s, wijzigen van de oriëntatie (beweeg muis terwijl de linker muisknop wordt ingedrukt), wijzigt u verlichting (volume rendering of MIP), aan / uit achtergrond, enz. </li><li> Zie Fig. 10. </li></ol></li></ol> 8. Representatieve resultaten: Hier presenteren we whole-brain gegevens en details. Vijgen. 12-15 tonen de hersenen als geheel India Ink, Golgi, en Nissl datasets 1, 4, 3. <img alt="Figuur 1" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig1.jpg" /> Figuur 1. Vast, gekleurd, en embedded hersenen van muizen <img alt="Figuur 2" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig2.jpg" /> Figuur 2. Embedded hersenen van muizen exemplaar gemonteerd op het monster ring. <img alt="Figuur 3" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig3.jpg" /> Figuur 3. The Knife Edge Scanning Microscoop (KESM). Een foto van de KESM wordt getoond met de belangrijkste componenten gemerkt: (1) hogesnelheidslijn-scan camera, (2) microscoop doelstelling, (3) diamant mes montage en licht collimator, (4) SPEcimen tank (voor onderdompeling in water beeldvorming), (5) drie-assige nauwkeurige air-dragende fase (6) wit-licht microscoop verlichting, (7) water pomp (in de rug) voor de verwijdering van de doorsnede weefsel, (8) PC-server voor podium-controle en beeld acquisitie, (9) granieten basis, en (10) graniet brug. <img alt="Figuur 4" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig4.jpg" /> Figuur 4. Imaging principes van de KESM. Het principe van de werking van KESM wordt geïllustreerd. Het doel en het mes is op zijn plaats gehouden, terwijl het monster aangebracht op de positionering podium beweegt (pijl met vaste lijn) op de resolutie van 20 nm en rijsnelheid van 1-5, en krijgt schraapte tegen de diamant mes (5 mm breed voor het 10X objectief), het genereren van een dunne gedeelte stroomt over het mes (pijl met vaste lijn). Line-scan beeldvorming wordt gedaan bij het uiterste puntje van het mes. <img alt="Figuur 5" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig5.jpg" /> Figuur 5. KESM camera en objectief scherpstellen controles. <img alt="Figuur 6" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig6.jpg" /> Figuur 6. KESM mes montage en controles. <img alt="Figuur 7" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig7.jpg" /> Figuur 7. Initial richten via de observatie-poort. <img alt="Figuur 8" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig8.jpg" /> Figuur 8. KESM Stage Controller 2 applicatie (screenshot). <img alt="Figuur 9" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig9.jpg" /> Figuur 9. KESM stack processor applicatie (screenshot). <img alt="Figuur 10" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig10.jpg" /> Figuur 10. MeVisLab applicatie (screenshot). <img alt="Figuur 11" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig11.jpg" /><br/&gt; Figuur 11 KESM Brain Atlas:. Web-interface (screenshot). <img alt="Figuur 12" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig12.jpg" /> Figuur 12. KESM de hersenen als geheel Oost-Indische inkt gegevens. Volume visualisaties van KESM gegevens stapels worden weergegeven voor de vasculaire data in te stellen. (A) Close-up van de vasculaire data. Breedte ~ 100 um. (Bd) Drie standaard uitzicht van de hele hersenen van muizen vasculatuur (subsampled van hoge-resolutie gegevens). Breedte ~ 10mm. <img alt="Figuur 13" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig13.jpg" /> Figuur 13. KESM whole-brain muis Golgi gegevens. <img alt="Figuur 14" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig14.jpg" /> Figuur 14. KESM Golgi data details. <img alt="Figuur 15" src="/files/ftp_upload/3248/3248fig15.jpg" /> Figuur 15. KESM whole-brain Nissl data. (A) Close-up van de Nissl gegevens. ~ 300 um 3. (Bd) Drie standaard uitzicht van de hele hersenen van muizen Nissl gegevens (subsampled van hoge-resolutie gegevens). Doorsnede getoond voor een duidelijk beeld van de interne structuren.

<ol>
	<li>Abbott, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+imaging+of+whole+small+animal+brains+with+the+knife-edge+scanning+microscope.">High-throughput imaging of whole small animal brains with the knife-edge scanning microscope.</a> Neuroscience Meeting Planner. Program No. 504.2, (2008).</li><li>Abbott, L. C., Sotelo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructural+analysis+of+catecholaminergic+innervation+in+weaver+and+normal+mouse+cerebellar+cortices.">Ultrastructural analysis of catecholaminergic innervation in weaver and normal mouse cerebellar cortices.</a> Journal of Comparative Neurology. 426, 316-329 (2000).</li><li>Choe, Y., Abbott, L. C., Miller, D. E., Han, D., Yang, H. -. F., Chung, J. R., Sung, C., Mayerich, D., Kwon, J., Micheva, K., Smith, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiscale+imaging,+analysis,+and+integration+of+mouse+brain+networks.">Multiscale imaging, analysis, and integration of mouse brain networks.</a> Neuroscience Meeting Planner. Program No. 516.3, (2010).</li><li>Choe, Y., Han, D., Huang, P. -. S., Keyser, J., Kwon, J., Mayerich, D., Abbott, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complete+submicrometer+scans+of+mouse+brain+microstructure:+Neurons+and+vasculatures.">Complete submicrometer scans of mouse brain microstructure: Neurons and vasculatures.</a> Neuroscience Meeting Planner. Program No. 389.10, (2009).</li><li>Choe, Y., Abbott, L. C., Han, D., Huang, P. S., Keyser, J., Kwon, J., Mayerich, D., Melek, Z., McCormick, B. H., Ravi Rao, A., Cecchi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Knife-edge+scanning+microscopy:+High-throughput+imaging+and+analysis+of+massive+volumes+of+biological+microstructures.">Knife-edge scanning microscopy: High-throughput imaging and analysis of massive volumes of biological microstructures.</a> High-Throughput Image Reconstruction and Analysis: Intelligent Microscopy Applications. , 11-37 (2008).</li><li>Choe, Y., Abbott, L. C., Ponte, G., Keyser, J., Kwon, J., Mayerich, D., Miller, D., Han, D., Grimaldi, A. M., Fiorito, F., Edelman, D. B., McKinstry, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Charting+out+the+octopus+connectome+at+submicron+resolution+using+the+knife-edge+scanning+microscope.">Charting out the octopus connectome at submicron resolution using the knife-edge scanning microscope.</a> BMC Neuroscience. 11, 136-136 (2010).</li><li>Mayerich, D., Abbott, L. C., McCormick, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Knife-edge+scanning+microscopy+for+imaging+and+reconstruction+of+three-dimensional+anatomical+structures+of+the+mouse+brain.">Knife-edge scanning microscopy for imaging and reconstruction of three-dimensional anatomical structures of the mouse brain.</a> Journal of Microscopy. 231, 134-143 (2008).</li><li>Mayerich, D., Kwon, J., Sung, C., Abbott, L. C., Keyser, J., Choe, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+macro-scale+Transmission+Imaging+of+Microvascular+Networks+Using+KESM.">Fast macro-scale Transmission Imaging of Microvascular Networks Using KESM.</a> Biomedical Optics Express. 2, 2888-2896 (2008).</li><li>McCormick, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+the+Brain+Tissue+Scanner.">Development of the Brain Tissue Scanner.</a> Technical Report. , (2002).</li><li>Sporns, O., Tononi, G., K&#246;tter, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+connectome:+A+structural+description+of+the+human+brain.">The human connectome: A structural description of the human brain.</a> PLoS Computational Biology. 1, 42-42 (2005).</li></ol>

Todd Huffman is met 3Scan, een commercieel bedrijf dat produceert en verkoopt de KESM Technology (US patent # 6744572).

De KESM zorgt voor een submicrometer-level overzicht van grote hoeveelheden biologisch monster (~ 1 cm 3). Dit soort volume is voldoende om hele kleine dierlijke organen, zoals hersenen, longen, hart, nieren houden, etc. gescande beelden van dergelijke organen kunnen ongekende kwantitatieve informatie over de structurele organisatie van deze organen te bieden, en maken computationele modellering van verschillende functionele aspecten van deze organen, inclusief circuit en netwerk dynamiek, elektrische eigenschappen, vocht en luchtstroom dynamiek, en gespierd dynamiek. Het prepareren protocol en post-analyse protocol beschreven in dit artikel wordt verwacht dat zij buiten research groepen te helpen om gemakkelijker toegang tot de KESM en de daaruit voortvloeiende gegevens. De KESM operatie protocol zal helpen deze externe onderzoekers om de voordelen en beperkingen van deze unieke beeldvormingmodaliteit waarderen.

A correction was made to <a href="http://www.jove.com/video/3248">Specimen Preparation, Imaging, and Analysis Protocols for Knife-edge Scanning Microscopy</a>. Important modifications were made to the Nissl staining protocol.

A correction was made to <a href="http://http://www.jove.com/video/3248">Specimen Preparation, Imaging, and Analysis Protocols for Knife-edge Scanning Microscopy</a>. Important modifications were made to the Nissl staining protocol.

Erratum: Specimen Preparation, Imaging, and Analysis Protocols for Knife-edge Scanning Microscopy

specimen preparation, imaging, and analysis protocols for knife-edge scanning microscopy

Grote vooruitgang in high-throughput, hoge resolutie, 3D-microscopie technieken in staat hebben gesteld de aankoop van grote hoeveelheden gegevens op neuroanatomische submicrometer resolutie. Een van de eerste dergelijke instrumenten produceren de hersenen als geheel schaal data is het Knife-Edge Scanning Microscoop (KESM) 7, 5, 9, ontwikkeld en gehost in de auteurs &#39;lab. KESM is gebruikt om sectie en het imago hele muis hersenen op submicrometer resolutie, waaruit de ingewikkelde details van de neuronale netwerken (Golgi) 1, 4, 8, vasculaire netwerken (Oost-Indische inkt) 1, 4 en cellichaam distributie (Nissl) 3 . Het gebruik van KESM is niet beperkt tot de muis, noch de hersenen. We hebben met succes belicht de octopus hersenen 6, muis longen en hersenen van de rat. We zijn momenteel bezig met hele zebravis embryo&#39;s. Gegevens als deze kunnen veel bijdragen aan connectomics onderzoek 10, om de microcirculatie en hemodynamische onderzoek, en om stereology onderzoek door de bepalingenDing een exacte grond-waarheid. In dit artikel beschrijven we de pijplijn, waaronder prepareren (vaststelling, vlekken, en inbedding), KESM configuratie en installatie, snijden en beeldvorming met de KESM, beeldverwerking, data voorbereiding, en data-visualisatie en analyse. De nadruk zal liggen op prepareren en visualisatie / analyse van de verkregen KESM gegevens. We verwachten dat het gedetailleerd protocol in dit artikel om te helpen de toegang tot KESM en verhoging van het gebruik ervan te verbreden.

Watch this Scientific Journal Video about Specimen Preparation, Imaging, and Analysis Protocols for Knife-edge Scanning Microscopy at JoVE.com

Specimen Preparation, Imaging, and Analysis Protocols for Knife-edge Scanning Microscopy

Het volledige proces van de hersenen prepareren op de seriële snijden beeldvorming met behulp van de Knife-Edge Scanning Microscope, om data visualisatie en analyse wordt beschreven. Deze techniek wordt momenteel gebruikt om de hersenen van muizen gegevens te verwerven, maar het is van toepassing op andere organen, andere soorten.

Specimen Voorbereiding, Imaging, en Analyse Protocollen voor Knife-edge Scanning Microscopie

Major advances in high-throughput, high-resolution, 3D microscopy techniques have enabled the acquisition of large volumes of neuroanatomical data at ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Three-dimensional Optical-resolution Photoacoustic Microscopy

Drie-dimensionale Optische resolutie Fotoakoestisch Microscopie

Optical microscopy, providing valuable insights at the cellular and organelle levels, has been widely recognized as an enabling biomedical technology. As ...

Bacterial Immobilization for Imaging by Atomic Force Microscopy

Bacteriële Immobilisatie for Imaging door Atomic Force Microscopy

AFM is a high-resolution (nm scale) imaging tool that mechanically probes a surface.  It has the ability to image cells and biomolecules, in a liquid ...

Video-rate Scanning Confocal Microscopy and Microendoscopy

Video-rate Scanning confocale microscopie en Microendoscopy

Confocal microscopy has become an invaluable tool in biology and the biomedical sciences, enabling rapid, high-sensitivity, and high-resolution optical ...

Creating Adhesive and Soluble Gradients for Imaging Cell Migration with Fluorescence Microscopy

Het maken van lijm en Oplosbare verlopen for Imaging Cell Migration met fluorescentie microscopie

Cells can sense and migrate towards higher concentrations of adhesive cues such as the glycoproteins of the extracellular matrix and soluble cues such as ...

High-resolution Spatiotemporal Analysis of Receptor Dynamics by Single-molecule Fluorescence Microscopy

Hoge-resolutie Spatiotemporal Analyse van Receptor Dynamics door Single-molecule fluorescentie microscopie

Single-molecule microscopy is emerging as a powerful approach to analyze the behavior of signaling molecules, in particular concerning those aspect (e.g., ...

Preparation of Mica Supported Lipid Bilayers for High Resolution Optical Microscopy Imaging

Voorbereiding van Mica Ondersteunde lipidendubbellagen voor hoge resolutie optische microscopie Imaging

Supported lipid bilayers (SLBs) are widely used as a model for studying membrane properties (phase separation, clustering, dynamics) and its interaction ...

Hybrid &#181;CT-FMT imaging and image analysis

Hybrid Ãƒâ€šÃ‚ÂµCT-FMT imaging and image analysis

Hybride μCT-FMT beeldvorming en beeldanalyse

Fluorescence-mediated tomography (FMT) enables longitudinal and quantitative determination of the fluorescence distribution in vivo and can be used to ...

Atomic Force Microscopy Imaging and Force Spectroscopy of Supported Lipid Bilayers

Atomic Force Microscopy Imaging en Force Spectroscopie van Ondersteunde lipidendubbellagen

Atomic force microscopy (AFM) is a versatile, high-resolution imaging technique that allows visualization of biological membranes. It has sufficient ...

Correlative Light Electron Microscopy (CLEM) for Tracking and Imaging Viral Protein Associated Structures in Cryo-immobilized Cells

Correlative Light Electron Microscopy CLEM for Tracking and Imaging Viral Protein Associated Structures in Cryo-immobilized Cells

Oereenstemming lichte elektronenmicroscopie (CLEM) voor het bijhouden en Imaging virale eiwitten verbonden structuren in Cryo-geïmmobiliseerd cellen

Due to its high resolution, electron microscopy (EM) is an indispensable tool for virologists. However, one of the main difficulties when analyzing ...

Visualizing Adhesion Formation in Cells by Means of Advanced Spinning Disk-Total Internal Reflection Fluorescence Microscopy

Visualiseren van hechting vorming in cellen door middel van geavanceerde draaiende schijf-totale interne reflectie fluorescentie microscopie

In living cells, processes such as adhesion formation involve extensive structural changes in the plasma membrane and the cell interior. In order to ...