Name: enrichment of nk cells from human blood with the rosettesep kit from stemcell technologies
Uploaded: 2007-10-01T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Enrichment of NK Cells from Human Blood with the RosetteSep Kit from StemCell Technologies at JoVE.com

Een gedetailleerd protocol is inbegrepen bij elke Rosette september isolatie cocktail en is online beschikbaar op de website van een StemCell technologieën.

<ol>
	<li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Procedures and instruction manuals. , .</li></ol>

De cellen geïsoleerd met behulp van deze techniek kan verder worden opgesplitst in verschillende populaties met behulp van andere celscheiding kits.

PBS aangevuld met 2% FCS en Histopaque oplossingen moeten worden gebracht op kamertemperatuur voor het begin van de procedure.

enrichment of nk cells from human blood with the rosettesep kit from stemcell technologies

Natural killer (NK) cellen zijn grote granulaire cytotoxische lymfocyten die behoren tot het aangeboren immuunsysteem en spelen belangrijke rollen in de strijd tegen kanker en infecties, maar zijn ook betrokken bij de vroege stadia van de zwangerschap en afstoting van transplantaten. Deze cellen zijn aanwezig in het perifere bloed, waaruit zij kunnen worden geïsoleerd. Cellen kunnen worden geïsoleerd met behulp van positieve of negatieve selectie. Voor de positieve selectie gebruiken we antilichamen gericht op een oppervlak marker alleen aanwezig op de cellen van belang dat de voor de negatieve selectie gebruiken we cocktails van antilichamen gericht aan het oppervlak markeringen aanwezig zijn op alle cellen, maar de cellen van belang. Deze laatste techniek heeft het voordeel van het verlaten van de cellen van renteloze van antilichamen, waardoor het risico van ongewenste cel activering of differenciation. In deze video-protocol waarin we laten zien hoe NK-cellen uit menselijk bloed gescheiden door negatieve selectie, het gebruik van de RosetteSep kit van StemCell technologieën. De procedure heeft betrekking op het verkrijgen van humaan perifeer bloed (minder dan een Institutional Review Board goedgekeurde protocol bij de proefpersonen te beschermen) en te mengen met een cocktail van antilichamen die zich binden aan markers afwezig op NK-cellen, maar aanwezig is op alle andere mononucleaire cellen aanwezig in de perifere bloed (bijvoorbeeld T-lymfocyten, monocyten ...). De antilichamen aanwezig zijn in de cocktail zijn geconjugeerd aan antilichamen gericht tegen A op erytrocyten glycophorin. Alle ongewenste cellen en rode bloedcellen zal dan ook worden gevangen in de complexen. De mix van bloed en antilichaam cocktail wordt dan verdund, overlayed op een Histopaque helling, en gecentrifugeerd. NK-cellen (&gt; 80% zuiver) kunnen worden afgehaald op het grensvlak tussen de Histopaque en de verdunde plasma. Vergelijkbare cocktails zijn beschikbaar voor de verrijking van andere celpopulaties, zoals het humaan T-lymfocyten.

Watch this Scientific Journal Video about Enrichment of NK Cells from Human Blood with the RosetteSep Kit from StemCell Technologies at JoVE.com

Enrichment of NK Cells from Human Blood with the RosetteSep Kit from StemCell Technologies

Natural killer cellen zijn een kleine populatie van lymfocyten. Hier laten we zien hoe deze cellen uit menselijk bloed te isoleren door negatieve selectie, met behulp van een kit van StemCell Technologies. De verkregen cellen zijn levensvatbaar en onaangetast door antilichamen, en dus klaar om te worden gebruikt voor een aantal procedures.

Verrijking van NK-cellen uit menselijk bloed met de RosetteSep Kit van StemCell Technologies

Natural killer (NK) cells are large granular cytotoxic lymphocytes that belong to the innate immune system and play major roles in fighting against cancer ...

Research

JoVE Journal

Biology

Purifying Plasmid DNA from Bacterial Colonies Using the Qiagen Miniprep Kit

Zuiveren Plasmide DNA van bacteriële kolonies Met behulp van de Qiagen Miniprep Kit

Plasmid DNA purification from E. coli is a core technique for molecular cloning. Small scale purification (miniprep) from less than 5 ml of bacterial ...

Immunohistochemistry: Paraffin Sections Using the Vectastain ABC Kit from Vector Labs

Immunohistochemie: Paraffinecoupes Met behulp van de Vectastain ABC Kit van Vector Labs

Immunohistochemistry (IHC) is a valuable technique utilized to localize/visualize protein expression in a mounted tissue section using specific ...

RNA Extraction from Neuroprecursor Cells Using the Bio-Rad Total RNA Kit

RNA-extractie uit Neuroprecursor cellen met behulp van de Bio-Rad Totaal RNA Kit

Isolation and Culture of Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice

Isolatie en Cultuur van Pulmonary endotheelcellen van neonatale muizen

Endothelial cells provide a useful research model in many areas of vascular biology. Since its first isolation 1, human umbilical vein endothelial cells ...

Generation of Human Induced Pluripotent Stem Cells from Peripheral Blood Using the STEMCCA Lentiviral Vector

Generatie van de mens geïnduceerde pluripotente stamcellen uit perifeer bloed Met behulp van de STEMCCA lentivirale vector

Through the ectopic expression of four transcription factors, Oct4, Klf4, Sox2 and cMyc, human somatic cells can be converted to a pluripotent state, ...

Collection, Isolation and Enrichment of Naturally Occurring Magnetotactic Bacteria from the Environment

Collection, Isolatie en Verrijking van natuurlijk voorkomende Magnetotactic Bacteriën van het milieu

Magnetotactic bacteria (MTB) are aquatic microorganisms that were first notably described in 19751 from sediment samples collected in salt marshes of ...

Isolation of Blood-vessel-derived Multipotent Precursors from Human Skeletal Muscle

Isolatie van bloedvatgeassocieerde afgeleid Multipotente Voorlopers van Human Skeletal Muscle

Since the discovery of mesenchymal stem/stromal cells (MSCs), the native identity and localization&#160;of MSCs have been obscured by their retrospective ...

Efficient Generation Human Induced Pluripotent Stem Cells from Human Somatic Cells with Sendai-virus

Efficiënte Generation humane geïnduceerde pluripotente stamcellen uit menselijke somatische cellen met Sendai-virus

A few years ago, the establishment of human induced pluripotent stem cells (iPSCs) ushered in a new era in biomedicine. Potential uses of human iPSCs ...

Isolation of Small Noncoding RNAs from Human Serum

Isolatie van Kleine Noncoding RNA&#39;s uit humaan serum

The analysis of RNA and its expression is a common feature in many laboratories. Of significance is the emergence of small RNAs like microRNAs, which are ...

Generation and Culture of Blood Outgrowth Endothelial Cells from Human Peripheral Blood

Generatie en cultuur van Blood uitgroei endotheelcellen van de humane perifere bloed

Historically, the limited availability of primary endothelial cells from patients with vascular disorders has hindered the study of the molecular ...