Name: enrichment of nk cells from human blood with the rosettesep kit from stemcell technologies
Uploaded: 2007-10-01T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Enrichment of NK Cells from Human Blood with the RosetteSep Kit from StemCell Technologies at JoVE.com

Ett detaljerat protokoll medföljer varje Rosett september isolering cocktail och finns tillgänglig online på StemCell teknik hemsida 1.

<ol>
	<li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Procedures and instruction manuals. , .</li></ol>

De celler som isolerats med denna teknik kan ytterligare delas in i olika populationer med andra kit cellseparation.

PBS kompletteras med 2% FCS och Histopaque lösningar måste bringas till rumstemperatur innan början av förfarandet.

enrichment of nk cells from human blood with the rosettesep kit from stemcell technologies

Naturliga mördarceller (NK) celler är stora granulat cytotoxiska lymfocyter som tillhör det medfödda immunförsvaret och spelar stora roller i kampen mot cancer och infektioner, men är också inblandade i ett tidigt skede av graviditeten och transplantatavstötning. Dessa celler finns i perifert blod, från vilken de kan isoleras. Celler kan isoleras med hjälp av antingen positivt eller negativt urval. För positiva val som vi använder antikroppar riktade till en yta markör närvarande endast på celler av intresse medan negativt urval använder vi cocktails av antikroppar riktade till ytan markörer som finns på alla celler men cellerna av intresse. Den senare tekniken ger fördelen av att lämna celler av intresse fria från antikroppar, vilket minskar risken för oönskad cellens aktivering eller differentiering. I denna video-protokoll visar vi hur man skiljer NK-celler från humant blod med negativt urval, med hjälp av RosetteSep kit från StemCell teknik. Förfarandet innebär att få humant perifert blod (under en granskningsnämnder-godkända protokoll för att skydda de mänskliga subjekt) och blanda det med en cocktail av antikroppar som binder till markörer saknas på NK-celler, men finns på alla andra mononukleära celler som finns i perifera blod (t ex T-lymfocyter, monocyter ...). Antikropparna som finns i cocktail är konjugerade med antikroppar riktade till glycophorin A på erytrocyter. Alla oönskade celler och röda blodkroppar kommer därför att fastna i komplex. Blandningen av blod och antikroppar cocktail är utspätt, overlayed på en Histopaque lutning och centrifugeras. NK-celler (&gt; 80% ren) kan hämtas i gränssnittet mellan Histopaque och den utspädda plasma. Liknande drinkar finns för anrikning av andra cellpopulationer, såsom mänskliga T-lymfocyter.

Watch this Scientific Journal Video about Enrichment of NK Cells from Human Blood with the RosetteSep Kit from StemCell Technologies at JoVE.com

Enrichment of NK Cells from Human Blood with the RosetteSep Kit from StemCell Technologies

Naturliga mördarceller är en liten population av lymfocyter. Här visar vi hur du kan isolera dessa celler från mänskligt blod med negativt urval, med hjälp av ett kit från StemCell Technologies. De erhållna celler är livskraftig och orört av antikroppar, och därför redo att användas för ett antal rutiner.

Anrikning av NK-celler från mänskligt blod med RosetteSep Kit från StemCell Technologies

Natural killer (NK) cells are large granular cytotoxic lymphocytes that belong to the innate immune system and play major roles in fighting against cancer ...

Research

JoVE Journal

Biology

Purifying Plasmid DNA from Bacterial Colonies Using the Qiagen Miniprep Kit

Purifying Plasmid DNA från kolonier Använda Qiagen Miniprep Kit

Plasmid DNA purification from E. coli is a core technique for molecular cloning. Small scale purification (miniprep) from less than 5 ml of bacterial ...

Immunohistochemistry: Paraffin Sections Using the Vectastain ABC Kit from Vector Labs

Immunohistokemi: Paraffinsnitt Använda Vectastain ABC Kit från Vector Labs

Immunohistochemistry (IHC) is a valuable technique utilized to localize/visualize protein expression in a mounted tissue section using specific ...

RNA Extraction from Neuroprecursor Cells Using the Bio-Rad Total RNA Kit

RNA-extraktion från Neuroprecursor celler med Bio-Rad Totalt RNA Kit

Isolation and Culture of Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice

Isolering och odling av pulmonell endotelceller från neonatala möss

Endothelial cells provide a useful research model in many areas of vascular biology. Since its first isolation 1, human umbilical vein endothelial cells ...

Generation of Human Induced Pluripotent Stem Cells from Peripheral Blood Using the STEMCCA Lentiviral Vector

Generering av Human inducerade pluripotenta stamceller från perifert blod Använda STEMCCA lentivirusvektorn

Through the ectopic expression of four transcription factors, Oct4, Klf4, Sox2 and cMyc, human somatic cells can be converted to a pluripotent state, ...

Collection, Isolation and Enrichment of Naturally Occurring Magnetotactic Bacteria from the Environment

Insamling, isolering och anrikning av naturligt förekommande Magnetotactic bakterier från miljön

Magnetotactic bacteria (MTB) are aquatic microorganisms that were first notably described in 19751 from sediment samples collected in salt marshes of ...

Isolation of Blood-vessel-derived Multipotent Precursors from Human Skeletal Muscle

Isolering av blod-kärl-härledda multi prekursorer från Human Skeletal Muscle

Since the discovery of mesenchymal stem/stromal cells (MSCs), the native identity and localization&#160;of MSCs have been obscured by their retrospective ...

Efficient Generation Human Induced Pluripotent Stem Cells from Human Somatic Cells with Sendai-virus

Effektiv Generation Human inducerade pluripotenta stamceller från mänskliga somatiska celler med Sendai-virus

A few years ago, the establishment of human induced pluripotent stem cells (iPSCs) ushered in a new era in biomedicine. Potential uses of human iPSCs ...

Isolation of Small Noncoding RNAs from Human Serum

Isolering av små icke-kodande RNA från humant serum

The analysis of RNA and its expression is a common feature in many laboratories. Of significance is the emergence of small RNAs like microRNAs, which are ...

Generation and Culture of Blood Outgrowth Endothelial Cells from Human Peripheral Blood

Generation och kultur of Blood utväxt endotelceller från humant perifert blod

Historically, the limited availability of primary endothelial cells from patients with vascular disorders has hindered the study of the molecular ...