Name: fsl constructs: a simple method for modifying cell/virion surfaces with a range of biological markers without affecting their viability
Uploaded: 2011-08-05T15:00:00
Duration: 9 min 38 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about FSL Constructs: A Simple Method for Modifying Cell/Virion Surfaces with a Range of Biological Markers Without Affecting their Viability at JoVE.com

المؤلفان بالشكر دان باس من سيغما الدريخ لعرض الفيديو. ونحن نشكر أيضا دون فرع شيرني Evgenii ، Chesla سكوت ، Hadac اليزابيث ، هاريسون أماندا ، داميان هيثكوت ، أنيكا هولت ، لان تشينغ تشوان ، ماكينتوش سوزانا ، Komarraju Sarvani ، Korchagina ايلينا ، اوليفر كارولين مارتن اولسون ، ستيفن باركر ، Rodinov ايجور الكسندر Tuzikov ويليامز اليانور لنتائجها والمساهمة في التوليف ، وتصميم البنى FSL وتحديد النشاط البيولوجي.

<ol>
	<li>Waehler, R., Russell, S. J., Curiel, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+targeted+viral+vectors+for+gene+therapy.">Engineering targeted viral vectors for gene therapy.</a> Nat. Rev. Genet. 8, 573-587 (2007).</li><li>Strable, E., Finn, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+modification+of+viruses+and+virus-like+particles.">Chemical modification of viruses and virus-like particles.</a> Curr. Top. Microbiol. Immunol. 327, 1-21 (2009).</li><li>Henry, S., Bovin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+of+synthetic+peptidolipids,+glycolipids+and+other+lipid-linked+structures+to+create+designer+red+cells.">The development of synthetic peptidolipids, glycolipids and other lipid-linked structures to create designer red cells.</a> Transfusion. 48, 194A-194A (2008).</li><li>Frame, T., Carroll, T., Korchagina, E., Bovin, N., Henry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+glycolipid+modification+of+red+blood+cell+membranes.">Synthetic glycolipid modification of red blood cell membranes.</a> Transfusion. 47, 876-882 (2007).</li><li>Hult, A. K., Frame, T., Henry, S., Olsson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometry+evaluation+of+red+blood+cells+transformed+with+variable+amounts+of+synthetic+A+and+B+glycolipids.">Flow cytometry evaluation of red blood cells transformed with variable amounts of synthetic A and B glycolipids.</a> Vox Sang. 95, 180-180 (2008).</li><li>Henry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modification+of+red+blood+cells+for+laboratory+quality+control+use.">Modification of red blood cells for laboratory quality control use.</a> Curr. Opin. Hematol. 16, 467-472 (2009).</li><li>Oliver, C., Blake, D., Henry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+neutralization+of+anti-A+and+successful+transfusion+of+A+antigen+incompatible+red+cells+in+an+animal+model.">In vivo neutralization of anti-A and successful transfusion of A antigen incompatible red cells in an animal model.</a> Transfusion. , (2011).</li><li>Oliver, C., Blake, D., Henry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+transfusion+reactions+and+predicting+in+vivo+cell+survival+with+kodecytes.">Modeling transfusion reactions and predicting in vivo cell survival with kodecytes.</a> Transfusion. , (2011).</li><li>Heathcote, D., Carroll, T., Wang, J. J., Flower, R., Rodionov, I., Tuzikov, A., Bovin, N., Henry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+antibody+screening+cells,+MUT+Mur+kodecytes,+created+by+attaching+peptides+onto+erythrocytes.">Novel antibody screening cells, MUT+Mur kodecytes, created by attaching peptides onto erythrocytes.</a> Transfusion. 50, 635-641 (2010).</li><li>Hadac, E. M., Federspiel, M. J., Chernyy, E., Tuzikovb, A., Korchagina, E., Bovin, N. V., Russell, S. J., Henry, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescein+and+radiolabeled+Function-Spacer-Lipid+constructs+allow+for+simple+in+vitro+and+in+vivo+bioimaging+of+enveloped+virions.">Fluorescein and radiolabeled Function-Spacer-Lipid constructs allow for simple in vitro and in vivo bioimaging of enveloped virions.</a> J Virol Meth. 10, (2011).</li><li>Blake, D., Lan, A., Love, D., Bovin, N., Henry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorophore-kodecytes+-+fluorescent+function-spacer-lipid+(FSL)+modified+cells+for+in+vitro+and+in+vivo+analyses.">Fluorophore-kodecytes - fluorescent function-spacer-lipid (FSL) modified cells for in vitro and in vivo analyses.</a> FEBS J.. 277, 199-199 (2010).</li><li>Harrison, A. L., Olsson, M. L., Brad Jones, R., Ramkumar, S., Sakac, D., Binnington, B., Henry, S., Lingwood, C. A., Branch, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+synthetic+globotriaosylceramide+analogue+inhibits+HIV-1+infection+in+vitro+by+two+mechanisms.">A synthetic globotriaosylceramide analogue inhibits HIV-1 infection in vitro by two mechanisms.</a> Glycobiology. 27, 515-524 (2010).</li><li>Barr, K., Diegel, O., Parker, S., Bovin, N., Henry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Function-Spacer-Lipid+(FSL)+constructs+enable+inkjet+printing+of+blood+group+antigens.">Function-Spacer-Lipid (FSL) constructs enable inkjet printing of blood group antigens.</a> FEBS J. 277, 235-235 (2010).</li><li>Lan, C. -. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Modeling inflammatory bowel disease [dissertation]. , (1988).</li></ol>

ديبورا ألف فارغ وستيفن م. هنري والموظفين وحملة الاسهم من بيوتك المحدودة كودي مالك البراءة التكنولوجيا كودي. دان باس هو موظف من سيغما الدريخ ، والتي رعت الإنتاج من هذه المادة عن طريق الفيديو.

تعديل وخلايا virions مع ثوابت FSL هي تقنية بسيطة جدا وقوية 11/03. لوصف وتمييز FSL بناء خلايا معدلة وغير معدلة virions من الخلايا ، التي تسمى kodecytes وkodevirions 60-10 على التوالي ، ولكن فقط عندما يمكن أن تظهر في مجموعة وظيفية وعرض لتكون موجودة على الغشاء بهم. عندما تتم kodecytes مع تركيزات مختلفة من يبني FSL ، يمكن الإشارة إليها من قبل تركيز المحلول بناء FSL تستخدم لخلق لهم ، على سبيل المثال 15 ميكروغرام / مل وkodecytes ، أو إذا تم استخدام أكثر من واحد لمدة FSL ثم مجتمعة ، مثال : + 7،8 kodecytes البيوتين. عندما خلايا مختلفة وينبغي مقارنة ، بما في ذلك نوع من الخلايا في الوصف ويوصى ، على سبيل المثال البيوتين الخلية الحمراء أو kodecytes kodecytes البيوتين 7،8 بطانة الرحم. وعلى الرغم من أن عملية الإدراج قوية جدا والإدراج (وإن كان ذلك بمعدلات مختلفة) تحدث على نطاق واسع درجة حرارة 4-37 درجة مئوية ، وخلال دقائق إلى ساعات ، للحصول على استنساخه الإدراج التحكم الصارم للوقت الاتصال ، ودرجة الحرارة ، وتركيز FSL ( مطلوبة بما في ذلك صياغة مخفف) وإلى حد أقل تركيز الخلية. حتى الآن ، ويمكن استخدام كافة بنيات FSL لتعديل الخلايا عن طريق نفس الأسلوب 11/04 ، ومع ذلك فمن المتوقع أن ظروف معينة ستكون اكثر ملائمة لتدفق العمل و / أو متطلبات التعامل الأمثل للخلايا / virions إلى تعديل . تركيز FSL الدقيق لتحقيق التأثير المطلوب يحتاج إلى يحدده المستخدم 4. وبناء الخلايا الناتجة FSL تعديل / virions يمكن عادة أن تستخدم بالطريقة نفسها باعتبارها الخلية معدلة / الفيريون في النظم البيولوجية أو تحليلية 4-11. كما سوف يبني FSL أزل ببطء من السطوح عند تعديل على اتصال مع حلول الدهون 7،8 ، أو يتم امتصاصها من قبل خلايا نشطة 11 ، لا بد من النظر في هذه المسائل فيما يتعلق بمستوى النشاط إشارة أو الحصول عليها على مدى فترات من الزمن. يمكن ان تكون ثابتة Kodecytes (على سبيل المثال غلوتارالدهيد / الفورمالين) بعد الإدراج قدمت تثبيتي ، لا تحتوي على دهون ويبلغ حجمه المذيبات وجماعة وظيفية متوافق مع مثبت. يمكن تعديل الخلايا ثابتة بدلا من يبني مع FSL. ويمكن بالإضافة إلى تعديل أسطح الخلية والفيريون أيضا أن يبني FSL غرست مباشرة إلى الدورة الدموية للحيوانات المختبر مما تسبب في تعديل الخلايا الحية المتداولة 7 و 12 لكبح الفيروسات ، والسموم ، و 12 و 7 الأضداد. يبني FLS قد استخدمت أيضا لتزيين الليبوزومات ويمكن طباعتها على أسطح الورق 13 ، حيث شل ، ويمكن استخدامها في فحوصات التشخيص. وينبغي أن القدرة على تعديل الخلايا الحية بسهولة مع مجموعة متزايدة من يبني FSL يثبت أن تكون البحوث مفيدة وأداة للتنمية لدراسة البيولوجيا سطح الخلية.

<img src="/files/ftp_upload/3289/3289table1.jpg" alt="الجدول 1" /> الجدول 1. المتاحة تجاريا يبني FSL وصفها في هذه الورقة.

fsl constructs: a simple method for modifying cell/virion surfaces with a range of biological markers without affecting their viability

القدرة على تعديل / تصور السطوح البيولوجية ، ومن ثم دراسة الخلية المحورة / الفيريون في طائفة من في المختبر والمجراة في بيئات ضروري لكسب مزيد من التبصر في وظيفة معينة أو جزيئات الكيان برمته. وتقتصر عموما دراسات بيولوجية لتعديل السطح الهندسة الوراثية للكائن أو مرفق من الأنصاف التساهمية الكيميائية لسطح الخلية 1،2. لكن هذه التقنيات التقليدية لكشف الخلية المتفاعلات الكيميائية ، أو أنها تتطلب معالجة كبيرة لتحقيق النتائج المرجوة ، مما يجعلها مرهقة ، وأنها قد تؤثر أيضا على البقاء دون قصد / ظائف الخلية المحورة. مطلوب طريقة بسيطة لتعديل دون ان تسبب أذى على سطح الخلايا. في الآونة الأخيرة تقنية جديدة ، فقد طرحت كودي تكنولوجيا مجموعة من يبني رواية تتألف من ثلاثة عناصر : رئيس مجموعة وظيفية (F) ، هل A (S) وذيل المادة الدهنية (L) ويعرف وظيفة ، أو الدهن ، فاصل FSL constructs3. هل تم تحديد (S) لتوفير بناء هذا هو التشتت في الماء ، ولكن سيكون عفويا وستابلي تدرج في غشاء. FSL بناء الأنصاف وظيفية (F) حتى الآن وتشمل مجموعة واسعة من ساتشاريديس الدم بما في ذلك المحددات المتعلقة المجموعة ، والأحماض السياليك ، السكريات hyaluronan ، fluorophores ، البيوتين ، radiolabels ، ومجموعة من الببتيدات 12/03. وقد استخدمت يبني FSL تعديل في الأجنة ، الحيوانات المنوية ، الزرد ، والخلايا الظهارية / بطانة الرحم ، وخلايا الدم الحمراء ، وvirions لإنشاء نظم مراقبة الجودة والألواح التشخيص ، لتعديل خلية التصاق / تفاعل / الانفصال / الشلل ، وعليها في المختبر وفي التصوير من الخلايا الحية / virions 12/03. عملية تعديل الخلايا / virions هي عامة وبسيطة للغاية. الإجراء الأكثر شيوعا هو احتضان خلايا (في وسائل الإعلام الحرة الدهن) حلا لFSL يبني لمدة 1-2 ساعات في 37 درجة مئوية 40-10. أثناء الحضانة وFSL يبني تلقائيا تدرج في الغشاء ، واكتمال العملية. غسل اختيارية. وتعرف الخلايا المعدلة ويبني FSL kodecytes 6-9 ، في حين يتم virions kodevirions 10. FSL يبني كما استخدمت الحقن المباشر وkodecytes / kodevirions في النماذج الحيوانية التجريبية 7،8،10. جميع kodecytes / kodevirions يبدو أن تحتفظ حيويتها الطبيعية وظيفة في حين كسب وظيفة جديدة من طراز F 7،8،10،11 شاردة. مزيج من تشتت حيويا في وسائل الإعلام ، إلى إدماج عفوية أغشية الخلايا ، وسمية منخفضة واضح ، يجعل FSL يبني أدوات بحثية قيمة لدراسة الخلايا وvirions.

Watch this Scientific Journal Video about FSL Constructs: A Simple Method for Modifying Cell/Virion Surfaces with a Range of Biological Markers Without Affecting their Viability at JoVE.com

FSL Constructs: A Simple Method for Modifying Cell/Virion Surfaces with a Range of Biological Markers Without Affecting their Viability

دالة فاصل الدهنية (FSL) يبني يسمح تعديل خصائص سطح الخلايا الحية وvirions دون فقدان للحيوية. الأسلوب يتطلب اتصال بسيط فقط من التوصل إلى حل بناء FSL مع خلية / الفيريون وعفوية ومستقرة التأسيس سطح يحدث.

FSL يبني : طريقة بسيطة لتعديل خلية / الفيريون السطوح مع مجموعة من العلامات البيولوجية دون أن يؤثر ذلك صلاحيتها

The ability to modify/visualize biological surfaces, and then study the modified cell/virion in a range of in vitro and in vivo environments is essential ...

Research

JoVE Journal

Biology

Pyrosequencing: A Simple Method for Accurate Genotyping

Pyrosequencing : طريقة بسيطة لالتنميط الجيني دقيقة

Pharmacogenetic research benefits first-hand from the abundance of information provided by the completion of the Human Genome Project. With such a ...

Application of a C. elegans Dopamine Neuron Degeneration Assay for the Validation of Potential Parkinson's Disease Genes

تطبيق الفحص جيم ايليجانس الدوبامين العصبية للتحلل من التحقق من صحة جينات مرض باركنسون المحتملة

Improvements to the diagnosis and treatment of Parkinson's disease (PD) are dependent upon knowledge about susceptibility factors that render populations ...

Fabrication of Myogenic Engineered Tissue Constructs

تلفيق عضلي يبني الأنسجة المهندسة

Despite the fact that electronic pacemakers are life-saving medical devices, their long-term performance in pediatric patients can be problematic owing to ...

A Lectin HPLC Method to Enrich Selectively-glycosylated Peptides from Complex Biological Samples

وهناك طريقة HPLC Lectin لإثراء هضميدات انتقائية الغليكوزيلاتي من العينات البيولوجية المعقدة

Glycans are an important class of post-translational modifications. Typically found on secreted and extracellular molecules, glycan structures signal the ...

Visualizing Single-molecule DNA Replication with Fluorescence Microscopy

تصور تكرار الحمض النووي جزيء واحدة مع مضان المجهري

We describe a simple fluorescence microscopy-based real-time method for observing DNA replication at the single-molecule level. A circular, forked DNA ...

Synthesis and Calibration of Phosphorescent Nanoprobes for Oxygen Imaging in Biological Systems

التوليف ومعايرة Nanoprobes الفسفورية للتصوير الأوكسجين في النظم البيولوجية

Oxygen measurement by phosphorescence quenching [1, 2] consists of the following steps: 1) the probe is delivered into the medium of interest (e.g. blood ...

Lineage Labeling of Zebrafish Cells with Laser Uncagable Fluorescein Dextran

الوسم نسب خلايا اسماك الزرد مع فلوريسئين الليزر ديكستران Uncagable

A central problem in developmental biology is to deduce the origin of the myriad cell types present in vertebrates as they arise from undifferentiated ...

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

طريقة بسيطة للتصوير Arabidopsis يغادر طريق Perfluorodecalin كوسيط التصوير إختراقي

The problem of acquiring high-resolution images deep into biological samples is widely acknowledged1. In air-filled tissue such as the spongy mesophyll of ...

A Simple Protocol for Extracting Hemocytes from Wild Caterpillars

A بروتوكول بسيط لاستخراج اليرقات من Hemocytes البرية

Insect hemocytes (equivalent to mammalian white blood cells) play an important role in several physiological processes throughout an insect's life cycle ...

Recombineering Homologous Recombination Constructs in Drosophila

Recombineering Homologous Recombination Constructs in Drosophila

Recombineering مثلي التركيبات التوحد في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

The continued development of techniques for fast, large-scale manipulation of endogenous gene loci will broaden the use of Drosophila melanogaster as a ...