Name: revealing neural circuit topography in multi-color
Uploaded: 2011-11-14T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Revealing Neural Circuit Topography in Multi-Color at JoVE.com

この作品は、RVSのスタートアップ資金イェシーバー大学の医学のアルバートアインシュタイン大学から新たな研究者によってサポートされていました。

1。無菌手術を用いた in vivo でのトレーサーを提供する（セクション1.1から1.16まで） 手続きを通じて、我々は標準的な無菌手術法を使用することをお勧めします。これは、滅菌手袋、ガウン、およびフェイスマスクの使用が含まれます。ツールのいずれか使用前にオートクレーブや水、次いでエタノールで十分に洗浄してください。手術中、及び動物、特に?...

<ol>
	<li>Apps, R., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+cortical+organization:+a+one-map+hypothesis.">Cerebellar cortical organization: a one-map hypothesis.</a> Nat. Rev. Neurosci. 10, 670-681 (2009).</li><li>Grishkat, H. L., Eisenman, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+the+spinocerebellar+projection+in+the+prenatal+mouse.">Development of the spinocerebellar projection in the prenatal mouse.</a> J. Comp. Neurol. 363, 93-108 (1995).</li><li>Mesulam, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Tracing neural connections with horseradish peroxidase. , (1982).</li><li>Reeber, S. L., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+expression+of+a+cocaine-+and+amphetamine+regulated+transcript+(CART)+peptide+reveals+complex+circuit+topography+in+the+rodent+cerebellar+cortex.">Patterned expression of a cocaine- and amphetamine regulated transcript (CART) peptide reveals complex circuit topography in the rodent cerebellar cortex.</a> Journal of Comparative Neurology. , (2011).</li><li>Reeber, S. L., Gebre, S. A., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+mapping+of+afferent+topography+in+three+dimensions.">Fluorescence mapping of afferent topography in three dimensions.</a> Brain. Struct. Funct. , (2011).</li><li>Sillitoe, R. V., Stephen, D., Lao, Z., Joyner, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engrailed+homeobox+genes+determine+the+organization+of+Purkinje+cell+sagittal+stripe+gene+expression+in+the+adult+cerebellum.">Engrailed homeobox genes determine the organization of Purkinje cell sagittal stripe gene expression in the adult cerebellum.</a> J. Neurosci. 28, 12150-12162 (2008).</li><li>Sillitoe, R. V., Vogel, M. W., Joyner, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engrailed+homeobox+genes+regulate+establishment+of+the+cerebellar+afferent+circuit+map.">Engrailed homeobox genes regulate establishment of the cerebellar afferent circuit map.</a> J. Neurosci. 30, 10015-10024 (2010).</li><li>Vig, J., Goldowitz, D., Steindler, D. A., Eisenman, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartmentation+of+the+reeler+cerebellum:+segregation+and+overlap+of+spinocerebellar+and+secondary+vestibulocerebellar+fibers+and+their+target+cells.">Compartmentation of the reeler cerebellum: segregation and overlap of spinocerebellar and secondary vestibulocerebellar fibers and their target cells.</a> Neuroscience. 130, 735-744 (2005).</li><li>Vogel, M. W., Prittie, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topographic+spinocerebellar+mossy+fiber+projections+are+maintained+in+the+lurcher+mutant.">Topographic spinocerebellar mossy fiber projections are maintained in the lurcher mutant.</a> J. Comp. Neurol. 343, 341-351 (1994).</li><li>Voogd, J., Broere, G., van Rossum, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+medio-lateral+distribution+of+the+spinocerebellar+projection+in+the+anterior+lobe+and+the+simple+lobule+in+the+cat+and+a+comparison+with+some+other+afferent+fibre+systems.">The medio-lateral distribution of the spinocerebellar projection in the anterior lobe and the simple lobule in the cat and a comparison with some other afferent fibre systems.</a> Psychiatr. Neurol. Neurochir. 72, 137-151 (1969).</li><li>Wu, H. S., Sugihara, I., Shinoda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Projection+patterns+of+single+mossy+fibers+originating+from+the+lateral+reticular+nucleus+in+the+rat+cerebellar+cortex+and+nuclei.">Projection patterns of single mossy fibers originating from the lateral reticular nucleus in the rat cerebellar cortex and nuclei.</a> J. Comp. Neurol. 411, 97-118 (1999).</li></ol>

我々は急速に発展し、成体マウスでは神経突起を標識するための新規蛍光ベースのアプローチを使用してトレースする軸索に成功し、樹状突起に必要な外科的および技術的な詳細を記載している。 WGA -アレクサを使用して、我々は、トレーサーとマーカーが高解像度で三次元のパターン化された回路の地形を分析するために使用することができる方法を示します。 多く?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 機器/試薬 </td><td> モデル/カタログ番号 </td><td> 会社 </td></tr><tr><td>ビーズ滅菌器</td><td>モデルは250猫をSteri。 ＃18000から45 </td><td>ファイン科学ツール</td></tr><tr><td> Cauterizer </td><td>ネコ。 ＃18000から00 </td><td>ファイン科学ツール</td></tr><tr><td>ホウケイ酸ガラス毛細管</td><td>ネコ。 ＃300056 </td><td>ハーバード装置</td></tr><tr><td>デュアルステージガラスマイクロピペットプラー</td><td>モデル001 - PC - 10 </td><td>ナリシゲ</td></tr><tr><td>マイクロメータの注射器</td><td>ネコ。 ＃GS - 1100 </td><td> Gilmontインスツルメンツ</td></tr><tr><td>小動物の定位音源</td><td>モデル940 - </td><td> Kopfは計装</td></tr><tr><td>電極マニピュレータ</td><td>モデル960 </td><td> Kopfは計装</td></tr><tr><td> Vetcare室</td><td>ネコ。 ＃340508 </td><td>ハーバード装置</td></tr><tr><td>暖房パッド</td><td>ネコ。 ＃341241 </td><td>ハーバード装置</td></tr><tr><td>ライカDFC360 FXカメラ</td><td> DFC360 FX </td><td>ライカ</td></tr><tr><td>ライカDFC490カメラ</td><td> DFC490 </td><td>ライカ</td></tr><tr><td>ライカDM5500顕微鏡</td><td> DM5500 </td><td>ライカ</td></tr><tr><td>ライカDFC3000 FXカメラ</td><td> DFC3000 FX </td><td>ライカ</td></tr><tr><td>ライカMZ16 FA顕微鏡</td><td> MZ16 FA </td><td>ライカ</td></tr><tr><td> CY3フィルター</td><td>モデル＃11600231 </td><td>ライカ</td></tr><tr><td> FITCフィルター</td><td>モデル＃11513880 </td><td>ライカ</td></tr><tr><td> A4 DAPI / UVフィルター</td><td>モデル＃11504162 </td><td>ライカ</td></tr><tr><td>小麦胚芽アグルチニン、のAlexa Fluor ® 488コンジュゲート</td><td>ネコ。 ＃W11261 </td><td>インビトロジェン</td></tr><tr><td>小麦ドイツメートル凝集素、のAlexa Fluor ® 555コンジュゲート</td><td>ネコ。 ＃W32464 </td><td>インビトロジェン</td></tr></tbody></table>

revealing neural circuit topography in multi-color

神経回路は、機能的な地形図にまとめられています。複雑な回路のアーキテクチャを視覚化するために我々は、複数の地形予測のグローバルなパターン形成を確実にラベルを付けるためにアプローチを開発した。小脳は、神経回路の整然とした配置を研究する理想的なモデルです。例えば、脊髄小脳苔状繊維のコンパートメントの組織は、苔状線維のパターン形成を研究するための不可欠なシステムであることが実証されています。我々は最近、アレクサ555と488コンジュゲート小麦胚芽レクチン（WGA）が開発し、成体マウスの脊髄小脳苔状線維の投射をトレースするために使用できることを示した（Reeberら2011）。我々は、神経突起を標識するためWGA -アレクサトレーサー望ましいツールを作る三大特性を発見した。最初に、Alexaの蛍光色素は強烈であり、その明るさは、直接トレースした後wholemountイメージングが可能になります。第二に、WGA -アレクサトレーサーは、開発の全体軌跡と大人の神経projectioにラベルを付けるNS。第三に、WGA - Alexaのトレーサーは、急速に逆行し、順行性の両方の方向に輸送される。ここでは、トレーサーと他の必要なツール、脊髄小脳トレースのための手術を実行する方法とどのように最高の三次元の画像トレースされた突起を準備する方法について詳細に説明します。要約すると、我々だけでなく小脳のでなく、皮質、脳幹、及び脊髄における機能地図の組織との接続を解読するのに有用となるステップバイステップのトレースプロトコルを提供しています。

Watch this Scientific Journal Video about Revealing Neural Circuit Topography in Multi-Color at JoVE.com

Revealing Neural Circuit Topography in Multi-Color

我々は、トレーサーを提供するための実用的なガイドを提供<em&gt; in vivoで</em&gt;とマウスで成功神経回路の解析に不可欠な手順を示すために、モデル系として脊髄小脳路を使用してください。我々は詳細にAlexaの蛍光物質に結合した小麦胚芽レクチン（WGA）を悪用私たちの多彩なトレースプロトコルについて説明します。

マルチカラーで神経回路の地形を明らかにし

Neural circuits are organized into functional topographic maps. In order to visualize complex circuit architecture we developed an approach to reliably ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

胚の脊髄から交連ニューロンの解剖と文化

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

行動内分泌学と実験経済学を組み合わせること：テストステロンと社会的意思決定

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

開発ゼブラフィッシュ前脳におけるクローン関連の神経前駆細胞のタイムラプスライブイメージング

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

内在性NADH蛍光の二光子イメージングによるマウス大脳皮質におけるMicroregional低酸素の検出

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Wholemount Immunohistochemistry for Revealing Complex Brain Topography

複雑な脳の地形を明らかにするためWholemount免疫組織化学

The repeated and well-understood cellular architecture of the cerebellum make it an ideal model system for exploring brain topography. Underlying its ...

Design and Assembly of an Ultra-light Motorized Microdrive for Chronic Neural Recordings in Small Animals

小動物の慢性神経録音用超軽量電動マイクロドライブの設計およびアセンブリ

The ability to chronically record from populations of neurons in freely behaving animals has proven an invaluable tool for dissecting the function of ...

Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust (Schistocerca Americana) Olfactory Circuits

Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust Schistocerca Americana Olfactory Circuits

ローカスの神経活動を特徴づけるためにマルチユニット記録方法（<em&gt; Schistocercaアメリカーナ</em&gt;）嗅覚回路

Detection and interpretation of olfactory cues are critical for the survival  of many organisms. Remarkably, species across phyla have strikingly similar ...

Neural Circuit Recording from an Intact Cockroach Nervous System

無傷のゴキブリ神経系の神経回路の録音

The cockroach ventral nerve cord preparation is a tractable system for neuroethology experiments, neural network modeling, and testing the physiological ...

Functional Analysis of the Larval Feeding Circuit in Drosophila

Functional Analysis of the Larval Feeding Circuit in Drosophila

幼虫給電回路の機能解析ショウジョウバエ</i

The serotonergic  feeding circuit in Drosophila  melanogaster larvae can be used to investigate neuronal substrates of  critical importance during the ...

Time-dependent Increase in the Network Response to the Stimulation of Neuronal Cell Cultures on Micro-electrode Arrays

マイクロ電極アレイにおけるニューロン細胞培養の刺激に対するネットワーク応答の時間依存的増加

Micro-electrode arrays (MEAs) can be used to investigate drug toxicity, design paradigms for next-generation personalized medicine, and study network ...